微生物总重点.pdf

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1、 第一章 （一）名词解释 1、微生物(microorganism)是广泛存在于自然界中的一群肉眼看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍甚至数万倍才能观察到的微小生物的总称。（三）问答题 1真核细胞型微生物与原核细胞型微生物的不同点有：（1）真核细胞型微生物：细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体；胞质内有完整的细胞器（如内质网、核糖体及线粒体等）。真菌属于此类型微生物。（2）原核细胞型微生物：细胞核分化程度低，仅有原始核质，没有核膜与核仁；细胞器不很完善。这类微生物种类众多，有细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体和放线菌。第二章 细菌的形态与结构 （一）名词解释 1 细

2、菌是一类具有细胞壁的单细胞原核型生物。其特点为：结构简单，无典型细胞核，只有原始的核质，无核膜及核仁；除核蛋白体外，无其他细胞器。2荚膜是某些细菌细胞壁外面的一层由细菌分泌的黏液性物质。其生物学意义主要有抗吞噬和用于细菌鉴定，是细菌毒力因素之一。3芽孢是某些细菌在一定的环境条件下，胞浆发生脱水浓缩，在菌体内形成一个折光性强、通透性低的圆形或椭圆形小体，为细菌的休眠状态。它的结构复杂，对热、干燥、化学消毒剂和辐射等都有很强的抵抗力。芽孢是某些疾病的传染源，可用于细菌鉴定并作为灭菌指标。4质粒是核质外的双股环状 DNA，携有遗传信息，控制细菌存活非必需的某些特定性状。细菌质粒具有自我复制、传给子代

3、、几个质粒共存于一个菌体、自然丢失，以及通过接合或转化、转导作用而传递至受体菌等特性。5鞭毛是某些细菌从胞质内伸出到菌体外的、细长弯曲的蛋白丝状物，是细菌的运动器官。某些细菌的鞭毛与致病性有关。有鞭毛的细菌又分为单毛菌、双毛菌、丛毛菌和周毛菌。6菌毛是某些细菌体上具有的比鞭毛细、短而直的丝状物。又分为普通菌毛和性菌毛：前者数量多，可达数百根，与细菌黏附有关，是细菌的致病因素之一；后者比前者稍长而粗，数量少（14 根），为中空管状物，可传递细菌的遗传物质。7普通菌毛是遍布整个菌细胞表面，每个细菌可有数百条。普通菌毛是细菌的黏附器官，细菌藉以黏附于宿主细胞表面，是其构成感染的必要因素。8脂多糖（l

4、ipopolysacchride,LPS）由脂质双层向细胞外伸出，包括类脂 A、核心多糖、特异性多糖三个组成部分，习惯上将脂多糖称为细菌内毒素。（四）问答题 1 肽聚糖的主要结构及青霉素、溶菌酶对其的影响：肽聚糖，又称黏肽，是原核生物细胞的特有成分。它由三部分组成：聚糖骨架由 N-乙酰葡萄糖胺和 N-乙酰胞壁酸交替排列，藉-1，4 糖苷键连接组成；四肽侧链连接于聚糖骨架上的 N-乙酰胞壁酸分子上；四肽侧链之间由肽链(五肽交联桥)或肽键交连构成交联桥。由此三部分构成完整的肽聚糖分子结构。溶菌酶能水解聚糖骨架中的-1，4 糖苷键，青霉素可抑制五肽交联桥与四肽侧链上的 D-丙氨酸之间的连接。两者均可

5、破坏胞内抗高渗屏障，导致菌体膨胀、崩解。2 革兰染色的原理、步骤及意义：革兰染色的原理：革兰染色的原理尚未完全阐明。但与细菌细胞壁结构密切相关，如果在结晶紫 碘染后，乙醇脱色前去除革兰阳性菌的细胞壁，革兰阳性菌细胞就能够被脱色。目前，对革兰阳性菌细胞壁的化学组分已十分清楚，但对革兰阳性菌细胞壁阻止染料被溶出的原因尚不清楚。步骤：标本被固定后。先用碱性染料结晶初染，再加碘液媒染，使之生成结晶紫 碘复合物，此时不同细菌均被染成深紫色；然后用 95乙醇处理，有些细菌被脱色，有些不能；最后用稀释复红或沙黄复染。此法可 将细菌分为两大类：不被乙醇脱色仍保留紫色者为革兰阳性菌，被乙醇脱色后复染成红色者为革

6、兰阴性菌。意义：革兰染色法在鉴别细菌、选择抗菌药物、研究细菌致病性等方面都具有极其重要的意义。）3 L 型是指细菌发生细胞壁缺陷的变型。因其首次在 Lister 研究所发现，故以其第一个字母命名。当细菌细胞壁中的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制这种细胞壁受损的细菌一般在普通环境中不能耐受菌体内部的高渗透压而将胀裂死亡；但在高渗环境下，它们仍可存活而成为细菌细胞壁缺陷型。革兰阳性菌 L 型称为原生质体（protoplast），必须生存于高渗环境中。革兰阴性菌 L 型称为原生质球（spheroplast）,在低渗环境中仍有一定的抵抗力。细菌 L 型的形态因缺失细胞壁而呈高度多形性

