专题2第7课时(1).docx

《专题2第7课时(1).docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《专题2第7课时(1).docx（8页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、第7课时分解纤维素的微生物的别离学习目标】1.掌握纤维素酶的种类和作用及纤维素分解菌的筛选方法。2.理解并掌握纤维素 分解菌的筛选过程及刚果红染色法的原理。3.掌握纤维素酶的测定方法。一、纤维素分解菌的筛选基础梳理-夯实教材基础.纤维素与纤维素醐纤维索基本组成单位：（）分布：主要分布在植物（）器官中。【特别提醒】纤维素的分布、主要性质和作用（2）纤维素陶组成：是一种复合酶，至少包括三种组分，即G酶、Cx酶、葡萄糖甘酶。分布棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物桔秆等 也富含纤维素主要 性质常温下比拟稳定，不溶于水及一般有机溶剂；纤维素不具有还原性，但 在一定条件下能进行水解反

2、响，产生葡萄糖，故其水解产物具有还原性作用植物细胞细胞壁的主要成分；一种重要的膳食纤维，具有刺激胃肠蠕动、 促进消化液分泌的功能；此外纤维素可用于造纸、纺织、制造炸药等作用：纤维素C酶和Cx酶葡萄糖【特别提醒】除自然环境中存在的分解纤维素的微生物外，在草食性动物牛、马、羊等的消化 道内，也共生有分解纤维素的微生物，其可产生纤维素酶分解纤维素，而人体没有分解纤维 素的能力。1 .纤维素分解菌的筛选（I）方法：（h方法一：先培养（）,再加入进行颜色反响。方法二：在（州寸就加入刚果红。【特别提醒】方法一需要用NaCl溶液洗去培养基外表浮色后，再进行观察，方法二不需要。（2）原理纤维素+刚果红一红色复

3、合物I纤维素酶调整pH和,倒平板时，一般需冷却至 左右，在附近操作。(3)假设用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是,应加入的碳源是, 为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入 染料，与纤维素可形成色复合物,假设产生，那么证明有纤维素分解菌存在。14. (2018.湖南衡阳八中月考改编)如表所示是某微生物培养基的配方。请分析回答以下问题:编号成分(NH4)2SO4KH2Po4FcSO4CaCl2h2o含量0.4 g4.0 g0.5 g0.5 g定容至100 mL(1)从培养基的营养成分看，此培养基可用来培养的微生物的同化作用类型是 o利用该培养基培养微生物时，微生物所需要的碳源来自。(2)假设

4、要观察微生物的菌落特点，培养基中还应添加的成分是。培养基的配方是根据微生物的营养需求设定的，如果在上面的配方中加入一定量的纤维 素，就可以富集培养 的微生物。(4)在筛选纤维素分解菌的过程中用刚果红染色法能够通过颜色反响直接对纤维素分解菌 进行筛选。甲同学在实验时得到了如下图的结果，那么纤维素分解菌位于 内。A. ab B. c C. be D. abc科学家通过初筛得到以下4个菌株，其中最适合作为目标菌株的是 号，原因是菌株透明圈直径R菌株直径rR/r1号0.40.31.32号1.10.61.73号2.00.82.54号2.10.92.3得到目的菌株后又设计了多组实验，过程如图：纯化接种3

5、mL液体培 培养96 h 钮而法一测定纤维菌株养基(调节温度分别机取液一素施活力该实验的自变量是，假设以枯秆为底物进行实验，实验结果的测定方法是 O(2019河北唐山质检)筛选降解纤维索能力强的微生物对秸秆等废弃物资源的再利用和环 境污染问题具有理论和实际意义。研究人员从土壤和腐烂的秸秆中筛选出能高效降解纤维素 的菌株，并对筛选出的菌株进行了初步研究。对培养基进行灭菌的常用方法是。为了在培养基外表形成单个菌落，假设以 接种环为工具，那么用 法进行接种。(2)先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培养基上，进行筛选得到初筛菌株。再将初筛 菌株接种到以 为唯一碳源的培养基上培养25天，加入刚果红染

6、液后，依据出现的颜色反响进行筛选，观察菌落特征并测量。同时将用初筛菌株制备的菌液放入加有滤纸条的液体培养基中，恒温振荡培养8天，观察滤 纸条的破损情况，结果见表。由表可知，8组菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强，原因是注：Dp=(D/d)2,其中d表示菌落直径(cm), D表示透明圈直径(cm)；“ + ”越多表示滤 纸破损越严重。株编号 检测赢1号2号3号4号5号6号7号8号Dp5.911.736.541.533.231.767.291.34滤纸破损情况+ + + + + + + + + + + + 4- + + + + +(3)为进一步研究1、3、7号菌株对秸秆降解的效果。分别用这三种菌株

