黄酮溶剂提取法.ppt

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1、三三 黄酮的提取与分离黄酮的提取与分离黄黄酮酮的的提提取取与与分分离离提取提取 分离分离 pH梯度萃取法溶剂萃取法柱色谱法 HPLC色谱法 溶剂提取法检识检识 理化检识 色谱检识 知识链接与拓展知识链接与拓展溶溶剂剂提提取取法法基本原理基本原理 操作形式操作形式 影响因素影响因素 浸渍法 煎煮法 渗漉法 回流法 连续回流法基本原理基本原理 根据中药化学成分与溶剂间根据中药化学成分与溶剂间“极性相似相溶极性相似相溶”的原理，依据各的原理，依据各类成分溶解度的差异，选择对所提成分溶解度大、对杂质溶解度小的类成分溶解度的差异，选择对所提成分溶解度大、对杂质溶解度小的溶剂，依据溶剂，依据“浓度差浓度差

2、”原理，将所提成分从药材中溶解出来的方法。原理，将所提成分从药材中溶解出来的方法。影响因素影响因素-溶剂、方法、粉碎度、温度、时间等1 1 药材粉碎度：药粉越细、表面积越大，提取效率越高。但太细，药粉对成分药材粉碎度：药粉越细、表面积越大，提取效率越高。但太细，药粉对成分的吸附也越强。因此水提取宜用粗粉；用有机溶剂可细些的吸附也越强。因此水提取宜用粗粉；用有机溶剂可细些,以以2020目为好。目为好。2 2 提取温度：一般热提效率高，但要考虑有些成分温度高易破坏，应选择适宜提取温度：一般热提效率高，但要考虑有些成分温度高易破坏，应选择适宜温度。温度。3 3 提取时间：一般提取时间长提出量大。但被

3、提成分在细胞内外溶解一旦平衡，提取时间：一般提取时间长提出量大。但被提成分在细胞内外溶解一旦平衡，时间长即无意义。一般热水提以时间长即无意义。一般热水提以1/2hr1/2hr为宜，乙醇提为宜，乙醇提1hr1hr为宜。为宜。4 4 提取溶剂的选择提取溶剂的选择:遵循遵循“相似者相溶相似者相溶”规律，选择对有效成分溶解度大，对无规律，选择对有效成分溶解度大，对无效成分溶解度小的溶剂做为提取溶剂效成分溶解度小的溶剂做为提取溶剂;溶剂沸点要适中、低毒安全、环保。溶剂沸点要适中、低毒安全、环保。5 5 提取方法的选择提取方法的选择:见后面见后面（一）化学成分的极性：被提取成分的极性是选（一）化学成分的极

4、性：被提取成分的极性是选择提取溶剂最重要的依据。择提取溶剂最重要的依据。1 1、影响化合物极性的因素：、影响化合物极性的因素：(1)(1)化合物分子母核大小（碳数多少）：分子大化合物分子母核大小（碳数多少）：分子大、碳数多，极性小；分子小、碳数少，极性大。、碳数多，极性小；分子小、碳数少，极性大。(2)(2)取代基极性大小：在化合物母核相同或相近取代基极性大小：在化合物母核相同或相近情况下，化合物极性大小主要取决于取代基极性情况下，化合物极性大小主要取决于取代基极性大小。大小。常常见见基基团团极极性性大大小小顺顺序序如如下下：酸酸酚酚醇醇胺胺醛酮酯醚烯烷。醛酮酯醚烯烷。举例：判断下列各组化合物

5、极性大小。举例：判断下列各组化合物极性大小。A B CA B C 常见中药化学成分类型的极性：常见中药化学成分类型的极性：极性较大的：苷类、生物碱盐、糖类、蛋白极性较大的：苷类、生物碱盐、糖类、蛋白质、氨基酸、鞣质、小分子有机酸、亲水性色素。质、氨基酸、鞣质、小分子有机酸、亲水性色素。极性小的：游离生物碱、苷元、挥发油、树极性小的：游离生物碱、苷元、挥发油、树脂、脂肪、大分子有机酸、亲脂性色素。脂、脂肪、大分子有机酸、亲脂性色素。溶剂的选择1、溶剂的分类水水：极性大，渗透力强，介电常数大；亲水性溶剂亲水性溶剂：极性较大，介电常数较大，常用的有甲醇、乙醇、丙酮；与水任何比例互溶；亲脂性溶剂亲脂性