7、，有球状、杆状和丝状。大小不一，L 型细菌大多数染成革兰阴性。细菌 L 型生长繁殖时的营养要求基本与原菌相同，但必须补充 3%5%的 NaCl、10%20%蔗糖或 7%聚乙烯吡咯酮（PVP）等稳定剂，以提高培养基的渗透压。同时还需要加入人或马血清。L 型细菌生长较缓慢，一般培养 27天后在软琼脂平板形成中间较厚、四周较薄的荷包蛋样细小菌落。此外，L 型菌尚有颗粒型和丝状型两种类型。L 型细菌在液体培养基中生长后呈较疏松的絮状颗粒，沉于管底，培养液则澄清。人工诱导或自然情况下，细菌 L 型在体内或体外均能产生。各种细菌 L 型有一个共同的致病特点，即引起多组织的间质性炎症。细菌变为 L 型致病性

8、有所减弱，但在一定条件下 L 型又可复为细菌型，引起病情加重。变形后的细菌其形态、培养特性均发生了改变，以致查不出病原使许多病人贻误诊治。临床遇有症状明显而标本常规细菌培养阴性者，应考虑细菌 L 型感染的可能性，宜作细菌 L 型的专门培养。4 革兰阳性菌细胞壁特殊组份：细胞壁较厚，约 2080mm。肽聚糖含量丰富，有 1550 层，每层厚度 1nm,约占细胞壁干重的 50%80%。此外，尚有大量特殊组份磷壁酸(teichoicacid)。磷壁酸是由核糖醇(ribitol)或甘油(glyocerol)残基经由磷酸二键互相连接而成的多聚物。磷壁酸分壁磷壁酸(wallteichoicacid)和膜磷

9、壁酸(membrane teichoicacid)两种，前者和细胞壁中肽聚糖的 N-乙酰胞壁酸连结，膜磷壁酸又称脂磷壁酸(lipteichoic acid)和细胞膜连结，另一端均游离于细胞壁外。磷壁酸抗原性很强，是革兰阳性菌的重要表面抗原；在调节离子通过黏肽层中起作用；也可能与某些酶的活性有关；某些细菌的磷壁酸，能黏附在人类细胞表面，其作用类似菌毛，可能与致病性有关。此外，某些革兰阳性菌细胞壁表面还有一些特殊的表面蛋白，如 A 蛋白等，都与致病有关。革兰阴性菌细胞壁特殊组份：细胞壁较薄，约 1015nm,有 12 层肽聚糖外，约占细胞壁干重的 5%20%。结构比较复杂。尚有特殊组份外膜层位于细

10、胞壁肽聚糖层的外侧，包括脂多糖、脂质双层、脂蛋白三部分。脂蛋白（lipoprotein）一端以蛋白质部分共价键连接于肽聚糖的四肽侧链上另一端以脂质部分经共价键连接于外膜的磷酸上。其功能是稳定外膜并将之固定于肽聚糖层。第四章 （一）名词解释 1 感染是指在一定条件下，入侵的病原体与机体防御功能相互作用而产生的病理过程。2半数致死量即在一定时间内，通过一定途径，能使一定体重的某种实验动物半数（50%）死亡所需的最少细菌数或细菌毒素量。3半数感染量即在一定时间内，通过一定途径，能使一定体重的某种实验动物半数（50%）感染所需的最少细菌数或细菌毒素量。4侵袭力是指细菌突破机体防御功能，在体内定居、繁殖

11、和扩散的能力。细菌侵袭力与其表面结构和产生的胞外酶有关。5毒血症是指病原菌在机体局部生长繁殖，不侵入血流，只是其毒素入血，引起特殊的中毒症状。6败血症是指病原菌侵入血流，并在其中大量生长繁殖，产生毒性代谢产物，引起严重的全身性中毒症状。7内源性感染是指来自自身的病原菌所致的感染。病原菌一般都是体内正常菌群的成员，少数是以隐伏状态留居的病原菌。前者在正常情况下不致病，但当机体抵抗力降低或长期应用广谱抗生素等导致菌群失调时，正常菌群的某些成员变为条件致病菌，可引起内源性感染。隐伏的病原菌常在机体免疫力降低时大量生长繁殖，引起内源性感染。8某些病原菌在引起显性或隐性感染后并未被及时清除，可在体内继续

12、存在且经常或间歇性地排出体外，是为带菌状态。处于带菌状态的个体称为带菌者。（四）问答题 1 巨噬细胞在吞入病原菌后，胞内氧化酶被激活，耗氧量增加，代谢旺盛，并产生过氧化氢、超氧阴离子、单态氧和游离羟基等一组杀菌物质,这种剧烈的生物氧化现象称为呼吸爆发。呼吸爆发产生的物质可直接杀伤病原菌，或在髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）协同下杀伤病原菌。因此，巨噬细胞的依氧杀菌机制，可分为 MPO 介导系统和非 MPO 介导系统。MPO 介导系统：由 MPO、H2O2 和含卤族元素的物质（氯化物等）组成。其杀菌机制与在 该系统作用下形成具有高度杀灭病原微生物的醛类物质有关。中性粒细胞有

13、MPO，可通过 MPO 系统介导杀菌。巨噬细胞无 MPO，故不具有此作用。非 MPO 介导系统：是指在缺乏 MPO 情况下，由过氧化氢、超氧阴离子、单态氧和游离羟基等直接杀伤病原菌的系统。2 细胞免疫是以细胞为主的免疫应答。发挥细胞免疫的 T 细胞主要有细胞毒性细胞（TC 细胞）和炎性 T 细胞。TC 细胞可特异性杀伤病原菌感染的靶细胞，当靶细胞被溶解，释出的胞内寄生菌可被体液因素清除。炎性细胞通过释放淋巴因子产生免疫效应。细胞内寄生菌进入机体后，一般先被巨噬细胞吞噬而不被杀灭，形成不完全吞噬。炎性 T 细胞可通过释放淋巴因子，如干扰素等，能激活巨噬细胞使其吞噬杀菌能力极大增强，可将不完全吞噬

