实验一普通光学显微镜的使用 (2)精选PPT.ppt

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1、关于实验一普通光学显微镜的使用(2)第1页，讲稿共43张，创作于星期日一、实验目的一、实验目的1 1、掌握普通光学显微镜的构造及原理、掌握普通光学显微镜的构造及原理2 2、学习并掌握正确的使用方法、学习并掌握正确的使用方法3 3、通过永久装片及新鲜切片观察，掌握一些细胞结构或细胞活动的、通过永久装片及新鲜切片观察，掌握一些细胞结构或细胞活动的特点特点 第2页，讲稿共43张，创作于星期日 二、实验内容二、实验内容（一）显微镜的使用（一）显微镜的使用（二）永久标本片的观察（二）永久标本片的观察（三）制作新鲜标本片（三）制作新鲜标本片（四）作业（四）作业第3页，讲稿共43张，创作于星期日（一）显微镜

2、的使用（一）显微镜的使用第4页，讲稿共43张，创作于星期日显微镜是显微镜是观察微小物体的精密仪器观察微小物体的精密仪器 第5页，讲稿共43张，创作于星期日1 1、光学显微镜的组成、光学显微镜的组成 光学、照明、机械光学、照明、机械2 2、显微镜的性能指标、显微镜的性能指标3 3、显微镜的使用步骤、显微镜的使用步骤第6页，讲稿共43张，创作于星期日显微镜的组成显微镜的组成 第7页，讲稿共43张，创作于星期日2 2、显微镜的性能指标、显微镜的性能指标（1 1）分辨力）分辨力（2 2）放大率）放大率第8页，讲稿共43张，创作于星期日显微镜分辨能力的高低决定于光学系统的显微镜分辨能力的高低决定于光学系

3、统的各种条件。被观察的物体必须放大率高，各种条件。被观察的物体必须放大率高，而且清晰，物体放大后，能否呈现清晰的而且清晰，物体放大后，能否呈现清晰的细微结构，首先取决于物镜的性能，其次细微结构，首先取决于物镜的性能，其次为目镜和聚光镜的性能。为目镜和聚光镜的性能。第9页，讲稿共43张，创作于星期日（1 1）分辨力）分辨力 R R显微镜能分辨两物点间的最小距离。显微镜能分辨两物点间的最小距离。R=0.61/NAR=0.61/NA第10页，讲稿共43张，创作于星期日数值孔径数值孔径 NANA也叫做镜口率（或开口率），在物镜和聚光也叫做镜口率（或开口率），在物镜和聚光器上都标有它们的数值孔径，数值孔

4、径是器上都标有它们的数值孔径，数值孔径是物镜和聚光器的主要参数，也是判断它们物镜和聚光器的主要参数，也是判断它们性能的最重要指标。性能的最重要指标。第11页，讲稿共43张，创作于星期日数值孔径可用下式表示：数值孔径可用下式表示：NA=nsinNA=nsin式中：式中：nn物镜与标本之间的介质折射率物镜与标本之间的介质折射率物镜的物镜的镜口角镜口角的的1/21/2，即半孔径角。，即半孔径角。镜口角镜口角是指从物镜光是指从物镜光轴上的物点发出的光轴上的物点发出的光线与物镜前透镜有效线与物镜前透镜有效直径的边缘所张的角直径的边缘所张的角度，见图。度，见图。第12页，讲稿共43张，创作于星期日镜口角总

5、是小于镜口角总是小于180180。因为空气的折射率为。因为空气的折射率为1 1，所以，所以干燥物镜的数值孔径总是小于干燥物镜的数值孔径总是小于1 1，一般为，一般为0.050.950.050.95；油浸物镜如用香柏油（折射率为油浸物镜如用香柏油（折射率为1.5151.515）浸没，则数值）浸没，则数值孔径最大可接近孔径最大可接近1.51.5。虽然理论上数值孔径的极限等于。虽然理论上数值孔径的极限等于所用浸没介质的折射率，但实际上从透镜的制造技术看，所用浸没介质的折射率，但实际上从透镜的制造技术看，是不可能达到这一极限的。通常在实用范围内，高级油是不可能达到这一极限的。通常在实用范围内，高级油浸

