药品生产相关的微生物基础知识.ppt

《药品生产相关的微生物基础知识.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《药品生产相关的微生物基础知识.ppt（87页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、药品生产相关的微生物基础知识2023/4/82023/4/81 1现在学习的是第1页，共87页一、自然界中微生物生存的环境一、自然界中微生物生存的环境人类生活的环境充斥着人类生活的环境充斥着大量微生物大量微生物 海拔海拔100英里（约英里（约160公公里）以上里）以上海平面以下海平面以下600英尺英尺（约（约182米）的地方都米）的地方都可以发现微生物的踪迹可以发现微生物的踪迹1英里英里=5,280英尺或英尺或1.609公里公里2023/4/82023/4/82 2现在学习的是第2页，共87页微生物分布特点微生物分布特点微生物无处不在微生物无处不在气源性微生物革兰氏阳性菌较多气源性微生物革兰氏

2、阳性菌较多它们可形成芽孢，难以杀灭它们可形成芽孢，难以杀灭因此，药品生产需要因此，药品生产需要HVAC水源性则革兰氏阴性菌居多水源性则革兰氏阴性菌居多不会生成孢子不会生成孢子但会形成细菌内毒素但会形成细菌内毒素耐热性差耐热性差G+G-2023/4/82023/4/83 3现在学习的是第3页，共87页首先分享几幅图片给大家一个感性认识葡萄球菌2023/4/82023/4/84 4现在学习的是第4页，共87页乳酸杆菌2023/4/82023/4/85 5现在学习的是第5页，共87页 芽孢杆菌2023/4/82023/4/86 6现在学习的是第6页，共87页 青霉是种真菌，属于子囊菌。有的能产生青霉

3、素，救了无数人的命。产生无性孢子。2023/4/82023/4/87 7现在学习的是第7页，共87页酵母菌2023/4/82023/4/88 8现在学习的是第8页，共87页根霉（Rhizopus)是种真菌，属于接合菌。能产生无性孢子菌丝体的直径约12 um黑的是孢子囊 2023/4/82023/4/89 9现在学习的是第9页，共87页爱滋病病毒2023/4/82023/4/81010现在学习的是第10页，共87页 禽流感病毒SARS病毒是一类新发现的冠状病毒2023/4/82023/4/81111现在学习的是第11页，共87页甲型H1NI2023/4/82023/4/81212现在学习的是第1

4、2页，共87页二、常见微生物二、常见微生物种类种类基本特点基本特点细菌细菌0.5 5 m，生长态时不耐热，部分，生长态时不耐热，部分能形成耐热芽孢能形成耐热芽孢真菌真菌5 m 50 m，形成芽孢随空气扩，形成芽孢随空气扩散，不耐热散，不耐热病毒病毒小于小于0.1 m，一般不耐热，一般不耐热，0.22m过滤不了过滤不了2023/4/82023/4/81313现在学习的是第13页，共87页三、真菌和细菌三、真菌和细菌大小大小真菌真菌 5 m 50 m细菌细菌 0.5 5 m主要成员主要成员酵母、霉菌酵母、霉菌细菌细菌细胞组成细胞组成酵母是单细胞，其它为多细胞酵母是单细胞，其它为多细胞均为单细胞均为

5、单细胞细胞质细胞质成份成份遗传物质遗传物质(DNA)被双层核膜包裹被双层核膜包裹(真真核核)，并且还有如线粒体、叶绿体及，并且还有如线粒体、叶绿体及高卡基体等被膜包裹的细胞器。高卡基体等被膜包裹的细胞器。遗传物质遗传物质(DNA)祼露并游离于细胞质祼露并游离于细胞质内内(原核原核)，并且不含有其它有膜细胞，并且不含有其它有膜细胞器。器。繁殖方式繁殖方式有性（如大型真菌或无性如酵母），有性（如大型真菌或无性如酵母），霉菌则二者兼有霉菌则二者兼有无性（裂殖）无性（裂殖）孢子孢子霉菌产生分生孢子（生长繁殖，类似霉菌产生分生孢子（生长繁殖，类似于植物的种子于植物的种子)，虽不耐热，但会飘，虽不耐热，但

6、会飘浮于空气中而难以消除。浮于空气中而难以消除。酵母不会产生孢子。酵母不会产生孢子。主要只有两个属产生孢子（内生孢主要只有两个属产生孢子（内生孢子），又名芽孢：子），又名芽孢：Bacillus-芽孢杆菌属和芽孢杆菌属和Clostridium-梭菌属梭菌属，细菌芽孢属于，细菌芽孢属于休眠体，一个细菌细胞产生一个芽孢休眠体，一个细菌细胞产生一个芽孢生长条件生长条件20-25oC,3-5天天30-35 oC,1-2天天杀灭程度杀灭程度不耐热，但难用消毒剂消毒（因孢子不耐热，但难用消毒剂消毒（因孢子处于漂浮状态）处于漂浮状态）生长态菌不耐热（极个别除外），但生长态菌不耐热（极个别除外），但形成芽孢后耐