6、溶剂：极性较小，介电常数小，常用的有乙酸乙酯、氯仿、乙醚、苯、石油醚。不溶或微溶于水。2 2、极性大小、极性大小 水水(H(H2 2O)O)甲醇甲醇(MeOHMeOH)乙醇乙醇(EtOHEtOH)丙酮（丙酮（MeMe2 2COCO）正丁醇正丁醇(n-BuOHn-BuOH)乙酸乙酯乙酸乙酯(EtOAcEtOAc)乙醚乙醚(Et(Et2 2O)O)氯仿氯仿(CHCl(CHCl3 3)苯（苯（C C6 6H H6 6)四氯化碳四氯化碳(CCl(CCl4 4)正己烷正己烷石油醚石油醚(Pet.et)(Pet.et)。亲亲水水性性溶溶剂剂亲亲脂脂性性溶溶剂剂问题：问题：1 1、比水重的有？、比水重的有？

7、2 2、不溶于水的有？、不溶于水的有？3 3、不溶于水极性最大的是？、不溶于水极性最大的是？4 4、与水互溶的有？、与水互溶的有？5 5、极性最大的有机溶剂是？、极性最大的有机溶剂是？6 6、极性最小的有机溶剂是？、极性最小的有机溶剂是？7 7、溶解范围最广的是？、溶解范围最广的是？8 8、是混合物的有？、是混合物的有？9 9、不同浓度乙醇极性大小比较？、不同浓度乙醇极性大小比较？（1）水水：最最常常用用。可可溶溶解解苷苷类类、生生物物碱碱盐盐、糖糖类类、蛋蛋白白质质、氨氨基基酸酸、鞣鞣质质、小小分分子子有有机机酸酸、有有机机酸酸盐盐、亲亲水水性性色色素素、无无机机盐盐。其其中中蛋蛋白白质质不

8、不溶于热水。溶于热水。缺缺点点：用用水水提提取取易易酶酶解解苷苷类类成成分分，且且易易霉霉坏坏变变质质。某某些些含含果果胶胶、粘粘液液质质类类成成分分的的中中草草药药，其其水水提提取取液液常常常常很很难难过过滤滤。沸沸水水提提取取时时，中中草草药药中中的的淀淀粉粉可可被被糊糊化化，而而增增加加过过滤滤的的困困难难。故故含含淀淀粉粉量量多多的的中中草草药药，不不宜宜磨磨成成细细粉粉后后加加水水煎煎煮。煮。（2 2）亲水性的有机溶剂：以乙醇最常用。乙醇）亲水性的有机溶剂：以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比较好。亲水性的成分除蛋白质、的溶解性能比较好。亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等

9、外，大多能在粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。乙醇中溶解。优点：应用范围广，易过滤，不霉变，易浓优点：应用范围广，易过滤，不霉变，易浓缩回收。缩回收。缺点：价高、不安全，需回流设备。缺点：价高、不安全，需回流设备。如：不同浓度乙醇能最大限度溶出的成分2030生物碱盐、蒽醌及其苷4050强心苷、鞣质6070皂苷、黄酮苷8095游离生物碱、挥发油（3）亲脂性的有机溶剂：这些溶剂的选择性能强，）亲脂性的有机溶剂：这些溶剂的选择性能强，用于亲脂性成分的提取，如用于亲脂性成分的提取，如游离生物碱、苷元、游离生物碱、苷元、挥发油等。挥发油等。优点：提取专属性强，易回收浓缩。优点：提取专

