围产期窒息后体温过低不影响新生儿外周淋巴细胞淀粉样蛋白产生的基因.docx

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1、围产期窒息后体温过低不影响新生儿外周淋巴细胞淀粉样蛋白产生的基因抽象在这项研究中，分用淀粉样蛋白前体,B分泌酶，presenilin 7和2的基因在围产期窒息和围产期窒息治疗后新生儿淋巴细胞 中通过RT-PCR在15-21天龄的表达。阿尔茨海默病相关基因的相对定量首先通过比拟非窒息控制的外周淋巴细胞与窒息或窒 息伴体温过低的淋巴细胞进行。在围产期窒息的新生儿中，外周淋巴细胞呈现淀粉肥蛋白的.体和6-分泌薜基因的表达减少。另 一方面，研究组中prese。/。7和2基因的表达增加。在低体温治疗的窒息组中，所研究基因的表达具有相同的变化模式，对窒 息组没有统计学意义。这说明，参与淀粉样蛋白前体在外周

2、淋巴细胞中代谢的基因的表达可能是窒息后大脑中进行性病理过程 的生物标志物，不受体温过低的影响。这些是世界上第一个显示体温过低在窒息后新生儿外周淋巴细胞中与阿尔茨海默病相关 的基因变化中的作用的数据。关键字:围产期窒息;缺氧缺血性脑病;体温过低;脑缺血;阿尔茨海默病;淋巴细胞;淀粉样蛋白前体;。分泌酶;孕烯素1和2;基因.引言根据现有数据，1000例活产婴儿中有20例需要复苏，导致围产期窒息的临床和生化病症1, 2。目前，围产期窒息每年 影响全世界约400万新生儿冏。这些新生儿中约有15-25%在新生儿期死亡，高达25%的幸存者出现神经功能缺损，10-30%的 患者精神运动发育缓慢4, 5o分析

3、围产期窒息后学龄前儿童长期后果的研究说明，脑瘫的发生率为5.5-52%6, 7, 8, 9,严 重残疾的发生率为各种运动障碍的发生率为1.3-40%2, 8, 9, 10,听力损失为2-20%6, 9, 10,视力缺陷的 发生率为1.8-40%6, 9, 11o ,言语障碍占4.2-21 %6, 7, 8,癫痫占13%,认知障碍占2, 12。越来越多的证据说明，围产期窒息期间和之后新生儿大脑中诱导的病理学与老年神经退行性疾病（如阿尔茨海默病）相似 3, 13, 14, 15o实验研究说明，小鼠围产期窒息会导致海马体神经元死亡延迟，记忆和空间学习显著缺陷13, 14o此外， tau蛋白水平显著升

4、高，磷酸化增加，淀粉样蛋白前体浓度较高，缺氧诱导因子1。降低，淀粉样蛋白降解脑草昔水平降低，淀 粉样蛋白随着小胶质细胞活化而增加，以及窒息后脑中星形胶质细胞3, 13, 15, 16。.此外，一项研究发现，产后第3天和 第7天窒息后血液中tau蛋白水平升高17。另一项研究显示，围产期窒息后，新生猪脑脊液中B淀粉样肽1-42显著降低18。 基于阿尔茨海默病的淀粉样蛋白假说，脑脊液中B淀粉样肽1-42的减少被认为是阿尔茨海默病开展的第一个标志19。在阿尔 茨海默病的前驱和临床前阶段，脑脊液中P淀粉样肽1-42的水平降低20;在实验性围产期窒息中也发现了类似的模式18。在我们之前的研究中，我们评估了

5、围产期窒息后新生儿外周淋巴细胞中与阿尔茨海默病开展相关的基因的表达3。国产 期窒息后，我们发现新生儿淋巴细胞中HIF 1-a,淀粉为遹白前必和6分泌硼因的表达降低同。然而，我们观察到围产期窒息 后15天或更长时间淋巴细胞中与y分泌酶相关的游ec浙）1和2基因显着过表达。目前，低体温仍然是围产期窒息后新生儿唯一可用的治疗选择，具有可变和/或短暂的医疗获益5, 21, 22, 23o 一些研 究说明，困产期窒息伴体温过低可提高生存率，降低长期并发症的发生率，例如重度残疾、癫痫和脑瘫的严重程度24, 25o相 比之下，其他研究说明，在有围产期窒息史的儿童中，低体温治疗可使18个月生存期死亡或严重损害

