细菌和病毒的遗传ppt课件.ppt
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1、关于细菌和病毒的遗传关于细菌和病毒的遗传PPT1现在学习的是第1页,共52页2第一节第一节 细菌的遗传重组细菌的遗传重组一、转化一、转化二、接合二、接合三、三、F因子与性导因子与性导*四、质粒及其遗传四、质粒及其遗传现在学习的是第2页,共52页3一、转化一、转化(transformation)(一一)、细菌转化实验、细菌转化实验(二二)、转化过程、转化过程*(三三)、共同转化与遗传图谱绘制、共同转化与遗传图谱绘制现在学习的是第3页,共52页4(一一)、细菌转化实验、细菌转化实验1.基础知识基础知识v野生型肺炎双球菌菌落为野生型肺炎双球菌菌落为光滑型光滑型,一种突变型为,一种突变型为粗粗糙型糙型
2、,两者根本差异在于,两者根本差异在于荚膜形成荚膜形成v荚膜的主要成分是多糖,荚膜的主要成分是多糖,具特殊的抗原性具特殊的抗原性v不同抗原型是遗传的、稳不同抗原型是遗传的、稳定的,一般情况下不发生定的,一般情况下不发生互变互变荚膜荚膜菌落菌落毒性毒性类型类型光滑型光滑型S发达发达光滑光滑有有I,II,III粗糙型粗糙型R无无粗糙粗糙无无I,II现在学习的是第4页,共52页52.Griffith转化研究转化研究(1928)现在学习的是第5页,共52页6Griffith对其试验结论及发展对其试验结论及发展v根据上述研究结果根据上述研究结果Griffith认为:认为:(有毒有毒)死细菌中的某种物质转移
3、到死细菌中的某种物质转移到(无毒无毒)活细菌中,并使之具有毒活细菌中,并使之具有毒性,导致小家鼠死亡性,导致小家鼠死亡将这种细菌遗传类型的转变称为将这种细菌遗传类型的转变称为转化转化,并将引起转化的物质称,并将引起转化的物质称为为转化因子转化因子(tranforming principle)但是当时的化学与生化分析技术还无法鉴定杀死细菌中的确切但是当时的化学与生化分析技术还无法鉴定杀死细菌中的确切成分,因而不能确定转化因子为何物成分,因而不能确定转化因子为何物v以后一些研究者重复上述试验,并且加入了以后一些研究者重复上述试验,并且加入了体外培养体外培养试验,即:试验,即:将加热杀死的将加热杀死
4、的SIII细菌与无毒细菌与无毒RII细菌混合培养,然后注入细菌混合培养,然后注入小家鼠体内,同样导致家鼠死亡。表明:小家鼠体内,同样导致家鼠死亡。表明:细菌在培养条件下也能够实现遗传类型间的定向转化细菌在培养条件下也能够实现遗传类型间的定向转化现在学习的是第6页,共52页7v1944年,年,Avery在离体条在离体条件下完成转化。件下完成转化。现在学习的是第7页,共52页8实验结论实验结论v实验结果表明:来源于加热杀死的实验结果表明:来源于加热杀死的SIII细菌,并使细菌,并使 RII细菌细菌转化成为转化成为SIII型细菌的型细菌的转化因子是转化因子是DNAv正是在这一认识的基础上,将转化定义
5、为:正是在这一认识的基础上,将转化定义为:某些细菌能通过其细胞膜摄取周围供体的染色体片段,并将此外某些细菌能通过其细胞膜摄取周围供体的染色体片段,并将此外源源DNA片段通过重组整合到自己染色体组的过程片段通过重组整合到自己染色体组的过程vAvery等人的实验实际上也表明:决定细菌遗传类型的物质是等人的实验实际上也表明:决定细菌遗传类型的物质是DNA,即证明了,即证明了DNA就是遗传物质就是遗传物质但由于他们采用的实验方法当时不被人们广泛接受,而且得出的结论但由于他们采用的实验方法当时不被人们广泛接受,而且得出的结论与当时人们的传统观念与当时人们的传统观念(认为蛋白质是遗传物质认为蛋白质是遗传物
6、质)不符合,而长期没有不符合,而长期没有得到人们的承认得到人们的承认现在学习的是第8页,共52页9(二二)、转化过程、转化过程v转化现象在细菌中是一种普遍现象。不同细菌转化过程有一定转化现象在细菌中是一种普遍现象。不同细菌转化过程有一定差异,但是它们都存在几个方面的特征,即:差异,但是它们都存在几个方面的特征,即:v感受态与感受态因子:感受态与感受态因子:感受态感受态指细菌能够从周围环境中吸收指细菌能够从周围环境中吸收DNA分子进行转化的生分子进行转化的生理状态理状态感受态主要受一类蛋白质感受态主要受一类蛋白质(感受态因子感受态因子)影响,感受态因子可以在影响,感受态因子可以在细菌间进行转移,
7、从感受态细菌中传递到非感受态细菌中,细菌间进行转移,从感受态细菌中传递到非感受态细菌中,可以使后者变为感受态可以使后者变为感受态转化可以分为自然转化(枯草杆菌)和人工转化(大肠杆菌)。转化可以分为自然转化(枯草杆菌)和人工转化(大肠杆菌)。用用Ca2+(如如CaCl2)处理大肠杆菌可以增强其感受能力处理大肠杆菌可以增强其感受能力现在学习的是第9页,共52页10(二二)、转化过程、转化过程(p157-158)v供体供体(donor)DNA与受体与受体(receptor)细胞结合细胞结合(binding):结合发生在受体细胞特定部位结合发生在受体细胞特定部位(结合点结合点)对供体对供体DNA片段有
