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1、关于蛋白质化学(7)第1页,讲稿共103张,创作于星期三蛋白质存在于所有所有生物细胞中,是构成生物体最基本的结构物质结构物质和功能物质功能物质。蛋白质是生命活动最基本的物质基础,参与了几乎所有的生命活动过程。如生物专有的催化剂酶一个细胞中约含有104种蛋白质,分子的数量达1011个。第2页,讲稿共103张,创作于星期三物质质量分数平均相对分子质量种类水8518自由水和结合水蛋白质103.6104清、球、组、核蛋白质等DNA0.4106RNA0.74.0105脂类2700脂肪、磷脂等糖类等0.4250单糖、双糖、多糖无机盐1.555Na+,K+,Ca+,Mg+,Cl-,SO42-等原生质中各种物
2、质的平均值原生质中各种物质的平均值第3页,讲稿共103张,创作于星期三一、蛋白质的生物学功能一、蛋白质的生物学功能:1.作为生物催化剂:在体内催化各种物质代谢反应的酶几乎都是蛋白质。(已发现3,000多种)2.调节代谢反应:一些激素是蛋白质或肽,如胰岛素、生长素。3.运输载体:如红细胞中运输O2、CO2要靠Hb(Hemoglobin血红蛋白)、运输脂类物质的是载脂蛋白、运铁蛋白等转运蛋白或叫载体蛋白。4.参与机体的运动:如心跳、胃肠蠕动等,依靠与肌肉收缩有关的蛋白质来实现,如肌球蛋白、肌动蛋白。5.参与机体的防御:机体抵抗外来侵害的防御机能,靠抗体,抗体也称免疫球蛋白,是蛋白质。第4页,讲稿共
3、103张,创作于星期三6.6.接受传递信息:接受传递信息:如口腔中的味觉蛋白、视网膜中的视觉蛋白。7.7.结构成分:建造和维持生物体的结构。结构成分:建造和维持生物体的结构。(如-角蛋白、阻遏蛋白及转录因子等)8.8.其它:其它:如鸡蛋清蛋白、牛奶中的酪蛋白是营养和储存蛋白;还有甜味蛋白、毒素蛋白等都具有特异的生物学功能。所以,我们不难理解,为什么说所以,我们不难理解,为什么说没有蛋白质就没没有蛋白质就没有生命。有生命。第5页,讲稿共103张,创作于星期三二、蛋白质的化学组成和分类二、蛋白质的化学组成和分类1、元素组成第6页,讲稿共103张,创作于星期三、蛋白质的含氮量、蛋白质的含氮量v蛋白氮
4、占生物组织所有含氮物质的绝大部分。蛋白氮占生物组织所有含氮物质的绝大部分。v大多数蛋白质含氮量接近于大多数蛋白质含氮量接近于16%16%蛋白质含量蛋白质含量 =每克样品中含氮的克数每克样品中含氮的克数 6.256.25第7页,讲稿共103张,创作于星期三消化消化蒸馏蒸馏吸收吸收滴定滴定凯氏定氮法:凯氏定氮法:反应方程式反应方程式用标准盐酸进行滴定用标准盐酸进行滴定 用硼酸吸收氨气用硼酸吸收氨气再强碱高温水蒸气再强碱高温水蒸气蒸馏出氨气蒸馏出氨气 先高温条件下强酸先高温条件下强酸(浓浓H2SO4)把把样品中的蛋白质的有机氮全部消化样品中的蛋白质的有机氮全部消化为无机氮形式为无机氮形式第8页,讲稿
5、共103张,创作于星期三奶粉奶粉-三聚氰胺事件三聚氰胺事件 三聚氰胺结构式三聚氰胺结构式NH3+3CO26+硅胶第9页,讲稿共103张,创作于星期三(Amino Acid,AA,Aa,aa)第一节、氨第一节、氨 基基 酸酸第10页,讲稿共103张,创作于星期三蛋白质的构件分子蛋白质的构件分子Protein Architecture一、氨基酸一、氨基酸第11页,讲稿共103张,创作于星期三(一)(一)蛋白质水解蛋白质水解蛋白质和多肽的肽键可被催化水解蛋白质和多肽的肽键可被催化水解酸酸/碱碱能将蛋白能将蛋白完全水解完全水解 酶酶水解一般是水解一般是部分水解部分水解得到各种得到各种AA的混合物的混合