6、的发生率降低33%,并且 不影响窒息后的不良并发症，例如神经发育障碍和脑瘫6, 21, 26.进一步的研究说明，在6-8岁的儿童中，低体温治疗后， 与健康儿童相比，认知评估的结果显著降低27, 28o临床前和临床研究均说明，低体温治疗并不能减少记忆障碍相关的问题29, 30o不幸的是，这种治疗围产期窒息患儿的方法如果成功，只是暂时的或不完整的5, 6, 23, 31。上述数据证实，约10%的 围产期窒息婴儿接受低体温治疗后患有癫痫，20%患有脑瘫5, 6,约一半死亡31或出现严重功能障碍27, 28o因此，在过去十年中进行的研窕说明，在早期阶段治疗体温过低具有短暂的疗效，但并非所有有围产期窒息

7、史的儿童。此 外，在窒息后的晚期，该治疗对病理改变明显缺乏影响，特别是在认知功能方面27, 28,这与脑神经变性的开展有关。在之前的一项qPCR研究中，我们发现围产期窒息会影响淀粉殍黄方滋然和B分物嫩的下调以及一组15天或更长时间的幸存者中涉兆 泰由7和2基因的上调(图1和图2) 3。然后，我们选择这些基因进行常规低体温治疗后的进一步研究，说明上述基因在治 疗和未治疗的患者外周淋巴细胞中的表达没有差异。研究说明，由窒息引起的与淀粉样蛋白前体代谢相关的基因表达的变化在 低温治疗后持续存在于淋巴细胞中。c OS号8.1415*Days after asphyxiaHIF1AI 1I ? : I I

8、 IIumIBACE1-1.581415*Days after asphyxia814Days after asphyxia图，国产期室息后淀粉样蛋白前体(APP) , B分泌酶(BACE1)和缺氧诱导因子1-a (HIF1A)基因的变化。(A) 1-7 (n = 8) , 8-14 (n = 7)和15+ (n = 8)天年龄组围产期窒息后淋巴细胞中4尸尸基因表达的平均水平。标记SD,标准偏差。N, 组中的孩子数量。两组之间的变化没有统计学意义(Kruskal-Wallis检验)。(B) 1-7 (n = 8) , 8-14 (n = 7)和15+ (n = 8) 天年龄组围生儿窒息后淋巴细

9、胞中B4CE7基因表达的平均水平。标记SD,标准偏差。N,组中的孩子数量。两组之间的变化 没有统计学意义(Kruskal-Wallis检验)。(C) .1-7 (n = 8) , 8-14 (n = 7)和15+ (n = 9)天年龄组围产期窒息后淋巴细 胞中H/尸俏基因表达的平均水平。标记SD,标准偏差。N,组中的孩子数量。两组间变化无统计学意义(Kruskal-Wallis试验) 冏。PSEN1BPSEN2LNUJsd s/-1 H1+1-78-1415*Days after asphyxia1-78-1415*ZN山Sd 0比63Days after asphyxia图2.围产期窒息后孕

10、涉蜀目7 (PSEN1)和孕前素21尸SE/V2)基因的变化。(A) .1-7 (n = 8) , 8-14 (n = 7)和15+ (n = 10)天年龄组围产期窒息后淋巴细胞中尸SEA/7基因表达的平均水平。标记SD,标准偏差。N,组中的孩子数量。1-7天组和 8-14日组间变化无统计学意义。围产期窒息(Kruskal-Wallis试验)后1-7和15+天(z = 3.903, p= 0.0002)和8-14和15+ 天(z = 3.092, p= 0.0059)组之间基因表达水平的指示统计学显着差异。* p& 0.01。(B) .1-7 (n = 8) , 8-14 (n = 7)和 1

11、5 + (n = 10)天年龄组围产期窒息后淋巴细胞中尸SEA/2基因表达的平均水平。标记SD,标准偏差。N,组中的孩子数量。1-7天组和8-14日组间变化无统计学意义。围产期窒息(Kruskal-Wallis试验)后1-7和15+天(z = 3.634, p= 0.0008)和 8-14和15+天(z = 3.387, p= 0.002)组之间基因表达水平的指示统计学显着差异。* p W 0.01。3.1 .材料和方法研究环境和设计在这项研究中，我们将围产期窒息儿童与一组围产期窒息儿童进行比拟，这些儿童在波兰卢布林地区接受了体温过低治疗, 存活率超过15天。在研究期间，所有新生儿都在卢布林医

