血细胞分析精选课件.ppt

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1、关于血细胞分析第一页，本课件共有73页第一章第一章 血细胞分析血细胞分析第二页，本课件共有73页内容提要v血液的常识v仪器原理v临床应用v常见故障及维修第三页，本课件共有73页血液概况v理化特征：红色（血红蛋白）不透明，含量占体重的7-9%，约5L。PH值为7.357.45比重为1.051.06相对粘度为45渗透压为2.63.9kPa第四页，本课件共有73页血液的功能v通过循环系统与全身各个组织器官密切联系。v参与机体呼吸：携氧和排出二氧化碳。v运输：将营养物质运送到器官组织，将体内代谢废物运往肾、肺等器官排出体外。v防御：血液中白细胞和抗体参与机体抗感染和其他免疫反应。v调节：调节体液渗透压

2、、酸碱平衡和体温平衡。第五页，本课件共有73页v将正常血液抗凝离心后得到沉淀的血液。第六页，本课件共有73页v液体的血浆占50-60%v血细胞占40-60%（白细胞、血小板、红细胞）。血液的基本组成血液的基本组成血浆血浆白细胞和血小板白细胞和血小板红细胞红细胞第七页，本课件共有73页 v 白细胞 红细胞 血小板v寿命：7天 120天 8天v体积：60120fl 1201000fl 230flv直径：(20 um)(6.77.7um)(23um)v功能：抗感染，免疫 携氧，代谢产物 凝血功能第八页，本课件共有73页白细胞的种类v 中性粒细胞（70%）v 单核细胞（5%）v 淋巴细胞（25%）v

3、嗜酸性粒细胞v 嗜碱性粒细胞v 经过瑞氏染色后的各种白细胞第九页，本课件共有73页v血液分析仪器是临床实验室最常用的分析仪器，包括：血液分析仪器是临床实验室最常用的分析仪器，包括：血细胞分析仪血细胞分析仪 血液凝固分析仪血液凝固分析仪 血液流变学分析仪血液流变学分析仪第十页，本课件共有73页历史手工法计数手工法计数手工法计数手工法计数仪器简单计数仪器简单计数仪器简单计数仪器简单计数两分群两分群两分群两分群三分群三分群三分群三分群五分群五分群五分群五分群五分群网织红五分群网织红五分群网织红五分群网织红第十一页，本课件共有73页手工法检验的过程1、细胞计数（红细胞、白细胞、血小板等血细胞的显微镜下

4、计数）2、定量血红蛋白3、白细胞分类（瑞氏染色）4、其它：血细胞比积、红细胞形态、嗜酸性粒细胞计数等第十二页，本课件共有73页血细胞分析仪发展v 50年代80年代（半自动）：需将样本经机外稀释后才能检测，易受干扰，随机误差也大。F820血细胞分析仪（两分群）第十三页，本课件共有73页血细胞分析仪发展v80年代后（全自动）：血液直接被吸入血液细胞分析仪后，在机内自动稀释、自动加溶血素、定时检测，有较高的精确度和准确性。Sysmex XS-1000i五分类血细胞分析仪第十四页，本课件共有73页血细胞分析仪发展v近年（联合型血液细胞分析系统）：将血细胞分析、涂片机、染片机、网织红细胞计数仪串联在一起

5、。自动加样系统和真空采血管的应用，避免实验室的随机误差，提高工作效率，成为仪器发展和使用的潮流。Sysmex HST530全自动血液分析流水线第十五页，本课件共有73页一、粒子检出原理1、电阻抗原理（Coulter原理）2、激光散射光检出原理3、交流（电阻）检出原理血细胞检测基本原理第十六页，本课件共有73页v库尔特原理：将血液按一定比例稀释于等渗溶液中，在小孔电极的两侧加一恒流源。在负压作用下，使稀释的血细胞通过小孔。当细胞通过截面时会由于电阻增大产生相应的脉冲，其脉冲的幅度与细胞的体积成正比，脉冲的频度与细胞的数量成正比。这便是著名的库尔特原理或称变阻脉冲原理。1、电阻抗原理（Coulte

6、r原理）第十七页，本课件共有73页第十八页，本课件共有73页2、激光散射光检出原理明确两个概念：什么是激光？什么是散射？第十九页，本课件共有73页鞘流技术v为了能够更好的从物理上最大限度地减少重合现象，开发了鞘流法。v具体方法为：用一毛细管对准小孔管，细胞单纯悬液从毛细管喷嘴喷出，同时与四周流出的鞘液一起流过敏感区，保证细胞悬液在中间形成单个排列的细胞液，四周被鞘液包绕。第二十四页，本课件共有73页鞘流技术示意图前前 鞘鞘 流流前前 鞘鞘 流流后后鞘鞘流流后后鞘鞘流流检检 测测 窗窗检检 测测 窗窗第二十五页，本课件共有73页鞘流技术示意图第二十六页，本课件共有73页3、交流（电阻）检出原理v