7、热。形成芽孢后耐热。2023/4/82023/4/81414现在学习的是第14页，共87页四、细菌的结构及生长条件四、细菌的结构及生长条件细菌一般结构包括细胞壁、细胞膜、细细菌一般结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核，特殊结构包括荚膜、胞质、细胞核，特殊结构包括荚膜、鞭鞭毛、菌毛、芽孢。毛、菌毛、芽孢。然而，细菌的芽孢，并然而，细菌的芽孢，并不是繁殖的手段，而是休眠体。不是繁殖的手段，而是休眠体。2023/4/82023/4/81515现在学习的是第15页，共87页革兰氏阳性菌：气源性，身体上部，呼吸道革兰氏阳性菌：气源性，身体上部，呼吸道革兰氏阴性菌：则是水源性的，细胞结构不革兰氏阴性菌：

8、则是水源性的，细胞结构不同同生物指示剂生物指示剂(BI)均为革兰氏阳性菌，灭菌均为革兰氏阳性菌，灭菌用用BI为非致病菌。为非致病菌。2023/4/82023/4/81616现在学习的是第16页，共87页五、细菌芽胞（孢）的形成及其特性五、细菌芽胞（孢）的形成及其特性成熟芽孢孢子壁母细胞孢子壁的形成生长态细胞摘自摘自 http:/www.microbe.org/microbes/spores.asp内生孢子产生于内生孢子产生于 GramGram+细菌细菌:芽孢杆菌属芽孢杆菌属BacillusBacillus梭菌属梭菌属ClostridiumClostridium仅含核酸及少量萌发必需物仅含核酸及

9、少量萌发必需物皮层含皮层含DPADPA和和CaCa2+2+复合物复合物能抵御各种恶劣环境能抵御各种恶劣环境可休眠上百万年可休眠上百万年真菌孢子因不具上述特性而不耐真菌孢子因不具上述特性而不耐热热2023/4/82023/4/81717现在学习的是第17页，共87页六、什么是芽孢？六、什么是芽孢？当某些细菌遇到不良生存环境条件时，当某些细菌遇到不良生存环境条件时，为保护自身，在细胞内形成一外壁厚为保护自身，在细胞内形成一外壁厚而坚硬的体眠体，该体眠体即称芽孢而坚硬的体眠体，该体眠体即称芽孢（SporeSpore）或孢子。）或孢子。由于其对不良环境的耐受性远高于生由于其对不良环境的耐受性远高于生长

10、态细胞，常被用于挑战灭菌工艺，长态细胞，常被用于挑战灭菌工艺，以确认被灭菌物品无菌的可靠性。以确认被灭菌物品无菌的可靠性。2023/4/82023/4/81818现在学习的是第18页，共87页芽孢的特性芽孢的特性主要产生于主要产生于Gram+细菌的两个属细菌的两个属芽孢杆菌属芽孢杆菌属 Bacillus梭菌属梭菌属 Clostridium能抵御各种恶劣环境，可存活上百万年，因为它能抵御各种恶劣环境，可存活上百万年，因为它有厚的皮层结构有厚的皮层结构仅含核酸及少量萌发必需物仅含核酸及少量萌发必需物含水量极低含水量极低休眠体，内生孢子，不可再生（每个细胞只产生休眠体，内生孢子，不可再生（每个细胞只

11、产生一个芽孢）；真菌孢子属于分生孢子，不具上述一个芽孢）；真菌孢子属于分生孢子，不具上述特性。特性。2023/4/82023/4/81919现在学习的是第19页，共87页芽孢的特点芽孢的特点耐热耐热80 下长期存活下长期存活100 下有相当高的存活率下有相当高的存活率100 以上死亡过程符合一级动力学方以上死亡过程符合一级动力学方程程影响芽孢耐热性的因素影响芽孢耐热性的因素芽孢存在的介质芽孢存在的介质受热时的湿度受热时的湿度2023/4/82023/4/82020现在学习的是第20页，共87页芽孢的利用芽孢的利用生物指示剂（生物指示剂（BIBI）对特定灭菌工艺具有一定耐受性并能用于定量测定对特

