微生物第六章微生物的生理特性讲稿.ppt
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1、微生物第六章微生物的生理特性第一页,讲稿共七十二页哦6.1 微生物的营养微生物的营养微生物要吃什么?微生物的微生物的营养要素营养要素碳源碳源氮源氮源能源能源生长因子生长因子无机盐无机盐水水第二页,讲稿共七十二页哦概念概念来源来源碳源凡是能为微生凡是能为微生物提供所需碳物提供所需碳元素的营养物元素的营养物质质有机碳源有机碳源 糖类(糖类(葡萄糖葡萄糖)脂肪酸脂肪酸 花生粉饼、花生粉饼、石油等石油等1、微生物的碳源、微生物的碳源 哪些微生物可以利用无机碳源?哪些微生物可以利用无机碳源?思考思考 哪些微生物可以利用有机碳源?哪些微生物可以利用有机碳源?无机碳源无机碳源 COCO2 2 Na Na2
2、2CO3CO3、NaHCO NaHCO3 3等等第三页,讲稿共七十二页哦碳源碳源有机碳有机碳(糖类等有机物)糖类等有机物)无机碳无机碳(COCO2 2、碳酸盐碳酸盐及碳酸氢盐)及碳酸氢盐)异养型微生物异养型微生物自养型微生物自养型微生物不同生物的不同生物的碳源碳源同化类型同化类型自养型自养型异养型异养型CO2+H2O能量能量 酶酶(CH2O)只能利用现成的有机物只能利用现成的有机物(如蓝藻,硝化细菌)(如蓝藻,硝化细菌)(大部分微生物)(大部分微生物)第四页,讲稿共七十二页哦氮源氮源氮源:能为微生物提供所需氮元素的营养物质氮源:能为微生物提供所需氮元素的营养物质种类:无机氮源种类:无机氮源 N
3、2、NH3、铵盐、硝酸盐、尿素铵盐、硝酸盐、尿素 有机氮源有机氮源 蛋白质、蛋白胨、氨基酸等蛋白质、蛋白胨、氨基酸等(1 1)常用的氮源:铵盐、硝酸盐)常用的氮源:铵盐、硝酸盐氮源氮源(2)含含“C、H、O、N”的化合物是异养微生物的的化合物是异养微生物的碳源兼氮源碳源兼氮源(如蛋白胨如蛋白胨)。第五页,讲稿共七十二页哦 蛋白胨是将肉、大豆蛋白蛋白胨是将肉、大豆蛋白等用酸、碱或蛋白酶水解后等用酸、碱或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂粉剂。一般来说,用于蛋白胨生一般来说,用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白(酪产的蛋白包括动物蛋白(酪蛋白、肉类)和植物蛋白蛋白、肉类)
4、和植物蛋白(豆类)等两种。(豆类)等两种。蛋白胨富含有机氮化合物,蛋白胨富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类。也含有一些维生素和糖类。它可以作为微生物培养基的它可以作为微生物培养基的主要原料主要原料 第六页,讲稿共七十二页哦能源定义:能为微生物生命活动提供最初能量来源的营养物质和辐射能。能源种类化学物质(化能营养型)辐射能(光能营养型):光能自养和光能异养型微生物的能源有机物:化能异养型微生物的能源无机物:化能自养型微生物的能源第七页,讲稿共七十二页哦生长因子生长因子:微生物正常代谢所生长因子:微生物正常代谢所必需的必需的,微量,微量,有机物有机物主要包括:维生素、氨基酸、碱基等主要包括:
5、维生素、氨基酸、碱基等来源:酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液来源:酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液第八页,讲稿共七十二页哦无机盐无机盐是微生物生长不可缺少的营养物质作用作用:构成细胞的组成成分构成酶的组成成分,维持酶的活性调节渗透压调节pH值及氧化还原电位作为自养型细菌的能源第九页,讲稿共七十二页哦水水是良好的溶剂,能将多种物质溶解,以利于微生物对营养的吸收和利用。参与生化反应(如脱水、加水反应)运输物质的载体光合作用中的还原剂第十页,讲稿共七十二页哦6.1.2 微生物的营养类型微生物的营养类型营养类型:根据微生物生长所需要的营养类型:根据微生物生长所需要的主要营养要素主要营养要素即即碳源碳源
6、和和能源能源的不同而划分的微生物类型。的不同而划分的微生物类型。微生物的营养类型微生物的营养类型参阅教材参阅教材87页页 表表6-1光能无机营养型光能无机营养型 光能有机营养型光能有机营养型化能无机营养型化能无机营养型化能有机营养型化能有机营养型自养自养 异养异养第十一页,讲稿共七十二页哦新月藻新月藻空球藻空球藻团藻团藻间生藻间生藻鼓藻鼓藻光能无机营养型微生光能无机营养型微生物物第十二页,讲稿共七十二页哦化能自养型硝化细菌铁细菌第十三页,讲稿共七十二页哦6.1.3 培养基培养基概念:由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的混合营养物质。任何培养基都应该具有微生物生长所需的六大营养元素,
7、且它们之间的比例是适当的。给微生物做饭吃第十四页,讲稿共七十二页哦、目的要明确、目的要明确根据所培养的微生物的种类、培养的目的配制根据所培养的微生物的种类、培养的目的配制、营养要协调、营养要协调注意各种营养物质的浓度和比例注意各种营养物质的浓度和比例,最重要为碳源和最重要为碳源和氮源的比,水处理中氮源的比,水处理中BOD5BOD5:N N:P=100:5P=100:5:1 1、理化条件适宜(、理化条件适宜(pHpH、渗透压、水活度和氧化还、渗透压、水活度和氧化还原电位等)原电位等)细菌细菌 pH7.07.5 pH7.07.5 放线菌放线菌 pH7.58.5 pH7.58.5 真菌真菌 pH4.
