C柱使用指南.pdf
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1、 C 柱使用指南 集团企业公司编码:(LL3698-KKI1269-TM2483-LUI12689-ITT289-C18柱使用指南 1、新柱在使用前需用纯有机试剂(如甲醇、乙腈)低流速冲洗,冲洗体积以 20 倍柱体积为宜,以便固定相能充分润湿、碳链舒展彻底,使色谱柱的性能达到巅峰状态;2、使用时需在每日实验结束后冲洗色谱柱,尤其是流动相中含有酸或盐时,需将色谱柱中的酸或盐冲洗干净,通常建议用 10%甲醇水冲洗 20 倍柱体积;3、长期保存前要将色谱柱彻底冲洗,建议冲洗 3-4 小时以上,最后保存在纯有机试剂或高 比例的有机试剂溶液(如 90%甲醇水)中;4、日常保存溶剂(即第二天需继续使用)尽
2、量与 3 中相同;5、由于 C18 柱(极性改性处理的除外)的固定相疏水性较强,在使用过程中尽量不要使用高水相条件,若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的负面影响,(Diamonsil2)由于碳载量高,表现尤为明显,建议使用过程中水相比例不超过 90%6、色谱柱压力升高、柱性能下降:通常为色谱柱被污染,对色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效;7、色谱柱压力骤升:通常由盐析出或筛板堵塞引起,若是盐析出,用10%甲醇水低流速冲洗至压力恢复即可;若判断并非盐析出,以纯甲醇或10%甲醇水为流动相反冲色谱柱(将色谱柱反接,不接检测器),若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效,需寻找其他原因。色谱柱再生程序:按照下列次序冲洗色谱柱,冲洗体积均为 20 倍柱体积:10%甲醇水甲醇异丙醇(或氯仿)甲醇10%甲醇水(步骤 3 选用异丙醇时,由于异丙醇粘度较大,需适当降低流速,建议流速设为 0.2-0.3ml/min)体积计算表:色谱柱尺寸 mm 色谱柱体积 mL 冲洗体积 mL 1504.6 2.5 50 2004.6 3.3 65 2504.6 4.2 80
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