12、定灭菌工艺具有一定耐受性并能用于定量测定灭菌效力的微生物制剂（灭菌效力的微生物制剂（USP32）特点特点芽孢芽孢用于制备生物指示剂的微生物应具有相当用于制备生物指示剂的微生物应具有相当的耐受性、稳定性、易培养、及非致病性的耐受性、稳定性、易培养、及非致病性应用于被验证产品、灭菌工艺、生产工艺应用于被验证产品、灭菌工艺、生产工艺符合有关法规的要求符合有关法规的要求2023/4/82023/4/82121现在学习的是第21页，共87页 第二部分第二部分 药品无菌生产的微生物知识药品无菌生产的微生物知识2023/4/82023/4/82222现在学习的是第22页，共87页一、无菌操作岗位人员的主要培

13、训内容1、有关法规、规定、制度 药品法、GMP、规章制度，无菌操作有关制度、规定、工艺规程及岗位操作法等;2、无菌基本概念 无菌产品定义、污染物及污染源（微粒、微生物、热源等）3、无菌控制方法要点 环境控制及监测方法，空气净化技术，水的净化，物料进入无菌区的要求和程序，人员进入无菌区的要求和程序，消毒剂和消毒方法等2023/4/82023/4/82323现在学习的是第23页，共87页4、岗位标准操作程序（SOP）训练 各种岗位标准操作程序的训练，如洗瓶机的操作，洗胶塞机的操作，设备清洗方法，场地清洗方法，无菌灌装岗位的操作（包括洗手方法，无菌工作服穿着要求，无菌操作程序及技巧，天平使用规则，称

14、量复核程序，灌装的计算，调整及复核等）5、组长岗位职责 人员管理，无菌操作的准备程序，组织清场、换批、复核计量，生产记录检查等2023/4/82023/4/82424现在学习的是第24页，共87页6、机修人员无菌概念的培训 生产工艺和设备的无菌要求，生产流水线的准备及故障排除、试车、保养及维修等 7、无菌操作岗位的文件管理 物料清单，无菌记录，清洁记录，设备运行维修记录，生产指令单，各岗位（洗瓶、洗塞、称量、灌装等）操作记录，批生产记录等2023/4/82023/4/82525现在学习的是第25页，共87页二、洁净与污染1、干净与洁净：干净：肉眼所见，是宏观。洁净：微粒、菌落，是微观。2、一般

15、区：是指洁净区之外，未规定有空气洁净度级别要求，但有卫生要求的区域。2023/4/82023/4/82626现在学习的是第26页，共87页3、洁净室（区）：需要对尘粒及微生物数量进行控制的房间（区域）。其建筑结构、装备及其使用均具有减少该区域内污染源的介入、产生和滞留的功能。（全封闭的结构，人员、物料出入门必须分别设置并有各自的净化用室和设施，人员、物料进入洁净室必须经过净化。生产布局要顺应工艺流程，尽量减少迂回、往返；进入洁净间的工艺用水必须符合规定，无菌间不得引入饮用水；进入洁净间的空气必须经过净化并符合规定。）2023/4/82023/4/82727现在学习的是第27页，共87页4、污染

16、：当一个产品存在有不需要的物质时，它即受到污染。2023/4/82023/4/82828现在学习的是第28页，共87页（1）尘粒污染包括肉眼可见与不可见的白点、纤维、微粒等来源：尘埃、衣物洁具、金属粒子、制剂制备中的粉尘、人体2023/4/82023/4/82929现在学习的是第29页，共87页尘埃 5.7%来自地面行驶的车辆，34%来自采掘、炼钢、水泥制造和磨面等工业性粉尘，57%来自燃料的燃烧如锅炉、机动车、火力发电厂，其他如土地干燥产尘、表面腐蚀等。2023/4/82023/4/83030现在学习的是第30页，共87页大气中的含尘浓度场所 0.5粉尘计数浓度（个/）市中心 1535 10

17、7市郊 820 107田野 48 107香烟烟雾 50 107/ML（大多0.5 发尘量（万发尘量（万/分钟）分钟）普通的确良 9173粗孔尼龙绸 0546尼龙绸 0546纯涤纶 1164绵纶丝纺织 4173棉双面卡 6033洁具使用过程中脱落大量的纤维、颗粒。2023/4/82023/4/83232现在学习的是第32页，共87页金属粒子洁净间有机械动作的设备运行中会产生大量金属粒子，特别是大容量注射剂的压盖机。2023/4/82023/4/83333现在学习的是第33页，共87页制剂制备中的粉尘制剂制备中的粉碎、过筛、混合、制粒、整粒、压片、颗粒分装、胶囊填充、某些轻质原料的称量等工序均可以