12、科大学的新生儿和婴儿病理学系住院治疗。窒息的纳入标准定义如下:新生儿(足月和早产)胎龄31周。pH值7.0的代谢性酸中毒(在出生后60分钟内获得的脐带或新生儿血液样本中)，或基差72,或10分钟时Apgar评分为0-5,或在10分钟时继续需要复苏。存在多器官系统衰竭,脑病的临床证据：周期性呼吸/呼吸暂停、动眼动或瞳孔运动异常、吸吮无力或消失或临床癫痫发作。神经系统表现不能归因于其他病因。该调查程序已获得卢布林医科大学伦理委员会的批准(2013年4月25日，同意号为。KE-0254/118/2013) o在获得两 个研究组患者的所有授权护理人员的书面同意后，收集血液和血液采样，以进行定期实验室分

13、析以进行诊断和/或治疗。低体温的治疗方案卢布林医科大学儿童医院是卢布林省唯一一家治疗围产期窒息后体温过低的新生儿的医院。因此，所有出生时具有该省严 重或中度围生期窒息特征的新生儿都被运送到那里接受体温过低的治疗。在运输过程中，在直肠温度的控制下开始被动冷却(培 养箱中的散热器关闭)。由于大面积只有一个低温治疗中心，因此适应治疗窗口(v6小时)是一个重大挑战。因此，对于低体 温治疗，新生儿必须在出生后6小时内进入重症监护室。通过治疗纳入标准后，如下所述，冷却程序开始。目前波兰关于头部 或全身冷却的纳入或排除资格认证方案如下所示。（1） 通过低体温治疗的围产期窒息的纳入标准：妊娠35周后出生的新生

14、儿，伴有严重或中度围产期窒息，或Apgar在生命的第10分钟W5分，或出生后10分钟的机械通气，或出生后1小时脐带血或动脉血酸中pH值7. 0,或出生后1小时脐带血或动脉血碱基缺损至少T6 mmol/Lo或神经功能障碍：昏迷，嗜睡，肌肉张力下降，对刺激的异常反响，没有或减少 吸吮反射，抽搐，肌肉张力增加。振幅变化一集成脑电图记录。（2） 排除标准：胎龄35周。出生体重1800克。严重出生缺陷，预后不良。严重创伤性颅脑外伤。直肠梗阻，阻止深层体温测量。缺乏父母/法定监护人的同意。入住重症监护病房时出生时间超过6小时。在我们的研究中，未接受降温治疗的患者（非体温过低组）由于胎龄，缺乏父母同意或从出

15、生到降温中心的时间过长（6 小时）而被排除在治疗之外。根据波兰新生儿标准指南，所有体温过低的患者（组）均使用CritiCool设备（Belmont Medical Technologies, Billerica, MA, USA）接受全身冷却。在启动并校准CriticCool后，裸体新生儿被放置在冷却罩中。将外表温度 探头放置在胸部，将直肠温度探头放置在5 cm的深度。目标体温为33.5QC （直肠温度在33.CTC至34.0。之间）。在体温过 低期间，对所有婴儿进行监测，并连续记录直肠温度、心率、呼吸频率、脉搏血氧仪、血压和实时皮肤温度。振幅整合的脑电 图记录与患者的生命体征同时可见。婴儿的

16、一般管理符合常规临床实践。冷却72小时后，使用相同的设备启动加热。温度每 20 min升高0.1。1 h后总温度升高0.3。以 婴儿花了大约10小时才升温到常温。根据婴儿的反响和临床状况，单独调整加 热的速率和持续时间。重新加热后监测直肠温度至少24小时。在研究的患者中，通常在加热后3-7天进行脑部MRI。经颅超声 在出生后头几天进行，体温过低后重复进行，这取决于临床适应症。23研究总体和样本数量该研究包括20名新生儿，5名患有围产期窒息的新生儿，以及5名健康新生儿作为对照，5名患有低温治疗窒息的新生 儿，以及5名健康新生儿作为对照。测试和对照组为15-21天。窒息组有3名年龄在21、15、2

17、1d的女孩和2名21、18 d的 男孩。在体温过低的窒息组中，有3名年龄在15天、21天和15天的女孩，2名21天的男孩。对照组有5名新生儿，年龄和 性别与研究组相同。对照组患儿因婴儿绞痛、母乳黄疸、轻度呼吸道感染和体重增加不良住院。对照组的新生儿是在无并发症 的妊娠后出生的，没有任何健康问题。由于上述病症，这些组的新生儿在卢布林医科大学新生儿和婴儿病理学系住院进行诊断 和治疗。所有入组新生儿的临床特征见表1。表1 .入组新生儿的临床特征。基因表达的研究,包括淀粉样蛋白前体,p分泌酶和Presenilin 1和2收集静脉血用于柠檬酸盐用于淋巴细胞的基因研究。接下来，将血液置于离心管中（Falc

