微生物学精品课课件_微生物细胞结构与功能.ppt
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1、 第第一一章章 微生物细胞的结构与功能微生物细胞的结构与功能 目的要求:目的要求:通过本章学习,要求掌握:通过本章学习,要求掌握:原核细胞的结构与功能;原核细胞的结构与功能;真核细胞的结构与功能;真核细胞的结构与功能;原核细胞与真核细胞的主要区别;原核细胞与真核细胞的主要区别;古生菌的根本结构特点。古生菌的根本结构特点。对细胞型微生物的多样性形成概念。对细胞型微生物的多样性形成概念。重点:重点:本章的重点讲授原核细胞的结构与功能。本章的重点讲授原核细胞的结构与功能。难点:难点:1、细菌细胞壁肽聚糖亚单位的组成。、细菌细胞壁肽聚糖亚单位的组成。2、细菌鞭毛与真核生物鞭毛亚显微结构的比较。、细菌鞭
2、毛与真核生物鞭毛亚显微结构的比较。3、细菌芽孢的形成过程。、细菌芽孢的形成过程。微生物微生物-细胞型生物细胞型生物和和非细胞生物非细胞生物。凡有细胞形态的微生物称为凡有细胞形态的微生物称为细胞型微生物细胞型微生物。按其细胞结构又可分为按其细胞结构又可分为原核微生物原核微生物和和真核微生物真核微生物。原核微生物原核微生物是指细胞核为原核即核为原始形态的核,是指细胞核为原核即核为原始形态的核,没有核膜、核仁,由没有核膜、核仁,由DNA组成,不与组蛋白结合。组成,不与组蛋白结合。原核微生物包括真细菌和古生菌两大群。原核微生物包括真细菌和古生菌两大群。根本构造:1.细胞壁;2.细胞膜;3.细胞核;4.
3、核糖体;5.颗粒状内含物;特殊构造:6.间体;7.质粒;8.荚膜;9.芽孢;10.鞭毛与菌毛 第一节第一节 原核细胞的构造原核细胞的构造细胞的结构细胞的结构特殊构造:局部细菌具有的或一般细菌在特殊环境下才有的构造特殊构造:局部细菌具有的或一般细菌在特殊环境下才有的构造一般构造:一般构造:一般细菌都有的构造一般细菌都有的构造第一节第一节 原核微生物细胞的结构原核微生物细胞的结构1、细胞壁重点:结构与功能、细胞壁重点:结构与功能 2、细胞质膜重点:结构与功能、细胞质膜重点:结构与功能3、细胞质和内含物、细胞质和内含物 1概念概念 2贮藏物贮藏物 3磁小体磁小体 4羧酶体羧酶体 5气泡气泡 6载色体
4、载色体 7核糖体核糖体 8质粒质粒4、核区、核区nuclear region or area5、特殊的休眠构造、特殊的休眠构造芽孢芽孢重点:芽孢的根本特性和耐热机制,利用伴孢晶体作为生物杀虫剂重点:芽孢的根本特性和耐热机制,利用伴孢晶体作为生物杀虫剂1概念概念 2细菌芽孢的特点细菌芽孢的特点 3芽孢的形成与芽孢的萌发过程芽孢的形成与芽孢的萌发过程4芽孢的耐热机制芽孢的耐热机制 5芽孢杆菌芽孢杆菌Bacillus芽孢形成的生理调控芽孢形成的生理调控6伴孢晶体伴孢晶体 7细菌的其他休眠构造细菌的其他休眠构造6、糖被重点:根本特点及与生产、科研的关系、糖被重点:根本特点及与生产、科研的关系1)概念概
5、念 2特点特点7、鞭毛根本结构及推动细菌运动的特点、鞭毛根本结构及推动细菌运动的特点1概念概念 2观察和判断细菌鞭毛的方法观察和判断细菌鞭毛的方法3鞭毛的结构及其运动机制鞭毛的结构及其运动机制 4鞭毛推动细菌运动的特点鞭毛推动细菌运动的特点8、菌毛、菌毛 9、性毛、性毛不同细菌细胞壁的化学组成和结构不同,通过革兰氏染色法可将所有的细菌分为革兰氏阳性G+和革兰氏阴性G-。一、细胞结构一)、细胞壁细菌细胞壁的功能细菌细胞壁的功能 :1、固定细胞外形;、固定细胞外形;2、为鞭毛运动提供支点;、为鞭毛运动提供支点;3、保护细胞免受外力的损伤、保护细胞免受外力的损伤G+菌可抵御菌可抵御1525个大气压的