8、06.0 pH4.06.0、经济节约、经济节约培养基的配制原则培养基的配制原则调节方法?调节方法?第十五页,讲稿共七十二页哦培培养养基基的的种种类类按按物理性质物理性质分分固体培养基(固体培养基(2%琼脂或天然固体状基质如马铃琼脂或天然固体状基质如马铃薯片、大米、纤维)(薯片、大米、纤维)(普通的微生物研究,酿造或普通的微生物研究,酿造或食用菌培养等。食用菌培养等。)半固体培养基(半固体培养基(0.5%1.0%琼脂)(琼脂)(观察运观察运动动、厌氧菌的培养、分离和计数、菌种的保藏厌氧菌的培养、分离和计数、菌种的保藏)液体培养基液体培养基 (污水处理厂的污水污水处理厂的污水)按按化学成分化学成分
9、分分合成培养基合成培养基(化学成分明确化学成分明确,精细,常用于,精细,常用于分类分类、鉴定、实验鉴定、实验等)等)天然培养基天然培养基(天然物质配制,(天然物质配制,成分不明确成分不明确,常,常用于用于工业生产工业生产)按按 用用 途途 分分选择培养基(用于从多种微生物中选择培养基(用于从多种微生物中选出选出需要的需要的种类)种类)鉴别培养基(用于鉴别培养基(用于判定判定某一微生物的某一微生物的存在存在)培养基的分类培养基的分类加富培养基(用于加富培养基(用于微生物分离前的富集微生物分离前的富集)第十六页,讲稿共七十二页哦1.1.液体培养基(液体培养基(liquid mediumliquid
10、 medium)未加任何凝固剂、呈液态的培养基未加任何凝固剂、呈液态的培养基用途:大规模工业生产和实验室微生物生理代谢等研究用途:大规模工业生产和实验室微生物生理代谢等研究优点优点:组分均匀,发酵率高,操作方便:组分均匀,发酵率高,操作方便第十七页,讲稿共七十二页哦 一些由天然固体基质制成的培养基也属于固体培养基,如由马铃薯块、胡萝一些由天然固体基质制成的培养基也属于固体培养基,如由马铃薯块、胡萝卜条、小米、米糠等卜条、小米、米糠等常用凝固剂:常用凝固剂:琼脂琼脂(agaragar)、)、硅胶硅胶(silica gelsilica gel)、)、明胶明胶(gelatingelatin)菌落菌落
11、2.2.固体培养基固体培养基第十八页,讲稿共七十二页哦液体培养基中加入少量液体培养基中加入少量(0.50.51.01.0)的琼)的琼脂制成的培养基脂制成的培养基半固体培养基(半固体培养基(semisolid mediumsemisolid medium)用途:观察细菌的运动特用途:观察细菌的运动特征、菌种保藏、厌氧菌培征、菌种保藏、厌氧菌培养、菌种鉴定和噬菌体效养、菌种鉴定和噬菌体效价的测定等价的测定等第十九页,讲稿共七十二页哦(2 2)根据培养基的成分划分)根据培养基的成分划分 1.1.天然培养基(天然培养基(complex mediumcomplex medium)利用动物、植物或微生物体
12、或其提取液制成的培养利用动物、植物或微生物体或其提取液制成的培养基基优点:优点:配制方便、营养丰富、价格便宜,适宜工业化生产配制方便、营养丰富、价格便宜,适宜工业化生产缺点:缺点:成分不清楚、难控制,精细科学实验结果重复性差成分不清楚、难控制,精细科学实验结果重复性差 牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基 第二十页,讲稿共七十二页哦 在天然培养基的基础上适当加入已知成分的无机盐类,在天然培养基的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如马铃薯蔗糖或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如马铃薯蔗糖培养基等培养基等2.2.合成培养基(