18、on, Coming Science Mexico S.A. de C.V., Reynosa, Tamaulipas, Mexico）,并用 PBS （Biomed, Lublin,波兰）以 1： 1 稀释。以这种方式制备的血液与 GradisolL试剂（波兰卢布林PoHa）组合。然后将其在离心机5810R （德国汉堡埃彭多夫）中以2000rpm在室温下离心20分 钟。收集血液单核细胞并在5mL PBS （波兰Biomed）中洗涤后，在室温下以2000rpm离心10分钟。然后将细胞置于1mL PBS （波兰Biomed）中，并在室温下以2000rpm在MiniSpin力口离心机（Eppend

19、orf）中再次离心10分钟。然后从沉淀中别离RNA。根据先前制备的程序进行RNA别离32, 33o在将冷却的TRI （4。0 （Invitrogen, Thermo Fisher Scientifics,华沙，波兰华 沙）以0.5 mL的体积添加到沉积物中后，手动使材料均质化。接下来，向样品中加入0.2mL氯仿，将其振荡15 s,然后在室 温下放置15分钟。然后将所有样品在5415 R离心机中在4。（3和13, 600rpm下离心15分钟，并通过加入0.5mL异丙醇从水 相中沉淀总细胞RNA。在最后阶段,将所有样品在5415R离心机中以13,600rpm的速度在4。（3下离心20分钟。使用Na

20、no Drop 2000分光光度计（Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA）来评估RNA的质量和数量。将得到的RNA储存在80% 乙醇和-2（TC的温度下，用于进一步研究。根据制造商的说明，使用一 pgRNA使用cDNA逆转录试剂盒转录cDNA （Applied Biosystems, Foster City, CA, USA）。在 Veriti Dx （Applied Biosystems, Foster City, USA）上按以下顺序进行 cDNA 合 成：I期25P, 10分钟;II期37。120分钟;川期85, 5分钟;四期4。使用制造商

21、的SDS软件（730系统软件，应用 生物系统，马萨诸塞州沃尔瑟姆，马萨诸塞州沃尔瑟姆，美国）通过实时基因表达分析（PCR）在7900HT实时快速系统设备 （应用生物系统，加利福尼亚州福斯特城，美国加利福尼亚州福斯特市）上使用Master Mix SYBRgreen PCR功率混合试剂扩 增了该方法获得的CDNA32, 33.DNA序列的多个拷贝的产生始于在95P下变性10分钟，然后在两种不同的温度下进行40 个循环：95,持续15秒，60,持续1分钟。对于每个扩增周期，在7900HT实时快速系统上检查和计算DNA繁殖量（应 用生物系统，福斯特城，加利福尼亚州，美国）。测试软件（Applied

22、Biosystems, Foster City, CA, USA）用于估计荧光水 平超过指定表达阈值循环（CT）的PCR循环数，以便在反响开始时计算混合物中DNA分子的数量。对内源性甘油醛3-磷酸脱 氢醐控制基因实现归一化。基于DCT技术评估基因表达的相对定量（RQ）,并将值计算为RQ = 2-AACT32, 33。使Expression Suite Software v.1.1 （Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA）对测试基因进行 RQ 计算。RQ 结果最 终是在对数RQ （LogRQ）转换后获得的32, 33。LogRQ = 0表示实验和对

23、照组之间的基因表达变化没有差异。LogRQ v 0表 示窒息研究中基因表达降低。LogRQ 0表示与对照组相比，窒息研究中的基因表达增加。使用以下TaqMan探针组（应用生 物系统，福斯特城，加利福尼亚州,美国），标记为FAMNFQ,使用：Hs00169098_m1 CAPP） , Hs01121195_m1 CBACE1）, Hs00997789_m1 CPSEN1） , Hs01577197_m1 （PSEN2）和 Hs99999905_m1 （GAPDH）。使用 Statistics v. 13.3 软件（Tibco Corporation, Palo Alto CA USA）使用Man