14、转变为完全吞噬，即可迅速将胞内寄生菌杀灭清除。3 机体的天然抵抗力主要指天然免疫，天然免疫主要由组织屏障和某些免疫细胞、免疫分子等组成。（1）人体屏障结构的组成和功能是：皮肤与黏膜屏障：皮肤与黏膜构成了机体的外部屏障，是机体抵御病原菌入侵的第一道防线。其作用主要有：A.机械性阻挡与排除作用：健康完整的皮肤与黏膜能有效地阻挡细菌的侵入；B.分泌杀菌物质：例如皮肤的汗腺分泌乳酸，使汗液呈酸性，不利于细菌的生长；皮脂腺分泌的脂肪酸、胃液中的胃酸、肠液中的蛋白酶，以及唾液、泪液、乳汁和呼吸道分泌物中的溶菌酶等，都有一定的杀菌作用；C.正常菌群的拮抗作用：寄居在皮肤、黏膜上的正常菌群，可通过生存竞争和代

15、谢过程中产生的某些抗菌物质，对某些病原菌有拮抗和抑制作用。血-脑屏障：主要由软脑膜、脉络丛的脑毛细血管壁和包绕在血管壁外的神经胶质细胞形成的胶质膜组成。血-脑屏障能阻挡病原微生物及其毒性产物从血流进入脑组织或脑脊液，从而保护中枢神经系统。婴幼儿因血-脑屏障尚未发育完善，故较易发生脑膜炎等中枢神经系统感染。血 胎盘屏障：血 胎盘屏障是存在于母体与胎儿之间的一种屏障结构，由母体子宫内膜的基蜕膜和胎儿绒毛膜构成。能阻止母体血流中的病原微生物及其毒性产物进入胎儿体内，保护胎儿免受感染。（2）病原菌被巨噬细胞吞噬后，其后果与病原菌的种类、毒力和机体的免疫状态等有密切关系，可有以下两种不同的结果：完全吞噬

16、：病原菌被吞噬后，在吞噬溶酶体中被杀灭，然后将消化后的残渣排出胞外，此为完全吞噬。例如化脓性球菌被吞噬后，一般在 510分钟内死亡，3060 分钟内被消化。不完全吞噬：有些病原菌，如结核杆菌、布氏杆菌、伤寒沙门菌等胞内寄生菌，在机体免疫力缺乏或低下时，只被吞噬而不被杀灭，称为不完全吞噬。不完全吞噬可使病原菌在巨噬细胞内得到保护，免受体液中特异性抗体、非特异性抗菌物质和抗菌药物的杀伤作用；有的病原菌甚至可在巨噬细胞内生长繁殖，导致巨噬细胞死亡或随游走的巨噬细胞而扩散到其他部位。（3）抗体和补体单独都能对某些病原菌起调理作用,若二者联合，作用更强。IgG Fc 介导的调理作用：中性粒细胞、单核细胞

17、、巨 噬细胞表面具有 IgG Fc 受体。当 IgG 通过其抗原结合部位（Fab 段）与细胞表面相应抗原结合，其 Fc 段与巨噬细胞表面相应的c 受体结合后，可在细菌与巨噬细胞之间形成“抗体桥”，促进巨噬细胞对细菌的吞噬。补体（C3b）介导的调理作用：IgG 或 IgM 类抗体与细菌结合形成的抗原抗体复合物可激活补体，其活化产物 C3b 可通过其端非稳定结合部位与菌体结合，其 C 端稳定结合部位与具有 C3b 受体的巨噬细胞结合，从而使细菌与巨噬细胞相连，起到促进巨噬细胞对细菌的吞噬和细胞内的杀菌作用。（4）巨噬细胞在吞入病原菌后，胞内氧化酶被激活，耗氧量增加，代谢旺盛，并产生过氧化氢、超氧阴

18、离子、单态氧和游离羟基等一组杀菌物质,这种剧烈的生物氧化现象称为呼吸爆发。呼吸爆发产生的物质可直接杀伤病原菌，或在髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）协同下杀伤病原菌。因此，巨噬细胞的依氧杀菌机制，可分为 MPO 介导系统和非 MPO 介导系统。MPO 介导系统：由 MPO、H2O2 和含卤族元素的物质（氯化物等）组成。其杀菌机制与在该系统作用下形成具有高度杀灭病原微生物的醛类物质有关。中性粒细胞有 MPO，可通过 MPO系统介导杀菌。巨噬细胞无 MPO，故不具有此作用。非 MPO 介导系统：是指在缺乏 MPO情况下，由过氧化氢、超氧阴离子、单态氧和游离羟基等直接杀伤病原菌的

19、系统。（5）抗体难以对细胞内寄生的病原菌发挥作用，故消灭胞内寄生菌主要靠细胞免疫。发挥细胞免疫的 T 细胞主要有细胞毒性细胞（TC 细胞）和炎性 T 细胞。TC 细胞可特异性杀伤病原菌感染的靶细胞，当靶细胞被溶解，释出的胞内寄生菌可被体液因素清除。炎性细胞通过释放淋巴因子产生免疫效应。细胞内寄生菌进入机体后，一般先被巨噬细胞吞噬而不被杀灭，形成不完全吞噬。炎性 T 细胞可通过释放淋巴因子，如干扰素等，能激活巨噬细胞使其吞噬杀菌能力极大增强，可将不完全吞噬转变为完全吞噬，即可迅速将胞内寄生菌杀灭清除。4 一般外毒素是蛋白质，分子量 27 000900 000，不耐热。白喉毒素经加温 5860 1