18、产生大量粉尘。2023/4/82023/4/83434现在学习的是第34页，共87页人体 人体皮屑情况 部位 数量（个）皮肤表面 175平方米 皮肤更替 5天一次 脱落尘粒 71亿/天2023/4/82023/4/83535现在学习的是第35页，共87页洁净室人员动作与微粒发生率动作或状态 发生率（万/分钟）（0.3-1.0）不动 10 手臂和头轻微活动 50手臂、手、头部都动作 100坐下、起立 250行走（60米/分钟）500行走（90米/分钟）750行走（130米/分钟）1000跳跃 150030002023/4/82023/4/83636现在学习的是第36页，共87页花粉一朵花开放时可

19、以产生几十万到上千万个花粉，是严重的过敏源。花种 1朵花开放时的花粉数 粒径/黑松 148万 40-60等披花 59万 80-100冬枪 41万欧洲枫 28万2023/4/82023/4/83737现在学习的是第37页，共87页（2）微生物污染包括细菌、真菌、病毒。微生物广泛存在于空气、水、土壤和人的身上。2023/4/82023/4/83838现在学习的是第38页，共87页某城市空气的含菌浓度场所 浮游菌浓度（个/）火车站 4.97 104 商业区 4.4 104 公 园 6.98 103 植物园 1.05 1032023/4/82023/4/83939现在学习的是第39页，共87页人体带菌

20、情况 部位 数量（个）手 100-1000/平方厘米 前额 1000-10万/平方厘米 头皮 100万/平方厘米 腋窝 1万-1000万/平方厘米 鼻分泌物 1000万/克 唾液 10亿/克2023/4/82023/4/84040现在学习的是第40页，共87页三、污染的四大媒介1、空气：空气本身并不产生污染，但空气是污染最主要、最危险的携带者。2、水：纯水本身并不产生污染，但无论怎样仔细的蒸馏或过滤，总会含有一定量的可溶性的有机物和盐类，这些可溶性物质就是微生物生长的养料。工艺用水：饮用水、纯化水、注射用水2023/4/82023/4/84141现在学习的是第41页，共87页3、表面：与制剂室

21、有关的表面是指设备、设施、容器、地板、墙壁等有关物体的表面。由于空气中的湿度，所有表面都包上一层含水的薄膜。这层薄膜由于静电吸引而饱含尘埃微粒与微生物，许多时候，表面还覆盖一层油状物，更易受到尘粒和微生物的污染。2023/4/82023/4/84242现在学习的是第42页，共87页4、人体：人是最大的污染源与污染的传播媒介。（1）人自己本身会产生数以千万计的微粒，并随着人体热量所形成的热流而扩散。（2）人体本身携带了无数的微生物（见上表），呼吸、咳嗽会产生大量的微水滴，这些微水滴既含有大量的尘粒，也含有大量的微生物。（3）化装品如口红、眉笔、底粉不但产生大量尘粒，还是微生物的良好营养物质。耳环

22、、戒指、项链、手表，隐藏了大量的尘粒与微生物。2023/4/82023/4/84343现在学习的是第43页，共87页四、人员进出洁净区的要求四、人员进出洁净区的要求（1）人员：应预防药品不受人的污染。（2）衣服：无菌工作服要维护良好，且穿戴要正确；工作服无破缝、无污渍；穿戴工作服要系紧衣扣，无头发或自身衣服露出。10 万（D）级洁净区的着装要求：罩住头发和胡须，穿戴该区域专用工作服、专用鞋或鞋套。1 万（C）级洁净区的着装要求：罩住头发、胡须和小胡子，上衣/裤子或连体服、紧腰、高领、专用鞋或鞋套，所用材料不产生污染。2023/4/82023/4/84444现在学习的是第44页，共87页四、人员

23、进出洁净区的要求（续）四、人员进出洁净区的要求（续）100（A）级洁净区着装的要求：戴兜帽、口罩、穿无菌衣、戴无尘灭菌手套、穿无菌鞋或鞋套，所用材料不产生污染，无私人衣物，每次进入洁净区均需穿新灭菌的工作服。2023/4/82023/4/84545现在学习的是第45页，共87页四、人员进出洁净区的要求（续）四、人员进出洁净区的要求（续）（3）正确的更衣要求：在净化室工作，必须遵守洁净室内每一个细节的工作规范；不允许将任何有害的物质带入洁净室；避免污染带给产品可能的严重损害；人员的清洁和卫生是很重要的；进入洁净室必须卸妆；2023/4/82023/4/84646现在学习的是第46页，共87页四、

