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1、医院医院(yyun)(yyun)消毒灭菌的效果监测消毒灭菌的效果监测 河北河北(h bi)(h bi)医科大学第二医院医科大学第二医院 史利克史利克第一页,共六十九页。l 一、前言一、前言:l 1.医医院院消消毒毒是是预预防防医医院院内内感感染染的的重重要措施要措施(cush)之一之一l 2.消毒效果的监测是评价消毒效果的监测是评价l 3.消毒设备运转是否正常消毒设备运转是否正常l 4.消毒药剂是否有效消毒药剂是否有效l 5.消毒方法是否合理消毒方法是否合理l 6.消毒效果是否达标的唯一手段消毒效果是否达标的唯一手段第二页,共六十九页。医院消毒效果监测医院消毒效果监测(jin c)(jin c
2、)(jin c)(jin c)时需遵循以下原时需遵循以下原则则 l 监监测测人人员员需需经经过过专专业业培培训训,掌掌握一定的消毒知识;握一定的消毒知识;l 熟悉消毒设备和药剂性能熟悉消毒设备和药剂性能;l 具备熟练具备熟练(shlin)的检验技能的检验技能;l 选选择择合合理理的的采采样样时时间间(消消毒毒后后、使用前使用前);l 遵循严格的无菌操作。遵循严格的无菌操作。第三页,共六十九页。二、热力灭菌效果二、热力灭菌效果(xiogu)(xiogu)的监测方的监测方法法 l(一(一)压力蒸汽灭菌效果监测方法压力蒸汽灭菌效果监测方法l 1 1、化学监测法、化学监测法:l 化学指示卡化学指示卡(
3、管管)监测方法监测方法l 既既能能指指示示蒸蒸汽汽温温度度,又又能能指指示示温温度度持持续时间续时间l 化化学学指指示示管管(卡卡)放放入入大大包包和和难难以以消消毒毒(xio d)(xio d)部位部位的的物品包中央物品包中央l (旧旧版版消消毒毒技技术术规规范范是是放放入入每每一一待待灭灭菌的物品包中央)菌的物品包中央)第四页,共六十九页。l 化学指示胶带化学指示胶带(jiodi)监测法:监测法:l 将将化化学学指指示示胶胶带带粘粘贴贴于于每每一一待灭菌物品包外待灭菌物品包外第五页,共六十九页。BD试验试验(shyn)(shyn)l 对预真空和脉动真空压力蒸汽对预真空和脉动真空压力蒸汽(z
4、hn q)灭菌,每日进行一次灭菌,每日进行一次B-D试验。试验。l 设计原理设计原理l a.使实验包成为灭菌器内残留空气使实验包成为灭菌器内残留空气的聚焦点,它相对较大的面积和可透气的聚焦点,它相对较大的面积和可透气布料易吸附、布料易吸附、“捕捉捕捉”残留空气。残留空气。l b.真空测试图上的化学试剂对残留空真空测试图上的化学试剂对残留空气具有敏感性。气具有敏感性。第六页,共六十九页。第七页,共六十九页。第八页,共六十九页。BD试验试验(shyn)(shyn)方法方法l 将测试图置于实验包中间位置;将测试图置于实验包中间位置;l 然后然后(rnhu),将实验包放于灭菌,将实验包放于灭菌器室内排
5、气口处,关闭柜门;器室内排气口处,关闭柜门;l 进行进行1345分钟灭菌处理完分钟灭菌处理完毕,打开柜门,观察测试结果。毕,打开柜门,观察测试结果。第九页,共六十九页。BD实验实验(shyn)(shyn)包的制备包的制备l 实验包由实验包由4650cm8090cm纯棉布纯棉布巾组成,布巾先横折为三层,再纵折成六巾组成,布巾先横折为三层,再纵折成六层。将折好的布巾一条摞一条至层。将折好的布巾一条摞一条至25cm高度。高度。摞放时,各层布巾按折叠侧左右交替摆好,摞放时,各层布巾按折叠侧左右交替摆好,以使两侧厚度相等以使两侧厚度相等(xingdng)。布巾摆好后,将真。布巾摆好后,将真空测试图夹放于
6、中央布巾之间,然后用布包空测试图夹放于中央布巾之间,然后用布包巾包好,外面用化学指示胶带固定好,成为巾包好,外面用化学指示胶带固定好,成为一个实验包。整个实验包的大小高约一个实验包。整个实验包的大小高约25cm,宽约宽约23cm,长约长约27cm,重约重约5kg。第十页,共六十九页。BD实验(shyn)(shyn)条件l 实验规定在实验规定在134蒸汽条件下,蒸汽条件下,使用使用3.5分钟观察结果分钟观察结果(ji gu),最长不超,最长不超4分钟。分钟。l 测试图必须夹放于布包的中央测试图必须夹放于布包的中央层位置。层位置。l 实验包放在灭菌器底层,靠近实验包放在灭菌器底层,靠近柜门与排气口