6、物得到多肽片段和得到多肽片段和AA的混合物的混合物氨基酸是蛋白质的基本结构单元氨基酸是蛋白质的基本结构单元蛋白质蛋白质月示月示胨胨多肽多肽肽肽AAAA 1*104 5*103 2*103 1000 200 100 -500第12页,讲稿共103张,创作于星期三(二)(二)氨基酸的结构氨基酸的结构地球上天然形成的AA300种以上。构成蛋白质的AA只有20余种,称蛋白质氨基酸,且基本是-氨基酸。不参与蛋白组成的称为非蛋白质氨基酸。第13页,讲稿共103张,创作于星期三什么是氨基酸?什么是氨基酸?氨基酸是指含有氨基的羧酸。蛋白质是由20种氨基酸组成的,除脯氨酸外,均为-氨基酸。即羧酸分子中-碳原子上
7、的一个氢原子被氨基取代而成的化合物。第14页,讲稿共103张,创作于星期三什么是什么是-氨基酸?氨基酸?第15页,讲稿共103张,创作于星期三六伴穷光蛋,酸谷天出门,死猪肝色脸,只携一两钱。一本落色书,拣来精读之。芳香老本色,不抢甘肃来。半胱、胱、蛋(甲硫)氨酸含硫氨基酸谷氨酸、天冬氨酸酸性氨基酸丝、组、甘、色氨酸一碳单位来源的氨基酸缬、异亮、亮氨酸支链氨基酸异亮、苯丙、酪、色、苏氨酸生糖兼生酮赖氨酸、精氨酸、组氨酸碱性氨基酸酪、苯丙、色氨酸芳香族氨基酸脯、羟脯、甘、苏、赖氨酸不参与转氨基的氨基酸(三)氨基酸的分类(三)氨基酸的分类 甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、
8、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸第16页,讲稿共103张,创作于星期三丙精天冬半胱谷甘组异亮亮赖甲硫苯丙脯丝苏色酪缬二十种氨基酸二十种氨基酸第17页,讲稿共103张,创作于星期三1 1、按酸碱性质、按酸碱性质酸性氨基酸:2种 天冬、谷氨酸碱性氨基酸:3种 赖、组、精氨酸中性氨基酸:15种第18页,讲稿共103张,创作于星期三2 2、按、按R R基团的化学结构分基团的化学结构分脂肪族氨基酸:15种,丙、缬、亮、异亮、蛋、天冬、谷、赖、精、甘、丝、苏、半胱、天冬酰胺、谷氨酰胺。芳香族氨基酸:3种,苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸
9、。杂环氨基酸:2种,组氨酸、脯氨酸。第19页,讲稿共103张,创作于星期三3 3、根据侧链、根据侧链R R基团是否有极性分基团是否有极性分极性带正电荷的氨基酸:极性带正电荷的氨基酸:3 3种种 极性带负电荷的氨基酸:极性带负电荷的氨基酸:2 2种种极性不带电荷的氨基酸:极性不带电荷的氨基酸:7 7种种非极性氨基酸:非极性氨基酸:8 8种种非极性氨基酸在维持蛋白质的三维结构中起着重要作用(蛋白质的疏水核心)。第20页,讲稿共103张,创作于星期三4 4、根据人体能否自身合成、根据人体能否自身合成必需氨基酸:必需氨基酸:8 8种,赖氨酸种,赖氨酸(Lys)(Lys)、缬氨酸、缬氨酸(Val)(Va
10、l)、甲硫甲硫氨酸氨酸(Met)(Met)、色氨酸、色氨酸(Try)(Try)、亮氨酸、亮氨酸(Leu)(Leu)、异亮氨酸异亮氨酸(Ile)(Ile)、苏氨酸、苏氨酸(Thr)(Thr)、苯丙氨酸、苯丙氨酸(Phe)(Phe)半必需氨基酸:半必需氨基酸:2 2种,种,ArgArg、HisHis婴儿期供给不足婴儿期供给不足非必需氨基酸:非必需氨基酸:其余其余假设来借一本书假设来借一本书第21页,讲稿共103张,创作于星期三缬组丙脯赖异亮亮天冬苯丙酪天酰谷酰谷精色甘丝半胱苏甲硫第22页,讲稿共103张,创作于星期三在少数蛋白质中分离出一些不常见的氨基酸,通常称为不在少数蛋白质中分离出一些不常见的
