第十一讲蛋白质的测定课件.ppt

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1、第十一讲蛋白质的测第十一讲蛋白质的测定定第1页，此课件共56页哦教学内容n了解蛋白质和蛋白质系数、氨基酸和氨基酸了解蛋白质和蛋白质系数、氨基酸和氨基酸态氮的概念，凯氏定氮法原理和方法，氨态氮的概念，凯氏定氮法原理和方法，氨基酸和氨基酸态氮的测定原理；基酸和氨基酸态氮的测定原理；n掌掌握握凯凯氏氏定定氮氮法法和和双双指指示示剂剂甲甲醛醛滴滴定定法法、电电位滴定法。位滴定法。第2页，此课件共56页哦自学引导题自学引导题1、蛋白质系数是如何计算出来的？、蛋白质系数是如何计算出来的？2、蛋白质的测定方法有哪些？国家标准是哪一、蛋白质的测定方法有哪些？国家标准是哪一种方法？种方法？第3页，此课件共56页

2、哦6.1概述概述(1)蛋白质的生理功能蛋白质的生理功能(2)蛋白质含量的测定意义蛋白质含量的测定意义(3)蛋白质的组成及性质蛋白质的组成及性质(4)蛋白质的测定方法蛋白质的测定方法(5)蛋白质系数蛋白质系数第4页，此课件共56页哦第5页，此课件共56页哦l2004/4安徽阜安徽阜阳劣质奶粉致阳劣质奶粉致大头娃娃171,13人人死死l头脸胖大，四肢细短，体重比出生时还轻 l205个奶粉品46个不合格生产厂家的55种奶粉。分布8个省，其中蛋白质含量低于5%的有31种，最少的仅为0.37%，第6页，此课件共56页哦（1 1）蛋白质的生理功能）蛋白质的生理功能蛋白质是生命的物质基础蛋白质是生命的物质基

3、础维持人体的酸碱平衡、水平衡维持人体的酸碱平衡、水平衡遗传信息的传递遗传信息的传递物质的代谢及运转都与蛋白质有关。物质的代谢及运转都与蛋白质有关。6.1概述概述第7页，此课件共56页哦(2)蛋白质含量的测定意义蛋白质含量的测定意义n人体重要的营养物质人体重要的营养物质,食品的营养指标。食品的营养指标。n合合理理开开发发利利用用食食品品资资源源、优优化化食食品品配配方方、指指导导经经济济核核算算及及生生产产过过程程控控制制 、提提高高和和监监督督产产品质量品质量。第8页，此课件共56页哦蛋白质是复杂的含氮有机蛋白质是复杂的含氮有机化合化合物，分子量很大物，分子量很大。组组成成：2020种种氨氨基

4、基酸酸通通过过酰酰胺胺键键以以一一定定的的方方式式结结合合起起来来化学元素：化学元素：C C、H H、O O、N N（P P、S S、CuCu、FeFe、I I）；）；官能基团：肽键、氨基酸残基、酸碱基因、芳香基团官能基团：肽键、氨基酸残基、酸碱基因、芳香基团结结论论：含含氮氮则则是是蛋蛋白白质质区区别别其其他他有有机机化化合合物物的的主主要要标标志志。(3)(3)蛋白质的组成及性质蛋白质的组成及性质第9页，此课件共56页哦 可分为两大类：可分为两大类：n 一类是利用蛋白质的共性，如含氮、肽键、折射率等一类是利用蛋白质的共性，如含氮、肽键、折射率等 ；n 另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸

5、性或碱性另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性或碱性基团以及芳香基团等测定蛋白质含量。基团以及芳香基团等测定蛋白质含量。n目前目前蛋白质测定最常用的方法是凯氏定氮法蛋白质测定最常用的方法是凯氏定氮法，通过测总氮，通过测总氮量来确定蛋白质含量。量来确定蛋白质含量。(4)蛋白质的测定方法蛋白质的测定方法第10页，此课件共56页哦蛋蛋白白质质系系数数：每每份份氮氮素素相相当当于于的的蛋蛋白白质质的的份份数数。一一般般蛋蛋白白质质含含氮氮为为16%16%，所所以以1 1份份氮氮素素相相当当于于6.256.25份份蛋蛋白白质质。此此数数值值（6.256.25）称称为为蛋蛋白白质系数质系数，用，用F F

