公共卫生突发事件样品采集与处理.ppt
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1、公共卫生突发事件样品采集公共卫生突发事件样品采集与处理与处理传染病的分类甲类传染病是指甲类传染病是指甲类传染病是指甲类传染病是指:鼠疫、霍乱鼠疫、霍乱鼠疫、霍乱鼠疫、霍乱。乙类传染病是指:乙类传染病是指:乙类传染病是指:乙类传染病是指:病毒性肝炎、病毒性肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、细菌性和阿米巴性痢疾、细菌性和阿米巴性痢疾、细菌性和阿米巴性痢疾、伤寒和副伤寒、伤寒和副伤寒、伤寒和副伤寒、伤寒和副伤寒、艾滋病、淋病、梅毒、脊髓灰质炎、麻疹、艾滋病、淋病、梅毒、脊髓灰质炎、麻疹、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、
2、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、流行性出血流行性出血热、狂犬病、热、狂犬病、钩端螺旋体病、钩端螺旋体病、钩端螺旋体病、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、布鲁氏菌病、炭疽炭疽炭疽炭疽、流行性、流行性和地方性斑疹伤寒、流行性乙型脑炎、黑热病、疟疾、登和地方性斑疹伤寒、流行性乙型脑炎、黑热病、疟疾、登革热。革热。丙类传染病是指丙类传染病是指丙类传染病是指丙类传染病是指:肺结核、血吸虫病、丝虫病、包虫病、:肺结核、血吸虫病、丝虫病、包虫病、麻风病、流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹、新生儿破伤麻风病、流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹、新生儿破伤风、急性出血性结膜炎、风、急性出血性结膜炎、除霍乱、痢疾、伤寒和
3、副伤寒以除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻外的感染性腹泻外的感染性腹泻外的感染性腹泻病。病。病。病。凡凡所所取取材材料料均均应应保保存存于于灭灭菌菌器器皿皿内内;组组织织块块可可保保存存于于灭灭菌菌生生理理盐盐水水中中,或或用用510510mLmLBrokeBroke氏氏液液保保存存;亦亦可可应应用用CaryCaryBleirBleir培培养养基基保存运送材料。容器用石蜡密封。保存运送材料。容器用石蜡密封。1 1、检材应包装严密,保存场所适宜,保存温度不高于、检材应包装严密,保存场所适宜,保存温度不高于442 2、准确详细填写送检
4、单。、准确详细填写送检单。3 3、指指派派二二名名人人员员(其其中中一一名名专专业业人人员员),乘乘快快速速交交通通工工具具送送检检材材。直接送达负责该地区检验工作的专业实验室。直接送达负责该地区检验工作的专业实验室。4 4、接交材料时首先检查包装,绝对不能有破损、污染,如有破损应、接交材料时首先检查包装,绝对不能有破损、污染,如有破损应立即消毒并报告有关单位处理。材料接交按清单点清种类、数量,并立即消毒并报告有关单位处理。材料接交按清单点清种类、数量,并准确记录签字。准确记录签字。应在调查范围内选择有代表性地段捕获所需动物并同时在应在调查范围内选择有代表性地段捕获所需动物并同时在全范围内收集
