【医学课件】体液蛋白质检验.ppt

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1、一、血浆蛋白质的组成、功能及分类一、血浆蛋白质的组成、功能及分类 一血浆蛋白质的组成一血浆蛋白质的组成 血浆蛋白血浆蛋白质是血浆固体成份中含量最多、组成复质是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份体成份90左右，目前已经研究的血浆左右，目前已经研究的血浆蛋白质有蛋白质有500多种，别离出的纯品物多种，别离出的纯品物200来种，除免疫球蛋白外，主要由肝细胞来种，除免疫球蛋白外，主要由肝细胞合成。合成。第一节第一节 概概 述述 二血浆蛋白质的功能二血浆蛋白质的功能 1.维持血浆胶体渗透压维持血浆胶体渗透压 清蛋白。清蛋白。2.作为某

2、些物质的载体作为某些物质的载体 如清蛋白能如清蛋白能与多种物质结合与多种物质结合FA、胆红素，而某、胆红素，而某些球蛋白具特异地运输某些物质的功能，些球蛋白具特异地运输某些物质的功能，运铁蛋白、运皮质醇蛋白。运铁蛋白、运皮质醇蛋白。3.维持体液维持体液pH恒定恒定 血浆蛋白血浆蛋白PI一一般都小于是弱酸，一局部的弱酸盐形式存般都小于是弱酸，一局部的弱酸盐形式存在，构成缓冲对。在，构成缓冲对。血浆中汗多具有免疫功能的球蛋白，主血浆中汗多具有免疫功能的球蛋白，主要由浆细胞合成，电泳时位于要由浆细胞合成，电泳时位于r区带，如区带，如IgG、IgA、IgM、IgD、IgE，此外，还，此外，还有具有免疫

3、作用的非特异球蛋白，如补体。有具有免疫作用的非特异球蛋白，如补体。凝血与纤溶是一对矛盾的统一、凝血因凝血与纤溶是一对矛盾的统一、凝血因子与纤溶因子绝大局部是血浆蛋白质，它子与纤溶因子绝大局部是血浆蛋白质，它们促进血液凝固，防止血液流失和溶解血们促进血液凝固，防止血液流失和溶解血栓，防止重要脏器的动脉栓塞。栓，防止重要脏器的动脉栓塞。血浆蛋白质可分成血浆蛋白质可分成AA，用于合成组，用于合成组织蛋白或氧化供能。织蛋白或氧化供能。血浆中有汗多酶类，其中局部在血血浆中有汗多酶类，其中局部在血浆中发挥作用，称血浆功能性酶，如凝浆中发挥作用，称血浆功能性酶，如凝血酶原、纤溶酶原、铜蓝蛋白、血酶原、纤溶酶

4、原、铜蓝蛋白、LPL、LCAT、肾素等。、肾素等。二、个别血浆蛋白质二、个别血浆蛋白质 一前血蛋白一前血蛋白pueallumun PA分子分子量万，由肝细胞合成，电脉时移速较白蛋白快，量万，由肝细胞合成，电脉时移速较白蛋白快，位于其前方面得名，半寿期短位于其前方面得名，半寿期短12h，PA是一类是一类运载蛋白，一种能与甲状腺素结合，称为甲状运载蛋白，一种能与甲状腺素结合，称为甲状腺结合蛋白，一种能与腺结合蛋白，一种能与VitA结合，称为结合，称为VitA结结合蛋白，常用测定方法是免疫化学方法，合蛋白，常用测定方法是免疫化学方法，【参考范围】【参考范围】0.4g/L,【临床意义】急性炎症，恶性肿

5、瘤，肝硬【临床意义】急性炎症，恶性肿瘤，肝硬化或肾炎时下降。化或肾炎时下降。二二白白蛋蛋白白allumim,ALb分分子子量量66458，由由肝肝实实质质细细胞胞合合成成，半半寿寿期期1519天天，是是血血浆浆中中含含量量最最多多的的蛋蛋白白质质，占占4060，主主要要功功能能，维维持持血血浆浆胶胶体体渗渗透透性性，缓缓冲冲作作用用，运运输输作作用用，营营养养作用，调节某些激素或药物活性。作用，调节某些激素或药物活性。白白蛋蛋白白可可微微量量地地通通过过肾肾小小球球，约约，但但大大局局部部被被血血小小管管重重吸吸收收。白白蛋蛋白白的的测测定方法目前主要是溴甲酚绿定方法目前主要是溴甲酚绿BCG法

