酸乳中乳酸菌的测定.docx

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1、试验乳及乳制品中乳酸菌的测定一、目的1、解酸乳中乳酸菌分别原理2、学习并把握酸乳中乳酸菌菌数的检测方法。二、原理活性酸奶需要掌握各种乳酸菌的比例，有些我国将乳酸菌的活菌数含量作为区分 产品品种和质量的依据。由于乳酸菌对养分有简单的要求，生长需要碳水化合物、氨 基酸、肽类、脂肪酸、酯类、核酸衍生物、维生素和矿物质等，一般的肉汤培育基难 以满足其要求。测定乳酸菌时必需尽量将试样中全部活的乳酸菌检测出来。要提高检 出率，关键是选用特定良好的培育基。采纳稀释平板菌落计数法，检测酸奶中的各种 乳酸菌可获得满足的结果。三、材料1、培育基改良MC培育基（MRS培育基，改良CHALMERS培育基，M17培育基

2、）。2、仪器和器具无菌移液管（25ml,1ml）,无菌水（225ml带玻璃珠三角瓶，9ml试管），无菌培育 皿，旋涡匀称器，恒温培育箱。四、流程酸奶f稀释一制平板f培育一检查计数五、方法1、样品稀释先将酸奶样品搅拌匀称，用无菌移液管吸取样品25ml加入盛有225ml无菌水的三 角瓶中，在旋涡匀称器上充分振摇，务必使样品匀称分散，即为10-1的样品稀释液， 然后依据对样品含菌量的估量，将样品稀释至适当的稀释度。2、制平板选用23个适合的稀释度，培育皿贴上相应的标签，分别吸取不同稀释度的稀释液1ml 置于平皿内，每个稀释度作2个重复。然后用溶化冷却至45左右的MC培育基倒平 皿，快速转动平皿使之混

3、合匀称，冷却成平板。3、培育和计数将平皿倒置于37恒温箱内培育72h,观看长出的细小菌落，计菌落数目，按常 规方法选择30-300个菌落平皿进行计算。六、结果1、指示剂显色反响乳酸菌的菌落很小，13mm,圆形隆起，外表光滑或稍粗糙，呈乳白色、灰白色 或暗黄色。由于产酸菌落四周能使CaCO3产生溶解圈，酸碱指示剂呈酸性显色反响。2、镜检形态必要时，可挑取不同形态菌落制片镜检确定是乳杆菌或乳链球菌。保加利亚乳杆 菌呈杆状，成单杆、或双杆菌或长丝状。嗜热链球菌，呈球状，成对、或短链、或长 链状。七、数据计数及处理作平皿内菌落计数时，可用肉眼观看，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在登记 各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板的平均菌落总数。将各稀释平板上的菌落数填入下表。每1ml酸奶中的乳酸菌数是