6、渗透压,个大气压的渗透压,G-菌可抵御菌可抵御510个大气压个大气压的渗透压的渗透压 4、为正常细胞的分裂所必需;、为正常细胞的分裂所必需;5、阻挡有害物质进入;、阻挡有害物质进入;6、与细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的敏感性、与细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的敏感性有关。有关。1).1).革兰氏阳性的细胞壁成分革兰氏阳性的细胞壁成分肽聚糖肽聚糖 G G+磷壁酸磷壁酸 A.肽聚糖的分子结构肽聚糖的分子结构a)双糖单位:双糖单位:N-乙酰葡糖胺、乙酰葡糖胺、N-乙酰胞壁酸乙酰胞壁酸b)四肽尾四肽侧链:四肽尾四肽侧链:L-Ala、D-Glu、L-Lys、D-Alac)肽桥肽间桥:甘氨酸五肽肽桥肽间
7、桥:甘氨酸五肽肽聚糖单体:肽聚糖单体:肽聚糖是由组成肽聚糖的单体聚合而成的大分子网状化合物。肽聚糖是由组成肽聚糖的单体聚合而成的大分子网状化合物。磷壁酸又名垣酸,是大多数磷壁酸又名垣酸,是大多数G+菌所特有的成分,约占菌所特有的成分,约占细胞壁成分的细胞壁成分的10%。B.磷壁酸磷壁酸磷壁酸磷壁酸壁磷壁酸壁磷壁酸膜磷壁酸膜磷壁酸磷壁酸主要有两种,一是核糖醇磷壁酸,一是甘油磷壁磷壁酸主要有两种,一是核糖醇磷壁酸,一是甘油磷壁酸酸,前者存在金黄色葡萄球菌和芽孢杆菌中,后者存在前者存在金黄色葡萄球菌和芽孢杆菌中,后者存在干酪乳杆菌中。干酪乳杆菌中。磷壁酸的主要功能:磷壁酸的主要功能:1 1、带带负负
8、电电荷荷,可可与与环环境境中中Mg2等等阳阳离离子子结结合合,提提高高这这些些离离子子的的浓浓度度,以以保保证证细细胞胞膜膜上上一一些些合合成酶维持高活性的需要;成酶维持高活性的需要;3 3、赋予革兰氏阳性菌特异的外表抗原;、赋予革兰氏阳性菌特异的外表抗原;4 4、提供某些噬菌体特异的吸附受体。提供某些噬菌体特异的吸附受体。2 2、保证革兰氏阳性致病菌如、保证革兰氏阳性致病菌如A A族链球菌与其族链球菌与其宿主间的粘连主要为膜磷壁酸;宿主间的粘连主要为膜磷壁酸;5 5、调节细胞自溶素活力调节细胞自溶素活力,防止细胞因自溶而死亡。防止细胞因自溶而死亡。2).2).革兰氏阴性的细胞壁成分革兰氏阴性
9、的细胞壁成分 G-细胞壁的组成和结构比细胞壁的组成和结构比G+更复杂。分为内壁层更复杂。分为内壁层和外壁层两局部。和外壁层两局部。肽聚糖肽聚糖 脂多糖脂多糖 脂蛋白脂蛋白 类脂类脂 蛋白质蛋白质 孔蛋白孔蛋白外壁蛋白外壁蛋白 外壁层外壁层 G-内壁层内壁层外壁层是外壁层是G细菌细胞壁所特有的结构,它位于壁的最细菌细胞壁所特有的结构,它位于壁的最外层,化学成分为脂多糖、磷脂和假设干种外蛋白。外层,化学成分为脂多糖、磷脂和假设干种外蛋白。G G+菌与菌与G G-菌肽聚糖单体的异同:菌肽聚糖单体的异同:其区别为其区别为:1 1、四四肽肽上上的的第第三三个个氨氨基基酸酸不不同同,G+,G+菌菌为为赖赖
10、氨氨酸酸;G-G-菌菌为内消旋二氨基庚二酸为内消旋二氨基庚二酸DAP)DAP)。2 2、肽间桥不同:、肽间桥不同:G+G+菌为甘氨酸五肽;菌为甘氨酸五肽;G-G-菌为肽键。菌为肽键。脂多糖脂多糖LPS)LPS)分子结构由三局部组成:分子结构由三局部组成:类脂A:2个N乙酰葡糖胺及5个长链脂肪酸 3个2酮3脱氧辛糖酸KDO 内核心区 核心多糖区 3个 L甘油D甘露Hep 外核心区:5个己糖Hex,包括葡糖胺、半乳糖、葡萄糖 O侧链:多个4Hex单位,内含半乳糖、鼠李糖、甘露糖、阿比可糖(Abq)LPS 类脂类脂A A是是G G-细菌的毒性中心细菌的毒性中心1 1、是革兰氏阴性细菌致病物质、是革兰