6、。法。【参考范围】【参考范围】3555g/L 【临临床床意意义义】血血浆浆白白蛋蛋白白增增高高临临床床少少见见，主主要要见见于于严严重重失失水水引引起起血血液液浓浓缩缩。血血浆浆白白蛋蛋白白降降低低临临床床常常见见。合合成成障障碍碍急急、慢慢性性肝肝炎炎。丧丧失失过过多多，肾肾病病综综合合症症、慢慢性性肾肾小小球球、肾肾炎炎、糖糖尿尿病病、系系统统性性斑斑狼狼疮疮等等。分分解解过过多多，营营养养不不良良，慢性胃肠道疾病。慢性胃肠道疾病。三三1-抗抗胰胰蛋蛋白白酶酶1AT或或AAT，分分子子量量万万，含含糖糖1012，电电泳泳时时位位于于1区区带带，占占90左左右右，由由肝肝细细胞胞合合成成，能

7、能抑抑制制多多种种酶酶活活性性，尤尤其其是是蛋蛋白白酶酶，占占血血清清中中抑抑制制蛋蛋白白酶酶活活力力的的90左左右右，抑抑制制作作用用有有明明显显的的pH依依赖赖性性，在在中性和弱碱性中活力最大。中性和弱碱性中活力最大。AAT也也是是一一种种急急性性时时相相反反响响蛋蛋白白，主主要要功功能能是是对对抗抗多多形形核核蛋蛋白白细细胞胞吞吞噬噬作作用时释放的溶酶体蛋白水解酶。用时释放的溶酶体蛋白水解酶。AAT测定方法测定方法 目前主要采用免疫目前主要采用免疫化学法。化学法。【参考范围】【参考范围】成人，成人，【临床意义】【临床意义】AAT下降见于胎儿呼吸下降见于胎儿呼吸窘迫症，窘迫症，AAT缺陷所

8、致的肺气肿、肝硬缺陷所致的肺气肿、肝硬化等。化等。AAT上升见于急性炎症、外科手上升见于急性炎症、外科手术后，长期服用可的松药物，妊娠及服术后，长期服用可的松药物，妊娠及服用避孕药物。用避孕药物。四四1-酸性糖蛋白酸性糖蛋白-AG或或AAG分分子量约子量约4万，含糖约万，含糖约45，主要由肝细胞，主要由肝细胞合成，某些肿瘤组织也可合成。合成，某些肿瘤组织也可合成。AAG是主要是主要的急性相反响蛋白，急性炎症时上升，与免的急性相反响蛋白，急性炎症时上升，与免疫防御功能有关。疫防御功能有关。AAG测定方法测定方法 使用使用AAG抗体，进行免抗体，进行免疫散法或免疫比浊法检测，疫散法或免疫比浊法检测

9、，【参考范围】【参考范围】【临床意义】主要作为急必时相反响的指【临床意义】主要作为急必时相反响的指标，风湿病、恶性肿瘤、心肌堵塞患者上升，标，风湿病、恶性肿瘤、心肌堵塞患者上升，营养不良、严重肝病下降。营养不良、严重肝病下降。五五甲甲胎胎蛋蛋白白AFP分分子子量量7万万，含含糖糖量量4，主主要要在在胎胎儿儿肝肝合合成成，妊妊娠娠1315周周血血清清AFP含含量量最最高高，以以后后逐逐渐渐下下降降，出出生生时时仅仅为为顶顶峰峰期期的的1，周周岁岁时时接接近近成成人人水水平平，仅仅1030g/L，功能不详。功能不详。AFP测测定定方方法法 火火箭箭电电泳泳放放射射自自显显影影；放放射射免免疫疫法法

10、RIA；酶酶联联免免疫疫吸吸附附法法ELISA灵灵敏敏度度接接近近放放免免，且且操操作简便，无放射污染，便于推广。作简便，无放射污染，便于推广。【参考范围】【参考范围】1030g/L 【临临床床意意义义】AFP作作为为肿肿瘤瘤标标志志物物，对对原原发发性性肝肝癌癌的的诊诊断断很很有有价价值值，80以以上上原原发发性性肝肝癌癌患患者者血血清清AFP上上升升，但但无无特特异异性性，肺肺癌癌、胰胰腺腺癌癌，肝肝硬硬化化患患者者血血清清AFP亦亦升升高高，此此外外，羊羊水水AFP含含量量测测定定可可用用于于胎胎儿儿产产前前监监测测，AFP增增高高，提提示示胎胎儿儿畸畸形形神神经经管管缺缺损损、脊脊柱柱