7、对秸秆进行处理，并 在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进 行了测定。结果如下图。(N)B()f()44)2()o n求、M遥置(N)B()f()44)2()o n求、M遥置(N)B()f()44)2()o n求、M遥置由图分析可知，三种菌株对 的降解能力最强，与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中 的降解率变化最大。整体分析，号菌株的降解效果最好。纤维二糖和葡萄糖，不能和刚果红形成红色复合物以f 1为中心的透明圈r深化探究解决问题疑难.如何设计实验证明纤维素酶能分解纤维素？提示设计对照实验。取两支试管，分别加入等量的滤纸条和缓冲液，在一支试管中加入

8、纤 维素酶，另一支试管中加入等量蒸偏水，振荡反响一段时间后，可观察到加入纤维素酶的试 管中滤纸条被水解，而加入蒸僧水的试管中滤纸条没有变化。1 .两种刚果红染色法中哪种染色法更容易区分纤维素分解菌和其他杂菌？提示 方法一更容易区分纤维素分解菌和其他杂菌。即先培养微生物，再加入刚果红进行颜 色反响，所显示的颜色反响基本上是纤维素分解菌的作用。方法二中有些微生物具有降解色 素的能力，它们在生长过程中会降解刚果红，也会使培养基上形成透明圈，与纤维素分解菌 不易区分。r学以致用-链接典例拓展.以下关于纤维素能的表达中，错误的选项是（）A.纤维素酹只有一种，只能将纤维素分解为葡萄糖B.纤维素酶是一种复合

9、酶，至少包括Ci酶、Cx酶和葡萄糖背酶三种组分C.纤维素可被纤维素酶水解成葡萄糖，为微生物提供营养物质D.分解纤维素的细菌、真菌和放线菌，都是通过产生纤维素筋来分解纤维素的【特别提醒】（1）分解纤维素的细菌也能在不含纤维素但富含其他有机物的环境中生存。纤维 素分解菌分解纤维素只是为了利用纤维素作为碳源，其他有机物假设可提供碳源，也可以生存。 （2）纤维素酶一般不在微生物细胞内起作用。多数细胞不能直接吸收纤维素，一般来说，纤维 素酶都是分泌到细胞外分解纤维素的。1 .以下关于刚果红染色法的表达中，正确的选项是（）A.可先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反响，此时不需用氯化钠溶液洗去浮色B.可在倒

10、平板时就加入刚果红，此时需要用氯化钠溶液洗去浮色C.纤维素分解菌菌落周围出现红色D.倒平板时就加入刚果红，长期培养，刚果红有可能被其他微生物分解形成透明圈 二、尝试从土壤中别离出分解纤维素的微生物基础梳理-夯实教材基础.实验流程（I）土壤取样：选择富含1 1的环境目的：增加纤维素分解菌的迭度，以确保能够 从在显中别离到所需要的微生物I (2)选择培养vI (2)选择培养vI (2)选择培养v操作方法：将土样加入装有30 mL选择培养基 的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上,在一定 温度下振荡培养12d,直至培养液变混浊，、也可重复选择培养(3)梯度稀释I(4)涂布培养：将样品涂布到()的培养基上I

11、(5)筛选菌株：()染色法，挑选产生()的菌落注：当土康中纤维素分解菌的浓度很高时，选择培养这一步可以省略。1 .菌种的进一步鉴定(1)鉴定原理：为确定透明圈内的菌落是纤维素分解菌，需要进行发酵产()的实验。(2)发酵方法：有(_1发酵和(1发酵两种。(3)纤维素配的测定方法：一般是采用对纤维素能分解(1等纤维素后所产生的()进行定量的测定。r深化探究解决问题疑难.鉴别培养基和选择培养基在目的和物理性质方面的区别是什么？提示(1)鉴别培养基是在培养基中加入某些特定的作用底物和指示剂，通过观察微生物生长 过程中分解底物所释放的不同产物与指示剂的不同反响来鉴别微生物；选择培养基是在培养 基中加入某

12、些物质，以促进目的菌的生长繁殖，同时抑制其他杂菌的生长繁殖。(2)选择培养的培养基中没有加入琼脂，所以属于液体培养基，而鉴别培养基一般为固体培养基。 【关键点拨】与固体培养基相比，液体培养基能使营养成分被充分利用，与振荡培养相配合， 能更有效地增加纤维素分解菌的浓度。1 .分析教材P29”纤维素分解菌的选择培养基配方”，回答以下问题：(1)此配方是液体培养基还是固体培养基？提示 此配方是液体培养基，因为配方中无凝固剂。(2)这个选择培养基对微生物是否具有选择作用？怎样设计对照实验证明你的观点？提示 有选择作用。本配方中富含纤维素，更适合能够分解纤维素的微生物大量繁殖。对照 实验可以用牛肉膏蛋白

