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1、基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程实验实验1616骨骼肌单收缩的分析收缩的总和与强直收缩 基础生物学实验(三)基础生物学实验(三)基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程一、实验目的一、实验目的 1 1、观察骨骼肌单收缩过程。分析骨骼肌单收缩的、观察骨骼肌单收缩过程。分析骨骼肌单收缩的3 3个时个时期。比较直接刺激肌肉与刺激支配肌肉的神经,其收缩曲期。比较直接刺激肌肉与刺激支配肌肉的神经,其收缩曲线有何不同。线有何不同。2 2、了解骨骼肌收缩的总和现象。观察不同频率的阈上、了解骨骼肌收缩的总和现象。观察不同频率的阈上刺激引起肌肉收缩形式的改变。刺激引起肌肉收缩形式的改变。基础生物
2、学实验基础生物学实验精品课程精品课程二、实验原理二、实验原理 1 1、肌组织对于一个阈上强度的刺激,发生一次迅速的收缩、肌组织对于一个阈上强度的刺激,发生一次迅速的收缩反应,称为单收缩。单收缩的过程可分为反应,称为单收缩。单收缩的过程可分为3 3个时期:潜伏个时期:潜伏期;收缩期和舒张期。期;收缩期和舒张期。2 2、两个同等强度的阈上刺激,相继作用于神经、两个同等强度的阈上刺激,相继作用于神经肌肉标肌肉标本,如果刺激间隔大于单收缩的时程,肌肉则出现两个分本,如果刺激间隔大于单收缩的时程,肌肉则出现两个分离的单收缩;离的单收缩;基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程如果刺激间隔小于单收缩的
3、时程而大于不应期,则出现两个收缩反应的重叠,称为收缩的总和。当同等强度的连续阈上刺激作用于标本时,则出现多个收缩反应的叠加,此为强直收缩。当后一收缩发生在前一收缩的舒张期时,称为不完全强直收缩;后一收缩发生在前一收缩的收缩期时,各自的收缩则完全融合,肌肉出现持续的收缩状态,此为完全强直收缩。基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程三、实验材料与仪器三、实验材料与仪器 1 1、蟾蜍、蟾蜍(或蛙或蛙)的坐骨神经的坐骨神经腓肠肌标本、常用手术器械、腓肠肌标本、常用手术器械、计算机采集系统、支架、双凹夹、肌槽、不锈钢盘或培养计算机采集系统、支架、双凹夹、肌槽、不锈钢盘或培养皿、神经屏蔽盒、滴管、任
4、氏液、橡皮泥、棉线。皿、神经屏蔽盒、滴管、任氏液、橡皮泥、棉线。基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程四、实验方法四、实验方法 1 1、制备蛙或蟾蜍坐骨神经干标本。、制备蛙或蟾蜍坐骨神经干标本。2 2、实验装置的连接、实验装置的连接 将神经屏蔽盒与计算机连接,屏蔽盒的地线良好接地。将神经屏蔽盒与计算机连接,屏蔽盒的地线良好接地。3 3、仪器的操作和实验参数的设置、仪器的操作和实验参数的设置基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程(1)本实验在Windows界面的PcLab平台下进行,打开PcLab。(2)采样窗参数的设置点击快捷工具栏上的“采样条件设置”快捷按钮,打开“采样条件设置”
5、窗口,“显示模式”为“记忆示波”,“采样间隔为25ls,“触发方式”为刺激器触发,“采样窗口”为2通道。将采样窗右侧显示控制区的参数设置为“通用(mV)”,“全通”设置为10kHz。(3)刺激参数的设置选取“主周期刺激”设定刺激参数。选择刺激模式为“主周期”方式,刺激器参数为1,波宽(ms):01,幅度(v):0.12(根据刺激需要调节),间隔(ms):50,延时(ms):1-20,根据显示需要调节),脉冲数:1。基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程 4 4、将蛙的坐骨神经干标本置于屏蔽盒内的电极上,神经、将蛙的坐骨神经干标本置于屏蔽盒内的电极上,神经干的中枢端置于刺激电极一侧,从末梢
6、端引导动作电位。干的中枢端置于刺激电极一侧,从末梢端引导动作电位。5 5、实验观察与记录、实验观察与记录点击点击“开始开始”按钮,采样窗开始扫描,再点击按钮,采样窗开始扫描,再点击“刺激刺激”按按钮,刺激所产生的生物电信号即显示在采样窗上。如果刺钮,刺激所产生的生物电信号即显示在采样窗上。如果刺激中途需要停止,则点击激中途需要停止,则点击“停止停止”按钮。如果需要改变按钮。如果需要改变y y轴的生物信号波幅,将鼠标箭头移至采样窗的右侧显示控轴的生物信号波幅,将鼠标箭头移至采样窗的右侧显示控制区,到上方时,则出现制区,到上方时,则出现“放大图形放大图形”,到下方时,则出,到下方时,则出现现“压缩
