植物组织培养实用技术精选PPT.ppt
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1、关于植物组织培养实用技术第1页,讲稿共59张,创作于星期二花卉组织培养实用技术花卉组织培养实用技术(以非洲菊为例以非洲菊为例)非洲菊非洲菊组织培养技术第2页,讲稿共59张,创作于星期二非洲菊属多年生草本花卉。重瓣花,花色有红、橙红、淡红、非洲菊属多年生草本花卉。重瓣花,花色有红、橙红、淡红、白色,花色艳丽,可用作切花生产或盆栽观赏。白色,花色艳丽,可用作切花生产或盆栽观赏。第3页,讲稿共59张,创作于星期二传统的繁殖方法为播种或分株繁殖,但非洲菊种子寿命短、发芽传统的繁殖方法为播种或分株繁殖,但非洲菊种子寿命短、发芽率低,而且播种繁殖变异率很高,难以得到性状一致的种苗,因率低,而且播种繁殖变异
2、率很高,难以得到性状一致的种苗,因而不能用于规模生产;而分株繁殖则存在繁殖慢,易退化和传播而不能用于规模生产;而分株繁殖则存在繁殖慢,易退化和传播病害,也不适于现代的大规模生产,因而目前国外一般都采用组病害,也不适于现代的大规模生产,因而目前国外一般都采用组织培养的方法来生产种苗。织培养的方法来生产种苗。第4页,讲稿共59张,创作于星期二一外植体的选择一外植体的选择 1、文献资料综述l茎尖是一种较好的外植体,出愈率最高、繁殖速度快,但取材有限、灭菌很易产生药害。l幼叶、幼叶柄、花梗作为外植体,可诱导产生愈伤组织,但是诱导成苗难。l花托是非洲菊组织培养中比较理想的外植体,其好处在于花托较大,易于
3、剥取,并有花被包裏,污染程度轻,易于消毒,污染率低第5页,讲稿共59张,创作于星期二首先要选择花大、花色艳丽、市场流行的品种,然后再选择无病虫害、植株生长健壮、花色纯正的优良品种单株进行取材。作为外植体的花蕾要选取直径在1.0 cm左右,而且未露心的小花蕾,太大或是太小的花蕾均不能获得满意的效果。2外外植植体体的的选选择择方方法法 第6页,讲稿共59张,创作于星期二 二外植体的消毒二外植体的消毒方法方法1 1、剥去外层萼片,在自来水下冲洗干净 2、置0.15%的升汞溶液中浸泡1215分钟 3、取出后剥去外部所有萼片,在1%的次氯酸钠溶液中消毒10分钟 4、放入无菌水中充分洗涤3次方法方法2 1
4、、剥去外层萼片,在自来水下冲洗干净 2、置70%酒精浸泡30秒 2、用0.1%升汞加数滴吐温浸泡58分钟 3、无菌水冲洗67次第7页,讲稿共59张,创作于星期二三外植体的原代培养三外植体的原代培养1、将灭菌后的花蕾外植体,剪成1.0cm长的小段2、在超净工作台上用0.1%氯化汞(HgCl2)对外植体进行表面消毒68min,小心倾去氯化汞溶液3、用无菌水冲洗67次4、接种在MS+BA1/L+IAA0.5mg/L诱导芽培养基上第8页,讲稿共59张,创作于星期二四试管苗的增殖与继代培养四试管苗的增殖与继代培养 培养67周以后,愈伤组织上陆续有小芽分化,此时将带有小芽的愈伤组织切成24个小块,分别移到
5、MS+BA 0.21/L+NAA0.2mg/LKT0.3mg/L诱导芽培养基上。第9页,讲稿共59张,创作于星期二培养一段时间后,又有小芽陆续分化。培养4周后,把这些继代培养的芽丛分割,并移到新鲜的培养基上。每次继代培养时间约为4周,芽丛的发生力可保持半年左右。在每次继代前,高于3cm的小苗转入培养基:1/2MS+BA1mg/L上,可促进幼苗迅速长大。第10页,讲稿共59张,创作于星期二注意注意1、在初级培养和继代培养时,降低MS中的氮素营养会导致芽的发生率降低,铵态氮和硝态氮之比为1:2时对非洲菊芽的增殖最好。2、随BA浓度的提高,增殖速度相应提高。但在较高的BA浓度条件下芽苗会变细、变弱,
