单增李斯特氏菌及其检测方法.docx

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1、单增李斯特氏菌及其检测方法单增李斯特氏菌单增李斯特氏菌，学名Listeria monocytogenes, 一种革兰氏阳性菌，是李斯 特菌属。李斯特菌属(Listeria)共分为2个群，7个种：第一群包括单核细胞增生 性李斯特菌(L monocytogenes, LM)(亦称产单核细胞李斯特菌)、伊氏李斯特菌(L ivanovii)(亦称绵羊李斯特菌)、英诺克李斯特菌(L innocua)(亦称无害李斯特菌)、 韦氏李斯特菌(Lwelshimei)、塞氏李斯特菌(Lseeligeri),第二群包括格氏李斯特菌 (Lgrayi)和莫氏李斯特菌(LmulTayi)。其中，单增李斯特菌是唯一能引起疾

2、病的人 畜共患病的病原菌。它能引起人、畜的李氏特菌病，感染后主要表现为败血症、 脑膜炎和单核细胞增多。二、单增李斯特氏菌检测方法1.细菌培养法该菌营养要求不高，兼性厌氧，最适在含有C02的微需氧环境中生长，生 长温度范围-L5C-45C,最适温度为30C-37C,能在普通冰箱冷藏室生长，是 一种典型的耐冷性细菌，同时还具有耐盐性。LM在普通琼脂平板上呈细小直径 约、半透明露水样菌落。在血琼脂平板上有8溶血环。在显色培养基 上呈蓝绿色。2.生化鉴定法该菌主要生化特性如下：触酶阳性；氧化酶阴性；发酵多种糖类；产酸不产气；不发酵木糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二塘; 不

3、利用枸椽酸盐，40%胆汁不溶解；口引口朵、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性；VP、甲基红试验和精氨酸水解试验阳性；对碱和盐抵抗力强，60-70C经5-20分钟可杀死，70%酒精5min、2.5%石碳 酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min可杀死此菌。该菌对青霉素、氨革青霉素、四环素、磺胺均敏感。3 .血清凝集法根据菌体抗原和鞭毛抗原，LM分为16个血清型：l/2a、l/2b 1 / 2c 3a、3b、3c、4a、4ab、4b、4c、4d、4e、5、6a、6b、7。抗原结构与毒力无关, 对人致病的主要为血清型1/2a、l/2b 4b,占全球本病病例约90%。关于

4、血清凝集法用的诊断血清方面，推荐天津生物芯片公司生产的单增李斯 特氏菌全套诊断血清产品，该菌最常见的O： 3, 0： 5, O： 8和O： 9型的诊断 血清 被纳入这套产品，详情如下：二十三、单增李斯特菌诊断血清规格：瓶数量货号血清品种规格全套IM-LM012单增李斯特菌诊断血清(成套总计)lml*12 瓶/套1IM-LM012-1单增李斯特菌诊断血清0 1/H1H11/瓶2IM-LM012-2单增李斯特菌诊断血清 0 11ml/瓶3IM-LM012-3单增李斯特菌诊断血清0IV1ml/瓶4IM-LM012-4单增李斯特菌诊断血清ov/w1ml/瓶5IM-LM012-5单增李斯特菌诊断血清0V

5、I1ml/瓶6IM-LM012-6单增李斯特菌诊断血清ovn1m瓶7IM-LM012-7单增李斯特菌诊断血清0V1II1ml/瓶8IM-LM012-8单增李斯特菌诊断血清OJX1ml/瓶9IM-LM012-9单增李斯特菌诊断血清H-A1ml/瓶10IM-LM012-10单增李斯特菌诊断血清U-AB1ml/瓶11IM-LM012-11单增李斯特菌诊断血清H-C1ml/瓶12IM-LM012-12单增李斯特菌诊断血清H-D1ml/瓶.核酸扩增法核酸扩增技术，即聚合酶链式反应(polymerase chainreaction, PCR),其基本原理是设计、合成两条寡核甘酸，作为引物，对应于待测病原微

6、生物某一段特 异性序列的两端，然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增，使靶序列放 大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。单增李斯特氏菌的检测，其特异性引物的设计，一种是依据它的基因组序列 中的特异序列（16S或16S/23S间区的保守区域），一种是依据它的毒力基因序 列（常用hlyA, iap等）。【相关试剂推荐】生产商贷号产品名称包装规格（次/盒）天津生物芯 片公司Cat. No. FPO 14单核李斯特菌核酸扩增（PCR-荧光探针法）检测试剂盒20Cat. No. CP012单核李斯特菌核酸扩增（PCR）检测试剂盒20Cat. No. FP021单增李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌核酸扩增检测试剂盒（双色 实时荧光PCR法）20Cat. No. FP022志贺氏菌、单增李斯特氏菌核酸扩增检测试剂盒（双色实时荧 光PCR法）20