7、处。柜门与排气口处。l 实验在每天第一次灭菌前空锅实验在每天第一次灭菌前空锅进行。进行。第十一页,共六十九页。结果结果(ji gu)(ji gu)判断判断l结果判断结果判断合格:合格:测试图变黑且均匀,即中央部分测试图变黑且均匀,即中央部分和边缘部分颜色一致,表示灭菌器抽和边缘部分颜色一致,表示灭菌器抽真空系统良好。真空系统良好。不合格:不合格:测试图变色不均匀,通常中央测试图变色不均匀,通常中央比边缘部分颜色浅,表示空气排除不比边缘部分颜色浅,表示空气排除不彻底彻底(chd),须检查、修理后使用,须检查、修理后使用.第十二页,共六十九页。B-D测试失败测试失败(shbi)(shbi)原因分析
8、原因分析l真空泵效果下降真空泵效果下降l自控系统失灵自控系统失灵,抽气时间缩短抽气时间缩短l柜室密封性能下降柜室密封性能下降,不能维持规定的负压不能维持规定的负压(f y)(f y)l空气起始温度低空气起始温度低,重力作用明显重力作用明显l送入蒸汽动能偏高送入蒸汽动能偏高,将过多的空气挤入试验包将过多的空气挤入试验包l试验包与柜室容量相比过小试验包与柜室容量相比过小,产生小装量效应产生小装量效应lB-D试验未按规定进行试验未按规定进行第十三页,共六十九页。2 2、生物、生物(shngw)(shngw)(shngw)(shngw)监测法监测法 指指示示菌菌株株:指指示示菌菌株株为为耐耐热热(na
9、i(nai r)r)的的嗜嗜热热脂脂肪肪杆杆菌菌芽芽孢孢(ATCC ATCC 79537953或或SSIK SSIK 3131株株),菌菌 片片 含含 菌菌 量量 为为 5.5.Ol0Ol05 5cfu/cfu/片片5.5.Ol0Ol06 6cfucfu片片,在在121121O.5O.5条条件件下下,D D值值(杀杀 灭灭 90%90%微微 生生 物物 所所 需需 时时 间间)为为1.31.3min1.9minmin1.9min,杀杀灭灭时时间间(KTKT值值)19)19minmin,存活时间存活时间(STST值值)为为3.93.9minmin。培培养养基基:试试验验用用培培养养基基为为溴溴甲
10、甲酚酚紫紫葡萄糖蛋白胨水培养基。葡萄糖蛋白胨水培养基。第十四页,共六十九页。检测检测(jin c)(jin c)(jin c)(jin c)方法方法l 将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入灭菌小纸袋内,置于标准试验包中心灭菌小纸袋内,置于标准试验包中心(zhngxn)(zhngxn)部部位。位。l 在下排气压力蒸汽灭菌柜室内,排气在下排气压力蒸汽灭菌柜室内,排气口上方放置一个标准试验包口上方放置一个标准试验包(由由3 3件平纹长件平纹长袖手术衣,袖手术衣,4 4块小手术巾,块小手术巾,2 2块中手术巾,块中手术巾,1 1块大毛巾,块大毛巾,3030块块lOcml
11、Ocm 8lOcmlOcm 8层纱布敷层纱布敷料包裹成料包裹成(25(25cm30cm30cmcm30cm30cm大小大小)。第十五页,共六十九页。预真空和脉动真空压力预真空和脉动真空压力(yl)(yl)蒸汽蒸汽灭菌器灭菌器 预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内,排气门上方放置一个器灭菌柜室内,排气门上方放置一个标准测试包标准测试包(由由16条全棉手术巾条全棉手术巾4lcm66cm,将每条手术巾的长边先将每条手术巾的长边先折成折成3层,短边折成层,短边折成2层然后层然后(rnhu)叠放,叠放,作成作成23cm23cml5cm大小的测试包大小的测试包)。第十六页,
12、共六十九页。手提压力手提压力(yl)(yl)蒸汽灭菌器蒸汽灭菌器 l 手手提提压压力力蒸蒸汽汽灭灭菌菌器器用用通通气气贮贮物物盒盒(22cml3cm6cm)代代替替标标准准试试验验包包,盒盒内内盛盛满满中中试试管管,指指示示菌菌片片放放于于中中心心(zhngxn)部部位位的的两两只只灭灭菌菌试试管管内内(试试管管口口用用灭灭菌菌牛牛皮皮纸纸包包封封),将将贮贮物物盒盒平平放放于于手手提提压压力蒸汽灭菌器底部。力蒸汽灭菌器底部。第十七页,共六十九页。检测检测(jin c)(jin c)方法方法l 经经一一个个灭灭菌菌周周期期后后,在在无无菌菌条条件件下下,取取出出标标准准试试验验包包或或通通气气