5、自毙动物送检。全范围内收集自毙动物送检。取材方法取材方法取材方法取材方法:将获得的全部应检动物分类编号登记,单只装:将获得的全部应检动物分类编号登记,单只装入小布袋内,活动物处死后,拣净体外寄生虫,进行动物分类入小布袋内,活动物处死后,拣净体外寄生虫,进行动物分类鉴定,然后按下述方法剖检。鉴定,然后按下述方法剖检。自毙、染病萎糜动物自毙、染病萎糜动物自毙、染病萎糜动物自毙、染病萎糜动物:按常规方法解剖后,分别观察腺、:按常规方法解剖后,分别观察腺、肝、脾、肺、心等有无病变,并取相应材料作细菌学检查,使肝、脾、肺、心等有无病变,并取相应材料作细菌学检查,使用的器械每用一次,必须进行检查。用的器械
6、每用一次,必须进行检查。腐败动物:腐败动物:腐败动物:腐败动物:多采取骨髓和脑组织作检查。多采取骨髓和脑组织作检查。(二)动物材料的采集(二)动物材料的采集昆虫材料包括:昆虫材料包括:昆虫材料包括:昆虫材料包括:蚤类、蜱类、螨类、虱子等,以蚤类为重点。蚤类、蜱类、螨类、虱子等,以蚤类为重点。蚤的采集:蚤的采集:蚤的采集:蚤的采集:动物体蚤的采集:动物体蚤的采集:动物体蚤的采集:动物体蚤的采集:收集的体蚤及其他昆虫,拣入装有收集的体蚤及其他昆虫,拣入装有0.510-50.510-5龙胆龙胆紫、紫、2%2%盐水的小瓶内,注明寄主、采集地点、采集日期。盐水的小瓶内,注明寄主、采集地点、采集日期。洞道
7、蚤的采集:用顶端固定白色法兰绒或毛巾的探蚤棒收集,洞道蚤的采集:用顶端固定白色法兰绒或毛巾的探蚤棒收集,巢穴蚤的采集:巢穴蚤的采集:巢穴蚤的采集:巢穴蚤的采集:主要靠挖掘穴内的窝巢及表层泥土而获得。必须一主要靠挖掘穴内的窝巢及表层泥土而获得。必须一巢装一袋,然后放入大白搪瓷盆内检蚤,收集的蚤分装并登记。巢装一袋,然后放入大白搪瓷盆内检蚤,收集的蚤分装并登记。地面游离蚤的采集:地面游离蚤的采集:地面游离蚤的采集:地面游离蚤的采集:常用粘蚤纸收集,将粘蚤纸按要求放在房屋地常用粘蚤纸收集,将粘蚤纸按要求放在房屋地面的一定位置,昏置晨查,搜集蚤纸上的蚤类,分装并登记。面的一定位置,昏置晨查,搜集蚤纸上
8、的蚤类,分装并登记。将以上收集的蚤类进行分类鉴定并进行细菌学检验。将以上收集的蚤类进行分类鉴定并进行细菌学检验。昆虫材料的采集昆虫材料的采集(三)鼠疫细菌检验基本要求与处理(三)鼠疫细菌检验基本要求与处理qq鼠疫细菌检验必须在专用实验室内进行。鼠疫细菌检验必须在专用实验室内进行。qq检检验验人人员员必必须须事事前前熟熟悉悉实实验验室室管管理理制制度度,自自身身防防护护制制度度,技术操作规程等。技术操作规程等。qq凡进入毒菌室操作,必须两人以上同时工作。凡进入毒菌室操作,必须两人以上同时工作。qq及时准确做好检验的各项实验记录。及时准确做好检验的各项实验记录。动物接种 病病人人、尸尸体体材材料料
9、,特特别别是是腐腐败败材材料料必必须须在在进进行行细细菌菌培培养养的的同同时时接接种种小小白白鼠(鼠(18201820g g)或豚鼠(或豚鼠(250300250300g g)脏脏器器块块,置置于于消消毒毒乳乳钵钵内内,用用灭灭菌菌剪剪刀刀剪剪碎碎并并研研成成匀匀浆浆,加加入入适适量量生生理理盐水,制成悬液备用。盐水,制成悬液备用。新新鲜鲜材材料料可可用用腹腹腔腔或或皮皮下下接接种种,豚豚鼠鼠接接种种0.51.00.51.0mLmL,小小白白鼠鼠接接种种0.20.40.20.4MlMl。腐腐败败材材料料可可采采用用经经皮皮接接种种,剃剃去去动动物物腹腹毛毛,并并造造成成轻轻微微划划痕痕,将将材材
