[精选]酶工程第13章酶在食品工业上的应用20402.pptx
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1、第十三章 酶在食品工业上的应用一、淀粉加工一、淀粉加工二、乳品加工二、乳品加工 三、果品加工三、果品加工四、酿酒工业四、酿酒工业五、肉类和鱼类加工五、肉类和鱼类加工六、食品保藏六、食品保藏七、面点制造七、面点制造酶工业概况 据据1984年年的的资资料料报报道道,自自然然界界中中已已发发现现的的酶酶约约有有25000多多种种,1982年年的的酶酶学学手手册册纪纪录录了了2200种种已已经经提提纯纯鉴鉴定定的的酶酶,其其中中50多多种种已已得得到到开开发发利利用用。但但工工业业上上大大量量制制造造和和应应用用的的还还只只限限于于淀淀粉粉酶酶、蛋蛋白白酶酶、葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶、果果胶胶酶酶、脂
2、脂肪肪酶酶、葡葡萄萄糖糖氧氧化化酶酶等等十十多多种种。1985年年,世世界界酶酶制制剂剂的的总总产产量量约约75000吨吨,销销售售金金额额约约6亿亿美美元元。全全世世界界酶酶制制剂剂的的生生产产量量每每年年以以8 8%左左右右的的速速度度增增长长,酶酶制制剂剂的的生生产产品品种种已已由由原原来来的的十十多多个个品品种种发发展展为为几几十十个个品品种种。大大约约80的的工工业业酶酶是水解酶,其中是水解酶,其中60是蛋白酶,是蛋白酶,30是糖水解酶。是糖水解酶。欧洲工业用酶产品市场欧洲工业用酶产品市场(1993199320032003年)年)年份年份总收入总收入(亿美元)(亿美元)收入增长率收入
3、增长率(%)年份年份总收入总收入(亿美元)(亿美元)收入增长收入增长率(率(%)19934.0119996.198.819944.256.220006.769.319954.546.720017.439.819964.877.320028.1910.219975.257.820039.0610.719985.698.3日本的酶制剂市场日本的酶制剂市场酶类型酶类型1998年收入年收入(亿日元)(亿日元)1999年收入年收入(亿日元)(亿日元)诊断用酶诊断用酶2530限制性内切酶限制性内切酶3018生产抗生素用酶生产抗生素用酶200310含酶洗涤剂含酶洗涤剂20002000酶解生产异构化糖酶解生产
4、异构化糖300300酶法生产甜味剂酶法生产甜味剂1520酶法生产食用油酶法生产食用油50150医用传感器用酶医用传感器用酶250250食品发酵用传感器用酶食品发酵用传感器用酶22造纸行业漂白用酶造纸行业漂白用酶030总总 计计25873112酶制剂在各行业中所占的百分比我国的酶制剂工业 从从“六六五五”到到“十十五五”期期间间,我我国国酶酶制制剂剂产产品品的的产产量量以以每每年年20%以以上上的的速速度度增增长长,生生产产规规模模、产产品品种种类类和和应应用用领领域域正正在在逐逐步步扩扩大大。据据中中国国发发酵酵工工业业协协会会最最新新统统计计,目目前前我我国国有有酶酶制制剂剂生生产产企企业业
5、约约200家家,现现有有生生产产能能力力40多多万万吨吨。产产品品以以糖糖化化酶酶、-淀淀粉粉酶酶、蛋蛋白白酶酶为为主主,三三种种产产品品的的产产量量占占酶酶制制剂剂总总产产量量的的95%以以上上。此此外外还还有有果果胶胶酶酶、-葡葡聚聚糖糖酶酶、纤纤维维素素酶酶、碱碱性性脂脂肪肪酶酶、-乙乙酰酰乳乳酸酸脱脱羧羧酶酶、植植酸酸酶酶、木木聚聚糖糖酶酶等等。我我国国酶酶制制剂剂产产品品主主要要用用于于酿酿酒酒、淀淀粉粉制制糖糖、洗洗涤涤剂剂、纺纺织织、皮革、饲料等行业。皮革、饲料等行业。食品工业中酶的应用范围 食食品品加加工工过过程程中中保保持持食食品品的的色色、香香、味味和和结结构构是是很很重重