6、且随BA浓度进一步提高,芽苗变得更加丛生、细弱。3、生产中在努力提高芽苗增殖率的同时,还应保证分生芽苗的健壮。根据品种不同,一般把增殖率控制在2.5-5.0之间。第11页,讲稿共59张,创作于星期二五试管苗的壮苗与生根五试管苗的壮苗与生根 将长高的无根苗(23)转移到生根培养基,诱导根培养基:1/2MS+NAA0.1mg/L。78 天后,小苗基部会长出35条不定根,1215天就可以出瓶,生根率达到95%以上。附加蔗糖30mg/l、琼脂7g/L,pH6.0。培养温度2527,光照1214 小时,光照强度2000lx。在无糖的MS培养基上,植株生根快,且生根率高。无糖或低糖培养所生根系发达,呈白色
7、,试管苗过渡成活率高。糖的浓度以01.5%为好,低盐培养基生根效果较好。第12页,讲稿共59张,创作于星期二六试管苗的移栽与田间管理六试管苗的移栽与田间管理欲移栽的组培苗先去掉瓶盖通风炼苗,3天后将生根苗洗净根部附着物,移入温室内的珍珠岩+腐殖土(1:1)基质中,继续训化一周内保持遮光80和适当的湿度,湿度以60%70%为宜,温度1525。一周后,适当增加光照,且每周淋一次无机液肥。第13页,讲稿共59张,创作于星期二在2周内保持较高的空气相对湿度,3周时幼苗长出白根,新叶抽出。一个月左右长出4片新叶,株高68厘米,可大定植或上市出售,移栽成活率97%。第14页,讲稿共59张,创作于星期二草莓
8、组织培养技术第15页,讲稿共59张,创作于星期二草莓属多年生草本植物,植株矮小。草莓的茎呈短缩状,地上短缩茎节间极短,节密集。地下短缩茎为多年生,可发育成不定根。叶属于基生三出复叶,离生雄、雌蕊离生。果实为假果,主要是花托膨大肉质化形成,瘦果以聚合果形式生于花托上。果实成熟时果肉红色,粉红色或白色。第16页,讲稿共59张,创作于星期二一、外植体的选择一、外植体的选择选择结果性优良的草莓母株上新抽出的匍匐茎作外植体,以每年67月份最为适宜。第17页,讲稿共59张,创作于星期二在无病虫害的田块,连续晴天34d时选取生长健壮、新萌发且未着地的匍匐茎段3cm长作外植体。第18页,讲稿共59张,创作于星
9、期二二、外植体的消毒二、外植体的消毒消毒步骤用洗涤灵水溶液洗去材料表面的油质用70的乙醇浸泡数秒以除去表面的蜡质用3的次氯酸钠溶液浸泡消毒1530min,然后用无菌水冲洗3次第19页,讲稿共59张,创作于星期二把芽放在解剖镜下,无菌条件下,用镊子、刀片、解剖针等工具把芽外面的幼叶和叶原基除去,使生长点暴露。用利刀切下含有12个叶原基,大小为.5mm的生长点。三、外植体的原代培养三、外植体的原代培养茎尖分离后,迅速接入MS+6 BA.5mgL+IBA 0.1mgL原代培养基中。第20页,讲稿共59张,创作于星期二培养条件为2225,日照1618h/d,光强3000Lx。注意在低温和短日照下,茎尖
10、有可能进入休眠,所以较高的温度和充足的光照时间必须保证。第21页,讲稿共59张,创作于星期二经23个月的培养,可生长分化出芽丛,一般每簇芽丛含2030个小芽为适。第22页,讲稿共59张,创作于星期二四、试管苗的增殖与继代培养四、试管苗的增殖与继代培养把芽丛割成芽丛小块,转入MS+6mgL培养基中,令其长大,以利分株,待苗长大到12cm时,可将丛芽分成有34个芽的小芽丛,再转入前述的分化培养基中,又会重复上述过程,达到扩大繁殖的目的。第23页,讲稿共59张,创作于星期二经过34周的增殖培养可获得由3040个腋芽形成的芽丛及植株。第24页,讲稿共59张,创作于星期二五、试管苗的生根与练苗五、试管苗
