高中生物选修一粗提取与鉴定课件.ppt

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1、关于高中生物选修一粗提取与鉴定第1页，此课件共10页哦一、基础知识：提取DNA的方法（1 1）DNADNA和蛋白质等成分和蛋白质等成分在不同浓度的在不同浓度的NaClNaCl溶溶液中溶解度不同；液中溶解度不同；（0.14mol/L0.14mol/L的的NaClNaCl溶液溶液,DNA,DNA溶解度最低，析出溶解度最低，析出）选择选择适当的盐浓度适当的盐浓度就能使就能使DNADNA充分溶解，而杂充分溶解，而杂质沉淀质沉淀，或者相反；，或者相反；1 1、DNADNA的的溶解性溶解性（2 2）DNADNA不溶于酒精溶液不溶于酒精溶液，但是细胞，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用中的某些蛋白质则溶

2、于酒精，利用这一原理，可以将这一原理，可以将DNADNA与蛋白质进一与蛋白质进一步分离。步分离。第2页，此课件共10页哦一、基础知识：提取DNA的方法（1 1）蛋白酶：）蛋白酶：水解蛋白质水解蛋白质，不能水解不能水解DNADNA。（2 2）高温：）高温：大多数蛋白质不能忍受大多数蛋白质不能忍受60608080的高温，而的高温，而DNADNA在在8080以上才会变性以上才会变性。（3 3）洗涤剂：）洗涤剂：瓦解细胞膜（瓦解细胞膜（主要破坏膜中主要破坏膜中的蛋白质分子的蛋白质分子），），但对但对DNADNA没影响。没影响。2 2、DNADNA对酶、高温和洗涤剂的对酶、高温和洗涤剂的耐受性耐受性第3

3、页，此课件共10页哦（1 1）二苯胺：）二苯胺：沸水浴条件下，沸水浴条件下，DNADNA遇二苯胺沸水浴遇二苯胺沸水浴5min5min会染成蓝色会染成蓝色（2 2）甲基绿：将）甲基绿：将DNADNA染成染成绿色绿色3 3、DNADNA鉴定原理鉴定原理第4页，此课件共10页哦二、实验设计原则上只要含原则上只要含DNADNA的生物材料都可以，但是的生物材料都可以，但是选取选取DNADNA含量相对较高的生物组织含量相对较高的生物组织，成功率更大。，成功率更大。（一）实验材料的选取（一）实验材料的选取 本实验材料：新鲜本实验材料：新鲜鸡血细胞液鸡血细胞液和鸡全血相比，和鸡全血相比，鸡血细胞液中鸡血细胞液

4、中DNADNA相对含量高相对含量高，保证实验能提取到足够量的保证实验能提取到足够量的DNADNA。第5页，此课件共10页哦二、实验设计（二）破碎细胞，获取含（二）破碎细胞，获取含DNADNA的滤液的滤液 1.1.动物细胞：动物细胞：加蒸馏水加蒸馏水使细胞吸水胀破使细胞吸水胀破，玻璃棒，玻璃棒搅搅拌可加速细胞膜和核膜破裂拌可加速细胞膜和核膜破裂，过滤后过滤后收集滤液收集滤液 2.2.植物细胞：植物细胞：切碎切碎后加后加洗涤剂洗涤剂和和食盐食盐，然后，然后充分充分搅拌、研磨搅拌、研磨，过滤后收集，过滤后收集滤液滤液；（；（P55P55问题）问题）第6页，此课件共10页哦二、实验设计（三）去除滤液中

5、的杂质（三）去除滤液中的杂质 方案方案3 3：控制温度在：控制温度在60756075 方案方案2 2：滤液中加嫩肉粉（木瓜蛋白酶）：滤液中加嫩肉粉（木瓜蛋白酶）方案方案1 1：控制：控制NaClNaCl溶液的浓度，反复地溶液的浓度，反复地 溶解与析出溶解与析出DNADNA，去除杂质，去除杂质第7页，此课件共10页哦 前面处理后的溶液过滤，加前面处理后的溶液过滤，加与滤液体积相与滤液体积相等的等的、冷却冷却的的酒精溶液酒精溶液(体积分数体积分数9595)，静置，静置2 23min3min，溶液中会出现，溶液中会出现白色丝状物白色丝状物 粗提取粗提取DNADNA 用玻璃棒用玻璃棒沿一个方向沿一个方

6、向搅拌，搅拌，卷起丝状物卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水并用滤纸吸取上面的水1、DNA的析出（的析出（进一步提纯进一步提纯DNA）（四）（四）DNADNA的析出与鉴定的析出与鉴定第8页，此课件共10页哦2.DNA的鉴定的鉴定 向两支试管中分别加入向两支试管中分别加入向两支试管中分别加入向两支试管中分别加入 2mol/L 2mol/L 2mol/L 2mol/L NaClNaClNaClNaCl 溶液溶液5ml5ml 其中一支试管中加其中一支试管中加其中一支试管中加其中一支试管中加DNADNA丝状物丝状物丝状物丝状物 各加入各加入二苯胺二苯胺试剂试剂试剂试剂4ml4ml4ml4ml 混匀后，混匀后，混匀后，混匀后，沸水浴沸水浴中加热中加热5min5min 待冷却后待冷却后待冷却后待冷却后，比较两只试管中溶液，比较两只试管中溶液，比较两只试管中溶液，比较两只试管中溶液的颜色变化的颜色变化的颜色变化的颜色变化 观察现象：观察现象：溶解丝状物的溶液变为溶解丝状物的溶液变为蓝色蓝色（四）（四）DNADNA的析出与鉴定的析出与鉴定第9页，此课件共10页哦感谢大家观看第10页，此课件共10页哦