6、要要的的问问题题。在在食食品品加加工工过过程程中中要要避避免免使使用用剧剧烈烈的的化化学学反反应应。酶酶由由于于反反应应条条件件温温和和,专专一一性性强强,本本身身无无色色无无味味,反反应应容容易易控控制制,因因而而最最适适合合用用在在食食品品加加工工方方面面。酶酶在在食食品品工工业业最最大大的的用用途途是是淀淀粉粉加加工工,其其次次是是乳乳品品加加工工、果果汁汁加加工工、烘烘烤烤食品以及啤酒制造等。食品以及啤酒制造等。一、淀粉加工1 1用于淀粉加工的酶用于淀粉加工的酶(1)淀淀粉粉酶酶:从从淀淀粉粉分分子子内内部部水水解解-1,4-糖糖苷苷键键,使使淀淀粉粉溶溶液液的的粘粘度度下下降降,碘碘
7、反反应应迅迅速速消消失失,水解产物为寡聚糖、麦芽糖及少量葡萄糖。水解产物为寡聚糖、麦芽糖及少量葡萄糖。(2)淀淀粉粉酶酶:从从淀淀粉粉分分子子的的非非还还原原端端水水解解-1,4-糖糖苷苷键键,依依次次切切下下一一个个个个麦麦芽芽糖糖,遇遇到到-1,6-糖糖苷苷键键即即中中止止,水水解解产产物物为为麦麦芽芽糖糖和和极极限限糊精。糊精。极限糊精非还原端非还原端非还原端非还原端非还原端非还原端还原端还原端用于淀粉加工的酶(3)淀淀粉粉葡葡萄萄糖糖苷苷酶酶:又又称称糖糖化化酶酶、葡葡萄萄糖糖淀淀粉粉酶酶。它它从从淀淀粉粉分分子子的的非非还还原原端端水水解解-1,4-糖糖苷苷键键,依依次次切切下下一一
8、个个个个葡葡萄萄糖糖,也也能能水水解解-1,6-糖糖苷苷键键和和-1,3-糖糖苷苷键键,但但速速度度慢慢得得多多。水水解解产产物物为为葡萄糖。葡萄糖。(4 4)葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶:即即木木糖糖异异构构酶酶,它它能能使使木木糖和葡萄糖异构成木酮糖和果糖。糖和葡萄糖异构成木酮糖和果糖。用于淀粉加工的酶(5)环环糊糊精精葡葡糖糖基基转转移移酶酶:水水解解淀淀粉粉的的-1,4-糖糖苷苷键键,生生成成68个个葡葡萄萄糖糖构构成成的的环环状状糊糊精精,在在有有蔗蔗糖糖存存在在时时可可以以将将淀淀粉粉上上的的葡葡萄萄糖糖转转移移到到蔗糖上,形成偶联糖。蔗糖上,形成偶联糖。(6)脱脱支支酶酶:水水解解-
9、1,6-糖糖苷苷键键,切切下下支支链链淀粉的分支。淀粉的分支。2 2葡萄糖生产 利利用用酶酶水水解解淀淀粉粉生生产产葡葡萄萄糖糖是是酶酶工工业业的的一一项项重重大大成成就就,自自50年年代代末末日日本本研研究究成成功功,次次年年日日本本的的葡葡萄萄糖糖产产量量猛猛增增10倍倍,现现在这个方法已在世界各地普遍采用。在这个方法已在世界各地普遍采用。酸法和酶法生产葡萄糖的比较酸法和酶法生产葡萄糖的比较项项 目目酸酸 法法酶酶 法法原料淀粉原料淀粉需要高度精制需要高度精制不必精制不必精制投料浓度投料浓度约约253050水解率水解率约约9098以上以上糖化时间糖化时间约约60分钟分钟4872小时小时设备
10、要求设备要求需耐酸耐压需耐酸耐压(pH2,304405kPa)不需耐酸耐压不需耐酸耐压糖化液状态糖化液状态有强烈苦味,色泽深有强烈苦味,色泽深无苦味和色素生成无苦味和色素生成管理要求管理要求管理困难,水解终止要中和管理困难,水解终止要中和 不必中和不必中和收率收率结晶收率结晶收率70结晶收率结晶收率80,全糖收率全糖收率100DEdextrose equivalent value葡萄糖当量值葡萄糖当量值 还还原原糖糖在在糖糖浆浆中中所所占占百百分分比比(以以干干物物质质计计),淀粉,淀粉的的DE值为值为0,葡萄糖的,葡萄糖的DE值为值为100。酶法生产葡萄糖的工艺流程淀粉乳淀粉乳 (3050)