11、裂裂、无无脑儿死胎。脑儿死胎。六六结结合合球球蛋蛋白白 Hp又又名名触触珠珠蛋蛋白白，是是一一种种糖糖蛋蛋白白，主主要要由由肝肝合合成成，电电泳泳时时位位于于2区区带带，是是一一种种急急性性时时相相反反响响蛋蛋白白，为为两两对对肽肽链链组组成成的的四四聚聚体体22。链链有有1和和2两两种种，其中其中1有两种遗传变异体。有两种遗传变异体。Hp的的主主要要功功能能与与血血浆浆中中游游离离血血红红蛋蛋白白结结合合，不不可可逆逆结结合合，并并送送至至肝肝细细胞胞内内降降解解，因因此此Hp在在溶溶血血后后含含量量急剧下降。急剧下降。血血浆浆Hp测测定定方方法法 测测定定Hp-Hb复复合合物物中中过过氧氧

12、化化物物酶酶活活性性。在在血血浆浆中中参参加加过过量量Hb，生生成成Hp-Hb复复合合物物，凝凝胶胶层层折折法法收收复复合合物物别别离离，测测定定结结合合的的Hb。电泳法。电泳法。免疫化学法。免疫化学法。【参考范围】【参考范围】【临临床床意意义义】急急性性时时相相反反响响中中血血浆浆Hp上上升升，烧烧伤伤、肾肾病病综综合合征征引引起起Alb丧丧失时失时Hp上升，血管内溶血上升，血管内溶血Hp下降。下降。七七2-巨巨球球蛋蛋白白2MG或或AMG是是血血浆浆中中分分子子量量最最大大的的蛋蛋白白质质，分分子子量量为为80万万，含含糖糖量量8。AMG由由肝肝细细胞胞与与单单核核吞吞噬细胞系统合成，半寿

13、期噬细胞系统合成，半寿期5天。天。AMG最最突突出出的的特特性性能能与与多多种种分分子子和和离离子子结结合合，特特别别是是它它能能与与不不少少蛋蛋白白水水解解酶酶结结合合而而影影响响这这些些酶酶的的活活性性，有有选选择择地地保保护护某某些些蛋蛋白酶活性的作用。白酶活性的作用。AMG测定方法测定方法 免疫化学法，免疫化学法，【参考范围】【参考范围】【临临床床意意义义】在在低低蛋蛋白白血血症症，AMG上上升升，妊娠、服用避孕药时妊娠、服用避孕药时AMG上升。上升。八八铜铜蓝蓝蛋蛋白白CER含含铜铜的的糖糖蛋蛋白白，分分子子量量约约1216万万，含含糖糖量量约约10，因因含含铜铜而而呈蓝色，故名铜蓝

14、蛋白。主要由肝脏合成。呈蓝色，故名铜蓝蛋白。主要由肝脏合成。CER具具有有氧氧化化酶酶活活性性，使使血血液液中中Fe2+氧氧化化成成Fe3+，故故又又称称亚亚铁铁氧氧化化酶酶。CER还还起起着着抗抗氧氧化化剂剂的的作作用用。防防止止组组织织中中脂脂质质过过氧氧化化物物和和自由基的生成。自由基的生成。CER测定方法测定方法 免疫化学法或酶活性测定。免疫化学法或酶活性测定。【参考范围】。【参考范围】。【临临床床意意义义】CER属属于于急急性性时时相相反反响响蛋蛋白白。在在感感染染、创创伤伤和和肿肿瘤瘤时时上上升升，Wilson病病肝肝豆豆状核变性状核变性CER下降。下降。九九转转铁铁蛋蛋白白TRF

15、 血血浆浆中中主主要要含含铁铁蛋蛋白白质质，分分子子量量万万，含含糖糖约约6，由由肝肝及及网状皮系统合成，半寿期网状皮系统合成，半寿期7天。天。主主要要运运载载由由消消化化道道吸吸收收的的铁铁和和RBC降降解解释释放放的的铁铁，此此外外还还可可逆逆地地结结合合多多价价金金属属离离子子，如如Ca、Zn、Cu等。等。TRF测定方法测定方法 放免法、散射比浊法。放免法、散射比浊法。【参考范围】。【参考范围】。【临临床床意意义义】TRF在在急急性性时时反反响响中中下下降降，如如炎炎症症、恶恶性性病病变变时时、TRF、Alb、PA同同时时下下降降，慢慢性性肝肝现现营营养养不不良良亦亦下下降降，妊妊娠娠、