11、氏阴性细菌致病物质内毒素的物质根底;内毒素的物质根底;2 2、与磷壁酸相似,也有吸附、与磷壁酸相似,也有吸附Mg2+Mg2+和和Ca2+Ca2+等阳离子以提高这等阳离子以提高这些离子在细胞外表浓度的作用;些离子在细胞外表浓度的作用;3 3、由由于于LPSLPS结结构构的的变变化化,决决定定了了革革兰兰氏氏阴阴性性细细菌菌细细胞胞外外表表抗抗原决定簇的多样性;原决定簇的多样性;4 4、是许多噬菌体在细胞外表的吸附受体。、是许多噬菌体在细胞外表的吸附受体。5 5、具有控制某些物质进出细胞的局部选择性屏障功能、具有控制某些物质进出细胞的局部选择性屏障功能脂多糖的功能脂多糖的功能脂多糖要维持其结构的稳
12、定性需要足量脂多糖要维持其结构的稳定性需要足量Ca2+的存在。如果用的存在。如果用螯合剂去除螯合剂去除Ca2+,LPS就解体。这时,就解体。这时,G-细菌的内壁层肽聚细菌的内壁层肽聚糖就暴露出来,因而就可被溶菌酶所水解。糖就暴露出来,因而就可被溶菌酶所水解。脂多糖脂多糖LPS含有三种特殊的糖含有三种特殊的糖 Hep(L-甘油甘油-D-甘露庚糖甘露庚糖)KDO 2酮酮3脱氧辛糖酸脱氧辛糖酸Abq(阿比可糖阿比可糖)LPS组成组成O侧链的糖类不同决定了不同细菌侧链的糖类不同决定了不同细菌的抗原特异性,可用血清学方法加以鉴定。的抗原特异性,可用血清学方法加以鉴定。在非致病的在非致病的G-细菌中脂多糖
13、没有细菌中脂多糖没有O侧链。侧链。脂多糖脂多糖LPS的毒性局部在类脂的毒性局部在类脂A。注意几点:注意几点:不同细菌肽聚糖亚单位中短肽中的二氨基酸不一样。不同细菌肽聚糖亚单位中短肽中的二氨基酸不一样。不同细菌肽聚糖亚单位之间的交联方式不一样不同细菌肽聚糖亚单位之间的交联方式不一样不同的细菌,肽聚糖中双糖亚单位的数量不一,例金黄色葡萄球不同的细菌,肽聚糖中双糖亚单位的数量不一,例金黄色葡萄球菌只有菌只有9个双糖亚单位,而地衣芽孢杆菌多达个双糖亚单位,而地衣芽孢杆菌多达79个二糖单位。个二糖单位。不同种类的细菌肽聚糖的含量不一。不同种类的细菌肽聚糖的含量不一。G+菌多,菌多,G-菌少,交链度菌少,
14、交链度也不一样,也不一样,G+高,高,G-低。低。肽聚糖能被溶菌酶水解,水解部位在糖苷键。肽聚糖能被溶菌酶水解,水解部位在糖苷键。G+菌对青霉素敏感,因青霉素可阻止肽聚糖亚单位之间交联肽链菌对青霉素敏感,因青霉素可阻止肽聚糖亚单位之间交联肽链的形成。的形成。肽聚糖存在于除古细菌以外的所有有壁原核生物的细胞壁中。肽聚糖存在于除古细菌以外的所有有壁原核生物的细胞壁中。简单染色法 正染色 革兰氏染色法 鉴别染色法 抗酸性染色法 芽孢染色法 死菌 姬姆萨染色法 负染色:荚膜染色法等细菌染色法 活菌:用美蓝或TTC氧化三苯基四氮唑 等作活菌染色 3).革兰氏染色革兰氏染色1.用碱性染料结晶紫对菌液涂片进
15、行初染。用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染。2.2.用碘液进行媒染,其作用是提高染料和细胞间的用碘液进行媒染,其作用是提高染料和细胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。相互作用从而使二者结合得更牢固。3.3.用乙醇冲洗脱色。在经历脱色后仍将结晶紫保存用乙醇冲洗脱色。在经历脱色后仍将结晶紫保存在细胞内的为革兰氏阳性细菌,而革兰氏阴性细菌在细胞内的为革兰氏阳性细菌,而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉,细胞呈无色。的结晶紫被洗掉,细胞呈无色。4.4.用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对涂片用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对涂片进行复染。例如番红,使原来无色的革兰氏阴性细进行复染。例如番红,使原来无