20、2 小时，破伤风毒素 60 20 分钟即可被破坏。外毒素可被蛋白酶分解，遇酸发生变性。在甲醛作用下可以脱毒成类毒素，但保持抗原性，能刺激机体产生特异性的抗毒素。产生外毒素的细菌主要是某些革兰阳性菌，也有少数是革兰阴性菌，如志贺痢疾杆菌的神经毒素、霍乱弧菌的肠毒素等。外毒素毒性强，小剂量即能使易感机体致死。外毒素具亲组织性，选择性地作用于某些组织和器官，引起特殊病变。例如破伤风杆菌、肉毒杆菌及白喉杆菌所产生的外毒素，虽对神经系统都有作用，但作用部位不同，临床症状亦不相同。破伤风杆菌毒素能阻断胆碱能神经末梢传递介质（乙酰胆碱）的释放，麻痹运动神末梢，出现眼及咽肌等的麻痹；白喉杆菌外毒素有和周围神经

21、末梢及特殊组织（如心肌）的亲和力，通过抑制蛋白质合成可引起心肌炎、肾上腺出血及神经麻痹等。有些细菌的外毒素已证实为一种特殊酶。例如产气荚膜的甲种毒素是卵磷脂酶，作用在细胞膜的磷脂上，引起溶血和细胞坏死等。5 内毒素是革兰阴性菌细胞壁中的脂多糖组分。（1）化学成分：内毒素是磷脂-多糖-蛋 白 质（phospholid-polysaccharide-protein）复 合 物，主 要 成 分 为 脂 多 糖(lipopolysaccharide,LPS)。是细胞壁的最外层成分，覆盖在坚韧细胞壁的黏肽上。各种细菌内毒素的成分基本相同，都是由类脂 A、核心多糖和菌体特异性多糖（O 特异性多糖）三部分组

22、成。类脂 A 是一种特殊的糖磷脂，是内毒素的主要毒性成分。菌体特异多糖位于菌体胞壁的最外层，由若干重复的寡糖单位组成。多糖的种类与含量决定着细菌种、型的特异性，以及不同细菌间具有的共同抗原性。它还参与细菌的抗补体溶解作用。内毒素耐热，加热100 1 小时不被破坏，必须加热 160，经 24 小时或用强碱、强酸或强氧化剂煮沸 30分钟才能灭活。内毒素不能用甲醛脱毒制成类毒素，但能刺激机体产生具有中和内毒素活性的抗体。（2）内毒素的作用：内毒素对组织细胞的选择性不强，不同革兰阴性细菌的内毒素，引起的病理变化和临床症状大致相同。发热反应：内毒素作为外源性致热原（即热原质）作用于粒细胞和单核细胞等，使

23、之释放内源性致热原，引起发热。糖代谢紊乱：先发生高血糖，转而为低血糖，大量糖原消耗，可能与肾上腺素大量分泌有关。血管舒缩 功能紊乱：内毒素激活了血管活性物质（5-羟色胺、激肽释放酶与激肽）的释放。末梢血管扩张，通透性增高，静脉回流减少，心排血量减低，导致低血压并可发生休克。因重要器官（肾、心、肝、肺与脑）供血不足而缺氧，有机酸积聚而导致代谢性酸中毒。弥散性血管内凝血（disseminated intravascular coagulation,DIC）：内毒素能活化凝血系统的因子，当凝血作用开始后，使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，造成 DIC；由于血小板与纤维蛋白原大量消耗，以及内毒素活化胞浆素原

24、为胞浆素，分解纤维蛋白，进而产生出血倾向。施瓦兹曼现象（Shwartzman phenomenon）：可能是由内毒素引起 DIC 的一种特殊形式。将内毒素注入动物 皮内，次日再以内毒素静脉注射，数小时后第一次注射的局部皮肤出现坏死。如果二次均为静脉注射内毒素，就可出现 DIC。现认为第一次剂量的内毒素封闭了单核-吞噬细胞系统，以致不能消除第二次注入的内毒素，故发生这种反应。亦可用炭粒代替第一次内毒素剂量以阻断单核-吞噬细胞系统，或以肾上腺皮质类因醇处理，也可得同样结果。此外，内毒素还能引起早期粒细胞减少血症，以后继发粒细胞增多血症；活化补体 C3，引起由补体介导的各种反应等。第五章 （一）名词

25、解释 1 在某些因素如溶菌酶、青霉素等的影响下，细菌细胞壁肽聚糖合成受抑制,其细胞壁可部分或完全缺失，形成细胞壁缺陷型细菌,也称为 L 型细菌。2质粒是细菌染色体外的遗传物质,为双股环状 DNA。3突变是指细菌遗传物质结构发生突然而稳定的改变而导致的变异。突变可自然发生，也可经人工诱导产生。4受体菌摄取供体菌游离的 DNA 片段,从而获得新的遗传性状，称为转化。5以温和噬菌体为载体，将供体菌的遗传物质转移到受体菌中去，使受体菌获得新的遗传性状，称为转导。6接合是指细菌通过性菌毛将遗传物质（主要为质粒）从供体菌转移给受体菌，使受体菌获得新的遗传性状。（四）问答题 1 L 型细菌的形成、特点及临床