6、物镜的最大数值孔径是浸物镜的最大数值孔径是1.41.4。几种物质的介质的折射率如下：几种物质的介质的折射率如下：空气为空气为1.01.0，水为，水为1.331.33，玻璃为，玻璃为1.51.5，甘油为，甘油为1.471.47，香柏油，香柏油为为1.521.52。第13页，讲稿共43张，创作于星期日可见光的波长为可见光的波长为0.40.70.40.7微米，平均波长为微米，平均波长为0.550.55微米。微米。若用数值孔为若用数值孔为0.650.65的物镜，则的物镜，则R=0.610.55R=0.610.55微米微米/0.65=0.52/0.65=0.52微米。这表示被检物体在微米。这表示被检物体

7、在0.520.52微米以上时微米以上时可被观察到，若小于可被观察到，若小于0.520.52微米就不能视见。如果使用微米就不能视见。如果使用数值孔径为数值孔径为1.251.25的物镜，则的物镜，则R=0.27R=0.27微米。凡被检物体微米。凡被检物体长度大于这个数值，均能视见。长度大于这个数值，均能视见。紫外线作光源的显微镜和电子显微镜就是利用短光波紫外线作光源的显微镜和电子显微镜就是利用短光波来提高分辨力以检视较小的物体的。来提高分辨力以检视较小的物体的。物镜分辨力的高低与造象是否清楚有密切的关系。目镜没物镜分辨力的高低与造象是否清楚有密切的关系。目镜没有这种性能。目镜只放大物镜所造的象。有

8、这种性能。目镜只放大物镜所造的象。第14页，讲稿共43张，创作于星期日可通过：可通过：_；_；_来来提高提高分辨力。分辨力。减低波长减低波长增大折射率增大折射率加大镜口角加大镜口角R R值愈值愈_，分辨力愈高，物象愈清楚。分辨力愈高，物象愈清楚。小小练练 习习第15页，讲稿共43张，创作于星期日（2 2）放大率）放大率显微镜的放大率（显微镜的放大率（V V）等于物镜放大率）等于物镜放大率（V1V1）和目镜放大率（）和目镜放大率（V2V2）的乘积，即：）的乘积，即：V=V1V2V=V1V2第16页，讲稿共43张，创作于星期日安放安放对光对光调焦调焦观察观察放片放片3、显微镜的使用步骤、显微镜的使

9、用步骤对光：以视野明亮均匀为宜。对光：以视野明亮均匀为宜。调焦：先在低倍镜下，以粗准焦螺旋调，再以细准焦螺旋调。看清楚物象后再调焦：先在低倍镜下，以粗准焦螺旋调，再以细准焦螺旋调。看清楚物象后再 转至高倍镜下，调细准焦螺旋。转至高倍镜下，调细准焦螺旋。注意：高倍镜不要使用粗准焦螺旋调焦。注意：高倍镜不要使用粗准焦螺旋调焦。第17页，讲稿共43张，创作于星期日（二）永久标本片的观察（二）永久标本片的观察1.胞间连丝胞间连丝2.有丝分裂有丝分裂3.血细胞血细胞4.肝细胞肝细胞5.人染色体人染色体6.草履虫草履虫7.人口粘膜上皮细胞人口粘膜上皮细胞8.植物根尖纵切植物根尖纵切第18页，讲稿共43张，

10、创作于星期日、胞间连丝、胞间连丝 贯穿两个相邻的植物细胞的细胞壁，并连接两个细贯穿两个相邻的植物细胞的细胞壁，并连接两个细胞的原生质细丝。胞间连丝中有连丝微管胞的原生质细丝。胞间连丝中有连丝微管(desmotubule)通过通过,它是由两个细胞的光面内质网衍它是由两个细胞的光面内质网衍生而来。胞间连丝不仅使相邻细胞的细胞质膜、细胞生而来。胞间连丝不仅使相邻细胞的细胞质膜、细胞质、内质网交融在一起质、内质网交融在一起,而且也是植物细胞间物质运输而且也是植物细胞间物质运输和传递刺激的重要渠道。和传递刺激的重要渠道。第19页，讲稿共43张，创作于星期日胞间连丝切片胞间连丝切片 (柿胚乳柿胚乳)第20

11、页，讲稿共43张，创作于星期日、有丝分裂、有丝分裂植物细胞有丝分裂植物细胞有丝分裂洋葱根尖（洋葱根尖（16条染色体）条染色体）动物细胞有丝分裂动物细胞有丝分裂 马蛔虫受精卵（马蛔虫受精卵（4条染色体）条染色体）第21页，讲稿共43张，创作于星期日洋葱根尖细胞有丝分裂图洋葱根尖细胞有丝分裂图1 12 24 43 3第22页，讲稿共43张，创作于星期日第23页，讲稿共43张，创作于星期日马蛔虫子宫切片马蛔虫子宫切片400400铁苏木精染色铁苏木精染色 卵壳卵壳围卵腔围卵腔 受精卵受精卵第24页，讲稿共43张，创作于星期日马蛔虫受精卵有丝分裂图马蛔虫受精卵有丝分裂图4 43 31 12 2第25页，

