2022年医学专题—绪论及细胞-组织胚胎学.ppt
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1、Histology and Embryology Department of Pathology 第一页,共六十二页。一、组织学与胚胎学的研究一、组织学与胚胎学的研究(ynji)(ynji)内容内容 v(一)组织学(一)组织学(histology)定义:组织学是借助于显微镜观察人体微细结构的一门学科。研究内容:研究内容:人体的组织是由细胞和细胞间质发育分化形成的,而器官系统则又是由几种不同(b tn)组织发育分化而成。因此组织学的研究内容包括:细胞、组织和器官系统三部分。第二页,共六十二页。1、细胞、细胞(xbo)(xbo)(cell)v定义:定义:是人体形态结构的基本单位,是一切生物体新陈代
2、谢(xn chn dixi)、生长发育、繁殖分化的形态学基础。v结构特点:结构特点:形态各异、大小不等:人体具有许多形态各异、大小不同的细胞,参与机体的各种机能活动。v功能特点:功能特点:相互调节、相互协同:各种细胞在机体内相互调节、相互协同,以维持整体的生命活动。第三页,共六十二页。2、组织、组织(zzh)(zzh)(tissue)v形成:形成:在胚胎发育时期形成。v组成:组成:由一些形态相似、功能相近的细胞 和细胞间质所组成。v分类:分类:由于细胞的特性不同(b tn),组织也相应分为:上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织。第四页,共六十二页。3、器官、器官(qgun)(qgun)和系统和
3、系统(organ and system)v形成:形成:是在胚胎发育的早期由几种不同的组织发育、分化和互相结合所形成。v器官器官(qgun)的组织特征:的组织特征:成体各器官、系统分别具有其细微结构的组织特征,执行着特定的功能。如:口腔、食道、胃、肠等均由不同的组织发育、分化和结合而成,它们具有各自不同的形态结构特点,但却执行着共同的功能,即消化食物、吸收营养、排除糟粕。第五页,共六十二页。(二)胚胎学(二)胚胎学(embryology)v定义:定义:是研究人体发生、生长发育及其机理的学科。v研究内容:研究内容:生殖细胞形成、受精、卵裂、植入、三胚层形成与分化、胎膜(ti m)与胎盘、先天性畸形
4、等。v人体的生长发育:人体的生长发育:是一个从精、卵结合所形成的受精卵开始直至个体死亡的连续不断的过程,也是一个由单细胞受精卵演变成多细胞人体的生长、发育与分化的过程。第六页,共六十二页。v人体在母体内生长发育的过程可分为胚期和胎期,而在人体的生长发育过程中绝大多数变化是发生在胚期和胎期。v所以人体胚胎学实际是研究人体在胚期和胎期的生长、发育,它所涉及的时期可以说是从受精开始,终止于出生。胎儿的诞生只不过是在人体的生长发育中环境的明显变化,人体本身的生长发育并不因诞生而停止。胎儿诞生后,不只是身体的长高、长大,而且还要发生一系列的重要变化。v因此(ync),从广义的角度讲,研究人体的发生、发育
5、的科学,应称为人体发生学人体发生学(development of human)。第七页,共六十二页。二、组织学与胚胎学的研究二、组织学与胚胎学的研究(ynji)(ynji)方法方法 v组织学与胚胎学的研究主要(zhyo)涉及到两方面:即显微镜显微镜和标本标本。第八页,共六十二页。显微镜包括(boku)(boku):1.光学显微镜光学显微镜(light microscopy,LM):又称光镜,常用于学习和研究(ynji)组织学与胚胎学,其分辨率为0.2m,放大倍数约为1000倍。第九页,共六十二页。2.电子显微镜电子显微镜(electron microscopy,EM):v又称为电镜,多用于组织
