S7实验七 大蒜离体繁殖(理论)资料讲解.doc

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1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。S7实验七 大蒜离体繁殖(理论)-实验七大蒜离体繁殖（理论）植物离体快速繁殖又称微体快繁，是指利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖的方法。是常规营养繁殖的扩展和延伸。特点：繁殖数量大，速度快一、意义与作用是改良品种、培育新品种的一种手段；获得大量优质苗木的有效方法。1、繁殖系数高，繁殖周期短，繁殖速度快2、应用广泛3、材料用量少，不受季节限制，可工厂化生产4、能获得无毒苗木无性系5、木本植物应用潜力大二、基本程序分为5个时期1、稳定的无菌培养体系的建立时期指从外植体选择、采取、清洗、灭菌、接种和茎芽发

2、生，直到获得茎芽稳定生长和增殖、茎芽扩繁数量可随意控制的时段。本期目标：成功地无污染接种，并且诱导茎芽发生提供合适的试管环境使培养物的生长达到稳定过程包括：外植体选择、外植体灭菌、培养基选定和稳定化培养2、稳定培养系的增殖、生长和增壮时期达到稳定状态的培养物通过不断的继代培养进行增殖、到达需求数量是商品化组织培养的主要时期分为3个阶段：培养物保存阶段培养物大量增殖阶段培养物生长和增壮阶段基本目标：维持培养物的稳定状态不断增殖茎丛达到需要数量措施：调整培养基成分及含量以细胞分裂素为主，生长素为辅温度、光照的改变3、诱导茎芽生根形成小苗时期使上一期培养的微枝发出不定根，形成完整小苗，便于经过驯化、

3、培养成商品苗。功能：保证组织培养微枝的生根安全地从试管内无菌环境转移到试管外有菌环境茎芽生根诱导的途径：A、试管内生根培养基总盐浓度低，无机盐含量低，细胞分裂素可不含有，生长素有一定量，降低蔗糖浓度，琼脂含量高B、试管外生根优势：根系发育好，根毛多，木质化程度高，分生能力强，生长速度快，茎干皮层细胞个体较小、液泡小，叶片角质层发达、气孔内陷、抗蒸腾能力和适应能力强，光合能力强注意：试管外生根不是万能的，对于难生根植物，试管内生根还是唯一选择。4、生根小苗移栽和驯化时期本阶段含两个过程：异养阶段过度到自养阶段人工环境过度到室外环境措施：将小苗分级炼苗：一般1周左右选定好植场所严格移栽技术，科学确

4、定移栽时间移栽后管理5、商品苗培育时期经过驯化培养的小苗，可按照一般苗木的培育要求进行培养三、植物离体无性繁殖中的器官发生方式有五种方式：1、不定芽型a、繁殖率高b、能保持遗传稳定性c、缩短繁殖周期2、器官型a、繁殖率高，但速度慢b、遗传性稳定3、器官发生型a、繁殖速度快b、遗传性不稳定，易产生变异c、愈伤组织是遗传转化、细胞培养或原生质体培养的良好材料4、胚状体发生型a、数量多、速度快、繁殖系数高；b、遗传性稳定。5、原球茎型指兰属特有的器官发生方式，即外植体经培养产生原球茎，再直接长成植株。四、影响因素（一）内因1、外植体基因型外植体类型及其生理状态外植体大小取材植株的年龄及生理状况2、继

5、代培养次数继代次数多器官建成能力下降根分化和茎分化具有相同规律3、愈伤组织的遗传特性及生理状态愈伤组织增殖培养越久或代数越多，转移到分化培养基上时，形态发生就会越困难，甚至丧失愈伤组织块过大也不利于分化原因：长期培养导致染色体组变化产生多倍体或非整倍体4、芽的增殖途径嫩梢扦插增殖途径关键是外植体芽位的选取丛生芽增殖途径器官发生途径愈伤组织器官形成胚状体途径原球茎途径：兰科植物的增殖（二）外因1、培养基2、培养条件五、无糖组培快繁技术简介植株生长方式自养：依靠自身光合作用进行异养：依靠培养基中糖进行混养：前二者兼有糖易导致污染发生1、技术原理用人工控制手段，以CO2代替糖作为碳源，提供最适条件，

6、促进植株光合作用，从而促进植物的生长发育，在短时间内，较低生产成本下，快速繁殖大量优质种苗。2、措施A、培养容器设计并使用具有控制湿度、气体的流动、CO2浓度、热的扩散的自动化容器。特点：透光性好，便于气体交换，分布均匀，利于CO2的吸收B、培养基质采用多孔有机材料来替代琼脂、卡那胶蛭石、珍珠岩、砂、塑料泡沫、石棉、陶棉、纤维素等特点：良好的透气性，生产成本低C、CO2输入替代糖，减少了微生物的污染，促进植株自养人工换气加速了气体的交换，满足了植株的生长需气量3、优势通过人工控制，动态调整优化植物生长环境大幅度减少了植物组培过程中微生物的污染节省投资，降低生产成本工艺简单化，流程缩短，技术和设备的集成度提高降低操作技术的难度和劳动作业强度，易于规模化生产-