13、贮贮物物盒盒中中的的指指示示菌菌片片,投投入入溴溴甲甲酚酚紫紫葡葡萄萄 糖糖 蛋蛋 白白 胨胨 水水 培培 养养 基基 中中,经经561561培培养养7 7d(d(自自含含式式生生物物指指示示物物按按说说明明书书执执行行),观观察察培培养养基基颜颜色色变变化化(binhu)(binhu)。检检测测时时设设阴阴性性对对照照和和阳阳性性对照。对照。第十八页,共六十九页。快速检测快速检测(24小时小时(xiosh)(xiosh)出结果出结果)第十九页,共六十九页。结果结果(ji gu)(ji gu)(ji gu)(ji gu)判定判定 l 每每个个指指示示菌菌片片接接种种的的溴溴甲甲酚酚紫紫蛋蛋白白
14、胨胨水水培培养养基基都都不不变变色色,判判定定为为灭灭菌菌(mi(mi jn)jn)合合格格:指指示示菌菌片片之之一一接接种种的的溴溴甲甲酚酚紫紫蛋蛋白白胨胨水水培培养养基基,由由紫紫色色变变为为黄黄色色时时,则灭菌则灭菌(mi jn)(mi jn)过程不合格。过程不合格。l 注注意意事事项项:监监测测所所用用菌菌片片须须经经卫卫生生部部认认可可,并并在在有有效效期期内内使使用用,生生物物指指示示物监测应物监测应1 1月月1 1次。次。第二十页,共六十九页。、干热灭菌效果监测、干热灭菌效果监测(jin c)(jin c)(jin c)(jin c)方法方法 l 1 1、化学检测法、化学检测法l
15、 检测方法:检测方法:将既能指示温度又能指将既能指示温度又能指示温度持续时间的化学指示剂示温度持续时间的化学指示剂3 3个个5 5个分个分别放入待灭菌的物品中,并置于灭菌器最别放入待灭菌的物品中,并置于灭菌器最难达到灭菌的部位。经一个难达到灭菌的部位。经一个(y)(y)灭菌周期后,灭菌周期后,取出化学指示剂,据其颜色及性状的改变取出化学指示剂,据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。判断是否达到灭菌条件。第二十一页,共六十九页。结果结果(ji gu)(ji gu)判定判定 l 检测时,所放置检测时,所放置(fngzh)的指示管的指示管的颜色及性状均变至规定的条件,的颜色及性状均变至规定的条件
16、,则判为达到灭菌条件;若其中之一则判为达到灭菌条件;若其中之一未达到规定的条件,则判为未达到未达到规定的条件,则判为未达到灭菌条件。灭菌条件。第二十二页,共六十九页。2 2、物理、物理(wl)(wl)(wl)(wl)检测法:检测法:(热电偶检测热电偶检测法法)l 检检测测方方法法:检检测测时时,将将多多点点温温度度检检测测仪仪的的多多个个探探头头(tn tu)分分别别放放于于灭灭菌菌器器各各层层内内、中中、外外各各点点。关关好好柜柜门门,将将导导线线引引出出,由记录仪中观察温度上升与持续时间。由记录仪中观察温度上升与持续时间。l 结果判定:结果判定:若所示温度若所示温度(曲线曲线)达到达到顶置
17、温度,则灭菌温度合格。顶置温度,则灭菌温度合格。第二十三页,共六十九页。生物生物(shngw)(shngw)(shngw)(shngw)检测法检测法 l 指指示示菌菌株株:枯枯草草杆杆菌菌黑黑色色变变种种芽芽孢孢(ATCC9372)ATCC9372),菌菌片片含含菌菌量量为为5.0105.0105 5cfu/cfu/片片5.0105.0106 6cfu/cfu/片。其抗力要求同上。片。其抗力要求同上。l 检测检测(jin c)(jin c)方法:方法:将枯草杆菌芽孢菌将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌中试管内片分别装入灭菌中试管内(1(1片片/管管)。灭。灭菌器与每层门把手对角线内,外角处放菌器与