10、属性强，易回收浓缩。缺点：价高、易燃、有毒，穿透性差；对设缺点：价高、易燃、有毒，穿透性差；对设备要求高。备要求高。提取提取溶剂的选择原则溶剂的选择原则：（1 1）要对所提取成分溶解度大；对杂质溶）要对所提取成分溶解度大；对杂质溶 解度小。解度小。（2 2）要与所提取成分不起意外的化学变化。）要与所提取成分不起意外的化学变化。（3 3）要廉价、易得、安全。）要廉价、易得、安全。溶剂提取过程溶剂提取过程提取过程：指溶剂进入药材组织，溶解其中的化学成提取过程：指溶剂进入药材组织，溶解其中的化学成分，并将其提出的过程。分，并将其提出的过程。通过通过扩散扩散、渗透渗透、细胞内外的浓度差细胞内外的浓度差

11、，使细胞内的，使细胞内的浓溶液不断向外扩散，细胞外的溶剂不断渗透进入细浓溶液不断向外扩散，细胞外的溶剂不断渗透进入细胞内，如此反复。胞内，如此反复。（三）常用的提取方法（三）常用的提取方法浸渍法浸渍法渗漉法渗漉法煎煮法煎煮法回流提取法回流提取法连续回流提取法连续回流提取法1.浸渍法：浸渍法：常用溶剂：水、乙醇常用溶剂：水、乙醇仪器装置：有盖的容器仪器装置：有盖的容器操作过程：操作过程：将药材粗粉置容器中将药材粗粉置容器中加入适量的溶剂加入适量的溶剂常温或加热常温或加热（4080）浸泡（浸泡时应将容器盖严，并经常搅拌振）浸泡（浸泡时应将容器盖严，并经常搅拌振摇），一般浸泡摇），一般浸泡35日或按

12、规定时间倾取上清液过滤得提日或按规定时间倾取上清液过滤得提取液。（药材可重复浸泡取液。（药材可重复浸泡2-3次）。次）。药材粗粉药材粗粉置于有盖的容器中，置于有盖的容器中，加入适量溶剂（水或有机溶剂）加入适量溶剂（水或有机溶剂）每次浸泡一日以上，每次浸泡一日以上，提取提取2-3次使有效成分大部分浸出次使有效成分大部分浸出倾取上清液，过滤倾取上清液，过滤 药液药液提取范围：提取范围：适宜含适宜含淀粉淀粉、树胶等成分树胶等成分较多的药材以及较多的药材以及含挥发性含挥发性成分，成分，或或遇热不稳定易分解或被破坏成分遇热不稳定易分解或被破坏成分的提取。的提取。提取优缺点：操作简便。提取优缺点：操作简便

13、。缺点：提取时间长、溶剂用量大，提取效率不高，缺点：提取时间长、溶剂用量大，提取效率不高，水为溶剂易发霉、变质，必要时加适量防腐剂。水为溶剂易发霉、变质，必要时加适量防腐剂。2.渗漉法渗漉法常用溶剂：水，乙醇。常用溶剂：水，乙醇。仪器装置：渗漉装置仪器装置：渗漉装置提取范围：适宜对热不稳定且易分解的成分的提取。提取范围：适宜对热不稳定且易分解的成分的提取。提取优点：由于有较大的浓度差，提取效率较高。提取优点：由于有较大的浓度差，提取效率较高。缺点：溶剂用量大，操作较繁。缺点：溶剂用量大，操作较繁。药材粗粉药材粗粉加入适量溶剂，装入渗漉筒内加入适量溶剂，装入渗漉筒内在渗漉筒上端不断添加溶剂，在渗

14、漉筒上端不断添加溶剂，在渗漉筒的上端不断添加溶剂，在渗漉筒的上端不断添加溶剂，使其渗过药粉，溶出可溶性成分使其渗过药粉，溶出可溶性成分提取液提取液 渗漉法渗漉法（1 1）溶剂：水、乙醇）溶剂：水、乙醇（2 2）仪器装置及操作：渗漉装置）仪器装置及操作：渗漉装置（3 3）适于：成分易挥发或受热不稳定药材。）适于：成分易挥发或受热不稳定药材。不适于：不适于：无组织结构的药材：乳香、没药、儿茶等。无组织结构的药材：乳香、没药、儿茶等。（4 4）特点：）特点：溶剂用量大，提取时间长，但提取效率较浸渍法高。溶剂用量大，提取时间长，但提取效率较浸渍法高。装筒时注意：装筒时注意：先用脱脂棉垫底部防药粉泄漏先