16、口口服避孕药，注射雌激素服避孕药，注射雌激素TRF上升。上升。十十2-微微球球蛋蛋白白BMG 由由淋淋巴巴细细胞胞合合成成，分分子子量量11800，存存在在于于所所有有有有核核细细胞胞的的外外表表，特特别别是是淋淋巴巴细细胞胞和和肿肿瘤瘤细细胞胞并并由由此此释放入血，半寿期释放入血，半寿期107min。BMG测定方法测定方法 常用放免法，常用放免法，ELISA法。法。【参考范围】。【参考范围】。【临临床床意意义义】主主要要用用于于监监测测肾肾小小管管功功能能，特特别别是是肾肾移移植植后后，如如有有排排异异反反响响，BMG在在尿尿中中排排出出量量上上升升，肾肾功功能能衰衰竭竭，炎炎症症、肿肿瘤瘤

17、血血浆浆BMG上升。上升。十十一一C-反反响响蛋蛋白白CRP 是是一一种种能能结结合合肺肺炎炎双双球球菌菌细细胞胞壁壁C-多多糖糖的的蛋蛋白白质质，分分子子量量14万万，五五条条肽肽链链组组成成，肝肝细细胞胞合合成成。CRP能能激激活活补补体体，促促进进粒粒细细胞胞、巨巨噬噬细细胞胞的的运动和吞噬，具有调理素样作用。运动和吞噬，具有调理素样作用。CRP测测定定方方法法 免免疫疫扩扩散散法法，火火箭箭免免疫疫电电泳法，泳法，ELISA法，放免法，法，放免法，【参考范围】。【参考范围】。【临临床床意意义义】作作为为急急性性时时相相反反响响的的一一个个极极灵灵敏敏指指标标，急急性性心心肌肌梗梗死死，

18、创创伤伤、感感染染、炎炎症、外科手术、肿瘤浸润迅速上升。症、外科手术、肿瘤浸润迅速上升。上述蛋白质除上述蛋白质除PA、Alb、BMG外都属于糖蛋白，含糖量最高的是外都属于糖蛋白，含糖量最高的是AAG、45，除，除BMG外都主要由肝外都主要由肝细胞合成。细胞合成。三、疾病时的血浆蛋白质三、疾病时的血浆蛋白质 一炎症、创伤一炎症、创伤 在在炎炎症症、创创伤伤、感感染染、心心肌肌堵堵塞塞、肿肿瘤瘤等等情情况况下下其其血血浆浆浓浓度度会会发发生生明明显显改改变变的的蛋蛋白白质质称称为为急急性性时时相相反反响响蛋蛋白白acute phase reactants APR。主主要要包包括括AAG、AAT、H

19、p、CER、C3、C4、纤纤维维蛋蛋白白原原、CRP；PA、Alb、TRF。二肝脏疾病二肝脏疾病 血血浆浆蛋蛋白白质质大大多多数数由由肝肝脏脏合合成成，因因此此肝肝脏脏疾疾病病可可导导致致多多种种血血浆浆蛋蛋白白质质发发生生变化。变化。如如乙乙肝肝活活动动期期AAT，Hp、PA、Alb，特特别别是是血血浆浆PA的的含含量量是是肝肝功功能能损损伤的敏感指标。伤的敏感指标。肝肝 硬硬 化化 时时 AAT、IgA、AMG，CER、CRP，而而AAG、Hp、C3，PA、Alb、TRF。三肾脏疾病三肾脏疾病 肾肾脏脏疾疾病病可可出出现现蛋蛋白白尿尿而而导导致致血血浆浆蛋蛋白白质质丧丧失失，丧丧失失的的蛋