7、图形压缩图形”,用鼠标每点击一次,可使生物电信号图,用鼠标每点击一次,可使生物电信号图形成比例地放大或缩小一次。也可点击采样窗最左侧的形成比例地放大或缩小一次。也可点击采样窗最左侧的“左显示控制区左显示控制区”按钮,改变放大器增益。如果需要改变按钮,改变放大器增益。如果需要改变x x轴的生物信号的波形宽度,则用鼠标点击轴的生物信号的波形宽度,则用鼠标点击“X X轴显示控制轴显示控制区区”的的“横向扩展曲线横向扩展曲线”或或“横向压缩曲线横向压缩曲线”,以使生物,以使生物信号图形显示至最佳需要状态。信号图形显示至最佳需要状态。基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程(1)神经干兴奋阈值的测定
8、刺激强度从01 V开始,逐渐增加刺激强度,当刚刚出现动作电位时的刺激强度,即为神经干的兴奋阈值。(2)双相动作电位在刺激阈值的基础上逐渐加大刺激强度,可见动作电位的图形为双相,而且其幅值随刺激强度增大而加大。当刺激增加到一定强度时,可见动作电位的幅值不再增大。(3)动作电位参数的测量用鼠标点击“快捷工具栏”的“观察”,移动鼠标,测出动作电位的一系列参数。(4)单相动作电位在两个引导电极之间损伤神经干标本,即可使原来的双相动作电位的下相消失,变为单相;注意上相动作电位的图形有什么变化。基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程 6 6、开启计算机采集系统,连接张力传感器、开启计算机采集系统,连
9、接张力传感器(100 g)(100 g)与刺激与刺激输出。将标本的骨头固定在肌槽的骨头固定孔内,腓肠肌输出。将标本的骨头固定在肌槽的骨头固定孔内,腓肠肌肌腱上的扎线与张力传感器应变梁相连,调节好扎线的张肌腱上的扎线与张力传感器应变梁相连,调节好扎线的张力,不可过松或过紧,以使肌肉自然拉平为宜力,不可过松或过紧,以使肌肉自然拉平为宜(保证肌肉保证肌肉一旦收缩,即可牵动张力传感器的应变梁一旦收缩,即可牵动张力传感器的应变梁)。将神经搭在。将神经搭在肌槽的电极上,接通电极与刺激输出的线路。肌槽的电极上,接通电极与刺激输出的线路。7 7、实验观察、实验观察(1)(1)收缩的总和收缩的总和启动波形显示图
10、标,调节扫描速度为启动波形显示图标,调节扫描速度为510mm510mms s,调节,调节单收缩幅度为单收缩幅度为1 15 cm5 cm左右。调节刺激设置为双刺激方式,左右。调节刺激设置为双刺激方式,并使两个阈上刺激强度相等。先调节刺激间隔大于单收缩并使两个阈上刺激强度相等。先调节刺激间隔大于单收缩的时程,然后逐渐缩短刺激间隔,分别观察并记录肌肉收的时程,然后逐渐缩短刺激间隔,分别观察并记录肌肉收缩形式的变化缩形式的变化 基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程(2)强直收缩减慢扫描速度(5mm/s)并衰减振幅增益,使单收缩的幅度减小至35 mm。调节刺激设置为串刺激方式,分别以15次s(串
11、长为5)、6次/s(串长为10)、10次/s(串长为20)、30次/s(串长为35)和45次/s(串长为50)的频率刺激标本,观察并记录肌肉收缩曲线的变化。注意用任氏液湿润标本,两次刺激之间稍有间歇,使肌肉休息片刻。基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程五、注意事项五、注意事项 1 1、实、实验过程中注意保持标本的活性良好,经常用任氏液湿润之。验过程中注意保持标本的活性良好,经常用任氏液湿润之。2 2、如果在显示窗上发现动作电位图形倒置,将引导电极位、如果在显示窗上发现动作电位图形倒置,将引导电极位置对换即可。置对换即可。基础生物学实验基础生物学实验精品课程精品课程六、作业六、作业 1 1、本实验的潜伏期是指什么?时间如何计算?其中包括哪、本实验的潜伏期是指什么?时间如何计算?其中包括哪些时间因素及生理过程?些时间因素及生理过程?2 2、刺激骨骼肌一刺激神经的单收缩曲线有何不同?、刺激骨骼肌一刺激神经的单收缩曲线有何不同?3 3、分析讨论不完全强直收缩和完全强直收缩的条件与机、分析讨论不完全强直收缩和完全强直收缩的条件与机制。制。4 4、分析讨论肌肉发生收缩总和的条件与机制、分析讨论肌肉发生收缩总和的条件与机制
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