26、意义：形成：在某些因素如溶菌酶、青霉素等的影响下,细菌细胞壁肽聚糖合成受抑制,可使细胞壁部分或完全缺失，形成细胞壁缺陷型细菌,也称为 L 型细菌。特点：L 型细菌形态不规则,大小不一,多呈球形,有时可呈巨球状或长丝状;革兰染色均呈阴性;需用高渗培养基培养。临床意义：临床上由于抗菌药物使用不当,可使病人体内细菌发生 L 型变异。某些 L 型细菌有致病性,可引起肾盂肾炎、骨髓炎、心内膜炎等疾病。2 常见的细菌变异现象及其意义：(1)形态与结构变异：细胞壁缺陷型(L 型)变异：临床上由于抗菌药物使用不当,可使病人体内细菌发生 L 型变异。某些 L 型细菌有致病性,可引起肾盂肾炎、骨髓炎、心内膜炎等疾

27、病。荚膜变异：例如从病人标本中分离的肺炎球菌有较厚的荚膜,致病性强,但在无血清的培养基中传代数次后,可失去荚膜,致病性亦随之减弱。鞭毛变异：例如将有鞭毛的变形杆菌接种在普通固体培养基表面,由于鞭毛的动力作用,细菌呈弥散生长;若将此变形杆菌接种于含 1石炭酸的培养基中培养,则鞭毛生长受抑制,生长仅限于接种部位。芽孢变异：例如将能形成芽孢,毒力强的炭疽杆菌置 42培养 1020 天后,则丧失形成芽孢的能力,毒力也随之减弱。(2)菌落变异：细菌的菌落可分为光滑型(smooth,S)和粗糙型(rough,R)两种。S-R 变异常见于肠道杆菌，如沙门菌属与志贺菌属的细菌。新从患者中分离的菌株,其菌落呈

28、S 型,但经人工培养基多次传代后,菌落变为 R 型。当细菌发生 S-R 变异时,其毒力、生化反应与抗原性等也常发生改变。(3)毒力变异：细菌的毒力变异可表现为毒力减弱或增强,如用于预防结核病的卡介苗(BCG)即是将有毒力的牛 型结核杆菌置于含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中,经过 230 次移种,历时 13 年而获得的一种毒力减弱、抗原性完整的变异株。(4)耐药性变异：原来对某种抗菌药物敏感的细菌可以发生变异而成为耐药菌株,这种现象称为耐药性变异。如金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药菌株目前已高达 95以上。常见的耐药菌还有结核杆菌、痢疾杆菌、铜绿假单胞菌等,这给临床治疗带来了一定困难。3 质粒是细菌染

29、色体外的遗传物质,为双股环状 DNA。质粒主要有如下特性:质粒可赋予细菌某些遗传性状。例如:A.F 质粒编码细菌性菌毛；B.R 质粒带有一种或多种耐药基因,可使细菌获得对抗菌药物的耐药性；C.Vi 质粒编码细菌毒力；D.Col 质粒使大肠杆菌产生大肠菌素。质粒可以自主复制，存在于细菌胞浆内的质粒可不依赖宿主菌染色体而独立进行复制。有的质粒既能独立复制,又能整合到宿主细菌的染色体上,与其共同复制。质粒随细菌的分裂传入子代细菌。质粒不是细菌必须具备的结构，可自行丢失或经人工处理消除。失去质粒的细菌，其生命活动可不受影响。质粒可以在细菌间转移。接合性质粒能通过自身传递装置（性菌毛）转移。非接合性质粒

30、不能编码产生性菌毛,可以噬菌体为载体,携带其转移,或与接合性质粒结合随之转移。一个细菌可带有一种或几种质粒。4 细菌从外源取得 DNA，并与自身染色体 DNA 进行重组，引起细菌原有基因组的改变，导致细菌遗传性状的改变，称基因的转移与重组。基因转移与重组的四种方式是：转化：受体菌直接摄取供体菌游离的 DNA 片段,从而获得新的遗传性状，称为转化。转导：以温和噬菌体为载体，将供体菌的遗传物质转移到受体菌中去，使受体菌获得新的遗传性状，称为转导。接合：是指细菌通过性菌毛将遗传物质（主要为质粒）从供体菌转移给受体菌，使受体菌获得新的遗传性状。溶原性转换：是由于温和噬菌体的 DNA(前噬菌体)整合到宿

31、主菌的染色体 DNA 后，使细菌的基因型发生改变,从而获得新的遗传性状，称为溶原性转换。5 细菌的基因结构发生改变的机制包括：碱基置换（substitution）包括两种类型：转换(transition)是由嘌呤置换嘌呤或嘧啶置换嘧啶。颠换(transversion)是指嘌呤置换嘧啶或嘧啶置换嘌呤。如碱基置换发生于编码多肽的区，则因可影响密码子而使转录、翻译遗传信息发生变化，因此可以出现一种氨基酸取代原有的某一种氨基酸。也可能出现了终止密码而使多肽链合成中断，不能形成原有的蛋白质而完全失去某种生物学活性。碱基的减少、增加与倒置：三种情况都可造成对密码的错误阅读。如 DNA 原有碱基顺序为 AA