12、讲稿共43张，创作于星期日、血细胞、血细胞第26页，讲稿共43张，创作于星期日血细胞血细胞中性粒细胞中性粒细胞第27页，讲稿共43张，创作于星期日、肝细胞切片肝细胞切片肝细胞切片线粒体线粒体第28页，讲稿共43张，创作于星期日肝板和肝血窦（示肝细胞、肝血窦、巨噬细胞）肝板和肝血窦（示肝细胞、肝血窦、巨噬细胞）第29页，讲稿共43张，创作于星期日肝细胞肝细胞第30页，讲稿共43张，创作于星期日NORNOR、人染色体、人染色体NOR第31页，讲稿共43张，创作于星期日人染色体人染色体NORNOR第32页，讲稿共43张，创作于星期日、草履虫、草履虫第33页，讲稿共43张，创作于星期日、人口粘膜腔上皮

13、细胞、人口粘膜腔上皮细胞第34页，讲稿共43张，创作于星期日第35页，讲稿共43张，创作于星期日植物根尖根冠、分生区植物根尖根冠、分生区、植物根尖纵切、植物根尖纵切分生区分生区根冠根冠第36页，讲稿共43张，创作于星期日植物根尖纵切（示伸长区）植物根尖纵切（示伸长区）第37页，讲稿共43张，创作于星期日植物根尖纵切（示成熟区）植物根尖纵切（示成熟区）第38页，讲稿共43张，创作于星期日细胞骨架细胞骨架第39页，讲稿共43张，创作于星期日（三）制作新鲜标本片（三）制作新鲜标本片1 1、胞间连丝的观察、胞间连丝的观察 试材：红椒（青椒）试材：红椒（青椒）试材：红椒（青椒）试材：红椒（青椒）2、叶绿

14、体的观察、叶绿体的观察、叶绿体的观察、叶绿体的观察 试材：菠菜叶试材：菠菜叶试材：菠菜叶试材：菠菜叶第40页，讲稿共43张，创作于星期日（四）作业（四）作业1 1、说明普通光学显微镜的构造、说明普通光学显微镜的构造2 2、试分析提高显微镜分辨力的方法、试分析提高显微镜分辨力的方法3 3、绘图、绘图（1 1）有丝分裂细胞（前、中、后、末四个时期中的三）有丝分裂细胞（前、中、后、末四个时期中的三个）个）（2 2）玉米根尖纵切（示根尖结构，每个区域绘几个代表）玉米根尖纵切（示根尖结构，每个区域绘几个代表性的细胞。）性的细胞。）（3 3）胞间连丝）胞间连丝（4 4）草履虫（显示大、小核）草履虫（显示大

15、、小核）第41页，讲稿共43张，创作于星期日 实验室规则和注意事项实验室规则和注意事项 1 1每次实验前，必须认真预习实习指导，明确本次实验每次实验前，必须认真预习实习指导，明确本次实验 的目的、的目的、要求和注意事项，熟悉实验内容、方法和步骤。对于比较复杂要求和注意事项，熟悉实验内容、方法和步骤。对于比较复杂的实验还应写出简要的实验操作程序的实验还应写出简要的实验操作程序2 2上实验课时必须携带讲义、实验指导、实验报告及绘图上实验课时必须携带讲义、实验指导、实验报告及绘图 文具等。文具等。进入实验室要穿好白大衣，按规定座位入座。进入实验室要穿好白大衣，按规定座位入座。3 3做实验前，要认真检查所用仪器药品等是否完好、齐全，如有缺做实验前，要认真检查所用仪器药品等是否完好、齐全，如有缺损应及时向任课教师报告，自己不得随意调换标本、仪器等。损应及时向任课教师报告，自己不得随意调换标本、仪器等。4 4实验时要遵守纪律，听从教师指导，保持肃静。有问题举手提实验时要遵守纪律，听从教师指导，保持肃静。有问题举手提问，严禁在实验室谈笑喧哗、随意走动和进行与实验无关的活问，严禁在实验室谈笑喧哗、随意走动和进行与实验无关的活动。动。第42页，讲稿共43张，创作于星期日感谢大家观看第43页，讲稿共43张，创作于星期日