高中生物人教版选修三专题二动物细胞培养和核移植技术共张ppt课件.ppt
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1、关于高中生物人教版选修三专题二动物细胞培养和核移植技术共张ppt第1页,此课件共27页哦1.1.掌握动物细胞培养的过程与条件。掌握动物细胞培养的过程与条件。2.2.了解动物细胞培养的过程的应用。了解动物细胞培养的过程的应用。3.3.掌握动物体细胞核移植技术的过程。掌握动物体细胞核移植技术的过程。4.4.了解动物体细胞核移植技术应用前景了解动物体细胞核移植技术应用前景第2页,此课件共27页哦1.动物细胞培养的取材动物细胞培养的取材.生长特点生长特点.过程过程.条件条件2.传代培养与原代培养;细胞株与细胞系的比较传代培养与原代培养;细胞株与细胞系的比较3.动物细胞培养与植物组织培养的比较动物细胞培
2、养与植物组织培养的比较4.细胞核移植的过程与用到的技术细胞核移植的过程与用到的技术第3页,此课件共27页哦【问题【问题分析分析一】一】动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程第4页,此课件共27页哦1.1.动物细胞培养应该选择什么样的材料?原因?原理动物细胞培养应该选择什么样的材料?原因?原理?细胞增殖细胞增殖2.2.动物细胞培养能否像植物组织培养那样最终培动物细胞培养能否像植物组织培养那样最终培养成新个体?养成新个体?不能,动物细胞培养只能使细胞数不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体目增多,不能发育成新的动物个体【问题【问题分析分析一】一】动物细胞培养的过程动物细胞培养的
3、过程动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织原因:分裂能力比较强。原因:分裂能力比较强。3.3.培养前用什么酶处理使细胞分散成单个细胞?这样培养前用什么酶处理使细胞分散成单个细胞?这样做的目的?做的目的?使细胞与培养液充分接触。使细胞与培养液充分接触。用培养液将分散的细胞稀释制成用培养液将分散的细胞稀释制成 再培养。再培养。细胞悬液细胞悬液第5页,此课件共27页哦4.动物细胞培养过程中细胞生长特性动物细胞培养过程中细胞生长特性:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。胞贴壁。培养瓶或培养皿的内表面光滑、
4、无毒、易于贴附。培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。动物细胞培养存在细胞的接触抑制的特性,动物细胞培养存在细胞的接触抑制的特性,那么细胞在培养瓶壁上可形成几层细胞?那么细胞在培养瓶壁上可形成几层细胞?一层一层第6页,此课件共27页哦6.目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为多少代以目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为多少代以内?原因是?内?原因是?5.5.原代培养和传代培养的区别?原代培养和传代培养的区别?5050代后
5、为什么能无代后为什么能无限增殖?限增殖?原代培养一般传至原代培养一般传至1010代左右。代左右。传代培养细胞一般传至传代培养细胞一般传至 代以后就不易传下去了代以后就不易传下去了,少部分少部分细胞会细胞会突变突变能传至无数代能传至无数代,遗传物质发生改变遗传物质发生改变。1010传至传至1010代以内代以内 遗传物质不改变,保持正常二倍体核型。遗传物质不改变,保持正常二倍体核型。第7页,此课件共27页哦细胞细胞悬浮悬浮液液1010代代细胞细胞5050代代细胞细胞无限传无限传代代原代培养原代培养传代培养传代培养细胞株细胞株细胞系细胞系如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞系?如何界定原代培养和
6、传代培养;细胞株和细胞系?细胞贴壁细胞贴壁细胞的接触抑制,细胞的接触抑制,细胞就会停止分裂增殖细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变遗传物质改变第8页,此课件共27页哦总结:动物细胞培养过程总结:动物细胞培养过程动物胚胎或幼龄动物的组动物胚胎或幼龄动物的组织、器官织、器官细胞悬液细胞悬液剪碎剪碎 用胰蛋白酶处理用胰蛋白酶处理1010代细胞代细胞转入培养瓶转入培养瓶40-5040-50代细胞代细胞传传代代培培养养无限传代无限传代单个细胞单个细胞加培养液稀释加培养液稀释传代传代1010代以内,代以内,遗传物质不改变,遗传物质不改变,保持正常二倍体核型。保持正常二倍体核型。传代传代10-5010-50代左
7、右,增长缓慢以至代左右,增长缓慢以至于完全停止,于完全停止,部分细胞核型可能发部分细胞核型可能发生变化生变化(遗传物质可能改变(遗传物质可能改变)为什么用胰蛋白酶处理?为什么用胰蛋白酶处理?原代培养特点:原代培养特点:细胞贴壁、细胞的细胞贴壁、细胞的接触抑制接触抑制继续传代培养少部分细胞获得不死性,继续传代培养少部分细胞获得不死性,细胞突变,细胞突变,遗传物质已经改变遗传物质已经改变,等同,等同于癌细胞。于癌细胞。原代培养原代培养细胞株细胞株细胞系细胞系第9页,此课件共27页哦1.1.动物细胞培养需要什么样的条件?动物细胞培养需要什么样的条件?无菌、无毒的环境、营养无菌、无毒的环境、营养、温度
8、和温度和PHPH、气体环境、气体环境 2.如何保证培养过程中的无菌、无毒环境?如何保证培养过程中的无菌、无毒环境?和所有和所有 进行无菌处理。进行无菌处理。培养液中加培养液中加 定期更换培养液定期更换培养液3.3.动物细胞培养液的主要成分是什么?动物细胞培养基动物细胞培养液的主要成分是什么?动物细胞培养基与植物组织培养基相比较有何独特之处?与植物组织培养基相比较有何独特之处?【问题【问题分析一分析一】动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件培养液培养液 培养用具培养用具糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子(维生素、激素等)和动物血清(维生素、激素等)和动
9、物血清独特之处有:独特之处有:1.1.液体培养基液体培养基 2.2.成分中有动物血清等成分中有动物血清等抗生素抗生素第10页,此课件共27页哦4.动物细胞培养基属于什么培养基?什么是动物细胞培养基属于什么培养基?什么是合成培养基?为什么要加入动物血清?合成培养基?为什么要加入动物血清?合成培养基合成培养基 将细胞所需的营养物质按其种类和数量严格配制将细胞所需的营养物质按其种类和数量严格配制而成的培养基而成的培养基。血清可以补充合成培养基血清可以补充合成培养基 中缺乏的物质。中缺乏的物质。5.5.哺乳动物适宜温度?多数细胞生存适宜哺乳动物适宜温度?多数细胞生存适宜PHPH?细胞培养所需气体主要?
