致病菌的检验螺旋体霉形体立克次体及衣原体.ppt
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1、致病菌的检验螺旋体霉形体立克次体及衣原体现在学习的是第1页,共36页 第16章 螺旋体(螺旋体(SpirochaetaSpirochaeta)螺旋体是一类螺旋体是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、无鞭毛而能活泼运菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、无鞭毛而能活泼运动动的原核单细胞微生物。在生物学上的位置介于的原核单细胞微生物。在生物学上的位置介于细菌与原虫细菌与原虫之间。之间。与细菌的相似之处:具有与细菌相似的与细菌的相似之处:具有与细菌相似的细胞壁细胞壁,内含脂多糖和胞壁酸,内含脂多糖和胞壁酸,二分裂繁殖,无定型核,对抗生素敏感;二分裂繁殖,无定型核,对抗生素敏感;与原虫的相似之处:与原虫的相似之
2、处:体态柔软体态柔软,胞壁与胞膜间绕有,胞壁与胞膜间绕有弹性轴丝弹性轴丝,借助它,借助它的屈曲和收缩能活泼运动,易被胆汁或胆盐溶解。的屈曲和收缩能活泼运动,易被胆汁或胆盐溶解。现在学习的是第2页,共36页一、形态特征一、形态特征1、形态:螺旋或波浪状。、形态:螺旋或波浪状。2、大小:悬殊,、大小:悬殊,长长3-500m,宽,宽0.09-3.0m;某些螺旋体可通过;某些螺旋体可通过一般的细菌滤器一般的细菌滤器。3、基本结构、基本结构:与细菌相似,有细胞与细菌相似,有细胞壁、原始核质。壁、原始核质。4、繁殖、繁殖:二分裂。二分裂。5、对某些抗生素敏感。、对某些抗生素敏感。现在学习的是第3页,共36
3、页二、染色特性二、染色特性 1、G-,但多不易着色,故少用。,但多不易着色,故少用。2、姬姆萨染色效果较好:染成红色或蓝色。、姬姆萨染色效果较好:染成红色或蓝色。染成蓝色染成蓝色者多属腐生性螺旋体者多属腐生性螺旋体。3、病理组织中的螺旋体、病理组织中的螺旋体(1)银染法:螺旋体染成)银染法:螺旋体染成黑褐色黑褐色,其他细菌和组织均,其他细菌和组织均染成染成黄色黄色。(2)印度墨汁负染色:螺旋体透明无色,背景衬有)印度墨汁负染色:螺旋体透明无色,背景衬有颜色,反差明显,形象清晰。颜色,反差明显,形象清晰。4、常用、常用相差和暗视野显微镜相差和暗视野显微镜观察,既能检查形体又可观察,既能检查形体又
4、可分辨运动方式。分辨运动方式。现在学习的是第4页,共36页三三 分类:分类:螺旋体目螺旋体目(Spirochaetales)螺旋体科螺旋体科(Spirochaetaceae),共,共5个个属:属:1、螺旋体属:长、螺旋体属:长5-500m,宽,宽0.2-0.75m,厌氧或兼性厌氧,自由生,厌氧或兼性厌氧,自由生活,多见于水生环境,目前尚未发现有致病者。活,多见于水生环境,目前尚未发现有致病者。2、脊螺旋体属:长、脊螺旋体属:长30-150m,宽,宽0.5-3.0m,有,有螺旋螺旋2-10圈圈。在活体。在活体标本,可用相差显微镜观察到卵圆形的内含物及大束的轴丝。营共生生标本,可用相差显微镜观察到
5、卵圆形的内含物及大束的轴丝。营共生生活,通常存于蛤、贝等软体动物肠内。活,通常存于蛤、贝等软体动物肠内。3、疏螺旋体属:长、疏螺旋体属:长3-15m,宽,宽0.2-0.5m,螺旋琉松而不规则,较容易,螺旋琉松而不规则,较容易染色。厌氧,营寄生生活。染色。厌氧,营寄生生活。一部分为病原菌一部分为病原菌,经蝉及虱传播,其中包,经蝉及虱传播,其中包括感染人的各种回归热病原体。在兽医实践上具有重要意义的有:括感染人的各种回归热病原体。在兽医实践上具有重要意义的有:鹅疏螺旋体鹅疏螺旋体(Borrelia anserina)可引起鸭、火鸡、鸡及某些野)可引起鸭、火鸡、鸡及某些野禽的疏螺旋体病。禽的疏螺旋体
6、病。色勒氏疏螺旋体色勒氏疏螺旋体(Borrelia theileri),可引起牛和马的疏螺旋体病。),可引起牛和马的疏螺旋体病。现在学习的是第5页,共36页4、密螺旋体属:本属螺旋体长、密螺旋体属:本属螺旋体长5-20m,宽,宽0.09-0.5m;螺旋弯曲而致;螺旋弯曲而致密。多数菌种用姬姆萨氏染料染色,效果不佳。用银染法较好。密。多数菌种用姬姆萨氏染料染色,效果不佳。用银染法较好。本属的病原菌最熟知者为本属的病原菌最熟知者为梅毒苍白密螺旋体梅毒苍白密螺旋体。在兽医微生物学中。在兽医微生物学中重要者有重要者有兔密螺旋体兔密螺旋体和和猪痢疾密螺旋体猪痢疾密螺旋体。5、细螺旋体属:细螺旋体属是其一