24、人员进出洁净区的要求（续）四、人员进出洁净区的要求（续）（4）穿洁净工作服的标准操作规程进入更衣室的更衣程序：换干净鞋卸装取下手表/首饰换 内衣（需要时）洗手戴帽子戴口罩 穿洁净服换鞋 和/或 鞋套镜前检查 着装收拾整理洗手戴工作手套进 入洁净室。2023/4/82023/4/84747现在学习的是第47页，共87页五、工具进入洁净区的要求1、对进入洁净区的工具进行监控。2、器具本身及部件都必须进行清 洁消毒。3、脏的，油腻的工具必须清洁并 消毒。4、洁净区配备维修工具箱。2023/4/82023/4/84848现在学习的是第48页，共87页六、在无菌区工作的要求 1、只有洁净区工作人员和授权

25、人员方可进入洁净室；2、在洁净室内不要快速走动，避免不必要的移动；3、不要从层流区附近穿过，不可避免时至少要离开1 米；4、所有地面上的物品，均视为已被污染。2023/4/82023/4/84949现在学习的是第49页，共87页六、在无菌区工作的要求（续）6、休息时，站着，手臂沿身体下垂，不要两臂交叉，也不要放在臀部；7、休息时，座着，把手放在膝盖上，不要交叉双手或双腿；8、工作中必要时才讲话；9、工作时，可使用电话，不可通过气锁讲话。2023/4/82023/4/85050现在学习的是第50页，共87页七、无菌检查的局限性七、无菌检查的局限性历史的教训历史的教训：1962年，美国年，美国FD

26、A颁布第一部颁布第一部GMP1970-1975年，美国输液污染至败血症年，美国输液污染至败血症400多起多起 -有问题的产品全部通过了无菌检查有问题的产品全部通过了无菌检查无菌检查的风险无菌检查的风险取样量为取样量为20瓶时污染率与通过无菌检查概率的关系瓶时污染率与通过无菌检查概率的关系批产品污染率批产品污染率5101520通过无菌检查的概率通过无菌检查的概率3612412023/4/82023/4/85151现在学习的是第51页，共87页药典对无菌保证的定量标准药典对无菌保证的定量标准1973年的英国药典和年的英国药典和1980年年USP增补版提到了无菌增补版提到了无菌的量化标准的量化标准F

27、o不小于不小于8分钟分钟经灭菌后，产品中污染菌存活的概率不大于百万分之一。经灭菌后，产品中污染菌存活的概率不大于百万分之一。中国药典在中国药典在2000版起，收载了此标准。版起，收载了此标准。无菌保证值：污染菌存活概率的负对数，经灭菌后，无菌保证值：污染菌存活概率的负对数，经灭菌后，产品的无菌保证值不小于产品的无菌保证值不小于62023/4/82023/4/85252现在学习的是第52页，共87页“无菌无菌”的标准及概念的标准及概念“每批产品中，污染品概率不得超过一百万分之一每批产品中，污染品概率不得超过一百万分之一”，无菌的这一量化标准应当可以用试验来证明的。，无菌的这一量化标准应当可以用试

28、验来证明的。用无菌检查法显然是不可能的。用无菌检查法显然是不可能的。然而，每瓶产品微生物存活的概率却可计算的。然而，每瓶产品微生物存活的概率却可计算的。这就需要测试产品灭菌前微生物污染数、这就需要测试产品灭菌前微生物污染数、D D值，使用对数值，使用对数规则，并用生物指示剂试验来证实。规则，并用生物指示剂试验来证实。量化指标量化指标 +计算计算 +试验，使无菌标准成为工业界可试验，使无菌标准成为工业界可执行的标准执行的标准 2023/4/82023/4/85353现在学习的是第53页，共87页 第三部分第三部分 热力灭菌基本原理热力灭菌基本原理2023/4/82023/4/85454现在学习的

29、是第54页，共87页 热对微生物的作用热对微生物的作用当高温破坏了细胞中起生命作用的蛋白当高温破坏了细胞中起生命作用的蛋白质、酶及核酸时，细胞死亡。质、酶及核酸时，细胞死亡。生命基本物质的破坏本质上是化学变化生命基本物质的破坏本质上是化学变化实验证明微生物受热死亡速度符合一级实验证明微生物受热死亡速度符合一级动力学方程动力学方程2023/4/82023/4/85555现在学习的是第55页，共87页微生物存活数与灭菌时间关系图微生物存活数与灭菌时间关系图 半对数座标半对数座标Y轴：微轴：微生物取对数生物取对数X轴：时间为轴：时间为10进制普通座标进制普通座标tlgN102030123Y轴及轴及X

30、轴均为普通座标（示意）轴均为普通座标（示意）t N1020301010010002023/4/82023/4/85656现在学习的是第56页，共87页芽孢的耐热参数：芽孢的耐热参数：D值值指一定温度下将微指一定温度下将微生物杀灭生物杀灭90 或或下降一个对数单位下降一个对数单位所需要的时间。所需要的时间。lgNlgNt t1 12 23 34 4t t1 1t t2 2D D2023/4/82023/4/85757现在学习的是第57页，共87页灭菌温度对灭菌温度对D值的影响值的影响 灭菌温度低时，达到同一灭菌效果的时间就长灭菌温度低时，达到同一灭菌效果的时间就长115121125lgNtlgN

