2013高考第一轮复习生物选修一第2讲.ppt
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1、选修一 生物技术实践生物第 2 讲微生物的培养与应用选修一 生物技术实践生物1培养基类型培养基类型 考点一:微生物的实验室培养微生物的实验室培养高频考点突破划分划分标标准准培养基种培养基种类类特点特点用途用途物理物理性性质质液体培养基液体培养基不加凝固不加凝固剂剂工工业业生生产产固体培养基固体培养基加凝固加凝固剂剂,如,如琼琼脂脂微生物分离、微生物分离、鉴鉴定定等等选修一 生物技术实践生物用用途途选择选择培养基培养基培养基中加入某培养基中加入某种化学物种化学物质质,用,用来抑制不需要的来抑制不需要的微生物的生微生物的生长长,促促进进所需要的微所需要的微生物的生生物的生长长培养和分离出特定培养和
2、分离出特定微生物微生物(如分离酵母如分离酵母菌和霉菌,可以在菌和霉菌,可以在培养基中加入青霉培养基中加入青霉素素)鉴别鉴别培养基培养基根据微生物的代根据微生物的代谢谢特点,在培养特点,在培养基中加入某种指基中加入某种指示示剂剂或化学或化学药药品品鉴别鉴别不同种不同种类类的微的微生物,如用伊生物,如用伊红红美美蓝蓝培养基培养基鉴别饮鉴别饮用水或乳制品中是用水或乳制品中是否含有大否含有大肠肠杆菌杆菌(若若有,有,则则菌落呈深紫菌落呈深紫色并色并带带有金属光有金属光泽泽)选修一 生物技术实践生物【特别提醒】加加入入培培养养基基中中的的凝凝固固剂剂(如如琼琼脂脂),一一般般不不能能被被微微生物利用,只
3、起到凝固作用。生物利用,只起到凝固作用。选选择择培培养养基基一一般般只只生生长长具具有有特特定定目目的的的的微微生生物物,鉴鉴别别培培养养基基可可以以存存在在其其他他微微生生物物,而而且且能能鉴鉴别别特特定定的的微微生物。生物。选修一 生物技术实践生物2配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项(1)步步骤骤:计计算算称量称量溶化溶化灭灭菌菌倒平板倒平板(2)注注意意事事项项:倒倒平平板板的的温温度度一一般般在在50左左右右适适宜宜,温温度度过过高高会会烫烫手手,过过低低培培养养基基又又会会凝凝固固。平平板板需需倒倒置置,这这样样既既可可使使培培养养基
4、基表表面面的的水水分分更更好好地地挥挥发发,又又可可防防止止皿皿盖盖上的水珠落入培养基,造成上的水珠落入培养基,造成污污染。染。选修一 生物技术实践生物3纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项(1)原原理理:在在培培养养基基上上将将细细菌菌稀稀释释或或分分散散成成单单个个细细胞胞,使其使其长长成成单单个的菌落,个的菌落,这这个菌落就是一个个菌落就是一个纯纯化的化的细细菌菌落。菌菌落。(2)方法:平板划方法:平板划线线法、稀法、稀释释涂布平板法。涂布平板法。平平板板划划线线法法:平平板板划划线线法法中中细细胞胞的的分分离离和和稀稀释释过过程程发发生生在在接接种种环环在在
5、固固体体平平板板表表面面上上的的移移动动划划线线过过程程中中。在在线线的的开开始始部部分分,微微生生物物往往往往连连在在一一起起生生长长,随随着着线线的的延延伸伸,菌菌数数逐逐渐渐减少,最后可能形成减少,最后可能形成纯纯种的种的单单个菌落。个菌落。(如下如下图图)选修一 生物技术实践生物几种划几种划线线方法示意方法示意图图注注意意第第一一次次划划线线及及每每次次划划线线之之前前都都需需要要灼灼烧烧接接种种环环灭灭菌菌。灼灼烧烧接接种种环环之之后后,要要冷冷却却后后才才能能伸伸入入菌菌液液,以以免免温温度度太太高高杀杀死死菌菌种种。划划线线时时最最后后一一区区域域不不要要与与第第一一区区域域相相
