高中生物选修动物细胞工程课件.ppt

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1、关于高中生物选修动物细胞工程第1页，此课件共46页哦动物细胞工程动物细胞工程技术手段：技术手段：基础：基础：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体动物细胞融合、单克隆抗体动物细胞培养技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础是其他动物细胞工程技术的基础第2页，此课件共46页哦动物细胞培养动物细胞培养概念：概念：原理：原理：目的：目的：从动物机体中从动物机体中取出取出相关的组织或器官，将它相关的组织或器官，将它分散分散成单个细成单个细胞，然后，胞，然后，放在适宜的培养基中放在适宜的培养基中，让这些细胞，让这些细胞生长和增生长和增殖殖动物细胞动物

2、细胞培养培养移植修复移植修复细胞增殖细胞增殖(有丝分裂有丝分裂)获得细胞或细胞产物获得细胞或细胞产物第3页，此课件共46页哦动物细胞的培养过程动物细胞的培养过程思考：思考：幼龄与老龄幼龄与老龄动物的组织细胞比较，动物的组织细胞比较，分化程度低分化程度低的与分化的与分化 程度程度高高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？的组织细胞比较，哪一种更易于培养？提示：细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞提示：细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞 的增殖能力与供体的年龄有关，的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能幼龄动物细胞增殖能 力强，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。力强，有丝分裂

3、旺盛，老龄动物则相反。所以，一般所以，一般 来说幼年动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于来说幼年动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于 培养。同样，培养。同样，组织细胞的分化程度越低，则增殖能力组织细胞的分化程度越低，则增殖能力 越强，所以更容易培养。越强，所以更容易培养。动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的细胞分化程动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。度低，增殖能力强，容易培养。第4页，此课件共46页哦动物细胞的培养过程动物细胞的培养过程幼龄动物幼龄动物取动物器官取动物器官和组织和组织剪碎组织剪碎组织胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理细胞培养细胞培养单个细胞

4、单个细胞第5页，此课件共46页哦强调一：细胞贴壁过程强调一：细胞贴壁过程细胞贴壁：细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。瓶壁上，称为细胞贴壁。培养瓶或培养皿壁要求：培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于帖附。表面光滑、无毒、易于帖附。第6页，此课件共46页哦当贴壁细胞分裂生长到当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时表面相互接触时,细胞就细胞就会停止分裂增殖，这种会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑现象称为细胞的接触抑制。制。强调二：接触抑制强调二：接触抑制第7页，此课件共46页哦动物胚胎或幼龄动物的组织器官动物胚胎或幼龄动物

5、的组织器官单个细胞单个细胞分散分散原因：原因：目的：目的：方法：方法：1.1.为什么要将细胞分散后，细胞才能生长增殖？从物质交换的角为什么要将细胞分散后，细胞才能生长增殖？从物质交换的角 度分析，细胞分散后，有什么优点？度分析，细胞分散后，有什么优点？接触抑制接触抑制(细胞与细胞紧靠在一起，限制细胞与细胞紧靠在一起，限制 了细胞的生长和增殖了细胞的生长和增殖)便于细胞与外界溶液进行充分的物质交换便于细胞与外界溶液进行充分的物质交换(易于吸收营养，排除代谢废物易于吸收营养，排除代谢废物)胰蛋白酶或胶原蛋白酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶第8页，此课件共46页哦2.2.分散细胞的方法是什么？该方法说明细胞间

6、的物质主要成分是分散细胞的方法是什么？该方法说明细胞间的物质主要成分是 什么？什么？3.3.用胰蛋白酶分散细胞会不会伤害细胞？改用胃蛋白酶可不可以？用胰蛋白酶分散细胞会不会伤害细胞？改用胃蛋白酶可不可以？细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须因此必须控制好控制好胰蛋胰蛋白酶的白酶的消化时间消化时间。胃蛋白酶作用的适宜胃蛋白酶作用的适宜pHpH约为约为2 2，当，当pHpH大于大于6