32、G，GAA，CGC，TGA，如失去第一个 A，则成为 AGG，AAC，GCT，GA，使原来编码押肽由亮 组 丙 苏氨酸改为半胱 亮 精 亮氨酸。这种突变导致的是密码意义的错误，称为移码突变。移码突变的影响范围自突变点起直到末端整条结构基因的转录与翻译，引起基因产物的变化比较严重，对生物活性的影响也较显著。碱基的互变异构：四种碱基中的任何一种均可发生互变异构，在作为模板时可引起互补碱基的改变。如当胸腺嘧啶以正常形式（即酮基型）为模板时，配对的互补碱基为腺嘌呤；当前者变为烯醇型结构时，通过氢键配对的碱基可变为鸟嘌呤。细菌自发突变的发生原因可能是宇宙间普遍存在的短波辐射、热及自然界存在的一些具有致突

33、变作用的物质。人工应用理化因素可诱发突变者称为诱变剂。化学诱变剂包括核苷酸碱基的类似物如分子结构类似胸腺嘧啶的 5溴尿嘧啶。烷化剂可改变碱基的化学结构也是诱变剂。吖啶类染料可螯合入 DNA 的碱基对之间，引起 DNA 在复制过程中出现碱基对的插入或缺失。紫外线与 X 线是常用的物理诱变 剂。紫外线可使邻近的胸原嘧啶构成双体，引起 DNA 结构的变化而致突变。第七章 （一）名词解释 1 灭菌是指杀灭物体上所有的微生物，包括病原微生物、非病原微生物和芽孢的方法。通过用物理学方法达到灭菌的目的。2无菌系指不含活菌的状态，是灭菌的结果。3消毒是指杀灭物体上的病原微生物，但不一定能杀死细菌芽胞的方法。用

34、于消毒的药物称为消毒剂。（二）问答题 1 湿热灭菌法的杀菌机制、各种湿热灭菌法的特点和应用对象：湿热灭菌法是最常用的灭菌法，其主要的杀菌机制为：A.使细菌菌体蛋白质凝固和变性；B.使细菌核酸降解；C.使细菌的胞浆膜损伤。湿热灭菌法主要包括下列几种方法：A.煮沸法：煮沸 10 分钟可达到消毒的目的，但是要杀死芽孢，则需要延长时间至 13 小时。可用于一般外科器械、注射器、胶管和餐具等的消毒。B.流通蒸汽灭菌法：通常 1015 分钟可杀死细菌的繁殖体，但不保证杀死芽孢。C.间歇灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽加热，能够杀死细菌所有的繁殖体和芽孢，主要用于不耐热的物质，如血清培养基的灭菌。D.高压蒸汽

35、灭菌法：是灭菌效果最好、目前应用最广的灭菌方法。通常压力为 1.05kgf/cm2(1.0310.5Pa)，温度为 121.3，持续 1530 分钟。可杀死包括细菌芽孢在内的所有微生物。该方法适用于耐高温和潮湿的物品的灭菌，如生理盐水、普通培养基、手术器械、注射器、手术衣、敷料等。E.巴氏消毒法：加热 61.162.830 分钟或者 71.71530 秒。可杀死物品中的病原菌和杂菌，而不破坏物品的质量。常用于牛奶和酒类的消毒。2 紫外线杀菌法的作用机制和注意事项：紫外线的杀菌机制主要是损伤细胞的 DNA 构型，从而干扰 DNA 正常碱基的配对，导致细菌死亡或突变。其杀菌作用与波长有关。一般波长

36、在 240280nm 时具有杀菌作用，以 265266nm 为最强。在使用紫外线杀菌法时应注意：A.紫外线的穿透力较弱，不能透过玻璃或纸张等，因此只适用于空气和物体表面的消毒；B.紫外线对人体皮肤和眼睛角膜有一定的损伤作用，使用紫外线灯照射时应注意防护。3 灭菌是指杀灭物体上所有的微生物，包括病原微生物、非病原微生物和芽孢的方法。通过用物理学方法达到灭菌的目的。如巴氏消毒法（pasteurization）、焚烧、高压蒸汽灭菌法。4 影响消毒灭菌效果的因素有：消毒剂的性质、浓度与作用时间：各种消毒剂的理化性质不同，对微生物的作用大小也差异。同一种消毒剂的浓度不同，其消毒效果也不一样。大多数消毒剂

37、在高浓度时起杀菌作用，低浓度时则只有抑菌作用。在一定浓度下，消毒剂对某种细菌的作用时间越长，其效果也越强。若温度升高，则化学物质的活化分子增多，分子运动速度增加使化学反应加速，消毒所需要的时间可以缩短。微生物的种类和数量：不同的细菌对消毒剂的抵抗力不同，细菌芽孢的抵抗力最强，幼龄菌比老龄菌敏感。微生物的数量越大，所需消毒的时间就越长。温度：消毒速度一般随温度的升高而加快，所以温度越高消毒效果越好。酸碱度：酸碱度的变化可影响剂杀灭微生物的作用。例如，季胺盐类化合物的戊二醛药物在碱性环境中杀灭微生物效果较好；酚类和次氯酸盐药剂则在酸性条件下杀灭微生物的作用较强。有机物：当细菌和有机物特别是蛋白质混