13、合成培养基(synthetic mediumsynthetic medium)优点:优点:重复性好重复性好缺点:缺点:成本较高,生长速度较慢成本较高,生长速度较慢 按微生物的营养要求精确设计后,由化学成分完全了解的按微生物的营养要求精确设计后,由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基。物质配制而成的培养基。适于实验室进行微生物适于实验室进行微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作等方面的研究工作3.3.半合成培养基(半合成培养基(semi-synthetic mediumsemi-synthetic
14、medium)第二十一页,讲稿共七十二页哦1.1.选择培养基(选择培养基(selective mediumselective medium)在培养基中加入特殊的营养物质或化学物质,抑在培养基中加入特殊的营养物质或化学物质,抑制不需要的微生物生长的培养基制不需要的微生物生长的培养基 (3 3)根据培养基的用途划分)根据培养基的用途划分 第二十二页,讲稿共七十二页哦2.2.加富培养基(加富培养基(enrichment mediumenrichment medium)在在基础培养基基础培养基中加入中加入某些特殊营养物质某些特殊营养物质(如血液、血清、(如血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等)制成的一
15、类营养丰富的培酵母浸膏、动植物组织液等)制成的一类营养丰富的培养基。养基。用途:培养营养要求比较苛刻的异养型微生物;用途:培养营养要求比较苛刻的异养型微生物;富集和分离某种微生物富集和分离某种微生物 加富培养基与选择培养基的区别加富培养基与选择培养基的区别加富培养基加富培养基是增加所要分离的微生物的数量,使其形成生长是增加所要分离的微生物的数量,使其形成生长优势,从而分离到该种微生物;优势,从而分离到该种微生物;选择培养基选择培养基是抑制不需要的微生物的生长,使所需要的微生是抑制不需要的微生物的生长,使所需要的微生物增殖,从而达到分离所需微生物的目的物增殖,从而达到分离所需微生物的目的第二十三
16、页,讲稿共七十二页哦3.3.鉴别培养基(鉴别培养基(differential mediumdifferential medium)加入某种能与微生物产生的某种代谢产物发生特定化学反加入某种能与微生物产生的某种代谢产物发生特定化学反应的特殊化学物质,产生明显的特征性变化,由此将不同微应的特殊化学物质,产生明显的特征性变化,由此将不同微生物加以区别的培养基生物加以区别的培养基 用途:快速分类鉴定,分离和筛选某种代谢物的产生菌用途:快速分类鉴定,分离和筛选某种代谢物的产生菌 常用的鉴别培养基常用的鉴别培养基伊红伊红-美蓝(美蓝(EMBEMB)培养基)培养基区别大肠杆菌和产气杆菌区别大肠杆菌和产气杆菌
17、明胶培养基明胶培养基检查微生物能否液化明胶;检查微生物能否液化明胶;硝酸盐肉汤培养基硝酸盐肉汤培养基检查是否具有硝酸盐还原作用;检查是否具有硝酸盐还原作用;醋酸铅培养基醋酸铅培养基检查微生物是否产生检查微生物是否产生H H2 2S S气体等气体等 第二十四页,讲稿共七十二页哦培养基的配制1.1.计算称量计算称量2.2.加水溶解加水溶解3.3.调节调节pHpH4.4.过滤分装过滤分装5.5.加塞包扎加塞包扎6.6.加压灭菌加压灭菌第二十五页,讲稿共七十二页哦6.2 酶及其作用一一 酶及其命名和分类酶及其命名和分类 二二 酶的作用特性酶的作用特性 三三 酶促反应的影响因素及动力学酶促反应的影响因素
18、及动力学第二十六页,讲稿共七十二页哦一一 酶及其命名和分类酶及其命名和分类1 酶的概念酶的概念:生物催化剂生物催化剂。在生物在生物细胞中自己合成细胞中自己合成,基本成分是蛋白质。基本成分是蛋白质。2 酶的命名和分类酶的命名和分类胞内酶胞内酶 胞外酶胞外酶 存在存在部位部位组成酶组成酶 诱导酶诱导酶存在存在 方式方式单成分酶单成分酶 双成分酶双成分酶组成组成 成分成分催化的反应类型催化的反应类型水解酶、氧化还原酶、转移酶、合成酶、裂解酶水解酶、氧化还原酶、转移酶、合成酶、裂解酶等等第二十七页,讲稿共七十二页哦组成酶组成酶:与基质存在与否:与基质存在与否无关无关。在体内有相当的数量。在体内有相当的
