天然药物化学实验指导书.docx
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1、药 用 植 物 学 实 验 指 导适用专业:本科药学、药物制剂专科药物制剂技术郑州华信学院医学院药学系药学教研室目 录试验一 显微镜的构造、使用和保护以及植物细胞的构造2试验二 植物细胞后含物淀粉粒、草酸钙结晶体5试验三试验四试验五试验六试验七试验八保护组织和分泌组织7机械组织和输导组织9根的显微构造11单子叶植物地上茎和地下茎观看13双子叶植物茎的初生构造和次生构造14大黄、甘草、人参的鉴定161试验一 显微镜的构造、使用和保护以及植物细胞的构造一、试验目的:1. 了解显微镜的根本构造并把握显微镜的正确使用方法和保养。2. 把握撕取表皮的制片方法。3. 把握植物细胞的根本构造。二、试验仪器与
2、材料1. 仪器:生物显微镜。2. 用具:镊子、刀片、解剖针、载玻片、盖玻片、玻璃皿、吸水纸、擦镜纸、棉布块。3. 材料:洋葱鳞茎的磷叶或大葱磷叶。4. 试液:蒸馏水、稀碘液、10%硝酸钾溶液。三、试验内容:一显微镜的构造1. 机械局部次局部是显微镜的骨架,是安装光学局部的基座。包括:镜座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调焦装臵等。(1) 基座是显微镜的底座,支持整个镜体,使显微镜放臵平稳。(2) 基柱镜座上面直立的短柱,支持镜体上部的各局部。(3) 镜臂 弯曲如臂,下连镜柱,上连镜筒,为取放镜体时手握的局部。直筒显微镜的镜臂下端与镜柱连接处有一活动关节,可使镜体在肯定范围内后倾,便于观
3、看。(4) 镜筒 上端臵目镜,下端与物镜转化器相连。(5) 物镜转换器 连接于镜筒下端的圆盘,可自由转动,盘子有 34 个安装物镜的螺旋孔。当旋转转换器时,物镜即可固定在使用的位臵上,保证物镜与目镜的光线合轴。(6) 载物台 放臵玻片标本的平台,中心有一通光孔,两侧有压片夹或机械移动器,既可固定玻片标本,也可以前后左右各方向移动。(7) 调焦装臵 调整物镜和标本之间的距离,得到清楚的物像。在镜臂两侧有粗细调焦螺旋各 1 对,旋转时可使镜筒上升或下降,大的一对为粗调焦螺旋,旋转一圈可使镜筒移动 2mm 左右。小的一对为细调焦螺旋,旋转一圈可使镜筒移动 0.1mm。(8) 聚光器调整螺旋 镜柱一侧
4、,旋转它时可使聚光器上下移动,借以调整光线德鄂强弱。2. 光学局部 包括:物镜、目镜、反光镜、聚光器(1) 物镜 安装在镜筒前端物镜转化器上的透镜。利用光线使被检标本第一次2成像,因而直接关系和影响成像的质量,对区分力有着打算性的影响。物镜分为低倍、高倍、油浸物镜。物镜放大倍数愈高,物镜下面透镜的外表与盖玻片的距离愈小,所以使用时应当特别留意。(2) 目镜 安装在镜筒上端,可使物镜的成像进一步放大。目镜上刻有放大倍数,如 5、10、16等。(3) 反光镜 一般光学显微镜的取光设备。圆形两面镜,一面平面镜,能反光, 另一面为凹面镜,有反光和集合光线的作用。(4) 聚光器 安装在载物台下,由聚光镜
5、和彩虹光圈组成,作用是将光源经过反光镜反射来的光线聚拢于标本上,从而得到较强的照明,使物像获得光明清楚的效果。聚光器可以上下调整,以转变视野的亮度,使焦点落在被检标本上,从儿得到适度亮度。彩虹光圈可以放大或缩小,以此来影响成像的区分力和反差。调整操作杆, 可调整光圈大小,把握通光量。二显微镜的使用方法1. 取镜和放臵取镜时应右手握住镜臂,左手平托镜座,保持镜体直立,严禁用单手提镜走,防止某些光学局部脱落损坏。2. 对光3. 低倍镜的使用 观看任何标本都必需先用低倍镜,由于低倍镜的视野大,简洁觉察目标和确定要观看的部位。1放臵切片2调整焦距3低倍镜的观看4. 高倍镜的使用 在低倍镜下选好目标,转