31、=1D125D121D1152023/4/82023/4/85858现在学习的是第58页，共87页 F0值：达到同一灭菌效果的概念值：达到同一灭菌效果的概念 F0值即标准灭菌时间值即标准灭菌时间指产品在灭菌过程中获得的与标准参照条件指产品在灭菌过程中获得的与标准参照条件（121）相同灭菌效果的曝热时间）相同灭菌效果的曝热时间lgNtLgNoLgNt121117LgNFTFo2023/4/82023/4/85959现在学习的是第59页，共87页不同灭菌温度下的灭菌率不同灭菌温度下的灭菌率灭菌温度灭菌温度 灭菌率灭菌率L1000.0081050.0251120.1261150.2511160.31

32、61180.5011200.7941211.0001221.251231.59灭菌率：为达到与某一温度灭菌率：为达到与某一温度下灭菌下灭菌1分钟相同的灭菌效果，分钟相同的灭菌效果，在在121下灭菌所需要的灭菌时下灭菌所需要的灭菌时间间 100灭菌时灭菌时1分钟，相当于分钟，相当于121 灭菌灭菌0.008分钟，即分钟，即Fo值值为为0.008分钟。分钟。105灭菌灭菌40分钟时，分钟时，Fo约为约为 1分钟，能使分钟，能使D值为值为1分钟的芽分钟的芽孢数量下降孢数量下降1个对数单位个对数单位2023/4/82023/4/86060现在学习的是第60页，共87页 第四部分第四部分 消毒、灭菌与消

33、毒、灭菌与常见的灭菌方法常见的灭菌方法2023/4/82023/4/86161现在学习的是第61页，共87页消 毒 消毒：是指对病原微生物的繁殖体的致死作用，但不能杀死芽孢等全部微生物。所以消毒是不彻底的，不能代替灭菌。消毒剂：凡用于消毒的化学药品统称为消毒剂，有液体的、固体的和气体的。常用的消毒剂2023/4/82023/4/86262现在学习的是第62页，共87页名称 作用机制 常用浓度 性质与用途 乙醇 蛋白质变性、溶解细胞 70%75%能迅速杀死细菌繁殖体，对一般病毒有一定的消毒作用，对芽孢无杀灭作用。洗必泰 破坏细胞膜，使胞浆外渗 0.1%0.5%表面活性剂，对革兰阳性细菌、阴性细菌

34、均有杀菌作用，但对前者作用较强。甲醛 阻抑菌细胞核蛋白质合成 37%40%能破坏细菌繁殖体及许多芽孢、真菌和病毒。来苏尔 损伤细胞膜 2%能杀灭大多数致病菌的繁殖体，对芽孢作用较弱。新洁尔灭 破坏细胞膜，使蛋白质变性0.05%0.1%季胺盐类化合物，阳离子表面活性剂，抗菌谱较窄，对革兰阳性菌有较强作用，对革兰阴性杆菌，特别是铜绿假单胞菌不敏感，在中性和弱碱性溶液中效果最佳。过氧化氢 蛋白质、酶类变性 2%3%强氧化剂，利用新生氧杀灭细菌繁殖体、芽孢、病毒，真菌有相对的抗性。2023/4/82023/4/86363现在学习的是第63页，共87页影响消毒剂活性的因素：温度 浓度 酸碱度 微生物的种

35、类 有机物质 其他物理化学因素2023/4/82023/4/86464现在学习的是第64页，共87页灭菌凡能杀灭物体中所有活的微生物的作用称为灭菌。灭菌的手段及设备，分别称为灭菌法及灭菌器灭菌法是指用适当的物理或化学手段将物品中的微生物杀灭或除去的方法。常用的物理方法有：热力、气体灭菌、辐射灭菌、物理阻留过滤除菌，还有脉动强光和等离子体等灭菌。2023/4/82023/4/86565现在学习的是第65页，共87页灭菌方法重点介绍：重点介绍：湿热灭菌湿热灭菌干热灭菌干热灭菌2023/4/82023/4/86666现在学习的是第66页，共87页湿热灭菌湿热灭菌-1-1湿热灭菌通常指一定压力下的蒸汽