11、氨基酸,通常称为不常见蛋白质氨基酸。这些氨基酸都是由相应的基本氨基酸常见蛋白质氨基酸。这些氨基酸都是由相应的基本氨基酸衍生衍生而来的。而来的。5 5、几种重要的不常见氨基酸几种重要的不常见氨基酸胶原蛋白胶原蛋白第23页,讲稿共103张,创作于星期三1 1、溶解度、溶解度2 2、氨基酸的旋光性、氨基酸的旋光性甘氨酸除外,无手性碳原子甘氨酸除外,无手性碳原子。二、氨基酸的溶解度、旋光性、光吸收二、氨基酸的溶解度、旋光性、光吸收第24页,讲稿共103张,创作于星期三说明说明:苏氨酸,异亮氨酸,羟脯氨酸,羟赖氨酸,有二个不苏氨酸,异亮氨酸,羟脯氨酸,羟赖氨酸,有二个不对称碳原子。对称碳原子。苏氨酸的四
12、个异构体如下:第25页,讲稿共103张,创作于星期三 胱氨酸光学异构体的特殊性。第26页,讲稿共103张,创作于星期三外消旋体:外消旋体:一对对映体右旋体和左旋体的等量混合物。旋光方向相一对对映体右旋体和左旋体的等量混合物。旋光方向相反、旋光能力相同的分子等量混合而成,其旋光性因这些分子间的作反、旋光能力相同的分子等量混合而成,其旋光性因这些分子间的作用而相互抵消,因而是不旋光的。用而相互抵消,因而是不旋光的。内消旋体:内消旋体:分子内,含有构造相同的手性碳原子,但存在对分子内,含有构造相同的手性碳原子,但存在对称面的分子。分子内虽然含有两个不对称碳原子称面的分子。分子内虽然含有两个不对称碳原
13、子C*C*,但由于,但由于它们具有对称因素,一半分子的右旋作用被另一半分子的左它们具有对称因素,一半分子的右旋作用被另一半分子的左旋作用在内部所抵消,因此是一个不旋光性化合物旋作用在内部所抵消,因此是一个不旋光性化合物 。第27页,讲稿共103张,创作于星期三 氨基酸的旋光符号和大小取决于它的氨基酸的旋光符号和大小取决于它的R R基的基的性质,溶液的性质,溶液的pHpH有关,测定的溶剂有关。有关,测定的溶剂有关。第28页,讲稿共103张,创作于星期三第29页,讲稿共103张,创作于星期三3 3、氨基酸的吸光性、氨基酸的吸光性在近紫外光区域(220300nm)只有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸收光
14、的能力。酪氨酸的最大光吸收波长(max)在275nm,275=1400;苯 丙 氨 酸 的max在275nm,275=200;色 氨 酸 的max在280nm,280=5600。利利用用分分光光光光度度法法很很方方便便地地测测定定蛋白质的含量。蛋白质的含量。第30页,讲稿共103张,创作于星期三三、氨基酸的酸碱性质三、氨基酸的酸碱性质(一)兼性离子(一)兼性离子兼性离子(两性离子)兼性离子(两性离子):所谓两性离子是指在同一:所谓两性离子是指在同一个氨基酸分子上带有能个氨基酸分子上带有能放出质子的放出质子的NHNH3 3+正离子和正离子和能能接受质子的接受质子的COOCOO-负离子。因此,氨基
15、酸是负离子。因此,氨基酸是两两性性电解质。电解质。第31页,讲稿共103张,创作于星期三第32页,讲稿共103张,创作于星期三(二)氨基酸的解离(二)氨基酸的解离pIpH pIpH pIpH 带正电,向阴极移动带正电,向阴极移动pIpIpHpH不带电,不移动不带电,不移动 氨基酸可以做缓冲试剂氨基酸可以做缓冲试剂第33页,讲稿共103张,创作于星期三(三)氨基酸的等电点(三)氨基酸的等电点当当溶溶液液为为某某一一pHpH值值时时,AAAA的的氨氨基基和和羧羧基基的的解解离离度度完完全全相相等等,正正负负离离子子浓浓度度相相等等。AAAA主主要要以以兼兼性性离离子子的的形形式式存存在在,分分子子
16、中中所所含含的的正正负负电电荷荷数数目目相相等等,净净电电荷荷为为0 0。这一这一pHpH值即为值即为AAAA的等电点(的等电点(p pI I)。在在p pI I时时,AAAA在在电电场场中中既既不不向向正正极极也也不不向向负负极极移移动动,即即处处于两性离子状态。于两性离子状态。在在p pI I时,时,AAAA的溶解度最小。的溶解度最小。第34页,讲稿共103张,创作于星期三侧链不含离解基团的中性侧链不含离解基团的中性AAAApI=(pK1+pK2)/2 第35页,讲稿共103张,创作于星期三甘甘氨氨酸酸滴滴定定曲曲线线第36页,讲稿共103张,创作于星期三u对于侧链含有可解离基团的对于侧链