15、用脱脂棉垫底部防药粉泄漏分次装筒，层层压平，约分次装筒，层层压平，约2/32/3容积容积上部覆盖滤纸或纱布加重物压住防药粉浮冲上部覆盖滤纸或纱布加重物压住防药粉浮冲开活塞加溶剂至流出，排除筒内空气再关活开活塞加溶剂至流出，排除筒内空气再关活塞，加溶剂至高出药粉数塞，加溶剂至高出药粉数cm操作：操作：药材粉碎药材粉碎润湿润湿装筒装筒排气排气浸渍浸渍渗漉。渗漉。工业生产渗漉器示意图：工业生产渗漉器示意图：3.煎煮法煎煮法常用溶剂：水常用溶剂：水仪器装置：砂锅、铝锅等。仪器装置：砂锅、铝锅等。操作范围：操作范围：对含挥发性即遇热不稳定的成分的药材不宜用此法。对含挥发性即遇热不稳定的成分的药材不宜用此

16、法。提取优缺点：提取优缺点：本法简便易行，提取效率比冷浸法高，但水溶性杂本法简便易行，提取效率比冷浸法高，但水溶性杂质多，易发霉。质多，易发霉。步骤：步骤：将中药饮片或粗粉置适当容器中，加水浸过药面，将中药饮片或粗粉置适当容器中，加水浸过药面，直火加热直火加热23次，每次煎煮的时间可根据药材量次，每次煎煮的时间可根据药材量而定。而定。注意：煎煮中要不断搅拌。少量药材可用砂锅、注意：煎煮中要不断搅拌。少量药材可用砂锅、搪瓷器具，忌用铁锅或铁器。搪瓷器具，忌用铁锅或铁器。工业上常用多功能提取罐：多功能提取罐生产操作注意事项：多功能提取罐生产操作注意事项：a、多功能提取罐开车前应全面检查电气线路及控

17、制系统是否正多功能提取罐开车前应全面检查电气线路及控制系统是否正常，为避免出渣门开启时自重而产生的冲力使活塞杆受损，常，为避免出渣门开启时自重而产生的冲力使活塞杆受损，控制箱中针形阀开度必须合适，应使出渣门缓缓平稳打开。控制箱中针形阀开度必须合适，应使出渣门缓缓平稳打开。b、当设备带压操作或压力没有恢复常压之前，严禁开启投料们、当设备带压操作或压力没有恢复常压之前，严禁开启投料们及出渣门。当关闭加料门时，必须是定位销进入沟槽内。罐及出渣门。当关闭加料门时，必须是定位销进入沟槽内。罐内加料加液后必须检查出渣门保险气缸是否处于锁定保险状态。内加料加液后必须检查出渣门保险气缸是否处于锁定保险状态。c

18、、使用乙醇提取时，要采用真空操作，或经冷却器后流入提取、使用乙醇提取时，要采用真空操作，或经冷却器后流入提取罐内，不能采用水泵强制循环。罐内，不能采用水泵强制循环。d、通蒸汽进入夹套时，缓慢开启蒸汽阀门，蒸汽压力不能超过、通蒸汽进入夹套时，缓慢开启蒸汽阀门，蒸汽压力不能超过2.0Mpa，安装时必须设有减压阀、安全阀、压力表。，安装时必须设有减压阀、安全阀、压力表。4.回流提取法回流提取法常用溶剂：有机溶剂。常用溶剂：有机溶剂。仪器装置：回流加热装置。仪器装置：回流加热装置。提取范围：不适用于对热不稳定及易分解的提取范围：不适用于对热不稳定及易分解的成分。成分。提取优缺点：提取效率比冷浸法高。但

19、装置提取优缺点：提取效率比冷浸法高。但装置较复杂。较复杂。操作过程：将药材粗粉装于园底烧瓶中操作过程：将药材粗粉装于园底烧瓶中加入适量溶剂加入适量溶剂水浴中加热回流提取水浴中加热回流提取1h过滤（残渣重复提取两次，合并提取液）过滤（残渣重复提取两次，合并提取液）提取液。提取液。回流提取装置图常用溶剂：有机溶剂。常用溶剂：有机溶剂。仪器装置：连续回流提取装置仪器装置：连续回流提取装置提取范围：不适于对热不稳定成分的提取。提取范围：不适于对热不稳定成分的提取。提取优缺点：溶剂用量少，提取效率高。但提取优缺点：溶剂用量少，提取效率高。但装置设备要求高。装置设备要求高。5.连续回流提取法连续回流提取法