6、表示。表示。不不同同的的蛋蛋白白质质由由于于氨氨基基酸酸的的构构成成比比例例及及方方式式不同，含氮量不同。不同，含氮量不同。不同种类不同种类的的食品的蛋白质系数有所不同食品的蛋白质系数有所不同。(5)蛋白质系数蛋白质系数第11页，此课件共56页哦n不同产品的蛋白质系数不同产品的蛋白质系数(F)玉米、鸡蛋、青豆等：玉米、鸡蛋、青豆等：6.25花生：花生：5.46大米：大米：5.95大豆及制品：大豆及制品：5.71小麦：小麦：5.70牛乳及制品：牛乳及制品：6.38第12页，此课件共56页哦(1)原理原理样样品品与与浓浓硫硫酸酸和和催催化化剂剂一一同同加加热热消消化化，使使蛋蛋白白质质分分解解，其

7、其中中碳碳和和氢氢被被氧氧化化为为二二氧氧化化碳碳和和水水逸逸出出，而而样样品品中中的的有有机机氮氮转转化化为为氨氨与与硫硫酸酸结结合合成成硫硫酸酸铵铵。然然后后加加碱碱蒸蒸馏馏，使使氨氨蒸蒸出出，用用硼硼酸酸吸吸收收后后再再以以标标准准盐盐酸酸或或硫硫酸酸溶溶液液滴滴定定。从从消消耗耗的的标标准准酸酸计计算算出出总总氮氮量量，再再折折算算为为粗蛋白含量。粗蛋白含量。常量常量凯氏定氮法凯氏定氮法1、通过学习觊氏定氮法的原理，我们可知道操作分、通过学习觊氏定氮法的原理，我们可知道操作分为哪几个大的步骤？为哪几个大的步骤？2、加入、加入硫酸钾硫酸钾、硫酸铜的作用是什么？、硫酸铜的作用是什么？自学引

8、导第13页，此课件共56页哦1、消化消化反应方程式如下：反应方程式如下：2NH2(CH)2COOH2NH2(CH)2COOH 13H2SO413H2SO4(NH4)2SO4(NH4)2SO4 6CO2 12SO2 16H2O浓硫酸具有浓硫酸具有浓硫酸具有浓硫酸具有脱水性脱水性，使有机物脱水后被炭化为碳、氢、使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氮。氮。浓硫酸又具有浓硫酸又具有氧化性氧化性氧化性氧化性，将有机物炭化后的碳氧化为二将有机物炭化后的碳氧化为二氧化碳，硫酸则被还原成二氧化硫：氧化碳，硫酸则被还原成二氧化硫：2H2H2 2SOSO4 4 C C 2SO2SO2 2 2H2H2 2O O COCO

9、2 2第14页，此课件共56页哦 在消化完全的样品溶液中加入浓氢氧化在消化完全的样品溶液中加入浓氢氧化钠使呈碱性，加热蒸馏，即可释放出氨气，钠使呈碱性，加热蒸馏，即可释放出氨气，反应方程式如下：反应方程式如下：2、蒸馏、蒸馏2N2Na aOHOH (NH(NH4 4)2 2SOSO4 4 2NH2NH3 3 NaNa2 2SOSO4 4 2H2H2 2O O第15页，此课件共56页哦3、吸收、吸收加热蒸馏所放出的氨，可用硼酸溶液进行吸收：加热蒸馏所放出的氨，可用硼酸溶液进行吸收：2NH3+4H3BO3(NH4)2B4O7+5H2O4、滴定、滴定待吸收完全后，再用盐酸标准溶液滴定：待吸收完全后，

