铁皮石斛组织培养课件.ppt

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1、LOGOLOGO关于关于铁皮石斛皮石斛组织培养培养第1页，此课件共14页哦Company Logo铁皮石斛的组织培养铁皮石斛的组织培养铁皮石斛，为兰科多年生附生草本植物。生于铁皮石斛，为兰科多年生附生草本植物。生于海拔达海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上，喜米的山地半阴湿的岩石上，喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境，不耐寒。温暖湿润气候和半阴半阳的环境，不耐寒。一般均能耐一般均能耐5的低温。石斛可分为黄草、的低温。石斛可分为黄草、金钗、马鞭等数十种，铁皮石斛为石斛之极金钗、马鞭等数十种，铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。品，它因表皮呈铁绿色而得名。第2页，此课件共14页哦Compan

2、y Logo铁皮石斛的组织培养技术路线铁皮石斛的组织培养技术路线外植体外植体丛生芽丛生芽培养基培养基生根发育生根发育完整植株第3页，此课件共14页哦Company Logo蔗糖：30g琼脂：6.8g初代培养基的设计初代培养基的设计诱导培养基诱导培养基 MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+琼脂6.8%【pH值5.25.6】MS母液：I-V50ml,5ml,5ml,5ml 5ml。激素母液：BA10ml,NAA5ml第4页，此课件共14页哦Company Logo蔗糖：30g琼脂：6.8g土豆汁150ml继代培养基的设计继代培养基的设计增殖培养基增殖培养基 MS+BA0.5m

3、l+NAA0.2+土豆汁10%20%【pH值5.25.6】取MS母液：IV50ml,5ml,5ml,5ml,5ml;激素母液：BA5ml,NAA2ml第5页，此课件共14页哦Company LogoNAABAIAA增殖培养将建立的无菌系中的小苗增殖培养将建立的无菌系中的小苗转转入增殖培养基中入增殖培养基中进进行增殖培行增殖培养。增殖培养基以养。增殖培养基以MS为为基本培养基，添加不同基本培养基，添加不同浓浓度的生度的生长调节剂长调节剂BA、NAA、IAA、IBA及土豆汁和香蕉汁等附加物及土豆汁和香蕉汁等附加物。土豆汁土豆汁香蕉汁香蕉汁IBA第6页，此课件共14页哦Company Logo蔗糖：

4、30g琼脂：6.8g香蕉汁：200ml活性炭：20g生根培养基的设计生根培养基的设计生根培养基生根培养基1/2MS+NAA0.20.5mg/L+香蕉汁20%+活性炭2.0%【pH值5.25.6】取MS母液：IV25ml,5ml,5ml,5ml,5ml;激素母液：NAA25ml第7页，此课件共14页哦Company LogoYour Text here生根培养将丛生芽无菌操作切下单株放在生根培养基中于适宜条件下培养，约12周后即生根，以长成完整植株。第8页，此课件共14页哦Company Logo优选优选1年生年生铁铁皮石斛植株皮石斛植株上上生生长长健壮的茎段健壮的茎段外植体的选择外植体的选择接

5、种小芽苗多易于在苗基部形成接种小芽苗多易于在苗基部形成丛丛生芽生芽。苗的高度苗的高度为为12cm时时,丛丛生芽增殖倍数最高数生芽增殖倍数最高数。生长发育健壮苗优先生长发育健壮苗优先123第9页，此课件共14页哦Company Logo外外植植体的体的处理理Text 1Text 2Text 3摘去叶片和膜摘去叶片和膜质质叶鞘，剪成叶鞘，剪成约约2cm长带节长带节的小段的小段。用洗用洗洁剂洁剂清清洗后置流水洗后置流水下冲下冲2030 min。在超在超净净工作台上用工作台上用75%的酒精消的酒精消30s0.1%HgCl2灭灭菌菌5min后，用无菌水冲后，用无菌水冲洗洗56次，放入次，放入垫垫有有干无

6、菌干无菌滤纸滤纸的培养皿的培养皿中，以吸去多余水分，中，以吸去多余水分，茎段两端各切茎段两端各切0.20.3cm。第10页，此课件共14页哦Company Logo接种实验接种实验一、接种准备工作一、接种准备工作1、超净工作台开紫外灯照射、超净工作台开紫外灯照射10-20min送风送风2、外植体消毒（继代培养采用已建立的无菌培养物作、外植体消毒（继代培养采用已建立的无菌培养物作为材料）为材料）3、工具消毒、工具消毒二、接种操作二、接种操作1、用消毒工具、器皿，切取铁皮石斛幼茎段、用消毒工具、器皿，切取铁皮石斛幼茎段2cm2、接种环烧红，沾一下培养基、接种环烧红，沾一下培养基3、镊取茎段插于培养

7、基中、镊取茎段插于培养基中4、封口、标记、封口、标记第11页，此课件共14页哦Company Logo各时期的培养条件各时期的培养条件茎段的诱导时间在茎段的诱导时间在511天之间天之间培养温度培养温度2325，光照强度，光照强度2000lx，光照时，光照时间间10h/d第12页，此课件共14页哦Company Logo参考文献参考文献1郑宽瑜郑宽瑜,邓君浪邓君浪,赵培快繁技术体系研究赵培快繁技术体系研究J.云南农业云南农业科技科技,2009,(S2):57-59。2周根余周根余,谢薇谢薇,程磊程磊.影响铁皮石斛原球茎生长的若干因素影响铁皮石斛原球茎生长的若干因素J.江西科学江西科学,1999,17(4):231-235.3叶纪沟叶纪沟.铁皮石斛试管苗的人工栽培研究铁皮石斛试管苗的人工栽培研究J.中国药业中国药业,2001,10(1):53。4李铭宗李铭宗.铁皮石斛的生物学特性和人工栽培铁皮石斛的生物学特性和人工栽培J.福建热福建热作科技作科技,1999,24(1):29-31。5张明张明,夏鸿西夏鸿西,朱利泉朱利泉,等等.石斛组织培养研究进展石斛组织培养研究进展J.中国中药杂志中国中药杂志,2000,25(6):323-326。第13页，此课件共14页哦感感谢谢大大家家观观看看第14页，此课件共14页哦