6、学与胚胎学的研究,其分辨率为0.2nm,比光镜高1000倍,可放大几万倍到几十万倍。因此电子显微镜能观察到细胞的更微细结构。透射(tu sh)电子显微镜图 扫描电子显微镜图第十页,共六十二页。(一一)一般光学一般光学(gungxu)(gungxu)显微镜技术显微镜技术 v应用光学显微镜观察组织标本(切片)是最常用的方法。v组织学的标本制作比较复杂,基本包括以下(yxi)几个主要,即步骤:取材、固定、脱 水、浸蜡、包埋、切片、染色染色、脱水、透明、封固等。v其他制片技术:此外血细胞、分离细胞或脱落细胞可直接涂在玻片上(涂片);疏松结缔组织可撕成薄片铺在玻片上(铺片);牙和骨等坚硬组织可磨成薄片(
7、磨片)第十一页,共六十二页。染色染色(rns)(rns)(Stainning):切片或其他标本需经染色后方(hufng)可在显微镜下观察。第十二页,共六十二页。(1)常规染色:苏木(s m)(s m)精(hematoxylin,H)和伊红(eosin,E),简称HE染色。苏木精:为碱性染液,使细胞核内的染色质和细胞质内的核糖体等物质染成蓝紫色,该物质称为(chn wi)具有嗜碱性嗜碱性(basophilia)。伊红:为酸性染液,可使细胞质内的普通蛋白和胶原纤维等物质染成粉红色,该物质称为具有嗜酸嗜酸性性(acidophilia)。若与苏木精和伊红亲和力均不强,则称中性中性(neutrophil
8、ia)。HE染色(rns),示小肠绒毛单层柱状上皮细胞细胞核嗜碱性,被染为蓝紫色;细胞质略嗜酸性,被染为粉红色。第十三页,共六十二页。(2)甲苯胺蓝(toluidine)染色(rns)(rns)技术:甲苯胺蓝是一种蓝色的碱性染料,可将细胞内、外的某些物质染成紫红色,而不是蓝色,这种染色(rns)现象称为异染性异染性(metachromasia)。示气管壁(un b)透明软骨囊:具有异染性的特点,在HE染色下被染为蓝紫色,但在甲苯胺蓝染色中,则被染为紫红色.第十四页,共六十二页。(3)特殊(tsh)(tsh)染色:即重金属盐浸镀法,如硝酸银法和氯化金法等 重金属盐浸镀法可使附着在细胞或组织表面(
9、biomin)的金属微粒还原而呈棕黑色或棕黄色。有些细胞或者组织可直接使硝酸银还原而被显示出来,称为亲银性亲银性(argentaffin);有些细胞或组织不能直接使硝酸银还原,在染色过程中需另外加入还原剂尚能发生反应,则称嗜嗜银性银性(argyrophilia)。硝酸银染色,示小肠(xiochng)腺内分泌细胞细胞被染为黑色;HE复染第十五页,共六十二页。(二)电子显微镜技术(二)电子显微镜技术(jsh)(jsh)根据分辨率、放大倍数及功能(gngnng)等不同可分为两种,即:透射电子显微镜,又称透射电镜或电镜;扫描电子显微镜,又称扫描电镜。第十六页,共六十二页。1、透射、透射(tu sh)(
10、tu sh)电子显微镜电子显微镜(transmission electron microscope)v透射电镜所观察(gunch)的组织必须用戍二醛或锇酸固定,树脂包埋,切厚5080nm的超薄切片,然后再经铅盐等重金属盐染色后镜下观察(gunch)。v电镜下所见的结构称超微结构超微结构(ultrastructure)。v超微结构被金属所染部位,在荧光屏上显得暗,图象较黑,为电子密度高电子密度高;反之则称为电子密度低电子密度低。v被检结构与重金属盐相结合的称正染色正染色;被检结构本身不与重金属盐结合,而其周围着重金属盐的称负染色负染色。一般染色都是正染色。透射(tu sh)电子显微镜,示淋巴细胞