10、再用盐酸标准溶液滴定：(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O2NH4Cl+4H3BO3第16页，此课件共56页哦第17页，此课件共56页哦 准准确确称称取取均均匀匀的的固固体体样样品品0.53g,或或半半固固体体样样品品25g,或或吸吸取取溶溶液液样样品品1525ml。小小心心移移入入干干燥燥的的凯凯氏氏烧烧瓶瓶中中(勿勿粘粘附附在在瓶瓶壁壁上上)。加加入入0.51g硫硫酸酸铜铜、10g硫硫酸酸钾钾及及25ml浓浓硫硫酸酸，小小心心摇摇匀匀后后，于于瓶瓶口口置置一一小小漏漏斗斗，瓶瓶颈颈45角角倾倾斜斜置置电电炉炉上上，在在通通风风橱橱内加热消化内加热消化。(2 2)测定方法测定方法样品消化

11、样品消化样品消化样品消化第18页，此课件共56页哦n若无通风橱可于瓶口倒插入一口径适宜的干燥管，若无通风橱可于瓶口倒插入一口径适宜的干燥管，用胶管与水力真空管相连接，利用水力抽除消化用胶管与水力真空管相连接，利用水力抽除消化过程所产生的烟气。过程所产生的烟气。n先以小火缓慢加热，待内容物完全炭化、泡沫消先以小火缓慢加热，待内容物完全炭化、泡沫消失后，加大火力消化至溶液呈蓝绿色。取下漏斗，失后，加大火力消化至溶液呈蓝绿色。取下漏斗，继续加热继续加热0.5h，冷却至室温。，冷却至室温。第19页，此课件共56页哦注意问题：注意问题：n加入样品不要沾附在凯氏烧瓶瓶颈；加入样品不要沾附在凯氏烧瓶瓶颈；n

12、消化开始时不要用强火，要控制好热源，消化开始时不要用强火，要控制好热源，并注意不时转动凯氏烧瓶，以便利用冷凝并注意不时转动凯氏烧瓶，以便利用冷凝酸液将附在瓶壁上的固体残渣洗下并促进酸液将附在瓶壁上的固体残渣洗下并促进其消化完全；其消化完全；第20页，此课件共56页哦n样品中若含脂肪或糖较多，在消化前应加入少样品中若含脂肪或糖较多，在消化前应加入少量辛醇或液体石蜡或硅油作消泡剂，以防消化过量辛醇或液体石蜡或硅油作消泡剂，以防消化过程中产生大量泡沫；程中产生大量泡沫；n消化完全后要冷至室温才能稀释或定容。消化完全后要冷至室温才能稀释或定容。所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。所用试剂溶液应用无氨蒸馏水

13、配制。第21页，此课件共56页哦蒸馏蒸馏、吸收吸收第22页，此课件共56页哦n按图装好蒸馏装置，按图装好蒸馏装置，冷凝管下端浸入接冷凝管下端浸入接受瓶液面之下受瓶液面之下（瓶内预先装有（瓶内预先装有50ml40gL硼酸溶液及混合指示剂硼酸溶液及混合指示剂56滴）。滴）。第23页，此课件共56页哦注意问题：注意问题：n安装的装置应整齐美观、协调，仪器各部件安装的装置应整齐美观、协调，仪器各部件应在同一平面内平行或垂直。应在同一平面内平行或垂直。n不能漏气。不能漏气。第24页，此课件共56页哦n要注意控制热源要注意控制热源使蒸汽产生稳定使蒸汽产生稳定，不能时猛，不能时猛时弱，以免吸收液倒吸；蒸馏前

14、加碱量应时弱，以免吸收液倒吸；蒸馏前加碱量应使消化液呈深蓝色或产生黑色沉淀。使消化液呈深蓝色或产生黑色沉淀。n冷凝管下端先插入硼酸吸收液液面以下才能冷凝管下端先插入硼酸吸收液液面以下才能蒸馏。蒸馏。第25页，此课件共56页哦3、滴定、滴定n将接受瓶内的硼酸液用将接受瓶内的硼酸液用0.1mol/L盐酸标准盐酸标准溶液滴定至终点。同时做一试剂空白（除溶液滴定至终点。同时做一试剂空白（除不加样品，从消化开始操作完全相同）。不加样品，从消化开始操作完全相同）。注意问题：注意问题：n所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。第26页，此课件共56页哦（3）试剂消化用：消化用：n浓硫