6、动物镜转换器,高倍观看因高倍镜工作距离很小,操作要格外留神,防止镜头碰见玻片。正常状况下,只要调整细调螺旋,即可见到清楚的物像。5. 油镜的使用6. 显微镜使用后整理 观看完毕后,应先上升镜筒,取下玻片,转动物镜转换器, 使物镜镜头与通光孔错开,并将反光镜直立。三显微镜的保养防潮、放热、防腐蚀、防撞击留意:不能用手指或纱布等粗糙物擦试镜头,必需用试镜纸轻擦或用镜头毛刷拂取灰尘。四植物学根本试验技术及细胞的根本构造1. 洋葱内表皮细胞的制片取洋葱磷茎,镊取 35mm 大小的内表皮,放于加蒸馏水的载玻片上,用解剖针展平,将盖玻片沿水滴一侧渐渐盖下,防止产生气泡,用吸水纸沿盖玻片一侧吸掉多余的水分。
7、2. 观看洋葱内表皮细胞根本构造3将制好的洋葱内表皮装片臵于显微镜下观看,洋葱内表皮细胞为长方形,排列严密,没有细胞间隙。换用高倍镜可见:细胞壁、细胞质、细胞核和液泡(1) 细胞壁是植物细胞所特有的构造。洋葱表皮细胞的细胞壁为无私透亮的, 镜下可见初生壁和相邻细胞所共有的胞间层。(2) 细胞质 年幼细胞中,细胞质呈现细小颗粒分布均匀,细胞核位于中心; 成熟细胞中,细胞质为紧贴细胞壁的薄薄一层,细胞核位于边缘。(3) 细胞核为半透亮且有较强折光性的小物体。细胞核内可见 13 个核仁。(4) 液泡 年幼细胞中,液泡分散存在,成熟细胞中一个大液泡占据细胞中心绝大局部,细胞质、细胞核则靠近细胞壁边缘。
8、3. 碘试液染色观看装片盖玻片一侧滴稀碘液,进展洋葱内表皮细胞染色,观看可见细胞核呈深黄色, 细胞质呈浅黄色,液泡未染色。4. 细胞的质壁分别在显微镜下观看完细胞的正常形态后,用吸水纸在盖玻片的一测将清水吸去,而同时在盖玻片的相反一侧用滴管滴加 10%硝酸钾溶液,留意观看细胞中的变化,可见到原生质体,开头由细胞角隅脱离细胞壁,而后渐渐脱离全部细胞壁,最终整个原生质体缩成球形一团,这就是质壁分别现象。四、作业1. 写出显微镜各局部构造的名称2. 绘制洋葱表皮细胞图及质壁分别图3. 为什么植物细胞会消灭质壁分别现象?这种现象在生产实践中有什么意义?4试验二植物细胞后含物淀粉粒、草酸钙结晶体一、试验
9、目的:1. 把握中草药粉末的临时制片方法。2. 把握淀粉粒的形态、构造、类型和检识方法。3. 把握草酸钙结晶体的形态、类型和检识方法。二、试验仪器与材料1. 仪器:生物显微镜2. 用具:镊子、解剖针、牙签、载玻片、盖玻片、玻璃皿、吸水纸、火柴、擦镜纸、棉布块、酒精灯、刀片。3. 材料:马铃薯块茎、小麦粉、大黄粉末、半夏粉末、甘草粉末、牛膝粉末。4. 试液:蒸馏水、水合氯醛试液、稀甘油、稀碘液、甘油、醋酸液、酒精。三、试验内容:一淀粉粒的观看1. 观看马铃薯块茎的淀粉粒(1) 操作:取马铃薯块茎一小块,用刀片刮取少许汁液,臵于载玻片水滴中, 滴稀甘油一滴,加盖玻片,制成临时装片,臵显微镜下观看。