11、超微结构黑色为高电子密度;灰色为低电子密度第十七页,共六十二页。2、扫描、扫描(somio)(somio)电子显微镜技术电子显微镜技术(scanning electron microscope)v扫描电子显微镜技术要观察(gunch)的组织不需制成切片。v固定后的标本,在其表面喷镀金属,在荧光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结构,如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。扫描(somio)电子显微镜示血细胞表面超微结构第十八页,共六十二页。(三)冷冻(三)冷冻(三)冷冻(三)冷冻(lngdng)(lngdng)切片技术切片技术切片技术切片技术(frozen section method)(frozen
12、 section method)v为了既要避免细胞、组织内的某些物质不被固定液所破坏,又要使组织变硬,便于将其切成较薄的薄片。同时,又要很快地得到切片。可将所获取的新鲜组织立即投入到液氮(-196)内进行快速冻结(dngji)。然后,再用恒冷箱切片恒冷箱切片机机(cryostat)制成冷冻切片(frozen section)。v利用这种方法制片迅速,细胞内酶的活性保存较好,故常用于酶组织化学染色。第十九页,共六十二页。(四)冷冻(四)冷冻(lngdng)(lngdng)蚀刻复型术蚀刻复型术(freeze etch replica)v该技术既可以看到细胞膜外表面,又可见细胞膜的内表面,也可探测细
13、胞膜断面的结构。v该技术包括(boku)冷冻、断裂、镀铂、分离复制面等主要步骤。冷冻蚀刻复型术,示细胞内面(ni min)及细胞核表面超微结构 第二十页,共六十二页。(五)组织(五)组织(五)组织(五)组织(zzh)(zzh)(细胞细胞细胞细胞)化学术化学术化学术化学术(histo(cyto)chemistry method)(histo(cyto)chemistry method)v定义:是通过化学反应的原理,定性、定位、定量研究组织或细胞内化学物质的组成及与功能的关系;若与电子显微镜技术相结合,则简称为电镜组织(细胞)化学。v基本原理:在组织切片和细胞样品上滴加一定的试剂,该试剂与组织内的
14、某些成分发生化学反应,在局部(jb)形成有色沉淀物,通过显微镜观察而对组织细胞内的化学成分进行定位、定性和定量的研究。第二十一页,共六十二页。v酶组织化学方法:组织化学方法也可显示酶的活性,各种不同(b tn)的酶有不同(b tn)显示方法。一般是将组织切片在某种酶底物中温育,而后检出反应产物,即可知酶的存在。如:显示三磷酸腺苷酶,作用液中就含三磷酸腺苷。举例:过碘酸希夫反应(period acid Schiff reaction),简称PAS 反应。该方法是显示细胞内糖原或多糖的一种方法,其化学反应的的基本(jbn)过程是通过过碘酸的氧化作用,使多糖释放出醛基,醛基与无色硷性品红结合反应,于
15、多糖存在的部位形成紫红色沉淀物,从而证明细胞内含有糖原或粘多糖成分。PAS法显示(xinsh)肝细胞糖原第二十二页,共六十二页。(六)免疫(六)免疫(六)免疫(六)免疫(miny)(miny)组织化学组织化学组织化学组织化学(immunohistochemistry method)(immunohistochemistry method)v是利用抗原与抗体(kngt)结合的原理,定性、定位、定量检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的方法。v该方法是先将蛋白质或多肽作为抗原,注入到某种动物体内,使其体内产生与所注入抗原相应的抗体。而后自其血清中提取该抗体,并以荧光染料或铁蛋白或辣根过氧化物酶等标记
16、。用标记了的抗体来处理组织切片。标记抗体与切片上相应抗原特异性结合。因此切片中有标记物呈现的部位,从而显示该物质在组织中的分布。v这种方法特异性强、敏感度高、发展十分迅速,应用也十分广泛,成为当前生物学和医学众多学科的重要研究方法。免疫(miny)组织化学反应步骤示意图第二十三页,共六十二页。(七)组织(七)组织(zzh)(zzh)或细胞培养或细胞培养(tissue or cell culture)(tissue or cell culture)v将人体或动物(dngw)的活细胞、活组织在体外培养,称细胞或组织培养(cell or tissue culture)。v细胞在体外生存,必需具备适宜