15、酸浓硫酸n硫酸钾硫酸钾n硫酸铜硫酸铜蒸馏用：蒸馏用：n40%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液第27页，此课件共56页哦吸收用：吸收用：n4%硼酸硼酸滴定用：滴定用：n0.1000mol/LHCl标准溶液标准溶液n0.1%甲基红乙醇溶液与甲基红乙醇溶液与0.1%溴甲酚绿乙溴甲酚绿乙醇溶液混合指示剂醇溶液混合指示剂第28页，此课件共56页哦硫酸钾硫酸钾的作用的作用 加加入入硫硫酸酸钾钾可可以以提提高高溶溶液液的的沸沸点点而而加加快快有有机机物物的的分分解解，它它与与硫硫酸酸作作用用生生成成硫硫酸酸氢氢钾钾可可提提高高反反应应温度其反应式如下：温度其反应式如下：K2SO4+H2SO4=2KHSO42KHSO

16、4=K2SO4+H2O+SO3但但硫硫酸酸钾钾加加入入量量不不能能太太大大，否否则则消消化化体体系系温温度度过过高高，又又会会引引起起已已生生成成的的铵铵盐盐发发生生热热分分解解而而造造成损失：成损失：（NH4）2SO4=NH3+(NH4)HSO42(NH4)HSO4=2NH3+2SO3+2H2O第29页，此课件共56页哦硫酸铜的作用催催化化作作用用、指指示示作作用用（消消化化完完全全指指示示：蓝蓝绿绿色色；蒸蒸馏馏时时碱碱性性反反应应完完全全指指示示：变变深深蓝蓝色或产生黑色沉淀）色或产生黑色沉淀）第30页，此课件共56页哦 说明事项：说明事项：蒸蒸馏馏过过程程应应注注意意接接头头处处无无松

17、松漏漏现现象象，蒸蒸馏馏完完毕毕，先先将将蒸蒸馏馏出出口口离离开开液液面面，继继续续蒸蒸馏馏1 1minmin，将将附附着着在在尖尖端端的的吸吸收收液液完完全全洗洗入入吸吸收收瓶瓶内内，再再将将吸吸收收瓶瓶移移开开，最最后后关关闭闭电电源源，绝绝不不能能先先关关闭闭电电源源，否否则则吸吸收液将发生倒吸。收液将发生倒吸。第31页，此课件共56页哦微量凯氏定氮法微量凯氏定氮法n微微量量凯凯氏氏定定氮氮法法的的原原理理与与操操作作方方法法，与与常常量量法法基基本本相相同同，所所不不同同的的是是样样品品质质量量及及试试剂剂用用量量较较少少，且且有有一一套套适适于于微微量量测测定定的的定定型仪器型仪器微

18、量凯氏定氮器。微量凯氏定氮器。第32页，此课件共56页哦6.3氨基酸态氮的测定氨基酸态氮的测定n为提高蛋白质的生理效价而进行食品氨基酸互为提高蛋白质的生理效价而进行食品氨基酸互补和强化的理论，对食品加工工艺的改革，对补和强化的理论，对食品加工工艺的改革，对保健食品的开发及合理配膳等工作都具有积极保健食品的开发及合理配膳等工作都具有积极的指导作用。因此，食品及其原料中氨基酸的的指导作用。因此，食品及其原料中氨基酸的分离、鉴定和定量也就具有极其重要的意义。分离、鉴定和定量也就具有极其重要的意义。第33页，此课件共56页哦n氨基酸的含量一直是某些发酵产品如氨基酸的含量一直是某些发酵产品如调味品的质量

19、指标，也是目前许多保健调味品的质量指标，也是目前许多保健食品的质量指标之一，其中的含氮量可食品的质量指标之一，其中的含氮量可直接测定，不同于蛋白质的氮，故称为直接测定，不同于蛋白质的氮，故称为氨基酸态氮。氨基酸态氮。n氨基酸态氮反映的是样品中游离氨基氨基酸态氮反映的是样品中游离氨基酸的总量。酸的总量。第34页，此课件共56页哦氨基酸态氮的氨基酸态氮的测定测定双指示剂甲醛滴定法双指示剂甲醛滴定法电位电位滴定法滴定法第35页，此课件共56页哦6.4.1双指示剂甲醛滴定法双指示剂甲醛滴定法(1)原理原理氨基酸具有酸性的氨基酸具有酸性的-COOH基和碱性的基和碱性的-NH2基。它们相互作用而使氨基酸成