10、料料以以棉棉拭拭子子涂涂布布于于剃剃毛毛之之皮皮肤肤上上并并擦擦之之,涂涂擦擦时时应应以以平平皿皿盖盖掩掩盖盖,以以防防材材料料四溅。四溅。接接种种实实验验动动物物后后,做做好好标标记记,放放入入饲饲养养笼笼内内,挂挂牌牌记记载载编编号号、接接种种日日期期、途径等。每日饲养途径等。每日饲养1212次,直到动物死亡或经次,直到动物死亡或经7 7d d后杀死剖检。后杀死剖检。如如7 7d d动物没有死亡,应处死动物,取动物的脾脏及有可疑病变组织制成动物没有死亡,应处死动物,取动物的脾脏及有可疑病变组织制成匀浆,接种第匀浆,接种第2 2组动物,动物死亡或观察组动物,动物死亡或观察7 7d d后处死,
11、同时采集血清,做后处死,同时采集血清,做被动血凝试验。无阳性发现方可做出阴性报告。被动血凝试验。无阳性发现方可做出阴性报告。二、猩红热二、猩红热 是是由由A A组组链链球球菌菌引引起起的的急急性性呼呼吸吸道道传传染染病病,常常侵侵犯犯515515岁岁儿儿童童,是是儿儿童童常常见见传传染染病病之之一一,少少数数病病人人在在病病后后可可出出现现变变态态反反应应性性心心、肾肾并并发发症症,在在一一定定程程度度上上,影影响响儿儿童童的的身身体体健健康康。是是我我国国乙乙类类的的法法定定传传染染病之一。病之一。A A组链球菌的分离组链球菌的分离组链球菌的分离组链球菌的分离 标本采集:标本采集:标本采集:
12、标本采集:采取咽拭子、伤口炎性分泌物等标本采取咽拭子、伤口炎性分泌物等标本 分离培养:分离培养:分离培养:分离培养:可直接草线接种血琼脂平板进行分离培养。观察菌落形可直接草线接种血琼脂平板进行分离培养。观察菌落形态及溶血现象,形成灰白色、透明或不透明、表现光滑、有乳光、态及溶血现象,形成灰白色、透明或不透明、表现光滑、有乳光、直接直接0.50.750.50.75mmmm,圆形突起的小菌落,菌落周围形成圆形突起的小菌落,菌落周围形成2424mmmm宽、界宽、界限分明、完全透明的溶血环。进一步涂片行革兰染色,证实为呈链限分明、完全透明的溶血环。进一步涂片行革兰染色,证实为呈链状排列的革兰阳性球菌,
13、菌呈圆形或卵圆形,直接状排列的革兰阳性球菌,菌呈圆形或卵圆形,直接0.51.00.51.0mm,链状链状排列,长短不一。分纯后进一步鉴定。排列,长短不一。分纯后进一步鉴定。三、钩端螺旋体病三、钩端螺旋体病qqq钩端螺旋体病钩端螺旋体病钩端螺旋体病钩端螺旋体病钩端螺旋体病钩端螺旋体病是由钩端螺旋体属的不同血清型是由钩端螺旋体属的不同血清型是由钩端螺旋体属的不同血清型致病性钩端螺旋体(致病性钩端螺旋体(致病性钩端螺旋体(LeptospiraLeptospiraLeptospira interrogansinterrogansinterrogans)引起的引起的引起的一种人兽共患病。它广泛分布于全世
14、界,我国本病一种人兽共患病。它广泛分布于全世界,我国本病一种人兽共患病。它广泛分布于全世界,我国本病危害严重。由于钩端螺旋体侵犯人的多种脏器,所危害严重。由于钩端螺旋体侵犯人的多种脏器,所危害严重。由于钩端螺旋体侵犯人的多种脏器,所以临床表现复杂。全年均有病人发生,但常在夏秋以临床表现复杂。全年均有病人发生,但常在夏秋以临床表现复杂。全年均有病人发生,但常在夏秋季、稻田收割季节和洪涝害引起发病和流行。人普季、稻田收割季节和洪涝害引起发病和流行。人普季、稻田收割季节和洪涝害引起发病和流行。人普通对本病易感。以青壮年发病较多。通对本病易感。以青壮年发病较多。通对本病易感。以青壮年发病较多。1、钩端