13、脓培养基培养微生物。假设选择培养基上微生物数量明显少于牛肉膏蛋 白脓培养基上微生物的数量，那么说明培养基起到了选择作用。2 .向含有分解尿素的细菌的培养基中加入酚红指示剂，会出现类似的圈吗？提示分解尿素的细菌能够将尿素分解成氨，加入酚红指示剂后会变红，也会形成以尿素分解菌为中心的红色的圈。【关键点拨】两种刚果红染色法的比拟学以致用链接典例拓展.分析下表培养基的配方，请回答下面的问题: 纤维素分解菌的选择培养基比拟工程方法一方法二先培养微生物，再加入刚果红在倒平板时加入刚果红优点显示出的颜色反响基本上是纤维 素分解菌的作用操作简单，不存在菌落混杂缺点操作繁琐，刚果红会使菌落之间 发生混杂有些微生

14、物会降解刚果红，形成透 明圈，与纤维素分解菌相混组分含量纤维素粉5gNaNO31 gNa2HPO4-7H2OL2gKH2PO40.9 gMgSO4-7H2O0.5 gKC10.5 g酵母膏0.5 g水解酪素0.5 g将上述物质溶解后，用蒸储水定容到1 000 mLo(I)此培养基配方中为微生物提供碳源的主要是、氮源是 O(2)此配方为 培养基(根据物理状态)配方。(3)此培养基选择出的微生物主要是 o【特别提醒】培养基中纤维素不是唯一的碳源，而是主要的碳源，酵母膏和水解酪素也可以提 供少量的碳源。此外，酵母音还可以为微生物提供氮源和生长因子。3 .研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微

15、生物，请就如何从土壤中获得纤维素 分解菌回答以下问题：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即Ci酶、Cx酶和 酶。(2)为获得纯洁的菌株，常采用平板划线法进行接种，此过程所用的接种工具是,操 作时采用 灭菌的方法。(3)刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与 和 发生这种反响。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反响； 第二种是在时就加入刚果红。(4)如果观察到产生的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行 的实验。纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的 进行定量的测定。【误区警示】在

16、纤维素分解菌的选择培养基中生长的不只有纤维素分解菌。出现透明圈的菌落 也不一定是纤维素分解菌。因此，选择培养后要进行鉴别培养，才能获得纤维素分解菌。学习小结解维的生的离分纤老微物分实验 流程基础知识上壤取样一选择培养一梯度稀稀一 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培 养基上-*挑选产生透明眼的菌落纤维素：是一种多糖类物质，自然 界棉花中含限最高纤维素酶：是一种复合酶,含酶、Cx酶和葡葡糖昔而纤维素分解菌的筛选方法：刚果红 染色法随堂演练知识落实1.判断正误：纤维素是构成植物细胞壁的主要成分，在纤维素酶的作用下，纤维素可以水解成葡萄糖 （）（2）纤维素可为微生物提供碳源和能源（）（3）葡萄糖甘酶能将

17、纤维素分解为葡萄糖（）（4）刚果红可以与纤维素形成透明复合物，所以可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌 （）（5）别离纤维素分解菌的实验中，应从富含纤维素的环境中取土样（）（6）刚果红染色法只能在培养微生物的时候加入刚果红（）（7）鉴别纤维素分解菌的刚果红培养基是固体培养基（）（8）在刚果红培养基上有透明圈的菌落一定是纤维素分解菌（）2 .在别离分解纤维素的微生物实验中，以下关于土壤取样的表达，不正确的选项是（）A,可选取深层的土壤作为样品B.可选取树林中多年落叶的腐殖土作为样品C.可选取树林中多年积累的枯枝败叶作为样品D.可把滤纸埋在土壤中经过30 d左右.，再选取已腐烂的滤纸作为样品.