7、也叫射频检测原理 细胞壁不能使低频电流通过，能通过高频电流。细胞核的大小和密度不同，它们对高频电流的阻抗也不同，因此可以用来区分白细胞。第二十七页，本课件共有73页二、HCT体积测定原理v血细胞比容（红细胞压积）（Hct、Ht、HCT或PCV）是指在一定条件下，经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占比值。第二十八页，本课件共有73页1、手工检测-毛细血管离心法v包括温氏法（Wintrobe法）、微量法：是将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中，以一定转速离心一定时间后，计算红细胞层占全血的体积比。第二十九页，本课件共有73页vHCT值=（RBC总体积/血液总体积）X100%第三十页，本课件共

8、有73页2、血细胞分析仪检测法v原理是当细胞通过计数小孔时，形成相应大小的脉冲，脉冲的多少即为细胞数量，脉冲高度为细胞体积，通过红细胞平均体积（MCV）和红细胞计数（RBC）即求得血细胞比容：HCT=MCVRBC第三十一页，本课件共有73页三、HGB浓度的测定原理v比色法：比色法：氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法 十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS）测定法 第三十二页，本课件共有73页五、血液定量方法v临床上的细胞计数是指单位体积内的细胞数。v通常红细胞、白细胞和血小板的计量均指每升细胞数量。v设被测血量的体积为Y（一般20l），稀释倍数为C，计数结果为S，则每升内细胞数X为：X=CS/Y第三十

9、三页，本课件共有73页1、样品旋转阀SRV：v优点：故障率低.血液吸引管内的一点点堵塞不影响定量，由于取的是中段血，血液定量很稳定。v缺点：血液样品有浪费，需要血液量较多，制作成本高。分阀血第三十四页，本课件共有73页标本分配技术：标本分配技术：SRV阀阀(SYSMEX专利专利)进样针进样针前片前片后片后片中片中片(旋转片旋转片)恒定的、精确的体积恒定的、精确的体积SRV中有高精度的小孔，阀门中片的全血中有高精度的小孔，阀门中片的全血(或稀释血或稀释血)传输至传输至检测器，在每次检测后，检测器，在每次检测后，SRV阀对内部小孔进行清洗阀对内部小孔进行清洗第三十五页，本课件共有73页2、注射式v

10、优点：马达转速控制简单，流速、定量都可改变，用于微量血液定量，需要血液量较少，成本低。v缺点：密封问题较难解决，2-3年需更换密封装置。第三十六页，本课件共有73页气泡或残留物气泡或残留物由于全血标本粘度比血清高，当注射器由于全血标本粘度比血清高，当注射器针筒中有气泡或残留物时，其分血精度针筒中有气泡或残留物时，其分血精度不准确。不准确。注射器式第三十七页，本课件共有73页3、薄膜泵(DP方式)v优点：耐用，稳定，4-5年也不需更换；v缺点：不容易控制容积，需正、负压，成本较高。第三十八页，本课件共有73页薄膜泵绝对定量真空真空正压正压标本计数的体积不会因为小孔的半堵塞而发标本计数的体积不会因

11、为小孔的半堵塞而发生变化。生变化。通常状态通常状态吸液状态吸液状态排液状态排液状态第三十九页，本课件共有73页五分类血细胞分析仪检测方法1、阻抗、激光散射和荧光染色检测法2、电阻抗和射频电导联合检测法3、多角度激光偏振光散射检测法4、电容、电导、光散射（VCS）白细胞分类法。5、激光散射和细胞化学染色技术第四十页，本课件共有73页1、采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法v主要用于SYSMEX开发的仪器中。vXT-1800ivXS-1000i第四十二页，本课件共有73页2、电阻抗和射频电导联合检测法v典型机型如Sysmex SE-9000/SE-9500/XE-2100等。v这类仪器共有四个不

12、同的检测系统，将标本用特殊细胞染色技术处理后再应用RF和DC技术对白细胞进行分类和计数。第四十三页，本课件共有73页3、多角度激光偏振光散射检测法v美国雅培公司（ABBOTT）推出的血细胞分析仪，在白细胞分类中采用独特的多角度偏振光散射（MAPSS）技术。第四十五页，本课件共有73页v1）0为前向角散射光，可粗略地测定细胞大小；v2）10为狭角散射光，可测细胞结构及其复杂性的相对特征；v3）90垂直光散射，主要对细胞内部颗粒进行测量。v4）90消偏振光散射，基于颗粒可以将垂直角度的偏振激光消偏振的特性，将酸嗜细胞从中性粒细胞和其它细胞中分离出来。v5）这四个角度进行测量和分析后，可将白细胞划分