15、螺旋体直接镜检和分离病人血液的直接镜检病人血液的直接镜检取取早早期期病病人人血血一一滴滴,加加蒸蒸馏馏水水一一滴滴,使使血血细细胞胞溶溶解解,在在暗暗视视野野显显微镜下检查有否活动的钩端螺旋体。微镜下检查有否活动的钩端螺旋体。取取早早期期病病人人静静脉脉血血1212mLmL于于无无菌菌试试管管中中待待凝凝固固。离离心心沉沉淀淀,吸吸取取血血清清与与血血细细胞胞交交界界处处略略显显白白色色的的悬悬液液。涂涂片片后后暗暗视视野野显显微微镜镜检检查查有否活动的钩端螺旋体。有否活动的钩端螺旋体。差速离心暗视野检查法:采集早期病人静脉血差速离心暗视野检查法:采集早期病人静脉血1 1mLmL,加于含加于含
16、2 2mLmL枸枸橼酸钠盐水管中,橼酸钠盐水管中,10001000r/minr/min离心离心1010minmin,吸上层血浆置另一清洁管吸上层血浆置另一清洁管中,中,3000350030003500r/minr/min离心离心30603060minmin。弃上清,取沉淀物一滴于玻片弃上清,取沉淀物一滴于玻片上,暗视野显微镜检查有否活动的钩端螺旋体上,暗视野显微镜检查有否活动的钩端螺旋体 2、培养分离病原体病病人人血血液液、尿尿液液培培养养:采采集集早早期期病病人人血血液液,无无菌菌操操作作接接种种于于2323管管KorthofKorthof培培养养基基中中,每每管管接接种种1313滴滴。血血
17、培培养养管管置置2828培培养养。每每隔隔5757d d取取培培养养物物暗暗视视野野显显微微镜镜下下观观察察有有无无钩钩端端螺螺 旋旋体体生生长长,若若有有生生长长,即即为为分分离离阳阳性性。若若未未见见生生长长,需需继继续续培培养养6060d d,仍仍不不见见钩钩端端螺螺旋体方作阴性处理。旋体方作阴性处理。接接 取取 病病 后后 两两 周周 以以 上上 的的 病病 人人 中中 段段 尿尿 30503050mLmL于于 无无 菌菌 离离 心心 管管 中中3500400035004000r/minr/min离离心心1 1h h。取取沉沉渣渣染染,可可在在采采集集尿尿标标本本的的前前一一天天晚晚上
18、上给给病病人人服服碳碳酸酸氢氢钠钠(NaHCONaHCO3 3)24g24g,同同时时,在在培培养养基基中中加加入入100400100400g/mL5-g/mL5-氟脲嘧啶或氟脲嘧啶或1/20001/2000的磺胺嘧啶。的磺胺嘧啶。病人血液、尿液接种金黄地鼠或幼龄豚鼠(体重病人血液、尿液接种金黄地鼠或幼龄豚鼠(体重120140120140g g之间)。之间)。菌株分群,分型鉴定:应用分群血清与新分离的钩端螺旋体作凝菌株分群,分型鉴定:应用分群血清与新分离的钩端螺旋体作凝集试验,确定菌群。应用交叉凝集素吸收试验或分型因子血清来集试验,确定菌群。应用交叉凝集素吸收试验或分型因子血清来确定菌型。确定
19、菌型。四、白四、白 喉喉qqq 白喉白喉白喉白喉白喉白喉是由白喉杆菌引起的急性呼吸道传染病。其是由白喉杆菌引起的急性呼吸道传染病。其是由白喉杆菌引起的急性呼吸道传染病。其感染特征为咽、喉、鼻部等处粘膜充血,肿胀并有灰白感染特征为咽、喉、鼻部等处粘膜充血,肿胀并有灰白感染特征为咽、喉、鼻部等处粘膜充血,肿胀并有灰白色假膜形成,以及细菌外毒素引起的全身中毒症状,严色假膜形成,以及细菌外毒素引起的全身中毒症状,严色假膜形成,以及细菌外毒素引起的全身中毒症状,严重者常合并心肌炎和末梢神经麻痹。由于白喉菌苗(百重者常合并心肌炎和末梢神经麻痹。由于白喉菌苗(百重者常合并心肌炎和末梢神经麻痹。由于白喉菌苗(
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