20、蛋白白质质与与其其分分子子量量有有关关。小小分分子子量量蛋蛋白白质质丧丧失失最最明明显显，而而大大分分子子量量的的蛋蛋白白质质因因肝肝细细胞胞代代偿偿性性地地合合成成增增加加，绝绝对对含含量量升升高高。所所以以血血浆浆Alb、PA、AAG、AAT、TRF，而而AMG、-LP、Hp，这这称称为为选选择择性蛋白质丧失。性蛋白质丧失。当当严严重重肾肾病病是是肾肾小小球球失失去去分分子子筛筛作作用用，可可导导致致非非选选择择性性蛋蛋白白质质丧丧失失，表现为广泛地低血浆蛋白质血症。表现为广泛地低血浆蛋白质血症。生化检验中测定蛋白质的方法很多，主生化检验中测定蛋白质的方法很多，主要利用蛋白质的分子组成，结

21、构或性质进行。要利用蛋白质的分子组成，结构或性质进行。一、蛋白质测定方法及评价一、蛋白质测定方法及评价 一测定蛋白质特征元素一测定蛋白质特征元素氮氮 如凯如凯氏定氮法，是测定蛋白质的经典方法，氏定氮法，是测定蛋白质的经典方法，1883年年Kjeldahl首创，精密度准确度高，但操作复首创，精密度准确度高，但操作复杂、费时、技术性强，不适合临床常规检测，杂、费时、技术性强，不适合临床常规检测，一般用于标准血清的标定和校正。一般用于标准血清的标定和校正。第二节第二节 体液蛋白质测定体液蛋白质测定 二利用重复的肽链结构二利用重复的肽链结构 如双缩脲如双缩脲法，法，1914年首创，操作简便，重复性好，

22、年首创，操作简便，重复性好，各种蛋白产生的颜色反响相近，但灵敏度各种蛋白产生的颜色反响相近，但灵敏度较低，是目前临床上测定总蛋白的常规方较低，是目前临床上测定总蛋白的常规方法。法。三三利利用用酪酪氨氨酸酸、色色氨氨酸酸残残基基与与试试剂剂的的反响或紫外吸收特性反响或紫外吸收特性 1.酚酚试试剂剂法法 1921年年，Folin首首创创，1951年年改改进进成成广广泛泛使使用用的的Lowry法法，灵灵敏敏度度高高较较双双缩缩脲脲法法高高100倍倍，主主要要用用于于微微量量蛋蛋白白质质检检测测，但但各各种种蛋蛋白白质质中中酪酪氨氨酸酸含含量量不不一一，故故准准确确性性较较差差，试试剂剂配配制制复复杂

23、杂且且不不稳稳定定，化化学干扰大，目前临床上仅用于粘蛋白测定。学干扰大，目前临床上仅用于粘蛋白测定。2.紫紫外外吸吸收收法法 在在280nm处处有有一一吸吸收收峰峰，快快速速、简简单单，不不需需加加任任何何试试剂剂，保保存存蛋蛋白白质质活性，化学干扰大。活性，化学干扰大。四利用与染料的结合能力四利用与染料的结合能力 1.考考马马斯斯亮亮蓝蓝G-250结结合合蛋蛋白白法法CBB法法1976年年Bradford应应用用于于蛋蛋白白质质测测定定，操操作作简简便便、快快速速、重重复复性性好好，灵灵敏敏度度高高，干干扰扰因因素素少少，但但特特异异性性不不高高，大大分分子子肽肽分分子子量量300以以上上，

24、也也参参与与反反响响，线线性性范范围围窄窄，临临床床上上主要用于尿、脑脊液蛋白质测定。主要用于尿、脑脊液蛋白质测定。2.溴溴甲甲酚酚绿绿结结合合清清蛋蛋白白法法BCG法法 灵灵敏敏度度高高，血血清清用用量量少少，操操作作简简便便，但但特特异异性性不不高高，局局部部球球蛋蛋白白也也能能与与之之结结合合1-球球蛋蛋白白、运运铁铁蛋蛋白白、触触珠珠蛋蛋白白等等，是是目目前前临临床床上上测测定清蛋白的常规方法。定清蛋白的常规方法。五五利利用用沉沉淀淀后后借借浊浊度度或或光光折折射射测测定定 如如比比浊浊法法、折折光光测测定定法法，方方法法简简便便，试试剂剂易易得得，但但浊浊度度的的强强弱弱受受反反响响