17、的条件,其包括营养、O2和CO2的比例、渗透压、pH值、温度和湿度。v利用体外培养细胞,可人为的给以各种不同的条件,研究不同条件对细胞的分裂、分化、结构和功能等的影响,并可用显微摄影等技术记录细胞的动态变化。培养(piyng)瓶内的细胞培养(piyng)96孔板内的细胞培养 第二十四页,共六十二页。三、学习组织学与胚胎学几点注意三、学习组织学与胚胎学几点注意(zh y)(zh y)的问题的问题 1.长度单位长度单位(dnwi):按国际单位制计量镜下或照片中细胞结构的长度。常用的长度单位是:毫米(mm)、微米(m)、纳米(nm)。1 毫米(mm)1000 微米(m)1000000 纳米(nm)0
18、.0001 毫米(mm)1 微米(m)1000 纳米(nm)0.0000001 毫米(mm)0.0001 微米(m)1 纳米(nm)第二十五页,共六十二页。2.理论理论(lln)(lln)和实习密切联系和实习密切联系 v组织学与胚胎学是一门以形态结构为主的学科,许多结构不要死记硬背,而是在实习课中通过观察、分析、比较,然后再记忆。v这种联系既不会感到枯燥而又能认识深刻,所以学习时要重视实习课这个重要环节。v组织学切片或照片中所显示的是组织和细胞的平面结构,如要研究它的立体结构,可制成连续切片,观察记录每一张切片中的结构,然后累积起来进行分析,或制成模型以表达整体结构。v同一细胞或某一种结构或组
19、织,由于切面的不同而有着(yu zhe)形态的差异。因此,应注意从平面的局部的图象中,正确地理解立体与整体的 结构关系。第二十六页,共六十二页。3.断面断面(dun min)(dun min)和立体的关系和立体的关系v在显微镜下观察的组织切片都是结构断面(dun min)的形态。v由于所切的部位不同,在一个细胞某断面可见细胞核,在某断面见不到细胞核。v又如身体内许多管状的器官,由于所切方位不同,往往呈完全不同的形态。示单管不同(b tn)横(左)、纵(右)切面模式图 示弯管不同切面模式图 第二十七页,共六十二页。4.结构结构(jigu)(jigu)与功能的关系:与功能的关系:每种细胞、组织和器
20、官均有一定的形态结构特点,并与其功能有着密切关系。例如:v神经细胞有细长突起的结构特点,以传递神经冲动;v分泌蛋白质的细胞,其细胞质中含丰富(fngf)的粗面内质网、发达的高尔基复合体和许多分泌颗粒等;v红细胞含丰富的血红蛋白,则具有结合和携带氧气的功能;v巨噬细胞胞质内含较多的溶酶体;v肌细胞的形态细长、肌浆内含与收缩有关的肌丝等;v上皮细胞的排列紧密与其保护功能相关;v消化道各段粘膜的功能不同,其结构又有各自的特点等。第二十八页,共六十二页。5.从静态结构了解从静态结构了解(lioji)(lioji)动态结构的变化:动态结构的变化:v从受精卵到胎儿娩出,胚胎经过一系列的变化,这个变化是个连
21、续的过程。v学习(xux)人体胚胎学时一定要把握住每一过程的变化,包括时间、地点、相互关系,从而建立起动态的概念。第二十九页,共六十二页。第一章第一章 细胞细胞(xbo)(xbo)(cell)v定义:定义:细胞(xbo)是一切生物体的结构结构和功能功能的基本单位基本单位。人体由多种细胞构成,它们具有不同的形态结构和特定的功能。共同完成人体完整的生命活动,如物质代谢、生长发育、对环境的感应及生殖遗传等。第三十页,共六十二页。一、一、细胞细胞(xbo)(xbo)的一般特点:的一般特点:1.细胞形态细胞形态人体细胞形态各异,有球形、多边形、梭形、扁平形、立方形、圆柱形和星形多突状等。都是适应有机体各
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