【基因工程及其应用】(旧人教版)cql.pptx
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1、基因工程及其应用基因工程及其应用 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的性状。原理:原理:基因基因重组重组操作水平:操作水平:DNA分子水平分子水平操作环境:操作环境:生物体外生物体外结果:结果:定向定向改造生物的性状改造生物的性状基因操作的工具基因操作的工具基因的剪刀基因的剪刀限制性核酸内切酶(限制酶)限制性核酸内切酶(限制酶)分布:分布:主要在微生物中主要在微生物中特点:特点:特异性(识别特定特异性(识别特定核苷酸序列,切割特定位核苷酸序列,切割特定位点)点)结果:结
2、果:产生黏性末端产生黏性末端(碱基碱基互补配对)互补配对)切割:切割:磷酸二酯键磷酸二酯键 EcoRI 基因的针线:基因的针线:DNA连接酶连接酶G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割用同种限制酶切割基因的针线基因的针线DNADNA连接酶连接酶连接部位:连接部位:脱氧核糖和磷酸之间脱氧核糖和磷酸之间(磷酸二酯键)(磷酸二酯键)结果:结果:两个相同的黏性末端连接两个相同的黏性末端连接基因的运输工
3、具基因的运输工具运载体运载体种类:种类:质粒(常用)、质粒(常用)、噬菌体、动植物病毒噬菌体、动植物病毒作用:作用:将外源基因导入受体将外源基因导入受体细胞细胞质粒:质粒:细菌及酵母菌中,细菌及酵母菌中,独独立立于细胞染色体外能于细胞染色体外能自主复自主复制制的小型环状的小型环状DNADNA。大肠杆菌的质粒大肠杆菌的质粒(plasmid):运载体运载体(carrying)应该应该具有什么特具有什么特点呢点呢?基因操作(gene engineering)的工具运载体运载体(carrying)1.1.能够在宿主细胞内复能够在宿主细胞内复制并稳定保存;制并稳定保存;.具有多个限制酶切点具有多个限制酶
4、切点以便与外源基因相连;以便与外源基因相连;.具有标记基因,便于具有标记基因,便于进行筛选进行筛选提取途径:提取途径:基因操作的基本步骤基因操作的基本步骤、提取目的基因、提取目的基因*从供体细胞从供体细胞DNADNA中直接分离法中直接分离法*人工合成基因法人工合成基因法(常用)(常用)反转录法:反转录法:mRNA单链单链DNA双链双链DNA直接合成法:直接合成法:蛋白质的氨基酸顺序蛋白质的氨基酸顺序基因碱基因碱基顺序基顺序目的基因目的基因2 2、目的基因与运载体结合、目的基因与运载体结合一个切口一个切口两个黏性末端两个黏性末端两个切口两个切口获得目的基因获得目的基因DNADNA质粒质粒重组质粒
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