18、每层门把手对角线内,外角处放置置2 2个含菌片的试管,试管帽置于试管旁,个含菌片的试管,试管帽置于试管旁,关好柜门,经一个灭菌周期后,待温度关好柜门,经一个灭菌周期后,待温度降至降至8080时,加盖试管帽后取出试管。时,加盖试管帽后取出试管。第二十四页,共六十九页。l在在无无菌菌条条件件下下 ,加加入入普普通通营营养养肉肉汤汤培培养养基基(5(5mlml管管),以以361361培培养养4848h h,观观察察初初步步结果结果(ji gu)(ji gu),无菌生长管继续培养至第七日。,无菌生长管继续培养至第七日。l 结结果果判判定定:若若每每个个指指示示菌菌片片接接种种的的肉肉汤汤管管均均澄澄清
19、清,判判为为灭灭菌菌合合格格,若若指指示示菌菌片片之之一一接种的肉汤管混浊,判为不合格。接种的肉汤管混浊,判为不合格。l对难以判定的肉汤管,取对难以判定的肉汤管,取o o1ml1ml接种于营养接种于营养琼脂甲板,用灭菌琼脂甲板,用灭菌L L棒涂匀,放棒涂匀,放361361培培养养4848h h,观察菌落形态,并做涂片染色镜检,观察菌落形态,并做涂片染色镜检,判断是否有指示菌生长,若有指示菌生长,判断是否有指示菌生长,若有指示菌生长,判为灭菌不合格;若无指示菌生长,判为灭判为灭菌不合格;若无指示菌生长,判为灭菌合格。菌合格。第二十五页,共六十九页。三、环氧乙烷三、环氧乙烷(EO)灭菌灭菌(mi
20、jn)(mi jn)效果监效果监测测l 灭菌效果监测灭菌效果监测l 每次每次灭菌均应进行程序监测灭菌均应进行程序监测l 每每个个灭灭菌菌物物品品的的外外包包装装应应粘粘贴贴包包外外化化学学指指示示胶胶带带,作作为为灭灭菌菌过过程程的的标标志志;包包内内放放置置化化学学指指示示卡卡,作作为为灭灭菌菌效效果果的的参考。参考。l 每月每月应做生物监测,移植物必须等生应做生物监测,移植物必须等生物监测结果为阴性物监测结果为阴性(ynxng)时方可使用。时方可使用。第二十六页,共六十九页。第二十七页,共六十九页。第二十八页,共六十九页。生物生物(shngw)(shngw)(shngw)(shngw)指示
21、物监测法指示物监测法 l 一一般般每每月月用用生生物物指指示示物物监监测测(jin(jin c)c)一一次次。生生物物指指示示物物用用枯枯草草杆杆菌菌黑黑色色变变种种芽芽孢孢(ATCC9372)ATCC9372),抗抗力力要要求求为为:菌菌量量在在5105105 5cfucfu片片5105106 6cfucfu片片,在在环环氧氧乙乙烷烷剂剂量量为为600600mgmgL30mg/LL30mg/L,作作用用温温度度为为542542,相相对对湿湿度度为为60601010条条件件下下,其其杀杀灭灭9090该该微微生生物物的的D D值值为为2.62.6minmin5.8min5.8min,存存活时间应
22、活时间应7.87.8minmin,死亡时间应死亡时间应5858minmin。第二十九页,共六十九页。生物生物(shngw)(shngw)指示剂的要求指示剂的要求l 菌菌量量为为5105103 3cfucfu片片5105104 4cfucfu片片。通通常做常采用以下数量的生物指示物较为适宜:常做常采用以下数量的生物指示物较为适宜:l 灭灭菌菌器器柜柜室室可可用用体体积积小小于于5m3时时,至至少少放置放置10个菌片;个菌片;l 灭灭菌菌器器柜柜室室可可用用体体积积为为5m3至至10m3时时,每增加每增加1m3,增加增加1个菌片;个菌片;l 灭灭菌菌器器柜柜室室可可用用体体积积大大于于10m3时时
23、,每每增增加加2m3,增加增加1个菌片。个菌片。l生生物物指指示示物物应应放放在在那那些些在在性性能能鉴鉴定定(jindng)时时发发现现是是最最难难灭灭菌菌的的部部位位,并并均均匀匀分分布布于于整整个个灭灭菌菌物物品中。品中。第三十页,共六十九页。要求要求(yoqi)(yoqi):每每次次灭灭菌菌都都应应进进行行灭灭菌菌过过程程监监测测(jin c)。l 检检测测所所用用化化学学和和微微生生物物指指示示物物必必须须经卫生部批准,并在有效期内使用。经卫生部批准,并在有效期内使用。第三十一页,共六十九页。四、紫外线消毒效果四、紫外线消毒效果(xiogu)(xiogu)(xiogu)(xiogu)