7、端或两端可弯曲呈钩状的一大类螺旋体,、细螺旋体属:细螺旋体属是其一端或两端可弯曲呈钩状的一大类螺旋体,故通常又称之为故通常又称之为钩端螺旋体钩端螺旋体。大部分是腐生性和水生性的,一部分有。大部分是腐生性和水生性的,一部分有寄生性,可引起人和动物的传染病。寄生性,可引起人和动物的传染病。现在学习的是第6页,共36页现在学习的是第7页,共36页四、培养特性四、培养特性n螺旋体的培养与细菌相比较为困难,但有些种属,特螺旋体的培养与细菌相比较为困难,但有些种属,特别是别是细螺旋体属细螺旋体属的培养并不难。其他种属的培养则要的培养并不难。其他种属的培养则要特殊的培养基,既便如此,也不易成功。特殊的培养基
8、,既便如此,也不易成功。n细螺旋体属在需氧条件下可以生长,而细螺旋体属在需氧条件下可以生长,而密螺旋体密螺旋体属则属则要求要求严格的厌氧严格的厌氧条件。条件。现在学习的是第8页,共36页伯氏疏螺旋体(伯氏疏螺旋体(B.burgdorferi)引起莱姆病(引起莱姆病(Lyme disease)的病原体。莱姆病最早)的病原体。莱姆病最早于于1975年在美国的康尼狄克州的莱姆镇发现,故而得年在美国的康尼狄克州的莱姆镇发现,故而得名,现已遍布全世界。名,现已遍布全世界。现在学习的是第9页,共36页此病由硬蜱(此病由硬蜱(IxodesIxodes)为传播)为传播媒介,感染媒介,感染人和犬、牛、马人和犬、
9、牛、马等等动物,可致关节炎等多种疾病。动物,可致关节炎等多种疾病。病人出现的第一个病症是被蜱叮病人出现的第一个病症是被蜱叮咬的部位呈咬的部位呈圆环状疹块圆环状疹块。现在学习的是第10页,共36页第第17章章 支原体支原体(Mycoplasma)支原体又称霉形体,是一类支原体又称霉形体,是一类无细胞壁的细菌,无细胞壁的细菌,是目前已是目前已知能在无生命的培养基中繁知能在无生命的培养基中繁殖的最小微生物。殖的最小微生物。自然界广自然界广泛分布,如污水,土壤,矿泛分布,如污水,土壤,矿石,植物,昆虫,家畜,禽石,植物,昆虫,家畜,禽类和人体中;危害人、畜、类和人体中;危害人、畜、植物,引起高度重视。
10、植物,引起高度重视。现在学习的是第11页,共36页特点特点:(1)(1)无细胞壁,细胞柔软,多形性,无细胞壁,细胞柔软,多形性,能通过细菌滤器能通过细菌滤器 (2)(2)在人工培养基中生长繁殖,形成在人工培养基中生长繁殖,形成“煎荷包蛋状煎荷包蛋状”菌落菌落(3)(3)含有含有DNADNA和和RNA RNA(4)(4)以二分裂或芽生方式繁殖以二分裂或芽生方式繁殖 (5)(5)对青霉素有抵抗力对青霉素有抵抗力 现在学习的是第12页,共36页一、形态与染色形态与染色 n支原体的大小为支原体的大小为0.2-0.3m,可通过滤,可通过滤菌器,常给菌器,常给细胞培养带来污染细胞培养带来污染。n具多形性和
11、可塑性。无鞭毛,革兰氏具多形性和可塑性。无鞭毛,革兰氏染色阴性,着色不良,染色阴性,着色不良,姬姆萨或瑞氏染色姬姆萨或瑞氏染色良好,呈淡紫色良好,呈淡紫色。n支原体基因组为一环状双链支原体基因组为一环状双链DNA,分子量小(仅有大肠杆菌的五分之一),分子量小(仅有大肠杆菌的五分之一),合成与代谢很有限。合成与代谢很有限。n细胞膜具有三层结构,内、外层主细胞膜具有三层结构,内、外层主要是蛋白质,中间层主要是脂质要是蛋白质,中间层主要是脂质 (固固醇含量高)。醇含量高)。现在学习的是第13页,共36页与细菌与细菌L L型的区别型的区别支原体支原体 L L型型遗传上与细菌无关遗传上与细菌无关 与原菌
12、有关,常可以回复与原菌有关,常可以回复细胞膜含细胞膜含高浓度固醇高浓度固醇 细胞膜不含固醇细胞膜不含固醇在一般培养基中稳定在一般培养基中稳定 大多需要高渗培养大多需要高渗培养生长慢,菌落小生长慢,菌落小 菌落稍大菌落稍大 0.1-0.3mm 0.5-1.0mm0.1-0.3mm 0.5-1.0mm菌落中心菌落中心深埋于培养基深埋于培养基中中 菌落生长于基质表面,菌落生长于基质表面,不易刮除不易刮除 易于刮除易于刮除液体培养混浊度低液体培养混浊度低 有一定混浊度有一定混浊度现在学习的是第14页,共36页二、培养特性二、培养特性 1、营养要求比一般细菌高,除基础营养物质外还需加、营养要求比一般细菌