38、在一起时，某些消毒剂的杀菌效果可受到明显影响。因此，在消毒皮肤及器械前应先清洁再消毒。第八章 （一）名词解释 1疫苗是用病原微生物或其成分制备而成，用于人工自动免疫的生物制品。习惯上所称的疫苗包括用立克次体、螺旋体、支原体和病毒等制成的疫苗和用细菌制成的菌苗。2人工自动免疫是用人工接种的方法给机体注射抗原性物质，使机体免疫系统因受抗原刺激而产生体液和(或)细胞免疫应答的过程。（二）问答题 1 对进行细菌学检查的标本，在其采集和送检上主要有以下要求：采集标本时应注意无菌操作，尽量避免标本被杂菌污染。根据疾病特点，适时采集适当部位的标本。采取局 部标本处，不应使用消毒剂。采集标本原则上应在使用抗菌

39、药物之前，对已用抗菌药患者的标本，应注明药物名称。标本采取后，应尽快送检。除某些细菌(如脑膜炎球菌)在送检中要注意保温外，大多数标本可冷藏送检。在送检材料容器上贴好标签，并在化验单上填好检验目的、标本种类和临床诊断等内容，以供检测时参考。2由于血清中某种抗体的出现及其效价的高低可受多种因素的影响，故在细菌感染的血清学诊断及判断结果时需考虑到以下问题：取双份血清标本进行检测：健康人由于隐性感染或近期预防接种等原因，体内抗体效价可相对增高；患者感染早期可因抗体应答尚未建立，而表现为抗体效价低于诊断标准。因此应取患者急性期与恢复期或间隔 12 周的双份血清标本进行检测，通常只有当后者的抗体效价比前者

40、升高 4 倍或 4 倍以上才有诊断意义。抗体效价无明显升高时还应考虑：感染早期应用抗菌药物或免疫功能低下的患者，抗体效价可无明显升高。因此，对抗体效价低于诊断标准的病例，也不能轻易否定，而应密切结合临床表现，并根据其他检查结果进行综合分析后作出判断。3人工自动免疫与人工被动免疫的区别参见课本。4人工自动免疫是采用人工方法接种菌苗或类毒素，使机体通过免疫系统的应答，产生特异性免疫力。(1)菌苗:用细菌体制成的生物制品称菌苗，可分为活菌苗及死菌苗两类。活菌苗：常用者有预防结核病的卡介苗(BCG)、鼠疫活菌苗等。制备活菌苗的关键在于获得减毒或无毒菌株，但该菌株应保持免疫原性。例如,卡介苗系将结核杆菌

41、在人工培养基上传 230 代(经 13 年)后获得;痢疾杆菌的依赖链霉素菌株则是通过选择后获得的突变株。活菌苗接种后，在体内有一定的生长繁殖能力，类似经型或隐性感染。一般只需接种一次，且需量较小，但引起的免疫效果好，且能维持较长时间。如能以自然感染途径接种则更为适宜，因除引见全身免疫外，尚能引起局部免疫。其缺点为活菌苗需维持其活力，菌苗的保存需一定的冷藏条件，且有效期短。死菌苗：用化学或物理方法将病原菌杀死后仍保持免疫原性可制备死菌苗。常用的死菌苗有霍乱、伤寒、副伤寒甲、乙混合菌苗、百日咳菌苗等。由于病原菌已被杀死，不能繁殖，因此,死菌苗用量较大，接种后可能出现局部肿痛或发热等全身反应。死菌苗

42、大多需要多次接种才能获得较好的免疫效果。为减少死菌苗的接种次数，现常将不同种类的死菌苗作合理混合，制成联合菌苗，如伤寒菌、甲、乙型副伤寒菌混合的三联菌苗。(2)类毒素:细菌的外毒素经 0.3%0.4%甲醛处理，毒性消失仍留其免疫原性，即成类毒素。在毒素中加入适量氢氧化铝等吸附剂(佐剂)即成为精制吸附类毒素。吸附剂可延缓类毒素在体内的吸收，使之能较长时间作用于机体，以增强免疫效果。如此既可减少注射次数又可减少用量。常用的类毒素有破伤风类毒素、白喉类毒素等。类毒素可与死菌苗合制成联合疫苗。目前使用的白、百、破三联疫苗即白喉类毒素、百日咳死菌苗与破伤风类毒素混合制成，主 要用于儿童。近年来,正在开展

43、一些肠毒素类毒素的研制，对于这些类毒素的免疫效果尚在考核中。(3)自身菌苗:葡萄球菌引起的反复发作的慢性化脓性感染，在抗生素治疗无效时，可从患者病灶中分离出病菌，制成死菌苗，少量多次皮下注射后，常可使感染终止；在肠杆菌引起的慢性尿路感染中可应用大肠杆菌制成的死菌苗注射作为治疗，这类菌苗称为自身菌苗。其机理可能有二：可能自身菌苗多次注射通过脱敏作用而终止慢性感染；可能通过反复注射特异性抗原增强了机体的特异性免疫应答。(4)多糖疫苗:根据细菌的研究与分析，对细菌中引起特异性保护作用的抗原成分提取纯化，可以生产特异的抗原疫苗。例如,脑膜炎双球菌、流感杆菌中的多糖成分为可引起保护性抗体的部分，可提取后

44、制成多糖疫苗。多糖疫苗的免疫原性需通过加入适当的吸附剂来提高。多糖疫苗中不含内毒素中的类脂 A，故无毒性。然而多糖疫苗为化学成分，无细菌在体内繁殖，亦需大量多次接种。(5)基因工程疫苗:用分子克隆技术将病原体相应抗原基因克隆、表达、纯化后用做疫苗。目前，此方面应用较多的是病毒的疫苗，如乙肝的基因工程疫苗已取得满意的结果。细菌方面，结核的基因工程疫苗在研制中。(6)合成肽疫苗：把病原体抗原决定 簇中的反应表位的氨基酸序列分析清楚后，用人工方法合成肽后联结于大分子上用做疫苗。目前，合成肽疫苗仅限于实验室研究，由于肽合成价格昂贵，尚不能普及应用。(7)基因疫苗：用分子克隆技术把病原微生物特定抗原基因