8、一定要求片段有一定要求结合是一个可逆过程结合是一个可逆过程vDNA摄取:摄取:当细菌结合点饱和之后,细菌开始摄取外源当细菌结合点饱和之后,细菌开始摄取外源DNA往往只有一条往往只有一条DNA单链进入细胞单链进入细胞(单链摄入单链摄入),另一条链在膜上降解,另一条链在膜上降解v联会联会(synapsis)与外源与外源DNA片段整合片段整合(integration):整合整合指单链转化指单链转化DNA与受体与受体DNA对应位点置换,稳定掺入到受体对应位点置换,稳定掺入到受体DNA中中的过程,实际上就是的过程,实际上就是遗传重组遗传重组过程过程研究整合的分子机制也就是研究遗传重组的分子机制研究整合的
9、分子机制也就是研究遗传重组的分子机制现在学习的是第10页,共52页11现在学习的是第11页,共52页12*(三三)、转化与基因重组作图、转化与基因重组作图v由于由于DNA是以小片段的形式进入受体的:是以小片段的形式进入受体的:u距离很远距离很远的两个基因很难同时存在于一个片段中,同时转化受体。的两个基因很难同时存在于一个片段中,同时转化受体。u基因间距离越近基因间距离越近,它们就有较多的机会整合到受体染色体中。,它们就有较多的机会整合到受体染色体中。现在学习的是第12页,共52页13*枯草杆菌共转化遗传作图枯草杆菌共转化遗传作图现在学习的是第13页,共52页14二、接合二、接合(一一)、接合现
10、象的发现和证实、接合现象的发现和证实(二二)、F因子及其在杂交中的行为因子及其在杂交中的行为*(三三)、中断杂交试验作图、中断杂交试验作图现在学习的是第14页,共52页15(一一)、接合现象的发现和证实、接合现象的发现和证实黎德伯格和塔特姆大肠杆菌杂交试验:黎德伯格和塔特姆大肠杆菌杂交试验:v材料:材料:大肠杆菌大肠杆菌(Escherichia coli)K12菌株的两个营养缺陷型菌株的两个营养缺陷型品系品系A甲硫氨酸缺陷型甲硫氨酸缺陷型met-和生物素缺陷型和生物素缺陷型bio-B苏氨酸缺陷型苏氨酸缺陷型thr-和亮氨酸缺陷型和亮氨酸缺陷型leu-v方法:方法:将将A、B混和,在基本培养基混
11、和,在基本培养基(固体固体)上涂布培养上涂布培养v结果:结果:平板上长出平板上长出原养型菌落原养型菌落(+)现在学习的是第15页,共52页16黎德伯格和塔特姆接合试验黎德伯格和塔特姆接合试验现在学习的是第16页,共52页17几种可能解释及其分析几种可能解释及其分析v对上述试验结果原养型菌落可能产生于:对上述试验结果原养型菌落可能产生于:亲本细菌亲本细菌A或或B发生了发生了回复突变回复突变两品系细胞通过培养基交换养料两品系细胞通过培养基交换养料互养作用互养作用两品系间发生了两品系间发生了转化作用转化作用发生细胞融合,形成了发生细胞融合,形成了异核体或杂合二倍体异核体或杂合二倍体v为了验证这些原养
12、型菌落产生的可能而进行的研为了验证这些原养型菌落产生的可能而进行的研究最终表明:究最终表明:这些解释均不成立这些解释均不成立现在学习的是第17页,共52页18回复突变可能的排除回复突变可能的排除vLederbery和和Tatum采用的是双营养缺陷型菌株,已基本排除采用的是双营养缺陷型菌株,已基本排除A或或B品系发生回复突变产生原养型细菌的可能品系发生回复突变产生原养型细菌的可能v理论分析:理论分析:单基因回复突变的频率约为单基因回复突变的频率约为10-6双基因回复突变的频率则为双基因回复突变的频率则为10-12,频率很低,频率很低但试验中产生原养型菌落产生的频率非常高,因此基本可以排除回复突但
13、试验中产生原养型菌落产生的频率非常高,因此基本可以排除回复突变的可能变的可能v对照实验:对照实验:单独接种未产生原养型菌落单独接种未产生原养型菌落现在学习的是第18页,共52页19*互养作用及其排除互养作用及其排除v试验材料:试验材料:A品系:品系:A-B+T1S(met-bio-thr+leu+T1S)B品系:品系:A+B-T1R(met+bio+thr-leu-T1R)v试验方法:试验方法:将将A、B品系混合接种在基本培养基表面品系混合接种在基本培养基表面短时间后喷短时间后喷T1杀死杀死A品系,使其不能持续产生品系,使其不能持续产生thr、leu供供B品系生长品系生长v结果与结论:结果与结
14、论:仍然出现原养型菌落仍然出现原养型菌落互养并非前述原养型菌落出现的原因,而可能发生了互养并非前述原养型菌落出现的原因,而可能发生了遗传重组遗传重组现在学习的是第19页,共52页20*转化作用及其排除转化作用及其排除vLederbery和和Tatum曾把品系曾把品系A的培养液经加热后,加入到的培养液经加热后,加入到B品品系的培养物中,未得到原养型系的培养物中,未得到原养型菌落;表明原养型菌落可能菌落;表明原养型菌落可能不不是由转化作用产生是由转化作用产生v戴维斯戴维斯(Dawis,1950)的的U型管试型管试验验结果:没有得到原养型细菌结果:没有得到原养型细菌结论:细胞直接接触是原养型细结论:
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