13、高,除基础营养物质外还需加10-20%人或动物人或动物血清血清以提供所需的以提供所需的胆固醇胆固醇。2、最适、最适pH 7.8-8.0之间,低于之间,低于7.0则死亡,但解脲脲原体最适则死亡,但解脲脲原体最适pH6.0-6.5。3、多数兼性厌氧,有些菌株在初分离时加入、多数兼性厌氧,有些菌株在初分离时加入5%CO2生长更好。生生长更好。生长缓慢,在琼脂含量较少的固体培养基上孵育长缓慢,在琼脂含量较少的固体培养基上孵育2-3天出现典型的天出现典型的“荷包蛋样荷包蛋样”菌落:圆形,菌落:圆形,核心部分较厚,向下长入培养基,核心部分较厚,向下长入培养基,周边为一层薄的透明颗粒区周边为一层薄的透明颗粒
14、区。现在学习的是第15页,共36页4 4、可在鸡胚的、可在鸡胚的卵黄囊或绒毛尿囊膜卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长,有些菌株可致鸡胚死亡。也能上生长,有些菌株可致鸡胚死亡。也能在细胞培养中生长,不一定引起细胞病变,但可在细胞培养中生长,不一定引起细胞病变,但可妨碍病毒的细胞培养妨碍病毒的细胞培养。5、液体培养基中生长少,不易见浑浊,、液体培养基中生长少,不易见浑浊,仅有小颗粒沉于管底仅有小颗粒沉于管底。6、繁殖方式多样,主要为二分裂,还有、繁殖方式多样,主要为二分裂,还有断裂、分枝、出芽断裂、分枝、出芽等。同时,等。同时,支原体分裂和其支原体分裂和其DNA复制不同步,可形成多核长丝体。复制不同步,可形
15、成多核长丝体。现在学习的是第16页,共36页三、生化反应与分型三、生化反应与分型 1、一般、一般能分解葡萄糖的支原体则不能利用精氨酸,能利用精氨能分解葡萄糖的支原体则不能利用精氨酸,能利用精氨酸的则不能分解葡萄糖。酸的则不能分解葡萄糖。解脲脲原体不能利用葡萄糖或精氨酸,但解脲脲原体不能利用葡萄糖或精氨酸,但可利用尿素作能源。可利用尿素作能源。2、各种支原体都有特异的表面抗原结构,很少有交叉反应,具有、各种支原体都有特异的表面抗原结构,很少有交叉反应,具有型特异型特异性性。应用生长抑制试验(。应用生长抑制试验(Growth inhibition test,GIT)、代谢抑制试验)、代谢抑制试验(
16、Metabolic inhibition test,MIT)等可鉴定支原体抗原并进行分型。等可鉴定支原体抗原并进行分型。现在学习的是第17页,共36页四、抵抗力四、抵抗力支原体对热的抵抗力与细菌相似。对环境支原体对热的抵抗力与细菌相似。对环境渗透压渗透压敏感,敏感,渗透压突变可致细胞破裂。对重金属盐、石炭酸、来渗透压突变可致细胞破裂。对重金属盐、石炭酸、来苏尔和一些表面活性剂较细菌敏感,但对醋酸铊、结苏尔和一些表面活性剂较细菌敏感,但对醋酸铊、结晶紫和亚锑酸盐的抵抗力比细菌强。晶紫和亚锑酸盐的抵抗力比细菌强。对影响壁合成的抗生素如对影响壁合成的抗生素如青霉素青霉素不敏感,但不敏感,但红霉素、四
17、环红霉素、四环素、链霉素及氯霉素素、链霉素及氯霉素等作用于支原体核蛋白体的抗生等作用于支原体核蛋白体的抗生素,可抑制或影响蛋白质合成,有杀灭支原体的作用。素,可抑制或影响蛋白质合成,有杀灭支原体的作用。现在学习的是第18页,共36页五、致病性与免疫性五、致病性与免疫性1、支原体不侵入机体组织与血液,在呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞粘、支原体不侵入机体组织与血液,在呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞粘附并定居后,通过不同机制引起细胞损伤,如附并定居后,通过不同机制引起细胞损伤,如获取细胞膜上的脂质获取细胞膜上的脂质与胆固醇造成膜损伤与胆固醇造成膜损伤,释放神经(外)毒素、磷酸酶及过氧化氢等。,释放神经(外)
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