【生物】高中生物实验.pdf

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1、高中生物实验汇总（详细版）实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞 一、实验目的：1、学会如何使用显微镜观察细胞；2、了解细胞的结构；3、学会制作临时装片。二、实验材料：（实验材料可换）松针、动物血液、动物神经细胞永久装片 三、实验用具：载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜（物镜 5X、10X、40X）四、方法步骤：1、制作松针的临时切片：（1）取干净的载玻片一个平置于试验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。（2）将土豆切成条状（截面约：0.5X0.5cm）取两条，将一根松针夹在两个土豆条之间，用刀片削成尽量薄的薄片，削时，手腕不动，靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取较薄

2、的切片，置于载玻片的水滴上。（3）从一侧轻轻盖上盖玻片，不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴，即完成临时切片的制作。2、观察切片：（1）取出显微镜，置于试验台上靠左的位置，打开光源。（2）将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上，调整载物台位置，使盖玻片对准光源。（3）使用 5X 物镜观察切片，使松针切片在视野中心，换成10X 物镜，观察松针叶面横切结构。（4）换成 40X 物镜观察，注意细胞及细胞内物质结构，画图。3、动物血液临时装片的制作及观察（除了不用切片，其他类似）4、动物神经细胞永久装片的观察。五、考点提示：1、松针的叶面结构是什么样的？2、动物细胞的结构是什么样的？与植物细

3、胞又什么不同？3、显微镜的物镜倍数愈大，视野的亮度如何？物体的大小如何？4、如何调节焦距？5、如何才能使切片尽量的薄？切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一、实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理一颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH 溶液和 CuSO4 溶液的使用方法。二、实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖

4、和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的 Cu 2O 沉淀。如：葡萄糖+2Cu2+4OH-加热 葡萄糖酸+Cu 2Ol（砖红色）+H 2O 即 Cu 2+被还原成 Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色-棕色-砖红色沉淀 淀粉遇碘变蓝色（直链）或紫（红）色（支链）2、脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，

5、不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹 III，苏丹 IV，苏丹黑及油红 O 等。脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理，适当提高温度（37r-6or）对组织切片染色效果是有好处的。脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油、

6、明胶和阿拉伯糖胶等。脂肪可以被苏丹 I 染液染成橘黄色或橙红色（或被苏丹 V 染液染成红色），胆脂素呈淡红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性 NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的 Cu2+作用，产生紫色反应。）O=Cx%?C=0 HN.:NH R-CHCH-R。七京1W。丽。;、NH R-CH；SH-R 1H.O 紫色络合物 三、实验材料：1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物蛆织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。）经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。2、做

7、脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡 34 小时（也可用蓖麻种子）。3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。4、淀粉的鉴定：马铃薯匀浆。四、实验用具：双面刀片、试管（最好用刻度试管）、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜 五、实验试剂：1.斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/mL NaOH 溶液和乙液：质量浓度为 0.05g/mL CuSO 4溶液）2.苏丹 III 或苏丹 IV 染液 3.双缩脲试剂（包括 A 液：质量浓度为 0.1g/mL NaOH 溶液和 B 液：质量

8、浓度为 0.01g/mL CuSO4溶液）4.体积分数为 50%的酒精溶液 5.碘液 6.蒸馏水 六、方法步骤：一、可溶性糖的鉴定 操作方法 注意问题 解释 1.制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。2.取 1 支试管，向试管内注入2mL 组织样液。3.向试管内注入 1mL 新制的斐林试剂，振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的 Cu 乙液等量混匀成斐林试剂；切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。(OH)2在 70 一

9、90oC 下分解成黑色 CuO 和水；甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无 Cu OH 生成。4,试管放在盛有 50-65oC 温水的大烧杯中，加热约 2 分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色一棕色一砖红色(沉淀)最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管不朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试 管，造成烫伤；缩短实验时间。、脂肪的鉴定 操作方法 注意问题 解释 制备组织样液。(浸泡、去皮研磨、过滤。)黄豆浸泡 1 至 2 天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定。加样液约 2ml 于试管中，加入双缩脲试剂 A，摇匀；再加入双缩脲试剂 B 液