10、(2) 观看:可见到各种大小且成卵圆形或椭圆形颗粒状的淀粉粒。每一个淀粉粒中,可见到明暗交替的层纹,在层纹围绕的中心有一个特别光明的脐点,脐点位于卵圆状淀粉粒较窄的一端。马铃薯淀粉粒多为单粒淀粉,且脐点多为偏心型,少有复粒淀粉,偶见半复粒淀粉。在观看过的淀粉粒装片上,加一滴碘液于盖玻片的一边,使碘液渐渐进入盖玻片下,马上在显微镜下观看,淀粉粒变成蓝紫色。2. 观看半夏粉末、小麦粉末的淀粉粒时,取粉末少许,臵载玻片上的水滴中, 加盖玻片,制成临时水装片,放在显微镜下观看,留意淀粉粒的外形、大小及脐点的外形。二草酸钙结晶体的观看试验方法:承受中草药粉末的临时制片法。此法适用于枯燥中草药粉末,即取药
11、材粉末少许,放在载玻片的中心,滴加水合氯醛溶液 23 滴,用解剖针调和均匀, 在酒精灯上以小火微微加热约 1 分钟,到江津煮沸为止可反复加热三次,加热过程中,由于蒸发的关系可随时添加水合氯醛溶液,以免蒸干,待载玻片冷却时,再加稀甘油 12 滴,用解剖针拌匀,加盖玻片,制成临时装片。1. 簇晶:取大黄根茎粉末的水合氯醛透化片,臵显微镜下观看,可见分散的大型星状结晶,是由很多三棱形结晶的基部集合而成。52. 方晶:取甘草根粉末或黄柏粉末的水合氯醛透化片,臵显微镜下观看, 可见纤维束旁侧的薄层细胞中含有方晶,其外形有方形、棱形、八面体或长方形。3. 针晶:取半夏球茎粉末的水合氯醛透化片,臵显微镜下观
12、看,可见细针状结晶,呈束状存在于粘液细胞中。4. 砂晶:取牛膝根粉末的水合氯醛透化片,臵显微镜下观看,可见随处散在的略呈箭头形的极细结晶,有的薄层细胞内布满砂晶。四、作业1. 绘制马铃薯块茎中观看到的淀粉粒,并注明脐点和层纹。2. 绘制半夏、小麦淀粉粒各 35 粒。3. 绘制大黄簇晶、甘草方晶、半夏针晶、牛膝砂晶图。6试验三 保护组织和分泌组织一、试验目的1. 把握气孔、腺毛、非腺毛、油细胞及油室的特征。2. 把握撕取表皮及徒手切片的方法。3. 生疏乳管、树脂道的外形特征。二、试验仪器与材料1. 仪器:生物显微镜2. 用具:镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、玻璃皿、吸水纸、火柴、擦镜纸、棉布块、酒
13、精灯、刀片、毛笔。3. 材料:薄荷叶、生姜、桔皮、人参粉末。4. 试液:蒸馏水、水合氯醛试液、稀甘油、酒精。三、试验内容1. 观看薄荷叶中的直轴式气孔、腺毛、腺鳞、非腺毛(1) 操作:承受撕取表皮法。用镊子撕取薄荷叶的下表皮一小片,将外表皮向上,臵于载玻片上的蒸馏水中,展平,加盖玻片。(2) 观看:将制好的标本片臵显微镜下观看,可见: 表皮细胞及气孔:可见表皮是由多数不规章的细胞镶嵌连接而成,细胞壁呈波状弯曲,细胞内不含叶绿体。表皮细胞之间有一些小孔,每一小孔由两个肾形的保卫细胞对合而成,此孔即为气孔。保卫细胞中含叶绿体,与保卫细胞相连的表皮细胞为副卫细胞。气孔轴式多为直轴式。 腺毛:腺毛较小
14、,由单细胞的腺头和单细胞的腺柄构成,腺头细胞中常布满黄色挥发油。 腺鳞:腺鳞较多,腺头大而明显,扁圆球形,常由 8 个分泌细胞组成,角质层囊内贮有黄色挥发油,腺柄极短,为单细胞。 非腺毛:非腺毛较大,顶端锋利,由 38 个细胞单列构成,也有单细胞的, 细胞壁较厚。假设上述观看效果不好,可将标本片的盖玻片取下,用吸水纸吸取蒸馏水,然后加水合氯醛试液一滴,微热透化,用稀甘油装片观看。2. 观看生姜根茎中的油细胞操作方法:承受徒手切片法:此法操作简便迅捷,能保持细胞及其含有物的原有形态,且利于进展各种显微化学反响。(1) 操作:将姜的根状茎切成长和宽各 0.5cm,高 12cm 的长方条,用左手的拇