24、的监测的监测 l 紫外线灯管辐照度值的测定紫外线灯管辐照度值的测定l 1 1、紫外线辐照计测定法:、紫外线辐照计测定法:l 开灯开灯5min后,将测定波长为后,将测定波长为253.7nm的紫外线辐照计探头的紫外线辐照计探头(tn tu)置置于被检紫外线灯下,待仪表稳定后,于被检紫外线灯下,待仪表稳定后,读数。读数。第三十二页,共六十九页。2 2、紫外线强度照射、紫外线强度照射(zhosh)(zhosh)(zhosh)(zhosh)指示卡监指示卡监测法测法l 开开启启紫紫外外线线灯灯5min后后,将将指指示示卡卡置置紫紫外外灯灯下下垂垂直直距距离离lm处处,有有图图案案一一面面朝朝上上,照照射射
25、lmin(紫紫外外线线照照射射后后,图图案案正正中中光光敏敏色色块块由由乳乳白白色色变变成成不不同同程程度度的的淡淡紫紫色色),观观察察指指示示卡卡色色块块的的颜颜色色,将将其其与与标标准准(biozhn)色色块块比比较较,读读出出照照射射强度。强度。第三十三页,共六十九页。3 3、结果、结果(ji gu)(ji gu)(ji gu)(ji gu)判定判定 l 普普通通30w直直管管型型紫紫外外线线灯灯,新新灯灯辐辐照照强强度度90W/cm2为为合合格格;使使用用中中紫紫外外线线灯灯辐辐照照强强度度70W/cm2为为合合格格;30W高高强强度度紫紫外线新灯的辐照强度外线新灯的辐照强度180W/
26、cm2为合格。为合格。l注注意意:测测定定时时电电压压220V5V,温温度度2025,相相对对湿湿度度60%,紫紫外外线线辐辐照照计计必必须须检检定定。指指示示卡卡应应获获得得卫卫生生(wishng)许许可可批件。批件。第三十四页,共六十九页。五、医疗器械灭菌效果五、医疗器械灭菌效果(xiogu)(xiogu)的监的监测测l 无无菌菌检检验验是是检检查查无无菌菌物物品品是是否否无无菌菌的的一种方法。一种方法。l 注意:注意:l 1、无菌检验应在洁净度为无菌检验应在洁净度为100级单级单向流空气区域内进行,应严格遵守无菌向流空气区域内进行,应严格遵守无菌操作,避免微生物污染;对单向流空气操作,避
27、免微生物污染;对单向流空气区域及工作台面,必须进行洁净度验证。区域及工作台面,必须进行洁净度验证。l 2、采样时间采样时间(shjin)在灭菌后,保存有效在灭菌后,保存有效期内。期内。第三十五页,共六十九页。无菌检验无菌检验(jinyn)(jinyn)(jinyn)(jinyn)前准备前准备 l 洗洗脱脱液液与与培培养养基基无无菌菌性性试试验验:无无菌菌试试验验前前3d,于于需需-厌厌养养培培养养基基与与霉霉菌菌培培养养基基内内各各接接种种lml洗洗脱脱液液,分分 别别(fnbi)置置 3035与与 2025培养培养72h,应无菌生长。应无菌生长。第三十六页,共六十九页。小件医疗器械的采样小件
28、医疗器械的采样(ci yn)(ci yn)l 取缝合取缝合(fngh)针、针头、刀针、针头、刀片等小件医疗器械片等小件医疗器械5件直接浸件直接浸入入6管需管需厌氧培养管厌氧培养管(其中一其中一管作阳性对照管作阳性对照)与与4管霉菌培养管霉菌培养管。培养基用量为管。培养基用量为15ml/管。管。第三十七页,共六十九页。注射器采样注射器采样(ci yn)(ci yn)l 取取5付注射器,在付注射器,在5ml洗脱液中反复抽吸洗脱液中反复抽吸5次,洗下管内次,洗下管内(un ni)细菌,混和后接种需细菌,混和后接种需-厌养厌养菌培养管菌培养管(共共6管,其中管,其中1管作阳性对照管作阳性对照)与霉与霉
29、菌培养管菌培养管(共共4管管)。接种量:。接种量:lml注射器为注射器为0.5ml,2ml注射器为注射器为lml,5ml10ml注射器注射器为为2ml,20ml50ml注射器为注射器为5ml。l 培养基用量:培养基用量:接种量为接种量为2ml以下为以下为15ml/管,接种量管,接种量5ml为为40ml/管。管。第三十八页,共六十九页。大件医疗器械的采样大件医疗器械的采样(ci yn)(ci yn)l 手手术术钳钳、镊镊子子等等大大件件医医疗疗器器械械取取2件件用用沾沾有有无无菌菌洗洗脱脱液液的的棉棉拭拭子子反反复复涂涂抹抹采采样样,将将棉棉拭拭子子投投入入5ml无无菌菌洗洗脱脱液液中中,将将采