17、含有可解离基团的AAAAup pI I 取决于两性离子两边取决于两性离子两边p pK K值的算术平均值值的算术平均值u酸性酸性AAAA:p pI I=(p=(pK K1 1+p+pK KR-COOR-COO-)/2)/2 u碱性碱性AAAA:p pI I=(p=(pK K2 2+p+pK KR-NH2 R-NH2)/2)/2 第37页,讲稿共103张,创作于星期三第38页,讲稿共103张,创作于星期三第39页,讲稿共103张,创作于星期三四、氨基酸的化学反应四、氨基酸的化学反应(1 1)-氨基参加的反应氨基参加的反应(2 2)-羧基参加的反应羧基参加的反应(3 3)-氨基和氨基和-羧基共同参加
18、的反应羧基共同参加的反应(4 4)侧链)侧链R R基参加的反应基参加的反应第40页,讲稿共103张,创作于星期三氨基酸的化学反应氨基酸的化学反应亚硝酸盐反应烃基化反应酰化反应脱氨基反应西佛碱反应侧链反应成盐成酯反应成酰氯反应脱羧基反应叠氮反应第41页,讲稿共103张,创作于星期三(1)-(1)-氨基参加的反应氨基参加的反应与亚硝酸反应与亚硝酸反应(范斯莱克法测定氨基酸氮的依据)可用来进行氨基酸定量和蛋白质水解程度的测定。室室温温下下第42页,讲稿共103张,创作于星期三氨基酸的甲醛滴定氨基酸的甲醛滴定(用于氨基酸定量分析用于氨基酸定量分析)氨基酸不能直接用酸、碱滴定来进行定量测定。氨基酸不能直
19、接用酸、碱滴定来进行定量测定。RCHCOO-NH3+RCHCOO-NH2+H+OH-中和滴定中和滴定HCHORCHCOO-NHCH2OHHCHORCHCOO-N(CH2OH)2应用:氨基酸定量分析应用:氨基酸定量分析甲醛滴甲醛滴 定法(间接滴定)定法(间接滴定)A.直接滴定,终点pH过高(12),没有适当指示剂。B.与甲醛反应,滴定终点在9左右,可用酚酞作指示剂。C.简单快速,一般用于测定蛋白质的水解速度。第43页,讲稿共103张,创作于星期三 是生物化工产品、食品和发酵物等产品中氨基氮的测定原理和方法第44页,讲稿共103张,创作于星期三与与2,42,4二硝基氟苯二硝基氟苯(DNFBDNFB
20、或或FDNBFDNB,SangerSanger试剂试剂)首先被英国的首先被英国的SangerSanger鉴定多肽蛋白质的鉴定多肽蛋白质的N N末端末端氨基酸。氨基酸。DNP-氨基酸氨基酸 黄色黄色 2,4二硝基氟苯二硝基氟苯弱碱性溶液弱碱性溶液二硝基苯基氨基酸二硝基苯基氨基酸第45页,讲稿共103张,创作于星期三Frederick SangerFrederick Sanger(桑格)英国化学家,在生物化学领域的贡献很大,他两次获诺贝尔奖1958和1980年;1953年确定了牛胰岛素一级结构;1975年和1977年确定了DNA的两种用酶测序的方法加减法和终止法。第46页,讲稿共103张,创作于星
21、期三与酰化试剂反应与酰化试剂反应氨基酸的氨基与酰氯或酸酐在弱碱溶液中发生作用时,氨基被酰基化。丹磺酰氯丹磺酰氯氨基酸氨基酸丹磺酰衍生物丹磺酰衍生物用于多肽链N末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定及保护氨基。第47页,讲稿共103张,创作于星期三常用的酰化试剂常用的酰化试剂叔丁氧甲酰氯、对甲苯磺酰氯、邻苯二甲酸酐、丹磺酰氯等。第48页,讲稿共103张,创作于星期三生成西佛碱的反应生成西佛碱的反应(SchiffSchiff)西佛碱是以氨基酸为底物的某些酶促反应的中间物。有色物质有色物质第49页,讲稿共103张,创作于星期三 脱氨基反应脱氨基反应氨基酸在生物体内经氨基酸氧化酶的催化即脱去-氨基而转