7、6时，胃蛋白酶就会时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pHpH为为7.27.28.48.4。多数动物。多数动物细胞培养的适宜细胞培养的适宜pHpH为为7.27.27.47.4。在此环境中胰蛋白酶活性高，。在此环境中胰蛋白酶活性高，适宜细胞培养时的消化适宜细胞培养时的消化第9页，此课件共46页哦4.4.分散的单个细胞要用什么状态的培养基来培养，你认为培养基分散的单个细胞要用什么状态的培养基来培养，你认为培养基 中应加入哪些物质？中应加入哪些物质？单个细胞单个细胞细胞悬液细胞悬液培养基培养基作用：作用：状态：状态：成分成分液体培养基液体培养基营养物质营养

8、物质为细胞提供营养为细胞提供营养无机物：无机物：有机物：有机物：水、无机盐水、无机盐氨基酸、糖类、促生氨基酸、糖类、促生长因子等长因子等血清、血浆血清、血浆合成培养基合成培养基+血清、血浆血清、血浆=半合成培养基半合成培养基第10页，此课件共46页哦n促生长因子是一类具有刺激细胞生长活性的细胞因子，通促生长因子是一类具有刺激细胞生长活性的细胞因子，通过与特异的、高亲和的细胞膜受体结合，调节细胞生长与过与特异的、高亲和的细胞膜受体结合，调节细胞生长与其他细胞功能等多效应的多肽类物质。存在于血小板和各其他细胞功能等多效应的多肽类物质。存在于血小板和各种成体与胚胎组织及多数培养细胞中，对不同种类细胞

9、有种成体与胚胎组织及多数培养细胞中，对不同种类细胞有一定专一性。一定专一性。第11页，此课件共46页哦5.5.细胞在培养瓶中生长具有哪些特点？细胞在培养瓶中生长具有哪些特点？细胞悬液细胞悬液原代培养原代培养(初次装瓶培养初次装瓶培养)培养瓶中培养培养瓶中培养细胞生长特点细胞生长特点贴壁生长贴壁生长含义：含义：要求：要求：细胞要能贴附于底物上才能增殖细胞要能贴附于底物上才能增殖培养瓶或培养皿内表面光滑、无培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒、易贴附毒、易贴附接触抑制接触抑制传代培养传代培养(分瓶继续培养分瓶继续培养)胰蛋白酶处理贴壁细胞，分散成单个细胞，制成细胞悬液胰蛋白酶处理贴壁细胞，分散成单个细胞

10、，制成细胞悬液第12页，此课件共46页哦概念：概念：p原代培养：原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的原代细胞。培养的第第1 1代代细胞与细胞与传传1010代以内代以内的细胞称为原代细胞培养。的细胞称为原代细胞培养。p传代培养：传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养培养瓶中继续培养，称为传代培养。第13页，此课件共46页哦动物胚胎或幼龄动物的组织、器官动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液1010代细胞代细

11、胞5050代细胞代细胞传代培养传代培养无限传代无限传代单个细胞单个细胞加培养液加培养液原代培养原代培养胰蛋白酶胰蛋白酶细胞株细胞株细胞系细胞系第14页，此课件共46页哦细胞株：细胞株：培养细胞一般传至培养细胞一般传至10501050代左右时，生长代左右时，生长 停滞，大部分细胞衰老死亡停滞，大部分细胞衰老死亡(核型正常核型正常)，这种传代细胞为细胞株这种传代细胞为细胞株细胞系：细胞系：细胞传至细胞传至5050代后，有部分细胞由于遗传物质代后，有部分细胞由于遗传物质 (核型核型)的改变，使其在培养条件下可以无限的改变，使其在培养条件下可以无限 制传代，这种传代细胞为细胞系制传代，这种传代细胞为细