25、的的条条件件影影响响大大加加试试剂剂的的方方法法、温温度度等等，结结果果准准确确性性差差，一一般用于尿、脑脊液蛋白测定。般用于尿、脑脊液蛋白测定。六六电电泳泳法法 CAE、PAGE目目前前临临床床上上常常用用电电泳泳技技术术，但但只只能能测测定定各各种种蛋蛋白白质质的的百分含量。百分含量。七七利利用用免免疫疫学学特特性性 免免疫疫化化学学法法，特特异异性性、灵灵敏敏度度高高，只只能能用用于于某某种种特特异异蛋蛋白白的的测定。测定。二、血清总蛋白的测定双缩脲法二、血清总蛋白的测定双缩脲法 【原理】蛋白质分子中的肽链在碱【原理】蛋白质分子中的肽链在碱性条件下能与二价铜离子作用生成紫红性条件下能与二

26、价铜离子作用生成紫红色的络合物，产生的颜色强度在一定范色的络合物，产生的颜色强度在一定范围内与蛋白质的含量成正比，但双缩脲围内与蛋白质的含量成正比，但双缩脲反响并非蛋白质特有的颜色反响，分子反响并非蛋白质特有的颜色反响，分子中含二个以上肽键者均有此反响。中含二个以上肽键者均有此反响。【试试剂剂】双双缩缩脲脲试试剂剂 未未失失结结晶晶水水的的硫硫酸酸铜铜CuSO45H2O溶溶于于500ml新新鲜鲜制制备备的的蒸蒸馏馏水水或或刚刚煮煮沸沸冷冷却却的的去去离离子子水水中中，加加酒酒石石酸酸钾钾钠钠NaKC4O4H64H2O，碘碘化化钾钾，待待完完全全溶溶解解后后参参加加6mol/L NaOH溶溶液液

27、100ml，最最后后加蒸馏水至加蒸馏水至1L，置聚乙烯瓶内盖紧保存。，置聚乙烯瓶内盖紧保存。酒酒石石酸酸钾钾钠钠的的作作用用是是络络合合铜铜离离子子，维维持持铜铜离离子子在在碱碱性性溶溶液液中中的的溶溶解解度度，碘碘化化钾钾防防止止两两价价铜离子复原。铜离子复原。【参考范围】【参考范围】6080g/L 【临床意义】【临床意义】一血清总蛋白增高一血清总蛋白增高 1.血液浓缩血液浓缩 严重腹泻严重腹泻、呕吐、高烧、呕吐、高烧 2.合合成成增增加加 主主要要见见于于球球蛋蛋白白合合成成增增加加，多多发发性性骨髓瘤。骨髓瘤。二血清总蛋白降低二血清总蛋白降低 静静脉脉滴滴注注过过多多低低渗渗溶溶液液，各

28、各种种原原因因所所引引起起的的水水钠钠潴潴留。留。2.摄摄入入缺缺乏乏和和消消耗耗增增加加 营营养养不不良良，慢慢性性胃胃肠肠道道疾疾病病引引起起的的消消化化吸吸收收不不良良，消消耗耗性性疾疾病病，结结核核病病、甲甲亢、恶性肿瘤。亢、恶性肿瘤。3.合成障碍合成障碍 主要见于肝脏疾患。主要见于肝脏疾患。4.蛋蛋白白质质丧丧失失 严严重重烧烧伤伤，大大量量血血浆浆渗渗出出，肾肾病病综合症。综合症。三、血清清蛋白测定溴甲酚绿法三、血清清蛋白测定溴甲酚绿法 【原理】溴甲酚绿【原理】溴甲酚绿BCG在的环在的环境中，在有非离子去垢剂境中，在有非离子去垢剂Brij-35存存在时，可与清蛋白结合形成蓝绿色复合

29、在时，可与清蛋白结合形成蓝绿色复合物，颜色的深浅在一不定范围内与清蛋物，颜色的深浅在一不定范围内与清蛋白含量成正比。白含量成正比。BCG与清蛋白结合的特异性较低，与清蛋白结合的特异性较低，它不仅与它不仅与Alb结合呈色，还可与其他蛋白结合呈色，还可与其他蛋白质呈色，其中质呈色，其中1-球蛋白，球蛋白，TRF、Hp最最明显，但反响速度不同，明显，但反响速度不同，Alb可立即反响可立即反响快反响，其他蛋白质反响慢慢反快反响，其他蛋白质反响慢慢反响。响。【试剂】【试剂】1.10mmol/L BCG贮贮存存液液 ，溶溶于于5ml 1 mol/L NaoH溶液中，加蒸馏水至溶液中，加蒸馏水至250ml。