10、34 滴，摇匀，溶液变紫色。A 液和 B 液也要分开配制，储存。鉴定时先加 A 液后加 B液。CuSO4溶液不能多加。先加 NaOH 溶液，为 Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B 液混装或同时加入，会导致 Cu2+变成 Cu(OH)2沉淀，而失效。2 否则 CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁 上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。附：淀粉的检测和观察碘液不要滴太多以免影响颜色观察 用试管取2ml 待测组织样液，向试管内滴加 2 滴碘液，观 察颜色变化。七、考点提示：1、

11、常见还原性糖与非还原性糖有哪些？答：葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。2、还原性糖植物组织取材条件？答：含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。3、研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？答：加石英砂是为了使研磨更充 操作方法 注意问题 解释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子 叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴 中，用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡 34 小 时，新花生的浸泡时 间可缩短。因为浸泡时间短，不易切片；浸泡时间过长，组织较软，切 片不易成形。切片要尽可能薄 些，便于观察。在子叶薄片上滴 23 滴苏丹 III 或苏

12、 丹 IV 染液，染色 1 分钟。染色时间不宜过长。用吸水纸吸去薄片周围染液，用 50%酒精洗去浮色，吸去酒精。酒精用于洗去浮色，不洗去浮 色，会影响对橘黄色脂肪滴的 观察。同时，酒精是脂溶性溶 剂，可将花生细胞中的脂肪颗 粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上 12 滴蒸馏水，盖上盖玻片。滴上清水可防止盖盖玻片时产 生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最 薄处，可看到细胞中有染成橘黄色 或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。时间一长，油滴会溶解在乙醇 中。三、蛋白质的鉴定 分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要

13、现混现用？答：混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。5、还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为？答：浅蓝色棕色砖红色。6、花生种子切片为何要薄？答：只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。7、转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是 什么？答：切片的厚薄不均匀。8、脂肪鉴定中乙醇作用？答：洗去浮色。9、双缩脲试剂 A、B 两液是否混合后用？先加 A 液的目的怎样通过对比看颜色变化？答：不能混合；先加 A 液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。实验三：观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布 一、实验原理：1、真核细胞的 DN

14、A 主要分布在细胞核内，RNA 主要分布在细胞质中。2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同，甲基绿对 DNA 亲和力强，使 DNA 显现出绿色，而吡罗红对 RNA 的亲和力强，使 RNA 呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可同时显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布。3、盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输；盐酸使染色体中的 DNA 与蛋白质分离，便于 DNA 与染色剂的结合 二、实验材料：人的腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞 三、实验用具：大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、

15、显微镜 四、方法步骤：1、取材 滴：在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液；刮：用消毒牙签在腔内侧壁上轻轻地刮几下；涂：将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中；烘：将涂有腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。2、水解 解：将烘干的载玻片放入装有 30ml 质量分数为 8%的盐酸的小烧杯中，进行材料的水解;保：将小烧杯放入装有 30P 温水的大烧杯中保温 5 分钟。3、冲洗涂片 冲：用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片 10 秒钟；吸：用吸水纸吸去载玻片上的水分。4、染色 染：用 2 滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色5 分钟；吸：吸去多余染色剂；盖：盖上盖玻片。5、观察 低

16、：在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰；高：转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。五、考点提示：1、取腔上皮细胞之前，应先漱，以避免装片中出现太多的杂质；2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞；3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗；4、用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂；5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却 1 分钟。实验四：体验制备细胞膜的方法 一、实验原理：细胞膜的流动性和半透性 二、实验材料：猪（或牛、羊、人）