20、为中性的基。它们相互作用而使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时，内盐。当加入甲醛溶液时，-NH2基与甲醛基与甲醛结合，从而破坏内盐。这样就可以用强碱结合，从而破坏内盐。这样就可以用强碱标准溶液来滴定标准溶液来滴定-COOH基，并用间接的方基，并用间接的方法测定氨基酸的总量。法测定氨基酸的总量。第36页，此课件共56页哦（2）操作：）操作：n用中性红作指示剂，先测定其它游离酸用中性红作指示剂，先测定其它游离酸的含量的含量n再用百里酚酞作指示剂测定氨基酸和游再用百里酚酞作指示剂测定氨基酸和游离酸的总含量。离酸的总含量。（3）方法适用范围）方法适用范围n浅色样品浅色样品第37页，此课件共56页哦

21、(4)操作方法操作方法移取含氨基酸约移取含氨基酸约2030mg的样品溶液的样品溶液2份，分别份，分别置于置于250ml锥形瓶中，各加锥形瓶中，各加50ml蒸馏水，其中蒸馏水，其中1份加份加入入3滴中性红指示剂，用滴中性红指示剂，用0.1mol/L氢氧化钠标准溶液氢氧化钠标准溶液滴定至由红色变为琥珀滴定至由红色变为琥珀色为终点；另色为终点；另1份加入份加入3滴百里滴百里酚酞指示剂及中性甲醛酚酞指示剂及中性甲醛20ml，摇匀，静置，摇匀，静置1分钟，用分钟，用0.1ml/L氢氧化钠标准溶液滴定至淡蓝色为终点。分氢氧化钠标准溶液滴定至淡蓝色为终点。分别纪录两次所消耗的碱液别纪录两次所消耗的碱液ml数

22、。数。第38页，此课件共56页哦式中式中c氢氧化钠标准溶液的浓度，氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L;V1用中性红作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准用中性红作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液的体积，溶液的体积，mL;V2用百里酚酞作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准用百里酚酞作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液的体积，溶液的体积，mL;m测定用样品溶液相当于样品的质量，测定用样品溶液相当于样品的质量，g0.014氮的毫摩尔质量，氮的毫摩尔质量，g/mmol(5)结果计算结果计算 氨基酸态氮（%）第39页，此课件共56页哦6.4.2电位滴定法电位滴定法(1)原理原理根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的

23、碱根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，将酸度计的电极插入被测性，使羧基显示出酸性，将酸度计的电极插入被测液中，用氢氧化钠标准溶液滴定，依据酸度计指示液中，用氢氧化钠标准溶液滴定，依据酸度计指示的的pH值判断和控制滴定终点。值判断和控制滴定终点。(2)仪器仪器酸度计（附磁力搅拦器）；酸度计（附磁力搅拦器）；第40页，此课件共56页哦(3)试验步骤试验步骤样品处理样品处理n吸取样品液于吸取样品液于100mL容量瓶中容量瓶中,加水定容。加水定容。吸取定容液吸取定容液20.00mL于于250mL烧杯中烧杯中,加水加水60mL，放入磁力转子，开动磁力搅拌器，放入磁力转子，开

24、动磁力搅拌器使转速适当。用标准缓冲液校正好酸度计，使转速适当。用标准缓冲液校正好酸度计，然后将电极清洗干净，再插入到上述样品然后将电极清洗干净，再插入到上述样品液中，用液中，用NaOH标准溶液滴定至酸度计指标准溶液滴定至酸度计指示示pH8.2,记下消耗的记下消耗的NaOH溶液体积。溶液体积。第41页，此课件共56页哦氨基酸的滴定氨基酸的滴定n在上述滴定至在上述滴定至pH8.2的溶液中加入的溶液中加入10.00mL的中性甲醛溶液，再用的中性甲醛溶液，再用NaOH标准溶液滴定标准溶液滴定至至pH9.2,记下消耗的记下消耗的NaOH溶液体积。溶液体积。第42页，此课件共56页哦空白滴定空白滴定n吸取

