犬狂犬病抗体的检测酶联免疫地方标准吸附法编制说明.docx

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1、犬狂犬病抗体的检测酶联免疫地方标准吸附法编制说明一、工程背景及任务来源狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus)引起的 一种烈性人畜共患病，病死率几乎高达100%。该病流行于 100多个国家和地区，全世界每年因狂犬病死亡的人数达5 万人，印度是狂犬病流行最严重的国家，其死亡人数占一半; 中国的狂犬病例数仅次于印度，占世界第二位，每年有超过 千人死于狂犬病；我省是狂犬病最为严重的省份，20XX年病 例数达284人，20XX年为2n人。目前，对狂犬病尚无有效的 治疗方法，及时接种疫苗是预防狂犬病的最有效措施之一。 我国人狂犬病病例约94%由犬类引起，6%由猫引起。因此， 对动

2、物接种有效的狂犬病疫苗是预防人狂犬病最好的方法。 而检测免疫抗体水平是评价狂犬病防控效果的关键环节。当前国际认可检测狂犬病抗体的方法有：荧光抗体病毒 中和试验(FAVN)、快速荧光灶抑制试验(RFFIT)、小鼠病毒 中和试验(MNT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。FAVN、RFFIT 等方法检测狂犬病抗体至少需要96 h, MNT法检测狂犬病抗 体需要21 d,这几种方法都需要活病毒、培养动物或者细胞， 操作繁琐，对实验室环境和操作者操作技能要求较高，存在 生物安全和人为判读误差的问题，不适合基层单位使用。而 ELISA方法不需要特殊的实验室设备和条件、操作简单安全 （不需要活病毒）、快

3、速（只需4 h就可以检测出狗和猫疫苗 接种后血清样品中的狂犬病抗体）、不需要操作人员主观判 断（通过酶标板读数），防止出现人为判读误差。研究发现, ELISA方法可以检测免疫狂犬病疫苗后产生的中和抗体水 平，其检测敏感性和特异性与RFFIT 一致，因此被OIE接纳 为评估免疫抗体水平的方法。然而目前，我国尚无检测犬狂 犬病特异性抗体国家标准和行业标准。自20XX年起，省动物疫病预防控制中心开始采用国内 某厂家生产的“狂犬病毒IgG抗体检测试剂盒（定性）”及 “狂犬病毒IgG抗体检测试剂盒（定量）”进行全区家犬狂 犬病免疫效果评价工作。本课题组对3000余份样品检测结 果说明，该试剂盒工作稳定、

4、操作简便，与进口试剂盒检测 结果基本一致，适合基层单位使用。国内其他单位也证实该 试剂盒与FAVN法检测结果吻合率高。（参见“三种狂犬病 抗体检测方法的应用比拟”，吉林畜牧兽医，20XX年11期 44页45页）。因此，基于上述试剂盒制订省地方标准在 技术上是完全可行，而且能填补目前的标准空白，满足广西 犬只狂犬病抗体检测工作标准化的需要。本标准为省质量技术监督局下达省动物疫病预防控制 中心承当的20XX年第十一批省地方标准制定（修订）计划 任务工程（X质监函20XX836号）,编号为20XX-1101。二、工作概况从20XX年底开始资料信息工作，确定标准编 写目标和依据，同时起草制（修）订省地

5、方标准工程建议书， 积极开展标准的申报。20XX年8月上旬接到省质量技术监督 局下达的地方标准制定（修订）工程计划的通知后，迅速成 立标准起草工作小组，确定标准起草编写方案及时间进度表, 并积极组织实施。至8月30日已按GB/T 1. 1标准化工作 导那么第一局部：标准的结构和编写规那么要求完成标准征求 意见稿的编写工作。9月起,陆续送12位在省内外有关高校、 参考实验室、研究所、基层兽医实验室和标准化管理等单位 工作的权威专家和技术管理人员征求意见。共收回12份征 询专家意见表，其中11位专家提出了修改意见，获反应意 见54条。经认真研究，采纳其中37条，局部采纳4条，未 采纳13条。于10