16、色的革兰氏阴性细菌最后呈现红色,而革兰氏阳性细菌继续保持深紫菌最后呈现红色,而革兰氏阳性细菌继续保持深紫色。色。革兰氏染色革兰氏染色C.Gram革兰于革兰于1884年创造的一种年创造的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。鉴别不同类型细菌的染色方法。革兰氏染色的原理:革兰氏染色的原理:G+菌的细胞壁肽聚糖含量高、网格结构紧密,含脂量菌的细胞壁肽聚糖含量高、网格结构紧密,含脂量低,用酒精脱色时,肽聚糖层收缩,网格孔径缩小,阻低,用酒精脱色时,肽聚糖层收缩,网格孔径缩小,阻止了结晶紫碘的复合物逸出,当复染时染不上蕃红的止了结晶紫碘的复合物逸出,当复染时染不上蕃红的红色,菌体仍为结晶紫的紫色,此为红色,菌
17、体仍为结晶紫的紫色,此为G+反响。反响。G-菌的细胞壁肽聚糖层薄,含脂量高,用酒精脱色时菌的细胞壁肽聚糖层薄,含脂量高,用酒精脱色时由于细胞壁中的脂类物质溶于酒精,使细胞通透性增由于细胞壁中的脂类物质溶于酒精,使细胞通透性增加,使得初染时进入细胞中的结晶紫碘的复合物逸加,使得初染时进入细胞中的结晶紫碘的复合物逸出,当再用蕃红复染时菌体就染上蕃红的红色,此为出,当再用蕃红复染时菌体就染上蕃红的红色,此为G-反响。反响。4).G4).G细菌与细菌与G G-细菌细胞壁的化学组成细菌细胞壁的化学组成 肽聚糖肽聚糖 G G+磷壁酸磷壁酸 多糖多糖 壁磷壁酸壁磷壁酸膜磷壁酸膜磷壁酸 肽聚糖肽聚糖-内壁层内
18、壁层 脂多糖脂多糖G-脂蛋白脂蛋白 类脂类脂 蛋白质蛋白质 孔蛋白孔蛋白外壁蛋白外壁蛋白 外壁层外壁层 G-细菌的细胞壁比细菌的细胞壁比G+菌要复杂得多,结构层次明显,菌要复杂得多,结构层次明显,分为内壁层和外壁层两层。分为内壁层和外壁层两层。肽聚糖的单体构成了大分子网状化合物肽聚糖的单体构成了大分子网状化合物:G G+菌的肽聚糖的分子结构交联度高,肽聚糖层厚菌的肽聚糖的分子结构交联度高,肽聚糖层厚,如如枯草杆菌网状分子有枯草杆菌网状分子有4040层。而层。而G G-菌的交联度低菌的交联度低,肽聚糖层肽聚糖层薄,如大肠杆菌仅由薄,如大肠杆菌仅由1 12 2层分子组成。层分子组成。G+菌与菌与G
19、-菌菌细细胞壁的比胞壁的比较较特性特性G+细细菌菌G-细细菌菌 结结构构一一层层,厚度,厚度为为20-80nm肽肽聚糖网格聚糖网格结结构构紧紧密密二二层层,内,内层层2-3nm,外,外层层8nm,肽肽聚糖位于内聚糖位于内层层,网格状网格状结结构疏松。构疏松。化化学学组组成成肽肽聚糖聚糖磷壁酸磷壁酸多多 糖糖脂蛋白脂蛋白脂多糖脂多糖蛋白蛋白质质脂脂 类类对对青霉素青霉素对对溶菌溶菌酶酶层层数多,交数多,交联联度高,度高,占壁干重的占壁干重的40-90%+或或-+-+或或-敏感敏感敏感敏感层层数少,交数少,交联联度低,只占度低,只占5-10%-+不敏感不敏感 不敏感不敏感2.古生菌的细胞壁古生菌的
20、细胞壁除热原菌属没有细胞壁以外,其余都具有与真除热原菌属没有细胞壁以外,其余都具有与真细菌功能相似的细胞壁细菌功能相似的细胞壁古生菌的细胞壁没有真正的肽聚糖,而含假肽古生菌的细胞壁没有真正的肽聚糖,而含假肽聚糖。假肽聚糖与真肽聚糖相比没有胞壁酸、聚糖。假肽聚糖与真肽聚糖相比没有胞壁酸、没有没有D型氨基酸、没有型氨基酸、没有DAP,而由,而由N-乙酰塔罗乙酰塔罗糖胺糖醛酸代替胞壁酸。糖胺糖醛酸代替胞壁酸。有些古细菌的细胞壁由杂多糖组成有些古细菌的细胞壁由杂多糖组成,还有些古还有些古细菌的细胞壁由蛋白质或糖蛋白组成。细菌的细胞壁由蛋白质或糖蛋白组成。古细菌细胞壁与真细菌细胞壁的古细菌细胞壁与真细菌