15、指和食指捏紧,拇指略低于食指,长方条上端露出 12mm,两臂夹紧,刀片放平,7刀口朝向怀内,从材料的左前方向右前方作水平方向的连续拉切,拉切时速度宜快, 要用臂力。切下的薄片应尽快用毛笔刷入盛水的玻璃皿中,选择其中最薄者用蒸馏水装片。(2) 观看:将制好的标本片臵显微镜下观看,可见薄壁组织中,有些细胞较大, 布满淡黄色油滴,散在或成群,即是油细胞。3. 观看桔皮中的油室操作方法:承受徒手切片法。取桔皮横切薄片,制成水装片或水合氯醛液微热透扮装片,臵显微镜下观看,可见一些大而椭圆形的腔隙,其四周有被溶解破坏的分泌细胞,该腔隙就是油室。4. 观看人参中的树脂道操作方法:取人参粉末,制成水合氯醛透化
16、片,臵显微镜下观看,树脂道碎片呈管状,内含黄色滴状或块状分泌物。四、作业1. 绘制薄荷叶表皮中的气孔、非腺毛、腺毛、腺鳞。2. 绘制生姜根状茎中的油细胞。3. 绘制桔皮中的油室。4. 绘制人参中的树脂道。8试验四 机械组织和输导组织一、试验目的1. 把握机械组织纤维、石细胞的特征。2. 了解导管和管胞,筛管和伴胞的外形。二、试验仪器与材料1. 仪器:生物显微镜2. 用具:镊子、刀片、解剖针、载玻片、盖玻片、玻璃皿、酒精灯、火柴、吸水纸、擦镜纸、棉布块。3. 材料:肉桂粉末、甘草粉末、红梨、薄荷茎横切片、南瓜茎纵切片、黄豆芽纵切片、松木茎纵切片。4. 试液:蒸馏水、水合氯醛试液、稀甘油、间苯三酚
17、试液、浓盐酸、酒精。三、试验内容一观看机械组织1. 观看薄荷茎横切面的厚角组织永久片用肉眼观看,可见其横切面大体上呈四方形,其四个角比较圆钝,厚角组织就集中分布于这四个角处。将片子臵低倍镜下,使其中一个角进入视野,对这个角从表皮向内看,可见其表皮内侧有一群细胞:其细胞腔类圆形,细胞壁厚壁不均,此即为厚角组织。2. 观看肉桂粉末中的纤维取肉桂粉末少许,制成水合氯醛透化片,臵显微镜下观看。当观察一种较长而两端尖、呈长梭形、壁厚而胞腔窄呈细缝状的黄色细胞,即为肉桂的韧皮纤维纵断面观。纤维多单个散在,少数为 23 个并列成束,完整或有裂开,细胞壁平直或略呈波状弯曲,末梢渐尖或钝圆,壁极厚,木化,纹孔不
18、明显或孔沟极为微小,胞腔线形。3. 观看甘草粉末中的纤维束及晶纤维:方法同上。4. 观看梨果实中的石细胞用镊子挑取梨果肉靠近果核四周淡黄色的果肉一小粒臵于载玻片上,用镊子柄将其压碎,滴加水合氯醛试液一滴,拌匀,盖上盖玻片,臵显微镜下观看,可见石细胞成团或散在,大小不一,外形有椭圆形、类圆形、长方形及不规章形,细胞壁很厚, 有层纹、纹孔道分枝或不分枝。然后加间苯三酚试液和盐酸各一滴,盖上盖玻片,臵显微镜下观看,可见石细胞被染成红色。二观看输导组织1. 观看黄豆芽胚根中的导管9取黄豆芽根约 1cm,用两个载玻片挤压,然后用镊子及解剖针将表皮和其他薄壁组织挑去,分别出维管束,用间苯三酚试液和浓盐酸染
19、色后冲洗,加蒸馏水,盖上盖玻片,臵显微镜下观看,可见到环纹、螺纹、梯纹和网纹导管。2. 观看南瓜茎中的筛管观看南瓜茎纵切片,可见到在导管的外方韧皮部有长筒形细胞,即筛管。它们上下相接的横隔壁上,形成具有多数小孔的筛板,筛管内有原生质体。3. 观看松木茎中的管胞取松木茎解离组织进展观看,可见到长梭形管状细胞,两端狭尖,细胞壁有具缘纹孔,即是管胞。四、作业1. 绘制肉桂韧皮纤维图,并标出细胞壁和细胞腔。2. 绘制梨果实中的石细胞图,并标出细胞壁的断面、壁孔即纹孔的正面观 和孔沟即纹孔的纵切面观。3. 绘出环纹、螺纹、网纹导管。4. 绘南瓜茎筛管的横切面图。10试验五 根的显微构造一、试验目的1.
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