10、细胞培养所需气体主要?O O2 2和和COCO2 2 的作用分别是?细的作用分别是?细胞培养胞培养O O2 2、COCO2 2 通常为?通常为?36.50.5 7.2-7.436.50.5 7.2-7.49595空气和空气和5 5的的COCO2 2O O2 2:是细胞代谢所必需的是细胞代谢所必需的。COCO2 2:维持培养液的的维持培养液的的PHPH动物细胞培养中能否把胰蛋白酶处理换成胃蛋白酶?动物细胞培养中能否把胰蛋白酶处理换成胃蛋白酶?第11页,此课件共27页哦细胞的全能性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体植物体培养结果培养结果 获得细胞获得细胞或细或细胞产物胞产物 快速繁殖、
11、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、葡萄糖、动物血清动物血清蔗糖、蔗糖、植物激素植物激素培养基特培养基特有成分有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目 问题分析二问题分析二 植物细胞和动物细胞培养的比较植物细胞和动物细胞培养的比较培养过程培养过程 有分化,有分化,无突变无突变无分化,无分化,可能有突变可能有突变第12页,此课件共27页哦电激处理使供电激处理使供电激处理使供电激处理使供体核进入受体体核进入受体体核进入受体体核进入受体卵母细胞构建卵母细胞构
12、建卵母细胞构建卵母细胞构建重组胚胎重组胚胎重组胚胎重组胚胎卵母细胞采集、培养卵母细胞采集、培养MMMM期卵母细胞期卵母细胞期卵母细胞期卵母细胞供体牛供体牛供体细胞注入去核供体细胞注入去核卵母细胞卵母细胞代孕母牛代孕母牛代孕母牛代孕母牛克隆牛克隆牛克隆牛克隆牛体细胞培养体细胞培养去核卵母细胞去核卵母细胞去核卵母细胞去核卵母细胞去核去核胚胎胚胎胚胎胚胎移植移植移植移植【问题【问题分析三分析三】动物核动物核移植技术移植技术的过程的过程:第13页,此课件共27页哦供体细胞供体细胞(供核)(供核)细胞培养细胞培养体细胞体细胞 卵巢卵母细胞卵巢卵母细胞(MM中期:供质)中期:供质)去核去核无核卵无核卵母细
13、胞母细胞显微操作显微操作注入注入细胞融合细胞融合重组重组细胞细胞构建重构建重组胚胎组胚胎胚胎胚胎移植移植代孕代孕母体母体生出与供体生出与供体奶牛遗传物奶牛遗传物质基本相同质基本相同的犊牛的犊牛(显微操作法)(显微操作法)(电刺激)(电刺激)物理或化物理或化学方法学方法第14页,此课件共27页哦1.1.原理原理?2.2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代用于核移植的供体细胞一般都选用传代几几代代以内的细胞,为什么?以内的细胞,为什么?3.3.核移植的受体细胞是什么?处在什么时期?核移植的受体细胞是什么?处在什么时期?用此细胞作为受体细胞有什么好处?用此细胞作为受体细胞有什么好处?【问题【问题分析
14、三分析三】动物核移植技术动物核移植技术的过程的过程动物细胞核的全能性。动物细胞核的全能性。一般选优良动物的一般选优良动物的原原代代1010代以内代以内的细胞。的细胞。去核的卵母细胞去核的卵母细胞卵母细胞体积大,便于操作,含有促使细胞核表达全能卵母细胞体积大,便于操作,含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。性的物质和营养条件。1010代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型,未突变代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型,未突变4.4.通过什么手段激活受体细胞,构建重组胚胎?通过什么手段激活受体细胞,构建重组胚胎?减数第二次分裂中期(减数第二次分裂中期(MM中期)中期)5.5.去核方法:常用?还有?
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