12、胞系细胞株和细胞系的区别：细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质细胞系的遗传物质(细胞核型细胞核型)改变，具有癌细胞的特点改变，具有癌细胞的特点(不死性不死性)，失去接触，失去接触 抑制，容易传代培养抑制，容易传代培养有关概念有关概念第15页，此课件共46页哦细胞细胞悬浮悬浮液液1010代代细胞细胞5050代代细胞细胞无限传无限传代代原代培养原代培养传代培养传代培养细胞株细胞株细胞系细胞系如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？多数组织细胞固定在表面多数组织细胞固定在表面生长和分裂。生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖随细胞增多，细胞就会

13、停止分裂增殖遗传物质改变遗传物质改变第16页，此课件共46页哦动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞细胞悬浮悬浮液液细胞株细胞株细胞系细胞系细胞增殖细胞增殖无限传代无限传代去掉组织去掉组织间蛋白间蛋白动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成生物体最终培养成生物体第17页，此课件共46页哦思考：保存或使用细胞时，一般选择思考：保存或使用细胞时，一般选择1010代以内的，还是代以内的，还是1010代以后的代以后的细胞？为什么？细胞？为什么？保存保存材料：材料：方法：方法：1010代以内的细胞代以内的细胞冷冻

14、（或超低温、液氮）冷冻（或超低温、液氮）第18页，此课件共46页哦动物细胞培养动物细胞培养过程过程胚胎或幼龄动物的组织器官胚胎或幼龄动物的组织器官胚胎或幼龄动物的组织器官胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液细胞悬液细胞悬液细胞悬液10101010代细胞代细胞代细胞代细胞50505050代细胞代细胞代细胞代细胞剪碎剪碎剪碎剪碎胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶洗涤、稀释、分离洗涤、稀释、分离洗涤、稀释、分离洗涤、稀释、分离原代培养原代培养原代培养原代培养用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.27.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4

15、)的活性较高。比比老老龄龄动动物物的的组组织织细细胞胞增增殖殖能能力力强强，有有丝丝分分裂裂旺旺盛盛。分分化化程程度度越越低低，增增殖殖能能力力越越强强，越容易培养。越容易培养。动动物物细细胞胞培培养养不不能能最最终终培培养养成成生生物体物体细胞增殖缓慢，核型可能变化动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。贴壁生长贴壁生长贴壁生长贴壁生长接触抑制接触抑制接触抑制接触抑制1010代以内，保持正常二倍体核型代以内，保持正常二倍体核型代以内，保持正常二倍体核型代以内，保持正常二倍体核型传代培养传代培养传代培养传代培养细胞系细胞系细胞系细胞系第

16、19页，此课件共46页哦1 1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件培养液和培养器具培养液和培养器具无菌处理无菌处理培养液中添加抗生素培养液中添加抗生素目的：防止培养过程中杂菌污染目的：防止培养过程中杂菌污染定期更换培养液定期更换培养液目的：清除代谢产物，防止细胞代谢积累目的：清除代谢产物，防止细胞代谢积累 对细胞造成伤害对细胞造成伤害2 2、营养：、营养：合成培养基合成培养基+血清、血浆血清、血浆 3 3、适宜的温度和、适宜的温度和PHPH值值36.5+0.536.5+0.5,7.2-7.4,7.2-7.4 4 4、必要的气体条件、必要的气体条件O O2 2

17、和和COCO2 2（95%95%空气和空气和5%CO5%CO2 2）COCO2 2维持培养液的维持培养液的PHPH第20页，此课件共46页哦细胞的全能性细胞的全能性培养瓶培养瓶锥形瓶锥形瓶培养器皿培养器皿获得细胞获得细胞或细或细胞产物胞产物获得完整个体或细获得完整个体或细胞产物胞产物培养目的培养目的葡萄糖、动物血葡萄糖、动物血清或血浆清或血浆蔗糖、植物激蔗糖、植物激素素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较植物细胞和动物细胞培养的