25、吸取80mL蒸馏水于蒸馏水于250mL的烧杯中，用的烧杯中，用NaOH标准标准溶液滴定至溶液滴定至pH8.2,然后加入然后加入10.00mL中性甲醛溶液，中性甲醛溶液，再用再用NaOH标准溶液滴定至标准溶液滴定至pH9.2,记下加入甲醛后消耗记下加入甲醛后消耗的的NaOH溶液体积。溶液体积。n操作说明：操作说明：第一次滴定是除去其它游离酸，所消耗第一次滴定是除去其它游离酸，所消耗的的NaOH溶液体积不用于计算。溶液体积不用于计算。第二步滴定才是测定氨基酸，用消耗的第二步滴定才是测定氨基酸，用消耗的NaOH溶液体积进行计算。溶液体积进行计算。第43页，此课件共56页哦（V1-V2）C0.014氨

26、基酸态氮氨基酸态氮%=100m20/100V1-酱油稀释液在加入甲醛后滴定至酱油稀释液在加入甲醛后滴定至pH9.2所用所用NaOH标准溶液的体积标准溶液的体积mLV2-空白滴定在加入甲醛后滴定至空白滴定在加入甲醛后滴定至pH9.2所用所用NaOH标准溶液的体积标准溶液的体积mLC-NaOH标准溶液的浓度标准溶液的浓度mol/Lm-吸取的酱油的质量吸取的酱油的质量g0.014-氮的毫摩尔质量氮的毫摩尔质量g/mmol（4）结果计算第44页，此课件共56页哦作业作业n现抽取南宁酱油厂生产的塑料袋装铁鸟牌酱油现抽取南宁酱油厂生产的塑料袋装铁鸟牌酱油1袋袋（规格（规格500mL）（生产日期）（生产日期

27、20050520），要求测定），要求测定氨基酸态氮含量。氨基酸态氮含量。n某检验员按密度瓶法测定了该酱油的相对密度为某检验员按密度瓶法测定了该酱油的相对密度为1.128，然后吸取酱油，然后吸取酱油5.00mL于于100mL容量瓶中容量瓶中,加加水定容。水定容。n吸取定容液吸取定容液20.00mL于于250mL烧杯中烧杯中,加水加水60mL，放入磁力转子，开动磁力搅拌器使转速适当。用，放入磁力转子，开动磁力搅拌器使转速适当。用pH6.18的标准缓冲液校正好酸度计，然后将电极清的标准缓冲液校正好酸度计，然后将电极清洗干净，再插入到上述酱油液中，用洗干净，再插入到上述酱油液中，用0.0498mol/

28、LNaOH标准溶液滴定至酸度计指示标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2,消耗的消耗的NaOH溶液体积为溶液体积为2.21mL。第45页，此课件共56页哦n在上述滴定至在上述滴定至pH8.2的溶液中加入的溶液中加入10.00mL的中性的中性甲醛溶液，再用甲醛溶液，再用NaOH标准溶液滴定至标准溶液滴定至pH9.2,消耗的消耗的NaOH溶液体积为溶液体积为9.12mL。n吸取吸取80mL蒸馏水于蒸馏水于250mL的烧杯中，用的烧杯中，用NaOH标准溶标准溶液滴定至液滴定至pH8.2,然后加入然后加入10.00mL中性甲醛溶液，再中性甲醛溶液，再用用NaOH标准溶液滴定至标准溶液滴定至pH9.2,加入

29、甲醛后消耗的加入甲醛后消耗的NaOH溶液体积为溶液体积为1.36mL。n1、请问在测定过程中为什么要加入中性甲醛？、请问在测定过程中为什么要加入中性甲醛？n2、计算该次氨基酸态氮含量测定结果。、计算该次氨基酸态氮含量测定结果。n3、该检验员按同样的方法另作了、该检验员按同样的方法另作了4次测定，结果分次测定，结果分别为别为0.49%,0.36%,0.50%,0.52%，请你写一份完整，请你写一份完整的检验评价报告。的检验评价报告。第46页，此课件共56页哦n相关知识点回顾：相关知识点回顾：一、可疑值的取舍一、可疑值的取舍Q检验法：检验法：n当测定次数较少时当测定次数较少时,Q检验法是一种常用检