6、连连。划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。稀稀释释涂布平板法涂布平板法选修一 生物技术实践生物.系列稀系列稀释释操作操作(图图1)A将将分分别别盛盛有有9 mL水水的的6支支试试管管灭灭菌菌,并并按按101106的的顺顺序序编编号。号。B用用移移液液管管吸吸取取1 mL培培养养的的菌菌液液,注注入入101倍倍稀稀释释的的试试管管中中。用用手手指指轻轻压压移移液液管管上上的的橡橡皮皮头头,吹吹吸吸3次次,使使菌菌液液与水充分混匀。与水充分混匀。C从从101倍倍稀稀释释的的试试管管中中吸吸取取1 mL稀稀释释液液,注注入入102倍倍稀稀释释的
7、的试试管管中中,重重复复b步步混混匀匀操操作作。以以此此类类推推,直直到到完完成成最最后后1支支试试管的稀管的稀释释。选修一 生物技术实践生物注注意意移移液液管管需需要要经经过过灭灭菌菌。操操作作时时,试试管管口口和和移移液液管管应在离火焰应在离火焰12 cm处。处。选修一 生物技术实践生物.涂布平板操作如涂布平板操作如图图2所示所示 选修一 生物技术实践生物注注意意稀稀释释涂涂布布平平板板操操作作复复杂杂,各各个个细细节节均均应应保保证证“无无菌菌”。具具体体如如下下:酒酒精精灯灯与与培培养养皿皿的的距距离离要要合合适适;吸吸管管头不要接触任何其他物体;头不要接触任何其他物体;吸管要在酒精灯
8、火焰周围使用。吸管要在酒精灯火焰周围使用。选修一 生物技术实践生物【对位训练】1有关培养基配制原则的表述正确的是有关培养基配制原则的表述正确的是A任任何何培培养养基基都都必必须须含含有有碳碳源源、氮氮源源、矿矿质质元元素素、水水B碳碳源源和和氮氮源源必必须须具具有有一一定定比比例例,碳碳元元素素的的含含量量最多,其次为氮元素最多,其次为氮元素C微微生生物物的的生生长长除除受受营营养养因因素素影影响响外外,还还受受到到pH、氧、渗透压的影响氧、渗透压的影响D营养物质的浓度越高越好营养物质的浓度越高越好答案答案C选修一 生物技术实践生物2(2012合合肥肥二二模模)用用平平板板划划线线法法或或稀稀
9、释释涂涂布布平平板板法法纯纯化大化大肠肠杆菌杆菌时时可可以以用用相相同同的的培培养养基基都都需需要要使使用用接接种种针针进进行行接接种种都需要在火焰旁都需要在火焰旁进进行接种行接种都可以用来都可以用来计计数活菌数活菌ABC D 选修一 生物技术实践生物解解析析平平板板划划线线法法或或稀稀释释涂涂布布平平板板法法都都使使用用固固体体培培养养基基,故故正正确确;平平板板划划线线法法采采用用接接种种针针进进行行操操作作,而而稀稀释释涂涂布布平平板板法法采采用用涂涂布布器器进进行行操操作作,故故错错误误;纯纯化化时时,要要进进行行无无菌菌操操作作,需需要要在在火火焰焰旁旁接接种种,避避免免空空气气中中
10、的的微微生生物物混混入入培培养养基基,故故正确;平板划线法一般用于分离而不是计数,故正确;平板划线法一般用于分离而不是计数,故错误。错误。答案答案C选修一 生物技术实践生物1筛选原理筛选原理配配制制选选择择培培养养基基,把把尿尿素素作作为为培培养养基基中中的的惟惟一一氮氮源源,原原则则上上只只有有能能够够利利用用尿尿素素的的微微生生物物才才能能够够生生长长,其其他他微微生生物物则则不能在此培养基上生不能在此培养基上生长长。考点二:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数选修一 生物技术实践生物2统计菌落数目统计菌落数目(1)理理论论依依据据:当当样样品品的的稀稀释释度度