24、n Wh计ncy U检验对结果进行统计分析。结果显示为sd土平均值，当户0.05时 具有统计学意义。3.结果窒息后淋巴细胞中代谢淀粉样蛋白前体的基因的表达围产期窒息后，研究组淀粉胡费白成伏基因的平均表达水平低于对照值（图3）。最小变化为-0.370倍，最大变化为-0.039 倍，中位数变化为-0.317倍。氏分/摩基因表达的平均值为-0.446,最小变化为-0.800倍，最大变化为-0.079倍，中位数为-0.428 倍。前饮尼7基因表达的平均值为0.339,最小变化为0.059倍，最大变化为0.658倍，中位变化为0.360倍。前贝氏2基因 表达的平均值为0.240,最小变化为0.184倍，

25、最大变化为0.351倍，中位变化为0.195倍。图3说明了窒息后淋巴细胞中研究 基因的平均表达水平的变化。 0 5 0 5 0 5 0 1 o o-oTOU6O-1A A+HAPPA A+H A A+H A A+HBACE1 PSEN1 PSEN2图3.围产期窒息（A）和围产期窒息伴低体温（A + H）后外周淋巴细胞中淀粉精蜀白成雄（APP）、B分泌酶（BACE1）、 早跟蛋白1（PSEN1）和孕前蛋白2（PSEN2）基因表达的平均水平，生存期超过15天。标记SD,标准偏差。两组之 间的变化没有统计学意义（曼-惠特尼检验）。32低体温治疗窒息后淋巴细胞中代谢淀粉样蛋白前体的基因的表达在低体温治

26、疗的围产期窒息后，研究组中淀粉精蛋白期依基因的平均表达水平低于对照组（图3） o最小变化为-1.347 倍，最大变化为。038倍，中位数变化为-0.523倍。6-分%遮表达基因的平均值为-0.662,最小变化为-1.409倍，最大变化为 -0.088倍，中位变化为-0.512倍。宓依宏力7基因表达的平均值为0.491,最小变化为0.196倍，最大变化为0.993倍，中位 变化为0.476倍。成依宏彦2基因表达的平均值为0.568,最小变化为0.140倍，最大变化为0.867倍，中位变化为0.626倍。 图3说明了用低体温窒息治疗后淋巴细胞中测试基因的平均表达水平的变化。窒息组与低体温治疗窒息组

27、之间无显著的统计学 变化（图3）。4 .讨论本研究旨在确定围产期窒息患者的外周血淋巴细胞是否显示与淀粉样蛋白生成相关的基因表达的变化，这些基因同时参与 窒息反响。这项工作是当前研究的延伸3,其中我们提出了与阿尔茨海默病相关的基因的新变化，例龄淀粉样蛋白前体,B分 泌酶,presenilin 1 Ml presenilin 2,在围产期窒息的新生儿的循环淋巴细胞中用低体温治疗。围产期窒息后15天开始的为前货 白1和2基因表达的增加很可能反映了作为对窒息反响的大脑进行性神经变性的发作14, 29,同时指出围产期和产后窒息损 伤的系统性。这一建议也得到了大脑中tau蛋白水平显著升高的支持，通过对体温

28、过低的整体脑缺血进行微透析的研究16。围 产期窒息后，体温过低对外周淋巴细胞中淀粉样蛋白前体代谢的基因缺乏影响，影响淋巴细胞的功能和活化。缺氧会改变淋巴细胞的功能34, 35,并参与窒息后脑中淋巴细胞的迁移和活化，最终导致新生儿脑损伤36, 37o 在围产期窒息期间，淋巴细胞在循环系统中有缺氧的风险，但是当它们离开血液并进入缺氧脑组织时，它们也有缺氧的风险。 因此，在围产期窒息中，整个大脑缺氧，白细胞在脑组织中另外暴露于缺氧。显然，缺氧对淋巴细胞的双重影响可能有利于神 经变性的进展37。实验性缺血后脑的超微结构研究显示，动脉和静脉间质血管内均有大量不同大小的血小板簇38。还观察到不同崩解阶段

29、的血小板。与内皮细胞相邻的血小板经常被去颗粒化，并伴有形状变化，包括假足。血小板聚集体是随机的、局灶性的，在大 脑皮层、基底神经节、丘脑、海马体和小脑中更为普遍38。最近还发现了血小板和血栓聚集体，显示出不同程度的脱颗粒。在 脑组织中脑血管外也发现血小板38。有证据说明，血小板聚集在缺血事件后很长一段时间内（即1年）复发38。微血管分支 或血管分岔区域血小板的局部积累占主导地位38,这与血脑屏障的变化密切相关39。血小板聚集体数量随着缺血后再循环时 间的延长而增加。缺血后经常注意到血小板与内皮细胞的局部粘附38。血管血栓形成期间血小板的积累导致淀粉样蛋白的大量 释放，说明阿尔茨海默病患者大脑中