18、在别离分解纤维素的微生物的实验中，为了判断选择培养基是否起到了对纤维素分解菌的 选择作用，需要设置的对照是（）A.未接种的只有纤维素为唯一碳源的培养基B.未接种的牛肉膏蛋白陈培养基C.接种了的牛肉膏蛋白陈培养基D.接种了的只有纤维素为唯一碳源的培养基. （2018河北石家庄二中月考）以下关于别离纤维素分解菌的实验的表达，错误的选项是（）A.经选择培养后将样品直接涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B.选择培养这一步可省略，但培养出的纤维素分解菌较少C.加入刚果红可以在倒平板时和长出菌落后进行D.鉴别纤维素分解菌的原理是纤维素分解后的产物不能和染料形成红色复合物.植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解

19、。回答以下问题：（I）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酷，其中的葡 萄糖甘酶可将 分解成。（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。 （3）为从富含纤维素的土壤中别离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养 基（成分见下表）：成分酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲+培养基乙+注：“ + ”表示有，“一”表示无。据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）用于别离和鉴别纤维素分解菌，原因是;培养基乙（填“能”或“不能”）用于别离和鉴

20、别纤维素分解菌，原因是课时对点练寸对点训练题组一纤维素与纤维素醐1.以下关于纤维素的表达，错误的选项是（）A.纤维素是由葡萄糖首尾相连而成的高分了化合物B.纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，是因为这些微生物能产生纤维素陋C.植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素D.自然界中的各种生物均能把纤维素分解成葡萄糖，从而作为生物体的能量来源（2019山东师范大学附中期中）微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是（）A. Ci酹和Cx能B.。酶和葡萄糖普酶Cx酶和葡萄糖甘酶G酶、Cx酶和葡萄糖甘酶3.以下不属于纤维素酶用途的是（）A.可作为消化剂，用于治疗消化不良、食欲不振B.可制成加酶洗涤剂，去

21、除污渍C.可减轻环境污染，水解纸质垃圾D.可作为能源供其他生物使用题组二纤维素分解菌的筛选4.以下有关分解纤维素的微生物的别离的表达，不正确的选项是（）A.纤维素酶的发醉方法有液体发醉和固体发醉B.对分解纤维索的微生物进行了初步筛选后，无需再进行其他实验C.纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行 定量的测定D.纤维素酹是一种复合前.通过别离分解纤维素的微生物实验，对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选，这只是分 离提纯的第一步，还需要进行（）A.发酵产纤维素酶的实验B.提取纤维二糖的实验C.浓缩纤维素分解菌的实验D.提取匍萄糖的实验5 .以下有关纤维素分解菌

22、别离实验的说法中，不正确的选项是（）A.该实验过程中选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度B,将别离得到的菌种接种在加入伊红美蓝的鉴别培养基上C.当纤维素被纤维索分解菌释放的酹分解后，培养基上会出现透明圈D.在用刚果红染色时，既可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反响，也可以在倒平 板时就加入刚果红题组三筛选纤维素分解菌的实验流程及结果分析.在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前，一般先进行选择培养，其主要目的 是（）A.完全除去其他微生物6 .获得纤维素的分解产物C.增加纤维素分解菌的浓度D.使纤维素分解菌充分长大8. （2018湖南长沙期末）以下别离纤维素分解菌的实验过程中，操作

23、有误的是（）A.选择倒平板时就加入刚果红的染色法，需用1 mol/LNaQ溶液处理15分钟.选择培养时用液体培养基，并振荡培养12dC.经稀释涂布培养后，鉴定的过程需要用到鉴别培养基D.为确定得到纤维素分解菌，需要进行发酵产纤维素酶的实验8 .以下与纤维素分解菌及其别离实验有关的说法，正确的选项是()A.别离实验的操作流程：土壤取样一梯度稀释一选择培养一挑选菌落B.透明圈是由纤维素分解菌分解刚果红染料形成的C.在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌符合生物与环境相适应的生物学观点D.纤维素酶只包括三种组分：G酷、Cx酶、前萄糖甘酶叶综合强化.别离土壤中纤维素分解菌用到的方法是()稀释倒平板法稀释

24、涂布平板法单菌落挑取法选择培养A.B. C.D. (D.漆酶属于木质素降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。以下图是别离、 纯化和保存漆酶菌株的过程，卜.列相关表达正确的选项是()A.生活污水中含有大最微生物，是别离产漆酶菌株的首选样品B.筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C.在涂布平板上长出的菌落，不需要进一步纯化D.斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株12 .在纤维素分解菌的鉴定实验中，纤维素能的测定方法一般是()A.对纤维素进行定量测定B.对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡葡糖进行定量测定C.对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定D.对纤维素分解菌进行定量测定.某微生物培养基的配方如下：NaNO33 g, K2HPO41 g, KC1 0.5 g, MgSO4-7H2O 0.5 g, FeSO40.0Ig, (CH2O)30g, H2O 1 0(K) mL,青霉素().1万单位。请回答以下问题： (1)依物理性质，该培养基属于 培养基。(2)该培养基中的碳源是 o不管何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是