30、采样样液液混混匀匀,接接种种(jizhng)于于需需厌厌氧氧培培养养管管(共共6管管,其其中中1管管作作阳阳性性对对照照)与与霉霉菌菌培培养养基基(共共4管管)。接接种种(jizhng)量量为为1ml/管,培养基用量为管,培养基用量为15ml/管。管。第三十九页,共六十九页。培养培养(piyng)(piyng)时间时间l 将需将需厌氧培养管以及阳性与阴性厌氧培养管以及阳性与阴性对照管均于对照管均于3035培养培养5d,霉菌培霉菌培养管与阴性对照管于养管与阴性对照管于2025培养培养7d,培养期间逐日检查是否有菌生长。培养期间逐日检查是否有菌生长。l 如加入供试品后培养基出现混浊或如加入供试品后
31、培养基出现混浊或沉淀,经培养后不能从外观判断时,可沉淀,经培养后不能从外观判断时,可取取(kq)培养液转种入另一支相同的培养基培养液转种入另一支相同的培养基中或斜面培养基上,培养中或斜面培养基上,培养48h72h后观察。后观察。第四十页,共六十九页。3 3、注意事项、注意事项 (1)送送检检时时间间不不得得超超过过6h,若若样样品保存于品保存于04,则不得超过,则不得超过24h。(2)被被采采样样本本表表面面积积30m2,设设4角角及中央及中央5点,点,4角的布点部位距墙壁角的布点部位距墙壁lm处。处。l 2、采采样样方方法法:将将普普通通营营养养琼琼脂脂平平板板(直直径径为为9cm)放放在在
32、室室内内各各采采样样点点处处,采采样样高高度度为为距距地地面面1.5m采采样样时时将将平平板板盖盖打打开开,扣放于平板旁,暴露扣放于平板旁,暴露5min,盖好立即送检。盖好立即送检。第四十九页,共六十九页。平板暴露平板暴露(bol)(bol)(bol)(bol)法结果计算公式法结果计算公式 l 细细菌菌总总数数(zngsh)(cfu/m3)=50000N/(AT)l 式中式中A为平板面积为平板面积(cm2);T为平板暴为平板暴露时间露时间(min);N为平均菌落数为平均菌落数(cfu)。第五十页,共六十九页。卫生学标准卫生学标准(biozhn)(biozhn)l I类类区区域域:细细菌菌总总数
33、数(zngsh)10cfu/m3(或或0.2cfu/平平板板),未未检检出出金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、溶血性链球菌为消毒合格;溶血性链球菌为消毒合格;l 类类区区域域:细细菌菌总总数数200cfu/m3(或或4cfu平平板板),未未检检出出金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、溶溶血血性性链链球菌为消毒合格:球菌为消毒合格:l 类类区区域域:细细菌菌总总数数500cfu/m3(或或l0cfu平平板板),未未检检出出金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、溶溶血血性链球菌为消毒合格。性链球菌为消毒合格。第五十一页,共六十九页。注意事项注意事项 l1、在消毒处理在消毒处理(chl)后、操作前进后、操作前进行采样
34、。行采样。l2、采样前,关好门、窗,在无采样前,关好门、窗,在无人走动的情况下,静止人走动的情况下,静止10min进进行采样。行采样。第五十二页,共六十九页。九、消毒液的监测九、消毒液的监测(jin c)(jin c)(jin c)(jin c)l有效氯含量测定有效氯含量测定,可以用试纸法测定。可以用试纸法测定。l 使用方法:使用方法:l 1、消毒剂溶液有效成分浓度在测定消毒剂溶液有效成分浓度在测定范围内时,取试纸浸于消毒液中,即刻取范围内时,取试纸浸于消毒液中,即刻取出,半分钟内在自然光下与标准色块比较,出,半分钟内在自然光下与标准色块比较,读值。读值。l 2、消毒液浓度高于试纸测定范围时,