30、验法是一种常用n的简便方法。该法是将测定值按大小顺的简便方法。该法是将测定值按大小顺n序排列序排列,由可疑值与其相邻值之差的绝对由可疑值与其相邻值之差的绝对n值除以极差值除以极差,求得求得Q值。值。第47页，此课件共56页哦nQ值愈大值愈大,表明可疑值离群愈远表明可疑值离群愈远,当当Q值超值超过一定界限时应舍去可疑值。下表为不同过一定界限时应舍去可疑值。下表为不同置信度时的置信度时的Q值。当计算值大于或等于表中值。当计算值大于或等于表中值时值时,该可疑值应舍去该可疑值应舍去,否则应予保留。否则应予保留。第48页，此课件共56页哦n例如例如,平行测定盐酸浓度平行测定盐酸浓度(mol/L),结果为

31、结果为0.1014,0.1021,0.1016,0.1013。试问。试问0.1021在置信度为在置信度为90%时是否应舍去。时是否应舍去。第49页，此课件共56页哦n查表查表,当当n=4,Q0.90=0.76。因。因QQ0.90,故故0.1021不能舍去。不能舍去。n当测定次数在当测定次数在3-10次之间时，最好用次之间时，最好用Q检检验法。验法。第50页，此课件共56页哦n二、对方法相对标准偏差的要求，一般主要取二、对方法相对标准偏差的要求，一般主要取决于被测对象的含量，含量越高要求相对标准决于被测对象的含量，含量越高要求相对标准偏差越低，例如，大于偏差越低，例如，大于10%的含量相对标准偏

32、的含量相对标准偏差一般不大于差一般不大于1%，随着含量的降低，相对标准，随着含量的降低，相对标准偏差可逐步增加，偏差可逐步增加，5%，10%，20%，30%甚至甚至50%。生产工艺有特殊要求的，由技术条件决。生产工艺有特殊要求的，由技术条件决定。定。n第51页，此课件共56页哦习题讲解：习题讲解：解：解：1、加入中性甲醛是为了固定氨基酸中的、加入中性甲醛是为了固定氨基酸中的氨基，使羧基显示出酸性，才能进行氨基氨基，使羧基显示出酸性，才能进行氨基酸测定。酸测定。2、依据题意，酱油的相对密度、依据题意，酱油的相对密度d420=1.128,取样体积取样体积V5.00mL酱油的质量酱油的质量md420

33、V1.1285.005.64g第52页，此课件共56页哦n酱油稀释液在加入甲醛后滴定至酱油稀释液在加入甲醛后滴定至pH9.2所用所用NaOH标准溶液的体积标准溶液的体积V19.12mLn空白滴定在加入甲醛后滴定至空白滴定在加入甲醛后滴定至pH9.2所用所用NaOH标准溶液的体积标准溶液的体积V21.36mLnNaOH标准溶液的浓度标准溶液的浓度C0.0498mol/L第53页，此课件共56页哦n根据电位滴定法，计算氨基酸态氮含量：根据电位滴定法，计算氨基酸态氮含量：n（V1-V2）C0.014n氨基酸态氮氨基酸态氮%=100nm20/100n（9.12-1.36）0.04980.014n100

34、n5.6420/100n0.48第54页，此课件共56页哦3、先进行数据处理、先进行数据处理从大到小排列测定结果数据：从大到小排列测定结果数据：0.36%，0.48%，0.49%,0.50%,0.52%可以看出可以看出0.36%与其它各次结果偏离太远，应为测定可与其它各次结果偏离太远，应为测定可疑值。疑值。X2X10.48%0.36%Q0.860.64XnX10.52%0.36%Q0.900.640.36%测定结果值应舍去，应用其它四次测定值计算。测定结果值应舍去，应用其它四次测定值计算。第55页，此课件共56页哦测定结果平均值测定结果平均值X（0.48%+0.49%+0.50%+0.52%）/4=0.50%（0.4975%）标准偏差标准偏差S（0.48%0.50%）2（0.49%0.50%）2（0.50%0.50%）2（0.52%0.50%）2（41）0.017%相对标准偏差相对标准偏差RSDS/X100%0.017%/0.52%100%=3%第56页，此课件共56页哦