核苷酸和核酸讲稿.ppt

《核苷酸和核酸讲稿.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《核苷酸和核酸讲稿.ppt（33页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、目目 录录关于核苷酸和核酸第一页，讲稿共三十三页哦一、核酸的化学反应核酸的化学反应 1.脱氨基作用（脱氨，脱氨基作用（脱氨，deamination）次黄嘌呤次黄嘌呤5-甲基胞嘧啶甲基胞嘧啶黄嘌呤黄嘌呤第二页，讲稿共三十三页哦2.脱氧核苷酸的水解脱氧核苷酸的水解 脱嘌呤脱嘌呤第三页，讲稿共三十三页哦3.紫外线和一些化学因子、烷化剂对紫外线和一些化学因子、烷化剂对DNA的损伤的损伤第四页，讲稿共三十三页哦亚硝酸亚硝酸第五页，讲稿共三十三页哦烷化剂：乙基甲烷磺酸（烷化剂：乙基甲烷磺酸（EMS）第六页，讲稿共三十三页哦紫外线诱导胸腺嘧啶二聚体紫外线诱导胸腺嘧啶二聚体第七页，讲稿共三十三页哦4.与嵌合剂

2、的反应与嵌合剂的反应第八页，讲稿共三十三页哦第九页，讲稿共三十三页哦溴乙啶溴乙啶丫啶橙丫啶橙 放线菌素放线菌素D 第十页，讲稿共三十三页哦二、DNA的酶法甲基化（的酶法甲基化（methylation）甲基供体：甲基供体：S腺苷甲硫氨酸腺苷甲硫氨酸甲基受体：被修饰碱基（甲基受体：被修饰碱基（A、C多于多于G、T）碱基的甲基化修饰不是随机的，而是限于一定的顺序或碱基的甲基化修饰不是随机的，而是限于一定的顺序或DNA的某一区域，在甲基化酶的作用下进行，甲基化是的某一区域，在甲基化酶的作用下进行，甲基化是可逆的。可逆的。甲基化的意义：帮助细胞识别和区分自身甲基化的意义：帮助细胞识别和区分自身DNA和外

3、来和外来DNA；调节基因表达；帮助；调节基因表达；帮助DNA修复等。修复等。第十一页，讲稿共三十三页哦第八节第八节 核酸酶和核酸酶和DNA限制性限制性内切酶内切酶第十二页，讲稿共三十三页哦一、核酸酶（一、核酸酶（nuclease）能水解核酸的酶为核酸酶能水解核酸的酶为核酸酶核酸酶都是磷酸二酯酶（核酸酶都是磷酸二酯酶（phosphodiesterases）第十三页，讲稿共三十三页哦核酸酶的分类核酸酶的分类按底物专一性分类：核糖核酸酶按底物专一性分类：核糖核酸酶(RNase)和脱氧和脱氧核糖核酸酶核糖核酸酶(DNase)按作用方式分类：内切核酸酶和外切核酸酶按作用方式分类：内切核酸酶和外切核酸酶内

4、切核酸酶：从核酸的内部切割核酸链，产生核内切核酸酶：从核酸的内部切割核酸链，产生核酸链片段。酸链片段。外切核酸酶：从核酸链的一端逐个切断磷酸二酯外切核酸酶：从核酸链的一端逐个切断磷酸二酯键，释放单核苷酸。按磷酸二酯键断裂方式：键，释放单核苷酸。按磷酸二酯键断裂方式：3-核酸酶和核酸酶和5-核酸酶核酸酶第十四页，讲稿共三十三页哦第十五页，讲稿共三十三页哦核酸酶对其底物的作用具有特异性核酸酶对其底物的作用具有特异性第十六页，讲稿共三十三页哦第十七页，讲稿共三十三页哦二、限制性内切酶（二、限制性内切酶（restriction endonuclease）限制性内切酶是从细菌中分离的一类专门识别限制性内

5、切酶是从细菌中分离的一类专门识别和水解特定核苷酸序列的内切酶类。这类酶在原核和水解特定核苷酸序列的内切酶类。这类酶在原核生物体内，用于生物体内，用于“防御防御”外来外来DNA的入侵，将外的入侵，将外来来DNA以独特的方式切成无感染能力的片段，以独特的方式切成无感染能力的片段，而自身不受损害（甲基化作用）而自身不受损害（甲基化作用）。第十八页，讲稿共三十三页哦1.限制性内切酶的分类限制性内切酶的分类、基因工程技术中常用基因工程技术中常用型型第十九页，讲稿共三十三页哦不需要不需要ATP参加；参加；不对不对DNA进行甲基化或其它方式修饰。进行甲基化或其它方式修饰。专门识别和切割特定的核苷酸序列，这个

6、序列专门识别和切割特定的核苷酸序列，这个序列一般含一般含46 个核苷酸残基，并具回文结构个核苷酸残基，并具回文结构“落落鹤岛上岛落鹤，垂柳岸边岸柳垂鹤岛上岛落鹤，垂柳岸边岸柳垂”。2.II型限制性内切酶型限制性内切酶 第二十页，讲稿共三十三页哦类酶识别序列特点类酶识别序列特点回文结构回文结构palindrome第二十一页，讲稿共三十三页哦切口（切口（kerf）：粘端，平端）：粘端，平端第二十二页，讲稿共三十三页哦第二十三页，讲稿共三十三页哦第二十四页，讲稿共三十三页哦3.限制性内切酶的种类（约限制性内切酶的种类（约1000多种）多种）第二十五页，讲稿共三十三页哦Hin d 属属 系系 株株 序

7、序Haemophilus influenzae d株株流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌d株的第三种酶株的第三种酶命名命名naming第一个字母取自产生该酶的细菌属（第一个字母取自产生该酶的细菌属（genus）名，用大写；）名，用大写；第二、第三个字母是该细菌的种（第二、第三个字母是该细菌的种（species）名，用小写；）名，用小写；第四个字母代表株（第四个字母代表株（strain）；）；用罗马数字表示发现的先后次序（用罗马数字表示发现的先后次序（sequence）。）。第二十六页，讲稿共三十三页哦4.限制性内切酶在限制性内切酶在基因重组中的应用基因重组中的应用 第二十七页，讲稿共三十三页哦第二十八页

8、，讲稿共三十三页哦第二十九页，讲稿共三十三页哦三、限制片段的长度和限制图三、限制片段的长度和限制图1.限制片段的长度限制片段的长度识别识别4个核苷酸序列的限制酶产生个核苷酸序列的限制酶产生DNA片段的平均片段的平均长度：长度：256（44）识别识别6个核苷酸序列的限制酶产生个核苷酸序列的限制酶产生DNA片段的平均片段的平均长度：长度：4096（46）第三十页，讲稿共三十三页哦2.制性内切酶图谱制性内切酶图谱 限制性图谱是各种限制性内切酶切点在某一限制性图谱是各种限制性内切酶切点在某一DNA分子或分子或DNA片段上的排列，由于各酶切点之间的片段上的排列，由于各酶切点之间的距离是以碱基对（距离是以碱基对（kbp mbp）表示的，所以可计）表示的，所以可计算出二切点间的绝对距离，因此限制图也称物理图。算出二切点间的绝对距离，因此限制图也称物理图。第三十一页，讲稿共三十三页哦质粒质粒pBR322的限制图的限制图第三十二页，讲稿共三十三页哦目目 录录感感谢谢大大家家观观看看第三十三页，讲稿共三十三页哦