19、数量。诱导酶诱导酶:受到各种持续的物理化学因素影响,在体内:受到各种持续的物理化学因素影响,在体内 产生的产生的适应新环境的酶适应新环境的酶。诱导酶的产生在废水生物处理中有重要意义。可以通过诱导酶的产生在废水生物处理中有重要意义。可以通过环境的环境的诱导诱导产生能处理相应物质的细菌等微生物(产生能处理相应物质的细菌等微生物(驯化驯化)。)。胞内酶胞内酶:在细胞内部起作用,催化细胞的合成和呼吸。:在细胞内部起作用,催化细胞的合成和呼吸。胞外酶胞外酶:能透过细胞,消化非溶解性营养物质(如纤维素、蛋:能透过细胞,消化非溶解性营养物质(如纤维素、蛋白质、淀粉等白质、淀粉等)细菌无摄食器官,遇到的是细菌
20、无摄食器官,遇到的是简单简单的溶解物质,通过的溶解物质,通过胞内酶胞内酶的作的作用;若遇到的是用;若遇到的是复杂复杂的固体物质,利用的固体物质,利用胞外酶胞外酶将吸附在细胞周将吸附在细胞周围的大分子物质水解为简单的小分子物质。围的大分子物质水解为简单的小分子物质。第二十八页,讲稿共七十二页哦二 酶的作用特性1 酶的作用特点酶的作用特点 具有具有蛋白质的各种特性蛋白质的各种特性 分子量大、两性化合物、不耐高温、易被毒物破坏分子量大、两性化合物、不耐高温、易被毒物破坏 用量用量少少而催化效率而催化效率高高 专一性专一性强强 温和温和。常温、常压、接近中性就可以起作用。常温、常压、接近中性就可以起作
21、用 第二十九页,讲稿共七十二页哦2 酶的活性酶的活性酶活性即是酶酶活性即是酶活力活力。指催化一定化学反应的能力。反应。指催化一定化学反应的能力。反应速速度度越越快快,酶,酶活性活性越越高高。如何确定酶活性的大小如何确定酶活性的大小?酶活性单位酶活性单位 比酶活性比酶活性v 国际酶学会议国际酶学会议1961条规定:条规定:1 1 酶活性单位酶活性单位是指在是指在 25最最适适pH及及底物浓度底物浓度等条件下,在等条件下,在1min内转化内转化1mol底物的酶量底物的酶量v 比酶活性比酶活性是指单位重量酶蛋白所具有的是指单位重量酶蛋白所具有的酶活性酶活性 单位数单位数。在水处理中,常采用在水处理中
22、,常采用比酶活性比酶活性来判断不同来源污泥来判断不同来源污泥的活性大小的活性大小第三十页,讲稿共七十二页哦三 酶促反应的影响因素及动力学酶促反应与酶活力有关。酶促反应与酶活力有关。影响酶促反应(酶活力)的因素有:影响酶促反应(酶活力)的因素有:1 温度温度 2 pH值值 3 基质浓度基质浓度 4 酶的总浓度酶的总浓度E0 5 毒物或抑制剂毒物或抑制剂第三十一页,讲稿共七十二页哦1 温度温度要求要求:保证酶最适宜的温度条件。:保证酶最适宜的温度条件。每种酶都有自己的每种酶都有自己的最适温度最适温度。最适反应温度最适反应温度:能形成能形成最大反应速度最大反应速度的温度的温度.微生物体内微生物体内3
23、03060601-1-半乳糖苷酶半乳糖苷酶 2 2 酰化氨基酸水解酶酰化氨基酸水解酶 3 3 葡萄糖异构酶葡萄糖异构酶第三十二页,讲稿共七十二页哦 废水生物处理中的废水生物处理中的污泥消化污泥消化法法和和生物滤池法生物滤池法在设计时都考虑在设计时都考虑了温度的因素。活性污泥曝气池运了温度的因素。活性污泥曝气池运行时影响因素复杂,要综观考虑。行时影响因素复杂,要综观考虑。第三十三页,讲稿共七十二页哦2 pH值值 大多数酶大多数酶 pH 67 废水生物处理保持废水生物处理保持pH 69(利用的是土壤微生(利用的是土壤微生物混合群)物混合群)为什么为什么pH值影响酶活力?值影响酶活力?酶蛋白是两性电
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