21、细胞壁的区别:区别:古细菌细胞壁不含有肽聚糖,而真细菌有古细菌细胞壁不含有肽聚糖,而真细菌有古细菌假肽聚糖中多糖由古细菌假肽聚糖中多糖由-1,3糖苷键连接而糖苷键连接而成,真细菌肽聚糖中多糖由成,真细菌肽聚糖中多糖由-1,4糖苷键连接糖苷键连接而成而成古细菌中没有古细菌中没有N-乙酰胞壁酸和乙酰胞壁酸和D型氨基酸型氨基酸古生菌假肽聚糖的单体结构古生菌假肽聚糖的单体结构-1,3糖苷键不被溶菌酶糖苷键不被溶菌酶水解水解N-乙酰葡糖胺和乙酰葡糖胺和N-乙酰塔罗糖胺糖醛酸乙酰塔罗糖胺糖醛酸交替连接而成,连在后一氨基糖上的肽交替连接而成,连在后一氨基糖上的肽尾由尾由L-glu、L-ala和和L-lys三
22、个三个L型氨基型氨基酸组成,肽桥那么由酸组成,肽桥那么由L-glu一个氨基酸一个氨基酸组成。组成。3.细胞壁缺陷细菌细胞壁缺陷细菌缺壁突变缺壁突变L型细菌型细菌实验室或宿实验室或宿主体内形成主体内形成根本去尽根本去尽原生质体原生质体G+人工去壁人工去壁局部去除局部去除原生质球原生质球G-在自然界长期进化中形成在自然界长期进化中形成支原体支原体 a.L型细菌型细菌L-form of bacteria细菌在某些环境条件下实验室或宿主体内通过自发突变细菌在某些环境条件下实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。因英国李斯特因英国李斯特Li
23、ster预防研究所首先发现而得名预防研究所首先发现而得名1935年,念珠状链杆菌年,念珠状链杆菌Streptobacillus moniliformis特点:特点:没有完整而坚韧的细胞壁,细胞呈多形态;没有完整而坚韧的细胞壁,细胞呈多形态;有些能通过细菌滤器,故又称有些能通过细菌滤器,故又称“滤过型细菌;滤过型细菌;对渗透敏感,在固体培养基上形成对渗透敏感,在固体培养基上形成“油煎蛋似油煎蛋似的小菌落直径在左右的小菌落直径在左右大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌、分枝杆菌和霍乱弧大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌、分枝杆菌和霍乱弧菌等菌等20多种细菌中均有发现,被认为可能与针对细胞壁的抗菌
24、多种细菌中均有发现,被认为可能与针对细胞壁的抗菌治疗有关。治疗有关。b.原生质体原生质体protoplast在人为条件下,用溶菌酶处理或在含青霉素的培养基中培养在人为条件下,用溶菌酶处理或在含青霉素的培养基中培养而抑制新生细胞壁合成而形成的仅由一层细胞膜包裹的,而抑制新生细胞壁合成而形成的仅由一层细胞膜包裹的,圆球形、对渗透压变化敏感的细胞,一般由革兰氏阳性细圆球形、对渗透压变化敏感的细胞,一般由革兰氏阳性细菌形成。菌形成。特点:特点:1对环境条件变化敏感,低渗透压、振荡、离心甚至通气对环境条件变化敏感,低渗透压、振荡、离心甚至通气等都易引起其破裂;等都易引起其破裂;2有的原生质体具有鞭毛,但
25、不能运动,也不被相应噬菌有的原生质体具有鞭毛,但不能运动,也不被相应噬菌体所感染;体所感染;3在适宜条件如高渗培养基可生长繁殖、形成菌落,在适宜条件如高渗培养基可生长繁殖、形成菌落,形成芽孢及恢复成有细胞壁的正常结构。形成芽孢及恢复成有细胞壁的正常结构。4比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物质,是研究比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物质,是研究遗传规律和进行原生质体育种的良好实验材料。遗传规律和进行原生质体育种的良好实验材料。c.球状体球状体(sphaeroplast)采用上述同样方法,针对革兰氏阴性细采用上述同样方法,针对革兰氏阴性细菌处理后而获得的残留局部细胞壁外菌处理后而获得的残留
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