6、月30日，完成标准送审稿的编写。标准起草人员：XXX等。三、标准编制原那么1、政策性原那么：本标准编写过程遵循国家相关法律、 法规和国家标准。2、先进性原那么：以国内外相关文献资料为参考，力求反 映最新的科技成果；以国内同类标准的编写方法为基础，对 本标准进行规范、充实和创新，使之具有先进性。3、经济性原那么：本工程为自筹经费工程，因此在本标 准编制过程，从获取信息、起草、实验室和临床验证到形成 征求意见稿和送审稿的每一个环节，在确保质量的前提下均 力行节约，利用有限的经费圆满完成各阶段编写任务。4、适用性原那么：本标准集国内外狂犬病抗体检测技术 的成功经验，并经实验室和临床验证，且完全按照国

7、家标准 的要求编写，内容全面，形式规范，可操作性和实用性强。 本标准基于成熟的国产试剂盒编制，与进口试剂盒相比本钱 大幅降低、操作更为简便。尤其是定性试验可以直接判定动 物群体免疫抗体水平是否达标，更适合与基层单位用于免疫 效果的评估。5、协调统一性原那么：本标准参照国内相关标准的编写 形式和表达方法，力求与国内相关标准的协调统一。本标准 通过持续查新，确保内容不与已有国家标准、行业标准和地 方标准重复或相矛盾。6、规范化原那么:本标准是严格按照GB/T 1. 1-2009的 要求来编写的。U!标准的主要依据是参考有关文献资料，结合我国国情, 进行实践研究，并通过试验和验证后，并参考其他资料经

8、室 内、室间验证提出。标准的主要内容是应用酶联免疫吸附试 验方法分别通过定性方法或者定量方法检测犬血清或血浆 中狂犬病特异性抗体水平，涵盖检测过程中的试剂、操作方 法及结果判定方法。五、与现行法律、法规和有关标准的关系狂犬病是当前中国死亡人数排在首位的人畜共患传染 病，大量研究和实践证明通过对家犬等易感动物进行免疫可 以有效预防并控制人间狂犬病例的发生。我省自20XX年来 开展全区范围的家犬狂犬病计划免疫工作，取得显著的防控 效果，家犬和人间病例数大幅降低。在防控工作中，检测家 犬血清或者血浆中狂犬病特异抗体是评价家犬狂犬病免疫 水平的必要手段，然而现行国家标准GB/T 18639狂犬病诊 断

9、技术和行业标准狂犬病防治技术规范均未提供狂 犬病免疫抗体的检测方法。当前，世界动物卫生组织OIE法典中收录的FAVN. RFFIT 等检测狂犬病抗体方法至少需要96 h, MNT法检测狂犬病抗 体需要21 d,并且这3种方法都需要活病毒、培养动物或者 细胞，操作繁琐，对实验室环境和操作者操作技能要求较高, 存在生物安全问题，不适合基层单位使用。而ELISA方法不 需要特殊的实验室设备和条件、操作简单安全、快速，且检 测敏感性和特异性与RFFIT 一致，因此也被OIE接纳为评估 免疫抗体水平的方法。为了比拟本标准提供的ELISA检测方法与OIE推荐 ELISA方法检测结果的异同，本课题采用国产和

10、进口试剂盒 对100份免疫血清进行了平行比对试验。结果显示国产试剂 盒与进口试剂盒检测结果的总体符合率可达82% o综上所述，本标准提供的ELISA检测方法不仅与目前现 行法律、法规和有关标准没有冲突，而且是对我国现行国家 标准和防治技术规范的有益补充。六、地方标准作为强制性地方标准或推荐性地方标准的 建议本项标准的制订，试验数据充分、可靠，经过实验室和 临床实践的考验，可作为推荐性地方标准，用于犬只狂犬病 抗体的检测。七、贯彻标准的措施和建议1、加大对基层单位的宣贯和培训力度；2、与试剂生产商合作，进一步提高试剂盒的稳定性和 最小检测极限，争取升格为国家标准或行业标准，满足全国 需要。八、其他应予说明的事项无。