35、消毒液浓度高于试纸测定范围时,可先稀释消毒剂,再测定。可先稀释消毒剂,再测定。l注意注意(zh y):试纸浸湿后时间超过:试纸浸湿后时间超过1分钟,颜分钟,颜色逐渐消退,结果不准确。色逐渐消退,结果不准确。第五十三页,共六十九页。戊二醛浓度戊二醛浓度(nngd)(nngd)测定测定l 试纸法:试纸法:1、从小瓶中取出一条;从小瓶中取出一条;2 2、将指示色块完全浸没于戊二醛溶液,一秒将指示色块完全浸没于戊二醛溶液,一秒内取出;内取出;3 3、沾下瓶盖上的纸垫,去除多余的液体;沾下瓶盖上的纸垫,去除多余的液体;4 4、横置于瓶盖上,注意不要将色块面朝下以横置于瓶盖上,注意不要将色块面朝下以免受到
36、污染;免受到污染;5 5、等候等候5858分钟判读分钟判读(pn d)(pn d)结果。结果。第五十四页,共六十九页。使用使用(shyng)(shyng)(shyng)(shyng)中消毒液染菌量测定中消毒液染菌量测定 l 1 1、涂涂抹抹法法:用用无无菌菌吸吸管管吸吸取取消消毒毒液液1.0ml,加加入入9.0ml含含有有相相应应中中和和剂剂的的采采样样管管内内混混匀匀,用用无无菌菌吸吸管管吸吸取取上上述述溶溶液液0.2ml,滴滴于于干干燥燥普普通通琼琼脂脂平平板板,每每份份样样品品同同时时做做2个个平平行行样样,一一平平板板置置20培培养养7d,观观察察霉霉菌菌(mjn)生生长长情情况况,另
37、另一一个个平平板板置置35温温箱箱培培养养72h记记数数菌菌落落数数,同同时时按按十十五五的的原原则则检检测测致致病菌。病菌。l 消消毒毒液液染染菌菌量量(cfu/ml)=每每个个平平板板上上的的菌菌落数落数50第五十五页,共六十九页。2 2、倾注、倾注(qngzh)(qngzh)(qngzh)(qngzh)法法 l 用用无无菌菌吸吸管管吸吸取取消消毒毒液液1.Oml,加加入入到到9.0ml含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌生生理理盐盐水水采采样样管管中中混混匀匀,分分别别取取0.5ml放放入入2只只灭灭菌菌平平皿皿内内,加加 入入 已已 熔熔 化化 的的 4548的的 营营 养养(yngy
38、ng)琼琼 脂脂15ml18ml,边边倾倾注注边边摇摇匀匀,待待琼琼脂脂凝凝固固,一一平平板板置置20培培养养7d,观观察察霉霉菌菌生生长长情情况况;另另一一个个平平板板置置361培培养养72h,计计数数菌菌落落数,同时按十五的原则检测致病菌。数,同时按十五的原则检测致病菌。l 消消毒毒液液染染菌菌量量(cfu/ml)=每每个个平平板板上上的的菌菌落数落数20第五十六页,共六十九页。注意事项注意事项l 消消毒毒液液染染菌菌量量100cfu/ml,并未检出致病菌为合格并未检出致病菌为合格(hg)。l 采样后采样后1h内检测。内检测。第五十七页,共六十九页。十、餐具消毒十、餐具消毒(xio d)(
39、xio d)(xio d)(xio d)效果监测效果监测 l 采采样样时时间间:在在消消毒毒后后、使使用用前前进行采样。进行采样。l 采样方法:采样方法:将将2.0cm2.5cm无菌无菌滤纸片于无菌洗脱液中浸湿均匀,贴滤纸片于无菌洗脱液中浸湿均匀,贴在食具表面,经在食具表面,经5min取下,每取下,每10张滤张滤纸合为一份样本纸合为一份样本(yngbn)(相当于相当于50cm2采采样面积样面积),投入含,投入含50m1生理盐水的生理盐水的lOOml三角烧瓶中,于三角烧瓶中,于4h内送检。内送检。第五十八页,共六十九页。注意事项注意事项l 纺纺 织织 品品:细细 菌菌 总总 数数(zngsh)5
40、cfu/cm2,大大肠肠菌菌群群末末检出。检出。l 餐具若用化学消毒剂消毒,餐具若用化学消毒剂消毒,采样液中应加入相应中和剂。采样液中应加入相应中和剂。第五十九页,共六十九页。十一、卫生洁具消毒十一、卫生洁具消毒(xio d)(xio d)(xio d)(xio d)效果监测效果监测 l 采采样样时时间间:在在消消毒毒后后、使使用用前前进进行行采样。采样。l 采采样样方方法法:便便器器、尿尿壶壶等等容容器器可可用用沾沾有有含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌生生理理盐盐水水的的棉棉拭拭子子,反反复复涂涂擦擦容容器器的的内内表表面面及及内内口口处处,剪剪占占手手接接触触部部位位后后,将将棉棉拭拭