36、灭菌，也包括过热湿热灭菌通常指一定压力下的蒸汽灭菌，也包括过热水灭菌（水浴式或喷淋式）水灭菌（水浴式或喷淋式）实际上只要微生物处于达到水水蒸气平衡状态实际上只要微生物处于达到水水蒸气平衡状态下的灭菌过程，都是湿热灭菌下的灭菌过程，都是湿热灭菌例：实验室给微生物取样瓶灭菌时通常加例：实验室给微生物取样瓶灭菌时通常加入入1ml水并密封。水并密封。水分的存在有利于灭菌水分的存在有利于灭菌2023/4/82023/4/86767现在学习的是第67页，共87页湿热灭菌特点湿热灭菌特点蒸汽有利于蛋白质的变性和酶的失活，从而杀灭细蒸汽有利于蛋白质的变性和酶的失活，从而杀灭细胞胞 蒸汽热穿透性强蒸汽热穿透性强

37、 灭菌效率高灭菌效率高温度相对较低温度相对较低灭菌时间相对短灭菌时间相对短灭菌过程不产生任何化学物理污染灭菌过程不产生任何化学物理污染灭菌设备控制参数少，运行稳定，方便管理灭菌设备控制参数少，运行稳定，方便管理 2023/4/82023/4/86868现在学习的是第68页，共87页湿热灭菌工艺之一湿热灭菌工艺之一美国美国FDA规定的残存概率法规定的残存概率法灭菌过程灭菌过程8 F01210-6热稳定性好的产品热稳定性好的产品以杀灭微生物作为实现无菌的手段以杀灭微生物作为实现无菌的手段残存概残存概率法率法Fo810-6热稳定性较差产品热稳定性较差产品工艺过程将防止产品被耐热菌污染放在首位，工艺过

38、程将防止产品被耐热菌污染放在首位，而不是仅依赖最终灭菌去消除污染而不是仅依赖最终灭菌去消除污染 流通蒸流通蒸汽法汽法不计算不计算Fo0.1%热不稳定产品热不稳定产品加热是无菌生产工艺（除菌过滤）的补充手段加热是无菌生产工艺（除菌过滤）的补充手段除菌除菌过滤法过滤法LRV70.1%不能加热的产品不能加热的产品LRV=log reduction value 过滤对数下降值，一过滤对数下降值，一般上游为般上游为107下游为下游为1，则，则LRV=7由于后续无菌操作较多，最终产品达到的无菌由于后续无菌操作较多，最终产品达到的无菌保证水平远低于除菌过滤的本身的能力保证水平远低于除菌过滤的本身的能力202

39、3/4/82023/4/87373现在学习的是第73页，共87页干热灭菌机理干热灭菌机理干热灭菌干热灭菌与与湿热灭菌湿热灭菌的动力学特征相的动力学特征相似，符合似，符合“对数规则对数规则”，但灭菌的，但灭菌的机理却并不相同。机理却并不相同。干热灭菌为何需较高的温度？干热灭菌为何需较高的温度？水份的影响：湿度低水份的影响：湿度低机理不同：干热灭菌是使微生物氧化机理不同：干热灭菌是使微生物氧化而不是使蛋白质变性而不是使蛋白质变性2023/4/82023/4/87474现在学习的是第74页，共87页干热灭菌要点干热灭菌要点干热灭菌的介质通常是热空气干热灭菌的介质通常是热空气用对数规则描述微生物杀灭过

40、程，准确性用对数规则描述微生物杀灭过程，准确性较差较差温度高，温度高，200 以上，有可能到以上，有可能到320 用于玻璃容器、手术器械等用于玻璃容器、手术器械等无菌生产工艺中安瓿、西林瓶的灭菌和去无菌生产工艺中安瓿、西林瓶的灭菌和去热源热源2023/4/82023/4/87575现在学习的是第75页，共87页干热灭菌与去热原的关系干热灭菌与去热原的关系去热原的工艺条件比孢子杀灭程序要苛去热原的工艺条件比孢子杀灭程序要苛刻得多，通常相当于标准干热灭菌时间刻得多，通常相当于标准干热灭菌时间FH 的数十倍。的数十倍。如果干热法去热原工艺能使细菌内毒素如果干热法去热原工艺能使细菌内毒素下降下降3个对

41、数单位，就不必再进行微生物个对数单位，就不必再进行微生物的生物指示剂挑战性试验。的生物指示剂挑战性试验。2023/4/82023/4/87676现在学习的是第76页，共87页第五部分第五部分灭菌工艺的验证灭菌工艺的验证2023/4/82023/4/87777现在学习的是第77页，共87页灭菌工艺的验证灭菌工艺的验证灭菌工艺验证资料是国外药品（注射剂）注册的必报材料灭菌工艺验证资料是国外药品（注射剂）注册的必报材料灭菌工艺条件（灭菌介质、温度时间参数、装载方式等）灭菌工艺条件（灭菌介质、温度时间参数、装载方式等）灭菌设备和灭菌工艺的验证（前者与后者不同）灭菌设备和灭菌工艺的验证（前者与后者不同）