17、的新鲜的红细胞稀释液（血液加适量的生理盐水）三、实验用具：蒸馏水、试管、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜 四、方法步骤：1、用试管吸取少量红细胞稀释液，滴一小滴在载玻片上，盖上盖玻片，制成临时装片 2、在高倍镜下观察，待观察清晰时，在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水，同时在另一侧用吸水纸小心吸引，注意不要把细胞吸跑。上述操作均在载物台上进行，并持续观察细胞的变化。可以看到近水的部分红细胞发生变化；凹陷消失，细胞体积增大，很快细胞破裂，内容物流出。五、考点提示：1、选择动物细胞进行实验的原因：动物细胞无细胞壁。2、选择哺乳动物成熟红细胞进行实验的原因：人和其他哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多的细胞器（膜）

18、，可以得到较纯净的细胞膜。3、细胞破裂后，用什么方法获得较纯的细胞膜：将涨破的细胞溶液，经过离心分离得到细胞膜。4、如何获得植物细胞膜：先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁水解得到原生质体；再将原生质体放入清水中，水自由扩散进入，原生质体涨破；最后经过离心分离得到植物细胞膜。5、稀释及稀释的时候用生理盐水的原因：稀释后，可以减少血液中的血浆蛋白等杂物。用生理盐水是为了保持渗透压，防止在稀释的时候就发生细胞破裂。实验五：用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 一、实验原理：1、叶肉细胞中的叶绿体，呈绿色、扁平的椭球形或球形，散布于细胞质中，可以在高倍显微镜下观察它的形态。2、线粒体普遍存在于动物细胞和植物细

19、胞中，健那绿染液能使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色。通过染色，可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。二、实验材料：新鲜的藓类的叶、人的腔上皮细胞、新配制的质量分数为1%的健那绿染液（将0.5g 健那绿溶解于 50mL 生理盐水中，加温到 30-40 摄氏度，使其充分溶解）三、实验用具：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签 四、方法步骤：1、观察叶绿体 低倍镜下找到叶片细胞一低倍镜下找到叶片细胞一高倍镜下观察。2、观察线粒体 染色-制片-低倍镜下找到腔上皮细胞-高倍镜下观察。五、考点提示：1、观察叶绿体时选择藓类叶的原因：藓类属于低等植物，叶片是

20、绿色的单层细胞，不需加工即可进行观察。2、临时装片中的材料要随时保持有水状态的原因：保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞质基质中，否则，细胞失水收缩，将影响细胞器形态的观察。实验六：植物细胞的吸水和失水 一、实验目的：1、学会使用显微镜观察植物细胞质壁分离和复原。（与前面的知识：显微镜的使用联系）2、观察不同浓度的溶液对细胞吸水失水的影响，掌握此种方法的具体应用。3、通过观察植物细胞的吸水和失水，明确渗透系统的组成以及具体应用。二、实验原理：1、成熟的植物细胞放到一定浓度的溶液中构成一个渗透系统。当细胞大量失水时原生质层与细胞壁的伸缩程度不同，导致原生质层和细胞壁分离。2、当外界溶液浓度大于细胞

21、液浓度时，根据扩散作用原理，水分会由细胞液中渗出到外界溶液中，通过渗透作用失水；由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞壁伸缩性较小，而原生质层性较大，从而使二者分开；反之，外界溶液浓度大于细胞液浓度，则细胞通过渗透作用吸水，分离后的质和壁又复原。三、实验材料：紫色特别深的洋葱外表皮、质量浓度为 0.3g/ml 的蔗糖溶液、清水 四、实验用具：显微镜、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、滴管、吸水纸 五、方法步骤：1、用刀片在洋葱鳞片叶的外表面划一个小方块，用镊子撕取这一小块洋葱表皮，在洋葱的外表皮上，用刀片划一些方块，用镊子轻轻撕取一小块（撕取的仅仅是外表皮，不要撕得太厚，仍然作为一个问题留给学生）。在取标本时，可以将洋葱的内表皮朝外，外表皮朝里进行对折，不要太用力，然后取其外表皮作为材料，将它平展地放在载玻片中央的清水滴中，并盖上盖玻片。2、用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小，以及原生质层的位置。3、从盖玻片的一侧滴入 0.3g/ml 的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，洋葱表皮细胞就侵润在蔗糖溶液中。注意重复 3-4 次。4、再用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小，以及原生质层的位置。