41、子子投投入入5ml无无菌菌生生理理盐盐水试管中,立即送检。水试管中,立即送检。l 拖把、抹布拖把、抹布(mb)等物品可用无菌的方法剪等物品可用无菌的方法剪取取lcm3cm,直接投入直接投入5ml含相应中和剂的含相应中和剂的无菌生理盐水中,立即送检。无菌生理盐水中,立即送检。第六十页,共六十九页。结果结果(ji gu)(ji gu)(ji gu)(ji gu)判定判定 l未检出致病菌为消毒未检出致病菌为消毒(xio d)合格。合格。第六十一页,共六十九页。十二十二(sh r)(sh r)(sh r)(sh r)、内镜消毒灭菌效果的监测、内镜消毒灭菌效果的监测 l 采采样样(ci yn)时时间间:
42、在在消消毒毒灭灭菌菌后后、使用前进行采样。使用前进行采样。采采样样方方法法:用用沾沾有有含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌生生理理盐盐水水的的棉棉拭拭子子,在在被被检检内内镜镜上上从从镜镜头头至至镜镜身身反反复复涂涂檫檫,剪剪去去手手接接触触部部位位,将将棉棉拭拭子子投投入入到到5ml含含相相应应中中和剂的生理盐水采样管中,立即送检。和剂的生理盐水采样管中,立即送检。第六十二页,共六十九页。结果结果(ji gu)(ji gu)(ji gu)(ji gu)判定判定 l 灭灭菌菌后后内内镜镜,未未检检出出任任何何微微生物为合格。生物为合格。l 消毒消毒(xio d)后的内镜,细菌总后的内镜,细菌
43、总数数20cfu件,并未检出致病菌为件,并未检出致病菌为合格。合格。第六十三页,共六十九页。十三、医用污物消毒效果十三、医用污物消毒效果(xiogu)(xiogu)(xiogu)(xiogu)监监测测 l 采样时间:采样时间:在消毒在消毒(xio d)后、清运前进行采样。后、清运前进行采样。l 焚焚化化消消毒毒效效果果监监测测:可可焚焚化化物物品品的的消消毒毒效效果果监监测测,以以污污物物燃燃烧烧充充分分、彻彻底底为为标标准准进进行行直直接接检检查。查。l 碱碱化化消消毒毒效效果果监监测测:以以熟熟石石灰灰为为消消毒毒剂剂的的碱碱化化消消毒毒,日日常常监监测测以以pH为为指指标标。消消毒毒后后
44、30min检检查查pH值,若值,若pH=12,继续作用继续作用24h为消毒合格。为消毒合格。l 氯化消毒效果监测:氯化消毒效果监测:氯化消毒效果的日常监氯化消毒效果的日常监测,以余氯量为指标,在消毒接触时间测,以余氯量为指标,在消毒接触时间2h后测定余氯后测定余氯量,余氯量量,余氯量200mg/L,为消毒合格。为消毒合格。第六十四页,共六十九页。(五)其它消毒(五)其它消毒(xio d)(xio d)因子消毒因子消毒(xio d)(xio d)效果效果监测监测 1 1、采采样样方方法法:取取1ml消消毒毒后后待待检检污污物物(固固体体称称取取2g),置置于于5ml含含相相应应中中和和剂剂的无菌
45、生理盐水的采样管中,立即送的无菌生理盐水的采样管中,立即送2 2、检检测测方方法法:将将采采样样管管在在混混匀匀器器上上振振荡荡(zhndng)20s或或用用力力振振打打80次次,取取采采样样液液按十五原则检测致病菌。按十五原则检测致病菌。第六十五页,共六十九页。十四、织物十四、织物(zhw)(zhw)(zhw)(zhw)消毒效果监测消毒效果监测 l采样采样(ci yn)时间:时间:在消毒烘干后进行采样。在消毒烘干后进行采样。l采样方法:采样方法:按七的原则执行。按七的原则执行。l检测方法:检测方法:按十五的原则检测致病菌。按十五的原则检测致病菌。l结果判定:结果判定:末检出致病菌为消毒合格。末检出致病菌为消毒合格。第六十六页,共六十九页。十五、致病菌的检测(jin c)(jin c)l 检测原则检测原则:l 致病菌的检测依据污染情况进致病菌的检测依据污染情况进行行(jnxng)相应指标的检测。相应指标的检测。第六十七页,共六十九页。谢 谢 再见(zijin)第六十八页,共六十九页。内容(nirng)总结医院消毒灭菌(mi jn)的效果监测。将折好的布巾一条摞一条至25cm高度。检测时设阴性对照和阳性对照。2、物理检测法:(热电偶检测法)。被采样本表面积100cm2,取100cm2。再见第六十九页,共六十九页。
限制150内