30、琥琥珀珀酸酸缓缓冲冲贮贮存存液液NaoH10g，琥琥珀珀酸酸56g，溶溶 解解 于于 800ml蒸蒸 馏馏 水水 中中，用用 1mol/L NaoH溶液调溶液调pH至加蒸馏水至至加蒸馏水至1L。3.叠叠氮氮钠钠贮贮存存液液 叠叠氮氮钠钠40g溶溶于于1000ml蒸馏水中。蒸馏水中。4.Brij-35溶溶液液 Brij-35 29g，加加蒸蒸馏馏水水80ml，置置80ml左左右右水水溶溶使使其其溶溶解解，然然后后加加水水至至100ml。5.BCG试试剂剂 于于IL容容量量瓶瓶内内加加蒸蒸馏馏水水400ml，琥琥珀珀酸酸缓缓冲冲贮贮存存液液100ml，BCG贮贮存存液液8ml，叠叠氮氮钠钠贮贮存存

31、液液，Brij-35溶溶液液，加加蒸蒸馏馏水至刻度，配好的水至刻度，配好的BCG试剂的试剂的pH应为。应为。Brij-35可可提提高高蛋蛋白白质质与与染染料料的的结结合合力力及及溶溶解解度度，提提高高呈呈色色稳稳定定性性，如如无无Brij-35可可用用吐温吐温-20代替，叠氮钠有防腐作用。代替，叠氮钠有防腐作用。【参考范围】【参考范围】3555g/L。【临床意义】【临床意义】四、血浆纤维蛋白原测定四、血浆纤维蛋白原测定 血浆纤维蛋白原血浆纤维蛋白原Fib是一种参是一种参与血液凝固的糖蛋白，又称凝血因子与血液凝固的糖蛋白，又称凝血因子，分子量，分子量34万，在肝脏合成，电泳时位万，在肝脏合成，电

32、泳时位于于球蛋白区带。血浆纤维蛋白原测定球蛋白区带。血浆纤维蛋白原测定对于出血性疾病和肝脏损伤的诊断有重对于出血性疾病和肝脏损伤的诊断有重要意义。测定血浆纤维蛋白原的方法有要意义。测定血浆纤维蛋白原的方法有多种，主要有：多种，主要有：在稀释血浆中参加钙离子使纤维蛋白在稀释血浆中参加钙离子使纤维蛋白原转化为不溶性纤维蛋白凝块，将凝块原转化为不溶性纤维蛋白凝块，将凝块别离后用双缩脲法测定纤维蛋白含量。别离后用双缩脲法测定纤维蛋白含量。在在血血浆浆中中参参加加12.5%的的亚亚硫硫酸酸钠钠使使纤纤维维蛋蛋白白原原沉沉淀淀而而与与其其他他血血浆浆蛋蛋白白质质别别离离，将将纤维蛋白原用双缩脲试剂显色，求

33、出其含量。纤维蛋白原用双缩脲试剂显色，求出其含量。在在时时，用用13.3%的的硫硫酸酸铵铵溶溶液液沉沉淀淀纤纤维维蛋蛋白白原原，而而血血浆浆中中其其他他蛋蛋白白质质保保持持溶溶解解状状态态，此此时时溶溶液液的的浊浊度度完完全全由由纤纤维维蛋蛋白白原原产产生生，通通过过比浊可求得其含量。比浊可求得其含量。用用人人纤纤维维蛋蛋白白原原免免疫疫动动物物获获得得抗抗人人纤纤维维蛋蛋白白原原抗抗体体，应应用用免免疫疫电电泳泳法法、免免疫疫扩扩散散法法和和ELISA法测定纤维蛋白原含量。法测定纤维蛋白原含量。【参考范围】【参考范围】【临床意义】【临床意义】纤纤维维蛋蛋白白原原是是一一种种急急性性时时相相反反响响蛋蛋白白，在在感感染染、严严重重组组织织损损伤伤、休休克克、肾肾炎炎、风风湿湿热热、恶恶性性肿肿瘤瘤以以及及放放射射治治疗疗、月月经经期期和和妊妊娠娠期期增增高。高。常常见见于于营营养养不不良良、严严重重的的肝肝功功能能损损伤伤、弥弥漫漫性性血血管管内内凝凝血血、分分娩娩时时羊羊水水进进入入血血液液在在血血管内形成血栓、先天性纤维蛋白原缺乏症。管内形成血栓、先天性纤维蛋白原缺乏症。