食品微生物检验习题参考答案.doc

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1、好风光好风光恢复供货才 食品微生物检验习题参考答案1、答:1干热灭菌法将包扎好的玻璃器皿摆入电热烘箱中，相互间要留有一定的空隙，以便空气流通。关紧箱门，翻开排气孔，接上电源。待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，加热至灭菌温度后，固定温度进行灭菌：160165保持2小时。2小时后切断电源。待烘箱内温度自然降温冷却到60以下后，再开门取出玻璃器皿，防止由于温度突然下降而引起玻璃器皿碎裂。2高压蒸汽灭菌法 关好排水阀门，放入纯洁水或蒸馏水至标度。注意水量一定要加足，否那么容易造成事故。将须要灭菌的器材、培养基等装入灭菌锅中，加盖密封。旋紧螺旋时，先将每个螺旋旋转到一定程度不要太紧，然后再旋紧相

2、对的两个螺旋，以到达平衡旋紧，否那么易造成漏气，达不到彻底灭菌的目的。通电加温，翻开排气活门，排尽锅内的空气。通常当压力表指针升至5磅MPa时，翻开排气活门放气，待压力表指针降至零点一小段时间后，再关闭活门。即活门冲出的全部是蒸汽时那么表示彻底，此时可关闭排气活门，如果过早关闭活门，排气不彻底，也达不到彻底灭菌的目的。MPa 或15磅MPa时或15磅时，锅内温度相当于120121MPa 或15磅压力保持2030分钟，即能到达完全灭菌的目的，然后停止加温。当到达所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间。降温：自然降温或翻开活门排汽降温。稍微翻开一点排气活门，使锅内蒸汽缓慢排除，然后逐渐开大

3、活门，气压徐徐下降，注意勿使排气过快，否那么会使锅内的培养基沸腾而冲脱或沾染棉花塞，但排气太慢又使培养基在锅内，受高温处理时间过长，对培养基也是不利的。一般从排气到翻开锅盖以10分钟左右为好。当锅内蒸汽完全排尽时即压力表指针降到零时，要立即翻开锅盖。取出灭菌物品：当锅内温度下降到60左右时器材或培养基。如培养基需制备固体斜面培养基时，那么应趁热将试管斜放在桌上，上面盖上报纸以免落灰尘，冷却后便可收起。最后将高压灭菌器内的剩余水排出。观察灭菌效果。把灭菌培养基放入25温箱中，培养48小时观察灭菌效果。 48小时后不见杂菌生出，便证明培养基已到达灭菌目的，可以使用。2、答：菌落总数是指食品经过处理

4、，在一定条件下培养后，所得1g或1ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。3、答：因为营养琼脂温度假设温度高于461，容易将验样中的菌烫死；假设温度低于461，那么营养琼脂会凝固，影响培养效果。4、答：革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： 1涂片固定。 2草酸铵结晶紫染1分钟。 3自来水冲洗。 4加碘液覆盖涂面染3分钟。 5水洗，用吸

5、水纸吸去水分。 6加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。 7蕃红梁色液稀染10秒钟后，自来水冲洗。枯燥，镜检。 染色的结果，革兰氏正反响菌体都呈紫色，负反响菌体都呈红色。5、答：因为乳糖胆盐发酵管中的成分有溴甲酚紫，中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色，如果颜色不变呈蓝紫色，说明无产酸的大肠菌群；如果颜色变黄色，说明可能出现能分解乳糖产酸的大肠菌群；胆盐可以抑制其它细菌生长繁殖；看杜氏小管中是否有气体，判断是否为分解乳糖产酸产气的大肠菌群。6、答：检验的稀释 乳糖发酵试验 证实证验EC肉汤发酵 伊红美蓝培养基 革兰氏染色 结果评定7、答：食品中沙门氏菌的检验方法有五个根本步骤：