18、比较第21页，此课件共46页哦过程：过程：植物组织培养植物组织培养 动物细胞培养动物细胞培养外植体外植体脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织再分化再分化胚状体胚状体/丛芽丛芽移栽移栽试管苗试管苗植株植株动物胚胎或幼龄动物的组织、器官动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液原代培养原代培养传代培养传代培养单个细胞单个细胞加培养液加培养液胰蛋白酶胰蛋白酶应用：应用：快速繁殖、作物脱毒等快速繁殖、作物脱毒等 生产生物制品、检测毒性等生产生物制品、检测毒性等第22页，此课件共46页哦应用应用n生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）n作为基因工程中的受

19、体细胞作为基因工程中的受体细胞n检测有毒物质，判断某种物质的毒性检测有毒物质，判断某种物质的毒性n用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据疾病提供理论依据第23页，此课件共46页哦1010年浙江卷年浙江卷下列关于下列关于动动物物细细胞培养的叙述，正确的是胞培养的叙述，正确的是A A培养保留有的培养保留有的细细胞在培养瓶壁上可形成多胞在培养瓶壁上可形成多层细层细胞胞B B克隆培养法培养克隆培养法培养过过程中多数程中多数细细胞的基因型会胞的基因型会发发生生改变改变C C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的二倍体细胞的传代培养次数通

20、常是无限的 D D恶性细胞系的细胞可进行传代培养恶性细胞系的细胞可进行传代培养答案：答案：D D 第24页，此课件共46页哦(08(08宁夏宁夏)回答下列有关动物细胞培养的问题：回答下列有关动物细胞培养的问题：在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_ 要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用 的酶是的酶是。随着细胞传代次数的增多

21、，绝大部分细胞分裂停止，进而出随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出 现现_现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细 胞会因遗传物质发生改变而变成胞会因遗传物质发生改变而变成细胞，该种细细胞，该种细 胞的黏着性胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的 量量。现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被 染色，而活细胞不染色，原因是染色，而活细胞不染色，原因是。相互接触相互接触接触抑制接触抑制单层单层胰蛋白酶胰蛋白酶衰老甚至死亡衰老甚至死亡不死性不死

22、性降低降低减少减少由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）子染料能够进入死细胞内而着色）第25页，此课件共46页哦检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞 分裂到分裂到期的细胞用显微镜进行观察。期的细胞用显微镜进行观察。在细胞培养过程中，通常在在细胞培养过程中，通常在_ 条件下保存细胞。条件下保存细胞。因为在这种条件

23、下，细胞中因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞的活性降低，细胞 的速率降低。的速率降低。给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行进行 攻击。攻击。中中 冷冻（或超低温、液氮）冷冻（或超低温、液氮）酶酶 新陈代谢新陈代谢 抗原抗原 第26页，此课件共46页哦二、动物体细胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1、定义：定义：动物核移植是将动物的动物核移植是将动物的一个细胞的一个细胞的细胞核细胞核,移入一个已经移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中

24、去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个使其重组并发育成一个新的胚胎新的胚胎,这个新的胚胎这个新的胚胎最终发育为最终发育为动物个体动物个体.3、分类：分类：胚胎核移植、体细胞核移植。胚胎核移植、体细胞核移植。胚胎细胞分化程度胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性低，恢复其全能性相对容易。相对容易。动物体细胞分化程动物体细胞分化程度高，恢复其全能度高，恢复其全能性十分困难性十分困难2、原理：原理：动物细胞核具有全能性动物细胞核具有全能性第27页，此课件共46页哦 1996 1996年，英国人年，英国人Ian Ian WilmutWilmut成功获得成功获得体细胞克隆羊体细胞克隆羊“多利多利”，这是

25、世界上这是世界上第一例第一例利用成年体细胞核获得的克隆动利用成年体细胞核获得的克隆动物物.第28页，此课件共46页哦卵细胞卵细胞母绵羊母绵羊母绵羊母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母绵羊子宫（代孕母体）母绵羊子宫（代孕母体）胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多多莉莉羊羊的的培培育育过过程程重组细胞重组细胞第29页，此课件共46页哦多莉羊诞生的意义：多莉羊诞生的意义：多莉羊在技术上的突破之处在于供核细胞多莉羊在技术上的突破之处在于供核细胞不是胚胎细胞，而是已分化的体细胞。这说明不是胚胎细胞，而是已分化的体细胞。这说明已经分化的已