11、耐热性耐热性淀粉酶淀粉酶 pH6.06.51402030S喷射液化喷射液化耐热性耐热性淀粉酶淀粉酶 96100,30min液化液液化液 DE1218 糖化酶糖化酶 pH4.5,60,4872小时小时 糖化液糖化液 DE9698 酶法生产葡萄糖的工艺流程糖化液糖化液 DE9698活性碳活性碳 离子交换树脂离子交换树脂 结晶结晶 浓缩固化或喷雾干燥浓缩固化或喷雾干燥(收率收率80以上)以上)(收率收率100)结晶葡萄糖结晶葡萄糖 粉状葡萄糖粉状葡萄糖 酶法生产葡萄糖用的淀粉酶 制制造造葡葡萄萄糖糖的的第第一一步步是是淀淀粉粉的的液液化化。薯薯类类淀淀粉粉比比谷谷物物淀淀粉粉容容易易液液化化,谷谷物
12、物淀淀粉粉液液化化时时,往往往往生生成成聚聚合合度度3040的的不不溶溶性性团团粒粒,使使糖糖的的收收率率降降低低,成成品品葡葡萄萄糖糖DE下下降降,而而且且妨妨碍碍糖糖液液过过滤滤,因因此此常常采采用用在在高高温温下下液液化化,使使不不溶溶性性团团粒粒分分解解。由由于于一一般般细细菌菌的的淀淀粉粉酶酶最最适适温温度度仅仅70,在在80以以上上时时很很不不稳稳定定,为为了了提提高高淀淀粉粉酶酶的的耐耐热热性性,常常向向淀淀粉粉乳乳中中添添加加Ca2和和NaCl,但但若若使使用用最最适适温温度度在在90的的地地衣衣芽芽孢孢杆杆菌菌耐耐热热性性淀淀粉粉酶酶时时,即即使使在在140喷喷射射瞬瞬间间液
13、化,也不需添加液化,也不需添加Ca2。酶法生产葡萄糖用的糖化酶 糖糖化化酶酶主主要要是是由由黑黑曲曲霉霉生生产产的的。黑黑曲曲霉霉糖糖化化酶酶中中常常含含有有葡葡萄萄糖糖苷苷酶酶(又又称称转转苷苷酶酶),它它可可将将淀淀粉粉酶酶作作用用产产生生的的麦麦芽芽糖糖水水解解,将将游游离离葡葡萄萄糖糖转转移移到到其其它它葡葡萄萄糖糖或或麦麦芽芽糖糖的的-1,6位位或或-1,3位位而而生生成成各各种种寡寡聚聚糖糖,使使葡葡萄萄糖糖的的DE及及收收率率降降低低。因因此此黑黑曲曲霉霉的的糖糖化化酶酶液液需需用用酸酸性性白白土土,阳阳离离子子交交换换树树脂脂或或在在pH3以下处理一定时间以去除以下处理一定时间
14、以去除葡萄糖苷酶。葡萄糖苷酶。3 3果葡糖浆(高果糖浆)生产 用用葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶将将葡葡萄萄糖糖的的一一部部分分转转化化为为果果糖糖,葡葡萄萄糖糖和和果果糖糖的的混混合合糖糖浆浆叫叫果果葡葡糖糖浆浆。由由于于葡葡萄萄糖糖的的甜甜度度只只有有蔗蔗糖糖的的70,而而果果糖糖甜甜度度是是蔗蔗糖糖的的1.51.7倍倍,故故当当糖糖浆浆中中果果糖糖含含量量达达42时时,其其甜甜度度与与蔗蔗糖糖相相同同,在在食食品品工工业业上上可可广广泛泛代代替替蔗蔗糖糖。特特别别是是因因果果糖糖在在低低温温下下甜甜度度更更为为突突出出,最最适适合用于冷饮。合用于冷饮。果葡糖浆的生产 1966年年日日本本首首先
15、先用用游游离离的的葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶工工业业化化生生产产果果葡葡糖糖浆浆,1973年年后后,国国内内外外纷纷纷纷采采用用固固定定化化葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶进进行行连连续续化化生生产产。果果葡葡糖糖浆浆生生产产所所使使用用的的葡葡萄萄糖糖,一一般般是是由由淀淀粉粉浆浆经经-淀淀粉粉酶酶液液化化,再再经经糖糖化化酶酶糖糖化化得得到到的的葡葡萄萄糖糖,要要求求DE值值大大于于96。将将精精制制的的葡葡萄萄糖糖溶溶液液的的pH调调节节为为6.57.0,加加入入0.01mol/L的的硫硫酸酸镁镁,在在6070的的温温度度条条件件下下,由由葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶催催化化生生成成果果葡葡糖糖浆浆。