11、的生根与练苗生根培养基为1/2MS+IBAl.0mgL,可使发根整齐,由于草莓地下部分生长快,发根力较强,也可将具有两片以上正常叶的新茎从试管中取出进行试管外生根。健壮的生根苗,应将芽丛切割开,单个芽转接到专门的生根培养基中生根,培养4周后,可长成约4-5cm高并有56条根的健壮苗。温度保持在23左右,光照度2 000Lx,12h光照。第25页,讲稿共59张,创作于星期二试管苗驯化时,用镊子把草莓苗从试管瓶中取出,洗掉根系附带的琼脂培养基。第26页,讲稿共59张,创作于星期二培养土以等量的腐殖土和河砂为好,用蒸汽消毒。在温室内驯化,栽前压实,浇透水,用竹签在钵中央打一小孔,将试管苗插入其中,压
12、实苗基部周围基质,栽后轻浇薄水,以利幼苗基部和基质密合。以后每天叶面喷水34次,45d就成活,展开新叶。当检查有一定的根系生出,可逐渐降低湿度和土壤含水量,进入正常幼苗的生长发育管理阶段。第27页,讲稿共59张,创作于星期二六、试管苗的移栽与田间管理六、试管苗的移栽与田间管理为提高母株的繁殖株数可采用5mg/L赤霉素,每株5ml处理和摘蕾的方法。在5月上旬和6月上旬分两次进行。摘蕾可减轻母株的营养负担,促使匍匐茎的大量发生,田间地每一株可繁殖150200株。第28页,讲稿共59张,创作于星期二母株必须保证每株有大于3.3m2的营养面积。再是注意匍匐茎排列位置,不要交错重叠,不利采苗,采苗也要适
13、时进行。无论秋季或春季种植,繁殖床必须要进行土壤消毒,小面积可用蒸气剂料混合消毒,可防治草莓萎缩病、根腐病、萎凋病等的发生。第29页,讲稿共59张,创作于星期二龙牙百合组织培养技术龙牙百合组织培养技术第30页,讲稿共59张,创作于星期二龙牙百合属百合科、百合属、百合种,药龙牙百合属百合科、百合属、百合种,药食兼用,是上等的滋补佳品,栽培经济效食兼用,是上等的滋补佳品,栽培经济效益好。百合繁殖方法主要有分球繁殖、鳞益好。百合繁殖方法主要有分球繁殖、鳞心繁殖、鳞片繁殖等,但经多代无性繁殖心繁殖、鳞片繁殖等,但经多代无性繁殖以后,导致病毒积累、种性退化,严重地以后,导致病毒积累、种性退化,严重地制约
14、着百合产量和质量的提高。利用组织制约着百合产量和质量的提高。利用组织培养与脱毒技术相结合,能够迅速去除无培养与脱毒技术相结合,能够迅速去除无性繁殖体内病毒,复壮品种,并可加快百性繁殖体内病毒,复壮品种,并可加快百合的快速繁殖速度。合的快速繁殖速度。第31页,讲稿共59张,创作于星期二龙牙百合特征龙牙百合特征:鳞茎,无皮,广卵形,外部鳞片长鳞茎,无皮,广卵形,外部鳞片长,将整将整个鳞茎包裹,直径个鳞茎包裹,直径515厘米,白色,茎高厘米,白色,茎高90厘米左厘米左右,直立茎上叶多而散生,披针形,叶色从浓绿,光滑。右,直立茎上叶多而散生,披针形,叶色从浓绿,光滑。花单生茎顶。花朵呈喇叭状长筒形,白
15、色,有清香。花单生茎顶。花朵呈喇叭状长筒形,白色,有清香。第32页,讲稿共59张,创作于星期二一、外植体的选择一、外植体的选择龙牙百合的许多器官、组织都可作为外植体,如鳞龙牙百合的许多器官、组织都可作为外植体,如鳞片、花梗、叶片、茎尖、腋芽、花瓣、花托、花丝、片、花梗、叶片、茎尖、腋芽、花瓣、花托、花丝、花药、胚、子房、根尖等,其中采用鳞片作外植体花药、胚、子房、根尖等,其中采用鳞片作外植体的较多。的较多。第33页,讲稿共59张,创作于星期二以以鳞片鳞片为例,在选取外植体时,要选择具备龙牙百合品为例,在选取外植体时,要选择具备龙牙百合品种特征、无病虫害危害的种球。外部鳞片易污染要将其种特征、无
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