26、经分化的动物体细胞核，仍然具有全能性动物体细胞核，仍然具有全能性，在在合适的条件下合适的条件下，就可以发育成新的个体。，就可以发育成新的个体。克隆技术在繁育优良家畜、治疗人类遗传克隆技术在繁育优良家畜、治疗人类遗传病、抢救濒危物种和保护生物多样性等方面有病、抢救濒危物种和保护生物多样性等方面有广阔的应用前景。广阔的应用前景。第30页，此课件共46页哦 2000200020002000年，美国科学家成功地克隆出年，美国科学家成功地克隆出年，美国科学家成功地克隆出年，美国科学家成功地克隆出首首例长类灵动物例长类灵动物一只恒河短尾猴一只恒河短尾猴一只恒河短尾猴一只恒河短尾猴“泰特拉（泰特拉（泰特拉（

27、泰特拉（TetraTetraTetraTetra）”。与其它动物与其它动物与其它动物与其它动物克隆不同的是，克隆不同的是，克隆不同的是，克隆不同的是，“泰特拉泰特拉泰特拉泰特拉”未用细未用细未用细未用细胞核移植技术，而是采用胚胎分解胞核移植技术，而是采用胚胎分解胞核移植技术，而是采用胚胎分解胞核移植技术，而是采用胚胎分解的方法，的方法，的方法，的方法，将受精卵培育卵裂至将受精卵培育卵裂至8 8个个个个细胞时将其分离，每细胞时将其分离，每细胞时将其分离，每细胞时将其分离，每2 2 2 2个细胞分为一部个细胞分为一部个细胞分为一部个细胞分为一部分，共分为分，共分为分，共分为分，共分为4 4 4 4

28、部分，并分别植入部分，并分别植入部分，并分别植入部分，并分别植入4 4 4 4个个个个“代理母亲代理母亲代理母亲代理母亲”子宫中，结果有一个子宫中，结果有一个子宫中，结果有一个子宫中，结果有一个“代理母亲代理母亲代理母亲代理母亲”成功成功成功成功a a a a生下了生下了“泰特拉泰特拉”，这意味着克隆人类已没有技，这意味着克隆人类已没有技术障碍。术障碍。第31页，此课件共46页哦黑面绵羊去黑面绵羊去核卵母细胞核卵母细胞白面绵羊乳白面绵羊乳腺细胞核腺细胞核a重组细胞重组细胞电脉冲刺激电脉冲刺激早期重组胚胎早期重组胚胎b另一头绵羊的子宫另一头绵羊的子宫妊娠、出生妊娠、出生克隆羊多利克隆羊多利1、写

29、出、写出AB所代表细胞工程名称：所代表细胞工程名称：a表示：表示：b表示表示:2、实施细胞工程时，所需受体、实施细胞工程时，所需受体细胞大多采用卵母细胞的原因：细胞大多采用卵母细胞的原因：体积大，易操作。含有促使细胞核表达体积大，易操作。含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。全能性的物质和营养条件。3 3、多利面部毛色是：、多利面部毛色是：根据遗传学原理说明判断依据。根据遗传学原理说明判断依据。4 4、若黑面绵羊的基因型为、若黑面绵羊的基因型为AA,AA,白面白面绵羊的基因型为绵羊的基因型为aaaa，则克隆羊的基，则克隆羊的基因型为因型为 核移植核移植胚胎移植胚胎移植白色白色多利全部的核基

30、因都来自白面绵羊多利全部的核基因都来自白面绵羊aa第32页，此课件共46页哦 取供体细胞传取供体细胞传代培养代培养1010代以内代以内的细胞的细胞.为什么为什么？用的是去核的用的是去核的减数第二次分裂减数第二次分裂中期细胞（中期细胞（M中期中期）为什么）为什么？激活方法：激活方法：激活目的：激活目的：促融方法：促融方法：电刺激电刺激胚胎移植至代胚胎移植至代孕受体内孕受体内 妊娠、分娩妊娠、分娩2.）核移植流程）核移植流程供体：优质高产奶牛供体：优质高产奶牛受体：普通奶牛（卵母细受体：普通奶牛（卵母细胞的采集与培养）胞的采集与培养）1、体积大，易操、体积大，易操作。作。2、含有促使细胞、含有促使