30、淀粉样蛋白的额外来源，在这些患者中频繁出现微血栓发作时可能会出现40。根据一项文 献综述，血小板衍生的淀粉样变性现在似乎比以前认为的更常见41。因此，来自血小板的全身性淀粉样蛋白可能参与多种进行 性淀粉样变性的疾病，从脑癌、先兆子痫和皮肤淀粉样蛋白积累到阿尔茨海默病41。这局部提示阿尔茨海默病中血小板的慢性 活化42。这反过来又说明，类似的现象也可能导致围产期窒息的神经变性。与神经变性相关的蛋白质已被证明存在于人淋巴细胞中，并与炎症和自噬相关的蛋白质相互作用43。淋巴细胞在脑缺血 后晚期穿透大脑，并参与神经炎症的进展36。与丫分泌酶代谢淀粉样蛋白前体为淀粉样蛋白相关的前贝氏素基因表达增加与神

31、经退行性疾病淋巴细胞中前列子蛋白和淀粉样蛋白染色呈正相关4司。免疫肽数据库的分析提供了证据，证明淋巴细胞中存在的 神经变性蛋白是大脑中内源性神经毒性蛋白的来源，例如淀粉样蛋白前体、前肾上腺素1和2以及tau蛋白43。还有研究说明， 早熟蛋白会影响钙水平、淀粉样蛋白前体转运、免疫和线粒体功能以及大脑中B分泌酶的表达和活性44, 45o在阿尔茨海默病 中，先兆烯素升高，并增加其开展的可能性45, 46o己经证明，前肾上腺素的活性可分为丫分泌酶依赖性和丫分泌酶依赖性47。 前奈林Y分泌酶依赖作用的一个例子是淀粉样蛋白前体代谢过程中存在切口47。此外，早抱子蛋白的Y分泌酶非依赖作用包括 Wnt信号通路

32、中小连环蛋白的稳定、钙稳态的调节及其与突触传递的相互作用47。新证据说明，人类缺血性脑卒中前后可能引发皮质下区域和海马淀粉样蛋白的积累，支持了淀粉样蛋白沉积在阿尔茨海默 病早期开始的观点48, 49o此外，在海马体的缺血性CA1和CA3锥体神经元中，载脂蛋白E在神经元细胞中的免疫反响性也 显著增加48。这些数据有力地支持了血管危险因素和/或脑缺血表硫虫与阿尔茨海默病进展之间普遍观察到的联系49。淋巴细胞中研究基因表达的变化极有可能影响缺氧脑中病理通路的开展或强化。特别是，上调的presenilin基因参与丫分 泌前，其参与淀粉样蛋白的产生。我们认为，淋巴细胞的变化可能会影响这些细胞中淀粉样蛋白

33、的产生，并间接影响围产期室 息后外周循环和脑组织中淀粉样蛋白的产生。这是一项新的观察结果，说明在未经治疗的新生儿和接受体温过低治疗的新生儿 中，围产期窒息可以通过上调Y分泌酶相关基因来改变循环淋巴细胞的功能。5 .结论本研究背后的问题是，围产期窒息后新生儿外周淋巴细胞中淀粉样蛋白前体代谢相关的基因表达是否可以通过低温来改 变。值得注意的是，在围产期窒息的新生儿中，未经治疗的新生儿和接受低体温治疗的新生儿都显示出与淋巴细胞中淀粉样蛋 白前体的加工相关的基因表达的相同变化（图3）。考虑到围产期窒息后淋巴细胞通过大脑，我们的观察说明，尽管对围产期窒 息伴体温过低的新生儿进行了治疗，但淋巴细胞在进行性神经退行性过程中可能起作用。这些细胞中Y分泌酶相关字粉或白基 因的激活和表达说明它们可能参与窒息后大脑中淀粉样蛋白的产生。这些发现可能导致未来的高级研究，以了解围产期窒息后 晚期淋巴细胞反响确实切作用。在围产期和产后窒息中，血液可用于彻底检查窒息过程。本文的主要局限性是研究和对照组中 的新生儿数量相对较少。这意味着没有足够的材料来扩展蛋白质印迹蛋白研究。这项研究应被视为初步调查，应继续对更大的 新生儿群体进行调查。