16、异异构化率一般为构化率一般为4245%。果葡糖浆的生产 用用柱柱层层析析法法从从果果葡葡糖糖浆浆中中分分离离出出果果糖糖,制制成成90的的果果糖糖浆浆,再再将将其其以以1:2的的比比例例和和42的的果果葡葡糖糖浆浆混混合合,可可得得到到甜甜度度比比蔗蔗糖糖甜甜10的的55的的果果葡葡糖糖浆浆。摄摄取取果果糖糖后后血血糖糖不不易易升升高高,故故可可适适量量用用于糖尿病人;吃果糖还有滋润肌肤的作用。于糖尿病人;吃果糖还有滋润肌肤的作用。异构化反应的温度与果糖产率的关系 葡葡萄萄糖糖转转化化为为果果糖糖的的异异构构化化反反应应是是吸吸热热反反应应。随随着着反反应应温温度度的的升升高高,反反应应平平衡
17、衡向向有有利利于于生生成成果果糖糖的的方方向向变变化化。异异构构化化反反应应的的温温度度越越高高,平平衡衡时时混混合合糖糖液液中中果果糖糖的的含含量量也也越越高高。但但当当温温度度超超过过70时时葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶容容易易变变性性失失活活,所所以以异异构构化化反应的温度以反应的温度以6070为宜。为宜。不同温度下反应平衡时果葡糖浆的组成反应温度(反应温度()葡萄糖(葡萄糖(%)果糖(果糖(%)2557.542.54052.147.96046.553.57043.556.58041.258.8木糖异构酶 工工业业上上所所用用的的葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶实实际际上上是是木木糖糖异异构构酶酶,
18、对对木木糖糖的的亲亲和和力力大大于于对对葡葡萄萄糖糖的的亲亲和和力力,是是由由节节杆杆菌菌、链链霉霉菌菌、凝凝结结芽芽孢孢杆杆菌菌、游游动动放放线线菌菌、黄黄杆杆菌菌等等生生产产的的,大大多多数数是是胞胞内内酶酶,除除节节杆杆菌菌、游游动动放放线线菌菌外外几几乎乎都都需需要要木木糖糖的的诱诱导导。游游动动放放线线菌菌的的异异构构酶酶对对葡葡萄萄糖糖的的亲亲和和力力更更强于木糖,是真正的葡萄糖异构酶。强于木糖,是真正的葡萄糖异构酶。葡萄糖异构酶的特性 葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶需需要要Co2+、Mg2+的的稳稳定定与与活活化化,最最适适温温度度7080,最最适适pH78,是是热热稳稳定定性性很很好
19、好的的酶酶。由由于于Ca2+、Cu2+、Ni2+及及O2抑抑制制异异构构酶酶,所所以以用用固固定定化化葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶生生产产果葡糖浆时,底物葡萄糖必须充分精制。果葡糖浆时,底物葡萄糖必须充分精制。固定化葡萄糖异构酶 通通常常葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶是是以以固固定定化化形形式式使使用用的的,不不同同的的公公司司应应用用不不同同来来源源的的葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶和和不不同同的的固固定定载载体体制制备备了了各各种种固固定定化化葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶。固固定定化化的的葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶占占固固定定化化酶酶整整体体市市场场的的份份额额最大,每年有数百万吨产品。最大,每年有数百万吨产品