22、变成酮酸。氨基酸氧化酶氨基酸氧化酶第50页,讲稿共103张,创作于星期三(2)-(2)-羧基参加的反应羧基参加的反应1、成盐和成酯:羧基被保护,氨基被活化,重金属盐不溶于水。2、成酰氯反应:氨基被保护,羧基被活化,在多肽人工合成中常用。3、脱羧基反应:4、叠氮反应:常用于多肽的合成。第51页,讲稿共103张,创作于星期三1 1 1 1、成盐、成酯反应、成盐、成酯反应、成盐、成酯反应、成盐、成酯反应可以屏蔽羧基活化氨基RCHCOOHNH2+C2H5OH干燥,HCl回流RCHCOOC2O5NH3Cl-+H2O成酯反应RCHCOOHNH2+NaOHRCHCOONaNH2+H2O第52页,讲稿共103
23、张,创作于星期三 氨基被保护后,羧基可与二氯亚砜或五氯化磷反应,生成酰氯,使羧基活化,在多肽的人工合成中常用。2、成酰氯的反应HN-保护基R-CH-COOH+PCl5HN-保护基R-CH-COCl+POCl3+HCl?三氯氧磷三氯氧磷 第53页,讲稿共103张,创作于星期三活化羧基,可用于肽的人工合成。活化羧基,可用于肽的人工合成。3、叠氮反应第54页,讲稿共103张,创作于星期三将将-氨基酸加热时,可脱去氨基酸加热时,可脱去COCO2 2得到胺。得到胺。Ba(OH)24、脱羧基反应 NH2 R-CH-COOH-R-CH2-NH2+CO2脱羧酶脱羧酶H2N-CH2CH2CH2-NH2H2N-C
24、H2CH2CH2CH COOHNH2CHCH22尸胺尸胺第55页,讲稿共103张,创作于星期三 茚茚三三酮酮在在弱弱酸酸中中与与-氨氨基基酸酸共共热热,引引起起氨氨基基酸酸的的氧氧化化脱脱氨氨,脱脱羧羧反反应应,最最后后,茚茚三三酮酮与与反反应应产产物物氨氨和和还还原原茚茚三三酮酮反反应应,生生成成紫紫色色物物质质(max=570nmmax=570nm)。)。(三)-NH2和-COOH共同参加的反应1 1、与茚三酮反应、与茚三酮反应第56页,讲稿共103张,创作于星期三+NH3+RCHO+CO2 +CCCOHOCCCOON蓝紫色复合物蓝紫色复合物ProPro、Hy-ProHy-Pro与直接形成
25、与直接形成黄色化合物(黄色化合物(max=440nmmax=440nm)茚三酮茚三酮还原茚三酮还原茚三酮还原茚三酮茚三酮(max=570nmmax=570nm)第57页,讲稿共103张,创作于星期三2023/4/42023/4/458582、成肽反应 一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基可以缩合成肽,形成的键称肽键。肽键第58页,讲稿共103张,创作于星期三(四)(四)侧链侧链R R基参加的反应基参加的反应氨基酸侧链功能基团:苯环苯环色氨酸、苯丙氨酸色氨酸、苯丙氨酸羟基羟基丝氨酸、苏氨酸丝氨酸、苏氨酸巯基巯基半胱氨酸半胱氨酸吲哚基吲哚基色氨酸色氨酸胍基胍基精氨酸精氨酸咪唑基咪唑基组氨酸组氨酸非
26、非-氨基氨基赖氨酸赖氨酸非非-羧基羧基谷氨酸、天冬氨酸谷氨酸、天冬氨酸侧链基团可与特异试剂发生特定反应,用于氨基酸的鉴定,氨基酸的修饰。蛋白质化学修饰:在较温和的条件下,以可控制的方式使蛋白质某些试剂起特异反应,以引起蛋白质中个别氨基酸侧链或功能基团发生共价化学改变。第59页,讲稿共103张,创作于星期三1 1、酪氨酸的酚羟基:、酪氨酸的酚羟基:在3和5位上容易发生亲电取代反应,例如发生碘化或硝化,分别生成一碘酪氨酸和二碘酪氨酸或一硝基酪氨酸和二硝基酪氨酸。酪氨酸酪氨酸第60页,讲稿共103张,创作于星期三 酪氨酸的酚基还可以与重氮化合物(例如对氨基苯磺酸的重氮盐)结合生成桔黄色桔黄色的化合物