42、灭菌工艺验证资料包括灭菌工艺验证资料包括灭菌设备的安装确认灭菌设备的安装确认灭菌设备的运行确认灭菌设备的运行确认灭菌工艺的验证灭菌工艺的验证先对设备温度仪表和验证用仪表进行校准先对设备温度仪表和验证用仪表进行校准空载热分布找到灭菌过程中灭菌设备的最冷点空载热分布找到灭菌过程中灭菌设备的最冷点不同装载形式、不同装量规格产品的热穿透试验产品获得的不同装载形式、不同装量规格产品的热穿透试验产品获得的F0生物指示剂验证生物指示剂验证-微生物挑战性试验微生物挑战性试验2023/4/82023/4/87878现在学习的是第78页，共87页热力灭菌常用生物指示剂热力灭菌常用生物指示剂灭菌方式灭菌方式 微生物

43、（孢子）微生物（孢子）D值范围（分）值范围（分）湿湿 热热121嗜热脂肪芽孢杆菌嗜热脂肪芽孢杆菌 Bacillus stearothermophilus 1.5-3.0 枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis 0.3-0.7凝结芽孢杆菌凝结芽孢杆菌 Bacillus coagulans 0.4-0.8梭状芽孢杆菌梭状芽孢杆菌 Clostridium sporogenes 0.4-0.8干热干热 150 枯草芽孢杆菌黑色变种枯草芽孢杆菌黑色变种 Bacillus subtilis var.niger 1.0 资料来源：参数放行专题材料资料来源：参数放行专题材料2023/4/

44、82023/4/87979现在学习的是第79页，共87页第六部分第六部分常见灭菌设备介绍常见灭菌设备介绍2023/4/82023/4/88080现在学习的是第80页，共87页灭菌设备灭菌设备1、混合蒸汽灭菌柜、混合蒸汽灭菌柜2、下排式蒸汽灭菌柜、下排式蒸汽灭菌柜3、脉动真空蒸汽灭菌柜、脉动真空蒸汽灭菌柜4、旋转喷淋灭菌柜、旋转喷淋灭菌柜5、隧道式洗瓶灭菌柜工作原理图、隧道式洗瓶灭菌柜工作原理图2023/4/82023/4/88181现在学习的是第81页，共87页混合蒸汽灭菌柜混合蒸汽灭菌柜SAM=steam air mixture蒸汽空气混合灭菌柜蒸汽空气混合灭菌柜混合汽体灭菌柜混合汽体灭菌柜

45、进蒸汽的管没画出进蒸汽的管没画出顶上用一风扇，使灭菌均匀顶上用一风扇，使灭菌均匀无风扇时，灭菌容易不均匀无风扇时，灭菌容易不均匀热交换器控制冷却速度热交换器控制冷却速度2023/4/82023/4/88282现在学习的是第82页，共87页下排式蒸汽灭菌柜下排式蒸汽灭菌柜热蒸汽在上热蒸汽在上冷空气在下冷空气在下蒸汽挤空气蒸汽挤空气2023/4/82023/4/88383现在学习的是第83页，共87页脉动真空蒸汽灭菌柜脉动真空蒸汽灭菌柜有高真空及脉动真空二种形式第二种比较常见抽99%，剩1%3次真空，残存的空气为0.1%密封圈密封圈2023/4/82023/4/88484现在学习的是第84页，共8

46、7页旋转喷淋灭菌柜旋转喷淋灭菌柜纯化水或注射用水纯化水或注射用水作传热介质作传热介质-过热水过热水灭菌灭菌加热时开工业蒸汽加热时开工业蒸汽冷却时，可用冷冻冷却时，可用冷冻水或自来水冷却水或自来水冷却产品转动，受热均匀产品转动，受热均匀软袋灭菌时，用过热水软袋灭菌时，用过热水较多，但需加压缩空气较多，但需加压缩空气2023/4/82023/4/88585现在学习的是第85页，共87页干热灭菌柜干热灭菌柜常见程序：常见程序：1802小时，细菌内毒素下降小时，细菌内毒素下降3对数单位对数单位2023/4/82023/4/88686现在学习的是第86页，共87页隧道式洗瓶灭菌柜工作原理图隧道式洗瓶灭菌柜工作原理图瓶清洁瓶清洁排水汽排水汽预热预热（280）去热原去热原(380)冷却冷却(30)干热灭菌干热灭菌层流层流保护保护洗瓶及灭菌、去热原为联动线洗瓶及灭菌、去热原为联动线B区区2023/4/82023/4/88787现在学习的是第87页，共87页