凝集反应课件听课.ppt
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1、凝集反应课件听课凝集反应课件听课概述概述一、定义一、定义凝集反应是指凝集反应是指颗粒性抗原颗粒性抗原(细菌、红细胞)(细菌、红细胞)或附着或附着在载体上的可溶性抗原在载体上的可溶性抗原(或抗体或抗体)与与相应的相应的抗体(或抗原)抗体(或抗原)在适量的电解质存在适量的电解质存在的条件下,经一定时间后凝聚成在的条件下,经一定时间后凝聚成肉眼可肉眼可见的凝集物见的凝集物。参加反应的抗原称为凝集原参加反应的抗原称为凝集原,抗体称为凝集素。抗体称为凝集素。ABO血型鉴定血血 型型 系系 统统 实验原理标准抗标准抗A血清血清含含抗抗凝集素凝集素使型、使型、AB型红细胞的凝集原凝集型红细胞的凝集原凝集含含
2、抗抗凝集素凝集素使型、使型、AB型红细胞的凝集原凝集型红细胞的凝集原凝集标准抗标准抗B血清血清实验步骤1、标记玻片:取洁净玻片一张,用笔在玻片两端分别标明 A BBA2、滴加血请:在玻片A B两端分别滴加标准抗A 和抗B血清各一滴。抗A抗体抗B抗体3、消毒取血 用无菌棉签蘸取消毒液消毒液,消毒左手无名左手无名指指腹指指腹皮肤,用消毒采血针垂直刺入消毒皮肤处取血各一滴分别涂于玻片的标准抗A血清和标准抗B血清中,分别分别用用牙牙签签将其将其混匀混匀4、观察结果静置静置1015分钟后用肉眼观察有无凝集现象。结果判断A型标准抗A血清标准抗血清根据有无凝集现象判定血型根据有无凝集现象判定血型B型AB型O
3、型方法评价方法评价:定性试验定性试验简便和快速简便和快速敏感度低敏感度低临床应用临床应用:菌种鉴定菌种鉴定血清学分型血清学分型血型鉴定血型鉴定试管凝集试验定量抗原(已知)定量抗原(已知)+系列稀释抗体系列稀释抗体(待检血清)(待检血清)不同程度的凝集反应(阳性)不同程度的凝集反应(阳性)确定抗体的滴度确定抗体的滴度(凝集效价凝集效价)1.实验材料:实验材料:伤寒杆菌伤寒杆菌O菌液、菌液、待测血清、生理盐水待测血清、生理盐水2.方法:方法:0.50.50.50.50.50.50.50.50.51:201:40 1:801:160 1:3200.5弃掉弃掉123450.160.9生理盐水生理盐水(
4、ml)待测血清待测血清对照管对照管0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml伤寒杆菌伤寒杆菌O菌液菌液0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml抗体稀释度抗体稀释度彻底混匀彻底混匀56,1h4.预期结果预期结果+很小的凝集颗粒很小的凝集颗粒混浊混浊-无凝集现象无凝集现象与对照相同与对照相同+小、部分凝集块小、部分凝集块中等混浊中等混浊+大多凝集管底大多凝集管底轻度混浊轻度混浊+大的凝集块大的凝集块清亮清亮凝集程度凝集程度沉淀沉淀上清上清管底沉淀管底沉淀凝集程度凝集程度 最高稀释比例最高稀释比例 待测血清的滴度待测血清的滴度方法评价:方法评价:半定量试验半定量试验简便、
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