27、。第61页,讲稿共103张,创作于星期三2 2、组氨酸的、组氨酸的侧链咪唑基侧链咪唑基:与重氮苯磺酸也能形成相似的化合物,但颜色稍有差异,呈棕红色。第62页,讲稿共103张,创作于星期三3 3、精氨酸的、精氨酸的侧链胍基侧链胍基:在硼酸钠缓冲液(pH8-9,25-35)中,与1,2-环己二酮反应,生成缩合物:第63页,讲稿共103张,创作于星期三4 4、半胱氨酸半胱氨酸侧链上的巯基侧链上的巯基(SHSH)第64页,讲稿共103张,创作于星期三(1 1)与卤化烷生成稳定的烷基衍生物)与卤化烷生成稳定的烷基衍生物可保护-SH 以防被氧化。+ICH+ICH2 2COOCOO-碘乙酸CH2COOI第6
28、5页,讲稿共103张,创作于星期三(2 2)巯基能和各种金属离子形成络合物)巯基能和各种金属离子形成络合物-SH 酶遇到重金属离子而生成硫醇盐时,将导致酶失活。对羟基汞苯甲酸对羟基汞苯甲酸第66页,讲稿共103张,创作于星期三(3 3)巯基易受空气或其他氧化剂氧化)巯基易受空气或其他氧化剂氧化形成两种氧化衍生物形成两种氧化衍生物形成二硫化物:胱氨酸的形成。胱氨酸二硫二硫键键第67页,讲稿共103张,创作于星期三(4 4)形成磺酸基:对游离的巯基具有保护作)形成磺酸基:对游离的巯基具有保护作用,保护用,保护ClyCly巯基之间的氧化。巯基之间的氧化。+HCOOOH+HCOOOH过甲酸O3H第68
29、页,讲稿共103张,创作于星期三5 5、羟基(、羟基(OHOH)丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸磷酸酯。Pi+HPO4 2-第69页,讲稿共103张,创作于星期三六、氨基酸混合物的分析分离六、氨基酸混合物的分析分离第70页,讲稿共103张,创作于星期三第71页,讲稿共103张,创作于星期三层析系统层析系统固定相固定相流动相流动相附着在固相上的液体附着在固相上的液体固体固体第72页,讲稿共103张,创作于星期三第73页,讲稿共103张,创作于星期三氨基酸的分离鉴定:(1 1)纸层析法纸层析法(2 2)薄层析法薄层析法(3 3)离子交换柱法离子交换柱法(4 4)高效液相分析法高效液相分析法第74页,讲稿共1
30、03张,创作于星期三第75页,讲稿共103张,创作于星期三(1 1)纸层层析纸层层析层析缸层析缸展层剂展层剂正丁醇正丁醇:冰醋酸冰醋酸:水水=4:1:50.25%的比例将茚三酮的比例将茚三酮 溶质在滤纸上的移动速度用溶质在滤纸上的移动速度用Rf值值表示:表示:Rf=原点到层析斑点中心的原点到层析斑点中心的距离距离/原点到溶剂前沿的距离原点到溶剂前沿的距离=X/Y第76页,讲稿共103张,创作于星期三第77页,讲稿共103张,创作于星期三第78页,讲稿共103张,创作于星期三第79页,讲稿共103张,创作于星期三(2)薄层层析)薄层层析第80页,讲稿共103张,创作于星期三(3 3)离子交换层析
31、)离子交换层析 通过带电的溶质分子与离子交换层析介质中可交换离子进行交换而达到分离纯化的方法,也可以认为是蛋白质分子中带电的氨基酸与带相反电荷的介质的骨架相互作用而达到分离纯化的方法。原理:原理:第81页,讲稿共103张,创作于星期三第82页,讲稿共103张,创作于星期三第83页,讲稿共103张,创作于星期三第84页,讲稿共103张,创作于星期三第85页,讲稿共103张,创作于星期三第86页,讲稿共103张,创作于星期三第87页,讲稿共103张,创作于星期三第88页,讲稿共103张,创作于星期三第89页,讲稿共103张,创作于星期三第90页,讲稿共103张,创作于星期三第91页,讲稿共103张
