2023年直接凝集反应实验报告.docx

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1、免疫学-直接凝集反映实验报告实验一：玻片凝集实验.实验原理：颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应的抗体结合,在适量电解质(通 常是0. 8 5 %NaCl)存在的条件下出现凝集现象,称为凝集反映。凝集反映的方法 有两种：直接法;间接法。颗粒性抗原(如完整的细菌或细胞)与相应抗体在 体外直接结合而出现的凝集反映,称为直接凝集反映。如玻片凝集反映和试管凝 集反映。将可溶性抗原预先吸附于一种与免疫无关的颗粒性载体表面，然后与相 应的抗体结合，出现凝集现象，称为间接凝集反映。如RF因子检测玻片凝集实验是使用已知抗体与未知颗粒性抗原在玻片上直接结合而出 现的凝集反映。此类反映较简朴迅速，常用于抗原或抗体的

2、定性检测。本次实验使用玻片凝集实验的原理进行人类AB 0血型的鉴定。AB0 血型系统是按照血液中红细胞表面的抗原分子来命名的。人类ABO血型抗原有 两种：A抗原和B抗原。A型血红细胞表面具有A型抗原，血液中具有抗B抗体; B型血红细胞表面具有B型抗原，血液中具有抗A抗体;AB型血红细胞表面具有 A抗原和B抗原，血液中不具有抗A、B抗体；。型血红细胞表面不具有A、B抗 体，但血液中具有抗A、B抗体。若用已知的抗A血清和抗B血清与受试者红细胞 上的相应抗原结合,即可引起红细胞凝集，根据凝集反映结果便可判断出受试者 的血型。1 .实验方法：(1)取洁净载玻片一张，用马克笔分为两格并注明A、B分区。(

3、2)倒置标准抗血清试剂瓶，悬空轻挤出抗A血清一滴，滴在A区内； 同法在B区内滴加抗B血清一滴。(3)使用消毒液对左手无名指进行消毒，待消毒液自然干燥后，使用无菌三棱采血针快速刺破手指。(4)用木棒的两端取血，分别在抗A血清和抗B血清中搅拌均匀。(5)用无菌棉棒压迫手指止血。(6)静置玻片数分钟后,观测红细胞凝集反映结果。2 .实验结果：3 .结果分析：实验二:试管凝集实验.实验原理：试管凝集反映是在试管内将待检血清对倍稀释后，加入等量的已知颗 粒性抗原与待检血清混合，然后观测试管内有无凝集快出现。如出现凝集块者为 阳性反映。混合后仍均匀浑浊，无凝集块出现者为阴性反映。根据血清凝集效价 鉴定待检

4、血清中相应抗体的含量。即在试管内用已知颗粒性抗原检测未知抗体的 相对含量的半定量实验。本次实验是以定量的伤寒杆菌为抗原,根据是否发生凝 集反映来检测血清中是否具有相应的抗体；根据各试管凝集限度的不同，来判断 抗体的效价。1 .实验方法：(1)取试管6支，用马克笔进行标记，依次放入试管架中。(2)在第一支试管中加入生理盐水0. 9m 1 ,其余各管加生理盐水0. 5mlo 然后在第一只试管中加入伤寒免疫血清0 . 1ml,用吸管将它与生理盐水吹打混 匀后，取出0.5ml加入第二支试管中；再将第二只试管的液体吹打混匀，取出 0. 5nli加入到第三支试管中，其余各管依次按照上述环节将血清对倍稀释。

5、至第 五支试管时,将试剂混匀后，取出0. 5nli弃之不用。是第六支试管不含伤寒免疫 血清，作为实验的阴性对照管。最后在各管中都加入0. 5m 1伤寒杆菌菌液。(3)轻摇试管架，混匀试管内液体，56水浴1小时后，观测实验结果。2 .实验结果：(1)对照组：即第六支试管，上清液浑浊，管底可有沉淀的细菌，轻摇后 分散呈均匀浑浊。(2)实验组：按1-5管依次观测。阳性者管底出现不规则凝集物，较 松散。阴性者与对照组相同。(3)凝集限度：+ +：液体澄清透明，细菌所有凝集于管底,轻摇可见大的凝集块。+：液体稍浑，细菌大多数凝集于管底，摇动后凝块较前者小。+：液体中档混浊，液体中有明显的凝集物,凝集块较小。+ ：液体混浊，仔细观测可以看见液体中有很小的凝集颗粒。一:与对照管相同。凝集效价：出现明显可见凝集物(+)时的血清最高稀释度为血清效价。