浙科版选修三早读材料02公开课.docx

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1、基因工程的原理和技术1、基因工程的基本原理：是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定和高效地表达。为了实现基因工程的母版，通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素， 并按照一定的程序进行操作：目的基因的获得、重组DNA的形成、重组DNA导入受体细胞 （宿主细胞）,筛选含有目的基因的受体细胞、基因表达。2：目的基因的获得：即获得我们所需要的基因，如人的胰岛素基因。（1）目的基因：是指能编码蛋白质的结构基因。（2）获得目的基因的两种方法：目的基因的序列已知：用化学方法合成目的基因。如胰岛素基因或用聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因目的基因的序列未知：建立一个包括目的基因在

2、内的基因文库,从基因文库中找到目的 基因3、形成重组DNA分子：就是将目的基因与载体DNA连接在一起。通常是用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA （如质粒），就会在目的 基因和载体DNA的两端形成相同的黏性末端,然后用DNA连接酶将目的基因和载体DNA 连接在一起，形成重组DNA分子。4、将重组DNA分子导入受体细胞用适当的方法将形成的重组DNA分子转移到合适的受体细胞中。常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等。如用质粒作载体，宿主细胞应选择大肠杆菌，用氯化钙处理大肠杆菌,增加大肠杆菌细胞壁 的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。植物细胞：农杆菌转化法动物细胞：显微注射法5、筛选含有目的基因的受体细胞：并不是所有细胞都接纳了重组DNA分子，因此需要筛选含有目的基因的受体细胞。采用 选择培养基筛选。6、目的基因的表达：目的基因在宿主细胞中表达，能产生人们需要的功能物质。