20、操作过程：操作过程：将药材置于铝纸袋中，放入提取器内将药材置于铝纸袋中，放入提取器内连接连接装置装置水浴加热回流提取适当时间水浴加热回流提取适当时间提取提取液。液。提取器提取器冷凝管冷凝管 虹吸管虹吸管冷凝管提取器烧瓶电热套操作形式操作形式方方法法常用溶剂常用溶剂优优点点缺缺点点浸渍法浸渍法水和醇水和醇室温提取不易破坏成分，设室温提取不易破坏成分，设备简单，适合提取含淀粉或备简单，适合提取含淀粉或黏液质多的药材。可配合黏液质多的药材。可配合超超声波声波处理提高提取效率。处理提高提取效率。时间长次多，提取效时间长次多，提取效率低。提取液易发霉率低。提取液易发霉渗漉法渗漉法水和醇水和醇室温提取不易

21、破坏成分，设室温提取不易破坏成分，设备简单，保持较备简单，保持较高浓度差高浓度差提提取效率高。取效率高。溶剂用量较多溶剂用量较多煎煮法煎煮法水水设备简单，提取较全面设备简单，提取较全面加热提取易破坏成分，加热提取易破坏成分，挥发性成分易损失，挥发性成分易损失，不适合提取含淀粉或不适合提取含淀粉或黏液质多的药材黏液质多的药材回流法回流法有机溶剂有机溶剂加热提取效率较高加热提取效率较高易破坏热敏性成分，易破坏热敏性成分，操作较繁操作较繁连续回流法连续回流法有机溶剂有机溶剂保持较保持较高浓度差高浓度差提取效率高，提取效率高，操作操作简便简便，溶剂，溶剂用量少用量少提取液受热时间长，提取液受热时间长，

22、成分易破坏成分易破坏黄酮类成分提取方法黄酮类成分提取方法溶剂法溶剂法 溶剂法溶剂法 关键关键 溶剂的选择溶剂的选择 选择依据选择依据 黄酮类成分的存在状态（游离、苷）及溶解性黄酮类成分的存在状态（游离、苷）及溶解性 溶溶剂剂的溶解性能的溶解性能 提取方法（煎煮法、渗漉法、回流法等）的提取方法（煎煮法、渗漉法、回流法等）的选择选择 溶剂 提取原理 游离黄酮 黄酮苷 备 注 乙醇乙醇 溶解范溶解范围围广广 +（甲醇）（甲醇）苷、苷元均可溶苷、苷元均可溶 （9095%）(60%）甲醇毒性大甲醇毒性大沸水沸水 多糖苷易于水多糖苷易于水 +成本低、安全成本低、安全,水溶性水溶性杂质杂质多多 碱性水或碱性

23、水或 稀稀氢氢氧化氧化钠钠溶出能力溶出能力强强 碱性乙醇碱性乙醇 酚酚羟羟基的酸性基的酸性 +石灰水除石灰水除杂质杂质效果好效果好 碱溶酸沉法注意：（1 1）碱性不宜过强，尤其在加热时易破坏黄酮。）碱性不宜过强，尤其在加热时易破坏黄酮。（2 2）酸沉淀时，酸性不宜过强，否则，黄酮形）酸沉淀时，酸性不宜过强，否则，黄酮形 成烊盐而损失。成烊盐而损失。（3 3）用）用Ca(OH)2,可沉淀杂质，有利于纯化。可沉淀杂质，有利于纯化。稀NaOH：浸出能力强，杂质多，酸化后需迅速过滤除杂石灰水：浸出能力中，能形成钙盐沉淀除去鞣质、羧基多 糖等杂质（如：芦丁的提取）5%NaOH/EtOH：浸出效果好，但收率降低浓碱：破坏母核。具邻二酚羟基加硼酸保护课堂活动播放录像 回流法 索氏提取法