20、。公公 司司 固固 定定 化化 方方 法法Novo Industry凝结芽孢杆菌细胞,自溶,用戊二醛交联并造粒凝结芽孢杆菌细胞,自溶,用戊二醛交联并造粒Gist-Brocades放线菌细胞包埋进明胶中,用戊二醛交联并造粒放线菌细胞包埋进明胶中,用戊二醛交联并造粒Clinton Corn Processing Co.酶抽提物,吸附到离子交换树脂上酶抽提物,吸附到离子交换树脂上Miles Labs.Inc用戊二醛交联细胞并造粒用戊二醛交联细胞并造粒CPC Int.Inc酶抽提物,吸附到粒状陶瓷载体上酶抽提物,吸附到粒状陶瓷载体上Sanmatsu酶抽提物,吸附到离子交换树脂上酶抽提物,吸附到离子交换
21、树脂上Snam Progetti细胞,包埋到乙酸纤维素中细胞,包埋到乙酸纤维素中4 4饴糖和麦芽糖生产 饴饴糖糖是是用用淀淀粉粉酶酶和和淀淀粉粉酶酶共共同同作作用用的的结结果果,其其中中含含麦麦芽芽糖糖、葡葡萄萄糖糖和和糊糊精精,麦麦芽芽糖糖的的含含量量通通常常低低于于4050。生生产产方方法法是是先先用用细细菌菌淀淀粉粉酶酶使使淀淀粉粉乳乳液液化化,再再加加少少量量麦麦芽浆糖化。饴糖中含有芽浆糖化。饴糖中含有极限糊精。极限糊精。麦芽糖生产 将将1020的的淀淀粉粉乳乳先先用用淀淀粉粉酶酶轻轻度度液液化化(DE2以以下下),加加热热使使淀淀粉粉酶酶失失活活,再再加加淀淀粉粉酶酶和和脱脱支支酶酶
22、,在在pH5.06.0,4060反反应应2448小小时时,淀淀粉粉几几乎乎完完全全水水解解,浓浓缩缩到到90以以上上时时,可可析析出出纯纯度度98以以上上的的结结晶晶麦麦芽芽糖糖。淀淀粉粉液液化化的的DE值值以以低低为为宜宜,以以免免大大量量生生成成聚聚合合度度为为奇奇数数的的糊糊精精,而而使使麦麦芽芽糖糖的的收收率率降降低低。麦麦芽芽糖糖加加氢氢还还原原可可制制成成麦麦芽芽糖糖醇醇,其其甜甜度度为为蔗蔗糖糖的的90,且且发发热热量量低低,可可供供糖糖尿尿病病、高高血血压、肥胖病人食用。压、肥胖病人食用。脱支酶和-淀粉酶的来源 工工业业生生产产的的脱脱支支酶酶主主要要来来自自肺肺炎炎克克氏氏杆
23、杆菌菌(K.pneumoniae)和和 蜡蜡 状状 芽芽 孢孢 杆杆 菌菌 变变 异异 株株(B.cerreas var.mycoides),此此酶酶可可水水解解茁茁霉霉多多糖糖(聚聚麦麦芽芽三三糖糖)的的-1,6键键,故故又又称称茁茁霉霉多多糖糖酶酶。淀淀粉粉酶酶主主要要来来自自大大豆豆(大大豆豆蛋蛋白白生生产产时时综合利用的产物综合利用的产物)和麦芽。和麦芽。5 5环状糊精与偶联糖 软软化化芽芽孢孢杆杆菌菌和和蜡蜡状状芽芽孢孢杆杆菌菌产产生生的的一一种种环环糊糊精精葡葡糖糖基基转转移移酶酶(CGTase),可可水水解解淀淀粉粉成成为为68个个葡葡萄萄糖糖所所构构成成的的环环状状糊糊精精,分
24、分别别称称为为、和和环环糊糊精精。环环糊糊精精分分子子呈呈中中空空筒筒状状,可可以以包包接接各各种种物物质质,在在食食品品工工业业上上可可作作为为食食品品添添加加剂剂用用来来乳乳化化、稳稳定定发发泡泡、保保香香脱脱苦苦等等;在在医医药药上上用用于于改改善善药药品品苦苦异异味味,防防止止氧氧化化,作作为为缓缓释释剂剂、稳稳定定剂剂等等;化工上用作农药缓释剂、稳定剂等。化工上用作农药缓释剂、稳定剂等。偶联糖 环环糊糊精精葡葡糖糖基基转转移移酶酶作作用用于于淀淀粉粉时时,若若有有蔗蔗糖糖存存在在,就就会会发发生生分分子子间间的的转转移移反反应应,先先将将环环糊糊精精裂裂开开,然然后后转转移移到到蔗蔗
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