45、克隆到特定的真核表达载体中，通过基因接种方式体获得针对特定抗原的免疫力。目前，尚处于实验研究阶段。第九章 第十章 （一）名词解释 1化脓性球菌指球菌中对人类有致病性，并主要引起化脓性感染的球菌。主要包括革兰阳性的葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌和革兰阴性的脑膜炎球菌、淋球菌。2 SPA是葡萄球菌A蛋白的英文缩写。90%以上的金黄色葡萄球菌菌细胞壁的一种表面蛋白，能与人及某些哺乳动物 IgG 分子的 Fc 段发生非特异性结合，结合后的 IgG 分子 Fab 段仍能与相应抗原结合。就葡萄球菌的致病性而言，SPA 可增强细菌的抗吞噬能力；在临床检测方面，却可利用 SPA 这一特点进行协同凝集试验，广泛应用

46、于多种微生物感染的简易、快速诊断。（四）问答题 1 胆汁溶菌试验的原理是：肺炎球菌生长至稳定期可产生自溶酶，破坏细胞壁，使细菌溶解。如果生长环境中有新鲜动物胆汁或 10%去氧胆酸钠等表面活性剂，可促进自溶酶基因提前于对数期进行表达。现象是在室温或 37加入上述药物于菌液中，经 510 分钟后，细菌溶解，菌液变清。而其他有溶血的球菌(如甲型链球菌)不产生自溶酶，故可用此试验区分之。2脑膜炎球菌需要床边接种的原因是：该菌抵抗力极弱，对干燥、热、寒冷等均敏感，室温中暴露 3 小时即死亡；常用消毒剂可迅速将其杀死；对多种抗菌药物敏感。只有用 37预热的培养基直接在床边接种，可使该菌既避免干燥、热、寒冷

47、的刺激，又不会在室温中暴露过长时间或因酸性代谢产物堆积而死亡。从而尽可能保证临床检验的正确性。3 SPA 即葡萄球菌 A 蛋白(staphylococcal protein A)是 90%以上的金黄色葡萄球菌菌细胞壁的一种表面蛋白，能与人及某些哺乳动物 IgG 分子的 Fc 段发生非特异性结合，结合后的IgG 分子 Fab 段仍能与相应抗原结合。就葡萄球菌的致病性而言，SPA 可增强细菌的抗吞噬能力；在临床检测方面，却可利用 SPA 这一特点进行协同凝集试验，广泛应用于多种微生物感染的简易、快速诊断。4 (1)金葡菌可通过多种途径侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。皮肤软组织感染主

48、要有疖、痛、毛囊炎、脓痤疮、甲沟炎、睑腺炎、蜂窝组织炎、伤口化脓等。内脏器官感染如肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎等。全身感染如败血症、脓毒血症等。(2)乙型溶血性链球菌由皮肤伤口侵入，引起皮肤及皮下组织化脓性炎症，如疖痈，蜂窝组织炎、丹毒等。沿淋巴管扩张，引起淋巴管炎，淋巴腺炎，败血症等，经呼吸道侵入，常有急性扁桃腺炎、咽峡炎，并蔓延周围引起脓肿、中耳炎、乳突炎、气管炎、肺炎等。不卫生接生，经产道感染，造成“产褥热”。两者所引起的化脓性感染不同特点主要是由于它们各自产生的致病物质不同造成的。(1)金葡菌产生多种毒素与酶:血浆凝固酶(coagulase)是能使含有枸橼酸钠或肝素抗凝

49、剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质，致病菌株多能产生，常作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要标志。凝固酶和葡萄球菌的毒力关系密切。凝固酶阳性菌株进入机体后，使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面，阻碍体内吞噬细胞的吞噬，即使被吞噬后，也不易被杀死。同时，凝固酶集聚在菌体四周，亦能保护病菌不受血清中杀菌物质的作用。葡萄球菌引起的感染易于局限化和形成血栓，与凝固酶的生成有关。凝固酶具有免疫原性，刺激机体产生的抗体对凝固酶阳性的细菌感染有一定的保护作用。慢性感染患者血清可有凝固酶抗体的存在。葡萄球菌溶血素(staphyolysin)按抗原性不同，至少有、五种，对人类在致病作用的主要是溶血素。它 是一种“攻

50、击因子”，化学成分为蛋白质，如将溶血素注入动物皮内，能引起皮肤坏死，如静脉注射，则导致动物迅速死亡。溶血素还能使小血管收缩，导致局部缺血和坏死，并能引起平滑肌痉挛。溶血素是一种外毒素，具有良好的抗原性。经甲醛处理可制成类毒素。杀白细胞素(leukocidin)含 F 和 S 两种蛋白质，能杀死人和兔的多形核粒细胞和巨噬细胞。此毒素有抗原性，不耐热，产生的抗体能阻止葡萄球菌感染的复发。表皮溶解毒素(epidermolytic toxin)也称表皮剥脱毒素(exfoliatin)引起人类或新生小鼠的表皮剥脱性病变。主要发生于新生儿和婴幼儿，引导起烫伤样皮肤综合征。主要由噬菌体型金葡萄产生的一种蛋白