32、,创作于星期三(4 4)高效液相层析)高效液相层析固定相支持剂颗粒细,表面积大;采取高压,洗脱速度快,高灵敏度的检测器。第92页,讲稿共103张,创作于星期三第93页,讲稿共103张,创作于星期三第94页,讲稿共103张,创作于星期三第95页,讲稿共103张,创作于星期三氨基酸的制备氨基酸的制备目前氨基酸的生产方法分三类:目前氨基酸的生产方法分三类:(1 1)直接发酵法;)直接发酵法;(2 2)化学合成法;)化学合成法;(3 3)蛋白质水解提取法(酸、碱、酶)蛋白质水解提取法(酸、碱、酶)。第96页,讲稿共103张,创作于星期三八、氨基酸的应用八、氨基酸的应用1 1、医药工业、医药工业(1 1
33、)氨基酸输液)氨基酸输液(2 2)必需氨基酸:苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、)必需氨基酸:苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、赖氨酸、蛋氨酸苯丙氨酸、色氨酸、赖氨酸、蛋氨酸(3 3)半必需氨基酸:精氨酸、组氨酸是幼儿所必需)半必需氨基酸:精氨酸、组氨酸是幼儿所必需的。的。第97页,讲稿共103张,创作于星期三治疗药剂治疗药剂(1)精氨酸:对治疗高氨血症、肝机能障碍等疾病颇有效果;(2)天冬氨酸:钾镁盐可用于恢复疲劳;治疗低钾症心脏病、肝病、糖尿病等。(3)半胱氨酸:能促进毛发的生长,可用于治疗秃发症;甲酯盐酸盐可用于治疗支气管炎等;(4)组氨酸:可扩张血管,降低血压,用于心
34、绞痛,心功能不全等疾病的治疗。第98页,讲稿共103张,创作于星期三2 2、化学工业、化学工业l(1)维生素B6:可采用丙氨酸或天冬氨酸为原料合成。l(2)叶酸:需要用谷氨酸为原料合成。l(3)氨基酸表面活性剂:酰基谷氨酸钠、十六烷基-L-赖氨酰-L-赖氨酸甲酯二盐酸、月桂酰-L-精氨酸乙酯盐酸等具有较强的抗菌杀菌活性,且无刺激性。l(4)聚合氨基酸:聚谷氨酸甲酯可用于作为合成皮革的表面处理剂;聚天冬氨酸或聚谷氨酸的二烷基酯与磷酸高级烷基酯结合得到化合物可作为可塑剂,稳定剂等。第99页,讲稿共103张,创作于星期三3、食品工业营养强化剂赖氨酸赖氨酸;谷氨酸钠味精味精;天冬氨酸钠:可用于清凉饮料
35、,能增加清凉感并使香味浓厚爽口;天冬氨酰苯丙氨酸甲酯:甜味素APM第100页,讲稿共103张,创作于星期三4 4、农业农业杀虫剂:刀豆氨酸、5-羟色氨酸可使南方毛虫拒食而死;半胱氨酸可杀死黄瓜蝇;甘氨酸乙酯衍生的二硫代磷酸盐具有较强的杀蚜虫和杀螨效果;杀菌剂:N-月桂酰缬氨酸可作为治疗稻瘟病;-1,4环己二烯丙氨酸能抑制黑穗病毒、稻瘟病等;除草剂:如N-3,4二氮丙氨酸,硫代氨基酸酯等;第101页,讲稿共103张,创作于星期三5 5、化妆品工业、化妆品工业u氨基酸能调节皮肤氨基酸能调节皮肤pHpH的变动,对细菌的防护作用,也可的变动,对细菌的防护作用,也可作为皮肤、毛发的营养成分,增加皮肤、毛发的光泽。作为皮肤、毛发的营养成分,增加皮肤、毛发的光泽。u防止皮肤干燥的自然保湿因子的主要成分是甘氨酸、防止皮肤干燥的自然保湿因子的主要成分是甘氨酸、羟基丁氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、丝氨酸等游离氨羟基丁氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、丝氨酸等游离氨基酸。基酸。u在化妆品中添加天冬氨酸或其衍生物以及一些维生素,在化妆品中添加天冬氨酸或其衍生物以及一些维生素,可防止皮肤老化。可防止皮肤老化。第102页,讲稿共103张,创作于星期三感谢大家观看第103页,讲稿共103张,创作于星期三
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