13、为嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞5种。第四十七页，本课件共有73页4、电容、电导、光散射（VCS）白细胞分类法v这是Beckman-Coulter公司血细胞分析仪的经典分析方法v标本的处理：此技术首先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞，然后加入稳定剂来中和红细胞溶解剂的作用，使白细胞表面、胞浆和细胞体积保持稳定不变。然后应用鞘流技术将细胞推进到流动细胞计数池（Flowcell）中，接受仪器VCS三种技术的检测。第四十八页，本课件共有73页容量、电导、光散射检测技术（VCS）(Volume、conductivityconductivity、light scatter)lig

14、ht scatter)1987年年 美国美国BECKMAN COULTER 公司发明公司发明VCS技术。技术。光散射光散射电导性电导性电阻抗电阻抗第四十九页，本课件共有73页第三节 血细胞分析临床应用vWBC、RBC、PLT相关项目(P20)vWBC、RBC、PLT直方图(P24)第五十页，本课件共有73页1、白细胞检测相关项目WBC白细胞109/L4-10NE%中性粒细胞比率%50-75LY%淋巴细胞比率%20-40MO%单核细胞比率%3-8EO%嗜酸性粒细胞比率%0-3BA%嗜碱性粒细胞比率%0-2NE#中性粒细胞109/L2-7LY#淋巴细胞109/L0.8-4MO#单核细胞109/L0

15、.12-1EO#嗜酸性粒细胞109/L0-0.3BA#嗜碱性粒细胞109/L0-0.2第五十一页，本课件共有73页2、红细胞检测相关项目RBC红细胞1012/L3.5-5.5HGB血红蛋白g/L110-160HCT红细胞压积0.37-0.50MCV红细胞平均体积fl80-92MCH平均红细胞血红蛋白量pg27-31MCHC平均红细胞血红蛋白浓度g/L320-360RDW-CV红细胞分布宽度变异系数%11.5-16.5RDW-SD红细胞分布宽度标准差fl37-54第五十二页，本课件共有73页3、血小板检测相关项目PLT血小板109/L100-300MPV平均血小板体积fl5-10PCT血小板压积

16、0.15-0.3PDW-CV血小板平均分布宽度CV%9-17P-LCR大血小板比例%19-47第五十三页，本课件共有73页血细胞直方图v直方图是血细胞分析仪用电阻抗原理对血细胞进行直方图是血细胞分析仪用电阻抗原理对血细胞进行检测，以检测，以细胞体积为横坐标细胞体积为横坐标，细胞的相对数量为纵细胞的相对数量为纵坐标坐标，表示某一种细胞数量分布情况，可反映细胞，表示某一种细胞数量分布情况，可反映细胞体积大小异质性。体积大小异质性。第五十四页，本课件共有73页1、WBC正常直方图v仪器在3-300fl范围内分析WBC采用四条与纵坐标平行的虚线（P25），划分三个区域来鉴别小型WBC(定为淋巴细胞)，

17、中型WBC(定为单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)、大型WBC(定为中性粒细胞)。第五十五页，本课件共有73页2、RBC直方图v仪器在25-250fl内分析RBC，正常RBC主要分布在50-150fl范围内，呈左偏态分布。第五十六页，本课件共有73页3、PLT直方图v仪器在2-36fl范围内分析PLT，正常呈左偏态分布，主要集中在2-20fl范围内。第五十七页，本课件共有73页正常直方图形态第五十八页，本课件共有73页异常白细胞直方图4、白细胞直方图临床意义第五十九页，本课件共有73页第六十页，本课件共有73页第六十一页，本课件共有73页5、红细胞直方图临床意义v仪器在25-250fl内分

18、析RBC，正常RBC主要分布在50-150fl范围内，呈左偏态分布。v通过观察图形峰的位置，峰底宽度，峰顶的形状及有无双峰现象来判断贫血的类型。第六十二页，本课件共有73页贫血分类（P21）v1、Wintrobe分类法（MCV、MCH、MCHC）v2、Bessman分类法（MCV/RDW）v3、贫血病因学分类（生成减少、破坏过多、外在异常、丢失）第六十三页，本课件共有73页第六十四页，本课件共有73页第六十五页，本课件共有73页第六十六页，本课件共有73页第六十七页，本课件共有73页6、血小板直方图临床意义。仪器在2-36fl范围内分析PLT，正常呈左偏态分布，主要集中在2-20fl范围内。第六十八页，本课件共有73页第六十九页，本课件共有73页第七十页，本课件共有73页第七十一页，本课件共有73页嗜酸嗜酸中性中性单核单核淋巴淋巴嗜碱嗜碱细胞大小颗粒复杂程度第七十二页，本课件共有73页感感谢谢大大家家观观看看第七十三页，本课件共有73页