11、足足够够高高时时,培培养养基基表表面面生生长长的的一一个个菌菌落落,来来源源于于样样品品稀稀释释液液中中的的一一个个活活菌菌。通通过过统统计计平平板板上上的的菌菌落落数数,就就能能推推测测出出样样品品中中大大约约含含有有多多少少活活菌菌。为为了了保保证证结结果果准准确确,一一般般选选择择菌菌落落数数在在30300的的平平板板进进行行计计数。数。(2)计计算方法;算方法;每克每克样样品中的菌株数品中的菌株数(CV)M其其中中C代代表表某某一一稀稀释释度度下下平平板板上上生生长长的的平平均均菌菌落落数数:V代表涂布平板代表涂布平板时时所用稀所用稀释释液的体液的体积积(mL);M代表稀代表稀释释倍数
12、。倍数。选修一 生物技术实践生物【对位训练】3下下列列关关于于微微生生物物分分离离和和培培养养的的有有关关叙叙述述,错错误误的的是是A微生物培养前,需对培养基进行消毒微生物培养前,需对培养基进行消毒B测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法C分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度D分分离离能能分分解解尿尿素素的的细细菌菌,要要以以尿尿素素作作为为培培养养基基中中唯一的氮源唯一的氮源解析解析微生物培养前,需对培养基进行灭菌处理。微生物培养前,需对培养基进行灭菌处理。答案答案A 选修一 生物技术实践生物4(201
13、2北北京京海海淀淀期期中中)通通过过实实验验测测定定土土壤壤中中的的细细菌菌数数量,下列与此操作有关的叙述中,不正确的是量,下列与此操作有关的叙述中,不正确的是A用用蒸蒸馏馏水水配配制制牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨培培养养基基,经经高高温温、高高压压灭灭菌后倒平板菌后倒平板B取取104、105、106倍倍的的土土壤壤稀稀释释液液0.1 mL,分分别别涂涂布布于各于各组组平板上平板上C将培养皿倒置,将培养皿倒置,37 恒温培养恒温培养2448小小时时D选择选择菌落数在菌落数在300个以上的培养皿个以上的培养皿进进行行计计数数 选修一 生物技术实践生物解解析析检检测测土土壤壤中中细细菌菌总总数数,用用
14、蒸蒸馏馏水水配配制制牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨培培养养基基,经经高高温温、高高压压灭灭菌菌后后倒倒平平板板;取取104、105、106倍倍的的土土壤壤稀稀释释液液和和无无菌菌水水各各0.1 mL,分分别别涂涂布布于于各各组组平平板板上上;将将实实验验组组和和对对照照组组平平板板倒倒置置,37恒恒温温培培养养2448小小时时;在在确确定定对对照照组组无无菌菌后后,选选择择菌菌落落数数在在30300的的平板进行计数。平板进行计数。答案答案D 选修一 生物技术实践生物1筛选原理筛选原理即:可根据是否即:可根据是否产产生透明圈来生透明圈来筛选纤维筛选纤维素分解菌素分解菌 考点三:分解纤维素的微生物的分离
15、分解纤维素的微生物的分离选修一 生物技术实践生物2实验流程实验流程土壤取土壤取样样:富含:富含纤维纤维素素的的环环境境选选择择培培养养:用用选选择择培培养养基基培培养养,以以增增加加纤纤维维素素分分解解菌菌的的数量数量梯度稀梯度稀释释涂布平板:将涂布平板:将样样品涂布于品涂布于鉴别鉴别培养基培养基上上挑挑选产选产生透明圈的菌落生透明圈的菌落选修一 生物技术实践生物3刚果红染色的两种方法的比较刚果红染色的两种方法的比较 先培养微生物,先培养微生物,再加入再加入刚刚果果红红在倒平板在倒平板时时就加入就加入刚刚果果红红优优点点显显示出的示出的颜颜色反色反应应基基本上是本上是纤维纤维素分解菌素分解菌的
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