测铁方法-from-Yuanquan450.pdf

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1、每次采样前先将土壤悬液摇匀，用自动加样器，取 0.5 mL 土壤悬液（只有在刚摇动的情况下,才容易取土壤悬液，但是很难保证每次取的悬液含水量一致，因此也具有较大误差),置于 4.5 mL 的 0.5 molL 的盐酸中，分别在加样前后称重，以确定所采集土壤悬液的重量，计算干土重。每个样品重复 3 份。室温下静置24 h，8000g 离心 5 分钟，取 100 L，加入到1 mL的含0。1ferrozine的200mM的 HEPES 缓冲液(pH7）中，反应 5 分钟后,在 562nm 波长测定吸光度。经过测定的各步骤，土壤亚铁浓度被稀释 110 倍,测出的值约为 0.5M 左右（以土壤亚铁含量

2、 110Mg-1 dw，土壤悬液含水量 50计算）可提取的 Fe(III)的测定:取 100L 上述浸提 24h 的样品，与 2mL 的 0。25mM 的溶于等浓度盐酸中的羟胺盐酸混合，在 60保温 2h，取 100L 与 1mL 的菲洛嗪试剂混合，然后按上述测亚铁的步骤操作。溶液的配制：(1)Fe2+标准溶液配制：准确称取 g 硫酸亚铁氨六合水（分析纯),先用 50 mL 0。1 molL 1稀 HCl 酸化,再用去离子水稀释,定容至 1 L,配制成 1。000 mmolL1的 Fe2+标准溶液.（2)Fe3+标准溶液配制：准确称取 g FeCl3 （3）pH=7。00 的 200 mM H

3、EPES（24(2羟基乙基）1哌嗪基 乙磺酸)缓冲液配制：称取 g HEPES(分析纯)，先用去离子水溶解至 8090 mL，用 0.1 molL-1 HCl 和 0.1 molL 1 NaOH 溶液调节 pH 至 7。00,再用去离子水定容至 200 mL，得总浓度为 0.2 molL 1的 HEPES 缓冲溶液。(4)ferrozine显色液配制：称取 0.1 g ferrozine，溶解在 100。0 mL HEPES 缓冲溶液中，得 1 gL 1显色液。（5)0。5 M HCl，就用它溶解样品 盐酸羟胺溶液因其不稳定,需临时配制。注意事项：1。配制标准溶液应注意实际样品的铁浓度，样品的浓度应该都在标准溶液的梯度之内.