6、1前增菌；2选择性增菌；3选择性平板别离沙门氏菌；4生化试验，鉴定到属；5血清学分型鉴定。8、答：三糖铁琼脂斜面培养基含有1葡萄糖作为发酵基质，且以酚红作为酸碱指示剂，如培养基由橘红转为黄色，表示有糖类发酵。测试时使用接种针先穿刺至底部，而后于斜面作划线接种，经培养18-24小时后，依情况判断糖类之发酵情形。可能为沙门氏菌的反响结果为： 1斜面碱性红色-底部呈黑色产气或不产气产气时会造成琼脂裂开：表示仅葡萄糖发酵。因微生物优先分解葡萄糖产酸，使培养基变黄，但因葡萄糖含量低，于斜面产生之微量酸立即氧化而呈碱性反响，同时培养基中的蛋白质也随之利用而产碱，所以斜面外表为红色；三糖铁琼脂培养基中亦含有

7、硫代硫酸钠作为产生硫化氢之基质，且含硫酸亚铁作为检测此无色产物之指示剂，经接种培养后，假设微生物有硫化氢产生，会与亚铁离子作用生成不溶性硫化亚铁之沉淀，进而使培养基变黑。9、答：食品中志贺氏菌的检验方法有五个根本步骤：1增菌培养；2别离培养；3初步生化试验；4血清学分型；5进一步生化试验。10、答：志贺氏菌在三糖铁琼脂上生长的现象：1斜面产碱仍为红色或粉红色；2底层产酸不产气，变黄色；3不产H2S，不出现黑色。志贺氏菌在葡萄糖半固体培养基上生长的现象：沿线生长，无动力。出现这些现象的原因是：志贺氏菌的生化反响特点是乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气(福氏志贺氏菌6型可产生少量气体)，无动力。1

8、1、答：1葡萄糖铵：阳性者斜面上有正常大小的菌落生长，阴性者不生长或生长极微小的菌落。2西蒙氏柠檬酸盐：阳性者斜面上菌落生长，培养基由绿色转为蓝色，阴性者不生长。3赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶：阳性者为紫色，阴性者为黄色。4pH7.2尿素：阳性者为红色，阴性者为黄色。5KCN：浑浊为阳性，澄清为阴性。6水杨苷和七叶苷：阳性者产气。12、答：金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金黄色，有时也为白色，大而突出、圆形、不透明、外表光滑，周围有溶血圈。在B-P琼脂平板上菌落呈圆形，外表光滑、凸起、湿润，直径23 mm。灰黑色至黑色，有光泽，常有浅色非白色的边缘，周围绕以不透明圈 沉淀，其外常有一清晰带。当用

9、接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。 13、答：吸取1:4新鲜兔血浆0.5 mL，放入小试管中，再参加培养24 h的金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤培养物0.5 mL振荡摇匀，置 361温箱或水浴内，每半小时观察一次，观察6 h，如呈现凝固,即将试管倒置或 倾斜时，呈现凝块者，被认为阳性结果。同时以阳性和阴性葡萄球菌株及肉汤作为对照。14、答：1形态与染色a、呈球形或卵圆形，直径0.5um-1um 链状排列长短不一。b、革兰氏染色阳性，衰老培养物常成阴性。c、无芽孢、无鞭毛、多数无夹膜 。2培养特性a、多数为需氧或兼性厌氧，少数为微需氧或专性厌氧。b、对营养要求高，普通培养基不能良好生长，需加血清液、腹

10、水等。c、最适温度37。d、在液体培养基中，溶血菌株,呈絮状或颗粒状沉淀生长上清下浊；不溶血菌球，均匀浑浊生长，如粪链菌。，针尖大小，菌落周围出现溶血环。(3)生化特性a、均分解葡萄糖产酸。b、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。c、能使牛奶产酸而不凝固，不液化明胶、不分解菊糖肺炎球菌分解葡萄糖。d、A群菌对杆菌肽敏感。15、答：1链激酶试验 吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐水，混匀，再参加链球菌18-24h361肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL，混匀，置于361水浴10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用的链激酶阳性的菌株做阳性对照。2杆菌肽敏感试验将分纯的乙型溶血性链球菌接种血平板，在划线处贴附杆菌肽纸片，36，18h，出现抑菌带为阳性，可推测为乙型溶血性链球菌。