31、细胞核表达全能性的物核表达全能性的物质和营养条件。质和营养条件。有人说它三个母亲，有人说它三个母亲，对吗？对吗？第33页，此课件共46页哦过程过程供体细胞（供核）供体细胞（供核）细胞培养细胞培养体细胞体细胞卵母细胞（减中期：供质）卵母细胞（减中期：供质）去核去核无核卵母细胞无核卵母细胞注入注入电刺激电刺激重重组组细细胞胞重组胚胎重组胚胎胚胎移植胚胎移植代孕母体代孕母体新个体新个体(与母体相同的与母体相同的个体个体)第34页，此课件共46页哦讨论讨论1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？为为使使核核移移植植的的胚胚胎胎或或动动物物的的遗遗传传物物质质全全部

32、部来来自自有有重重要要利利用用价价值值的的动动物物提提供供的的体体细细胞胞，在在供供体体细细胞胞的的细细胞胞核核移移至至受受体体细细胞胞之之前前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。第35页，此课件共46页哦培培养养的的动动物物细细胞胞一一般般当当传传代代至至10105050代代左左右右时时，部部分分细细胞胞核核型型可可能能会会发发生生变变化化，其其细细胞胞遗遗传传物物质质可可能能会会发发生生突突变变，而而1010代代以以内内的的细细胞胞一一般般能能保保持持正正常常的的二二倍倍体体核核型型。因因此此，在在体体细细胞胞核核移移植植中中，为为了保证供体细

33、胞正常的遗传基础，通常采用传代了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代1010代以内的细胞。代以内的细胞。2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？第36页，此课件共46页哦3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？绝大部分绝大部分DNADNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量的来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNADNA，即，即线粒体线粒体DNADNA是来自于受体卵母细胞。是来自于受体卵母细胞。此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习性行

34、为、习性的形成与所处环境有很大关系的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克隆动物所生，核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和核供体动物活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供体动物100%100%的复制。的复制。第37页，此课件共46页哦应用前景应用前景1、加快家畜遗传改良进程、加快家畜遗传改良进程2、保护频危物种、保护频危物种3、器官移植供体、器官移植供体4、利用生物反应器生产生物蛋白、利用生物反应器生产生物蛋白第38页，此课

35、件共46页哦前景前景第39页，此课件共46页哦5.体细胞核移植技术存在的问题体细胞核移植技术存在的问题看书看书P49-50页页第40页，此课件共46页哦存在问题存在问题n成功率低成功率低n存在健康问题存在健康问题n克隆动物食品的安全问题克隆动物食品的安全问题许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。免疫失调等。第41页，此课件共46页哦思考与探究2.动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？

36、动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。第42页，此课件共46页哦 1 1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是细胞是 -（）A A细胞系细胞系 B B细胞株细胞株 C C原代细胞原代细胞 D D传代细胞传代细胞2 2、动物细胞工程技术的基础是、动物细胞工程技术的基础是 -（）（）A.A.动物细胞融合动物

37、细胞融合 B.B.单克隆抗体单克隆抗体 C.C.胚胎移植胚胎移植 D.D.动物细胞培养动物细胞培养AD第43页，此课件共46页哦3 3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞织细胞 （）A.A.容易产生各种变异容易产生各种变异 B B具有更强的全能性具有更强的全能性 C.C.取材十分方便取材十分方便 D D分裂增殖的能力强分裂增殖的能力强D第44页，此课件共46页哦 4.4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于-（）A.A.培养基不同；培养基不同；B.B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；C.C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；D.D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。养成植株。A第45页，此课件共46页哦感谢大家观看第46页，此课件共46页哦