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1、遗传学PPT现在学习的是第1页，共43页闫昕 黄华仪 江辰峰 王辰伊 果蝇杂交实验方案现在学习的是第2页，共43页果蝇杂交实验方案实验目的 实验材料 实验技术流程 实验的步骤 闫昕现在学习的是第3页，共43页实验的目的 验证基因伴性遗传的规律验证基因连锁与交换规律并计算重组值现在学习的是第4页，共43页实验材料-黑腹果蝇 果蝇用果蝇作为实验材料的优点用果蝇作为实验材料的优点果蝇是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有2500个种。通常作遗传学实验材料的是黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）1、饲养容易。在常温下，以玉米粉等做饲料就

2、可以生长，繁殖。2、生长迅速。十二天左右就可以完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400-500个，因此在短时间内就可获得大量的子代，便于遗传学分析。3、染色体数少。只有4对。4、唾腺染色体制作容易。横纹清晰，是细胞学观察的好材料。5、突变性状多。而且多数是形态突变，便于观察。现在学习的是第5页，共43页实验材料-黑腹果蝇生活史 果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说，30以上温度能使果蝇不育或死亡，低温能使生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度为20-25。现在学习的是第6页，共43页实验材料-黑腹果蝇的饲养方法 果蝇以酵母菌为主要食料，凡能发酵的基质都可做为果蝇饲料。实验室里主要

3、有玉米饲料、米粉饲料、香蕉饲料等现在学习的是第7页，共43页实验材料-黑腹果蝇的饲养方法玉米饲料香蕉饲料米粉饲料I.取应加水量的一半，加入琼脂，煮沸，使充分溶解，加糖，煮沸溶解。II.取另一半水混合玉米粉，加热调成糊状。III.将上述两者混合，煮沸。以上操作都要搅拌，以免沉积物烧焦。IV.待稍冷后酵母粉及丙酸，充分调匀，分装，按用量配置，可得饲料200mL左右I.取应加水量的一半，加入琼脂，煮沸，使充分溶解，加糖，煮沸溶解。II.取另一半水混合米粉，加热调成糊状。III.将上述两者混合，煮沸。以上操作都要搅拌，以免沉积物烧焦。IV.待稍冷后酵母粉及丙酸，充分调匀，分装，按用量配置，可得饲料20

4、0mL左右 I.将熟透的香蕉捣碎制成香蕉浆。II.将琼脂加到水中煮沸，使充分溶解 III.将琼脂加入香蕉浆，煮沸。IV.稍冷后加入酵母粉及丙酸，充分调匀，分装。现在学习的是第8页，共43页实验材料-研究的性状及显隐性实验中观察的性状一般都可以用肉眼鉴定，另一些可在解剖镜下鉴定。现在学习的是第9页，共43页实验技术流程 亲本的纯种培养第一天，将所需品系（野生型/特别性状突变型）的雌雄果蝇麻醉后进行挑选，挑出所需品系的果蝇5-10对，分别培养，25培养8天。杂交亲本的确定确定进行杂交实验的亲本，挑选性状符合的处女蝇。雌蝇一定要选处女蝇。处女蝇的挑选方法：亲本饲养2周之后，提前1012小时把培养瓶内

5、所有活的成虫倒干净，然后在倒掉成虫的12小时内吧新羽化的成虫倒出来，装进消毒过的培养瓶或者平底试管进行适度麻醉，麻醉后放在消毒过的白瓷板或者硬纸板上把雌雄蝇分别挑出，雌蝇即为处女蝇。根据实验所需处女蝇数量的多少，可连续收集，但不要超过3天。后代的性状观察与记录将所需品系的雌蝇与雄蝇放在一起培养，如果需要观察F1代的性状，7-8天后，需要倒掉亲本，避免F1代雌蝇与父本杂交，影响结果。实验结果的分析与讨论杂交的遗传式现在学习的是第10页，共43页 实验步骤实验步骤 4.1亲本的纯种培养亲本的纯种培养 4.2杂交杂交1（伴性遗传的观察）（伴性遗传的观察）4.3 杂交杂交2（伴性遗传的进一步观察）（伴

6、性遗传的进一步观察）4.4 杂交杂交3（连锁与交换的观察）（连锁与交换的观察）王辰伊 现在学习的是第11页，共43页亲本的纯种培养亲本的纯种培养 现在学习的是第12页，共43页4.1.1 亲本饲养瓶的准备亲本饲养瓶的准备 准备好两个品系的雌雄黑腹果蝇饲养瓶：准备好两个品系的雌雄黑腹果蝇饲养瓶：野生型，红眼（野生型，红眼（+）长翅（）长翅（+）直刚毛（）直刚毛（+）突变型，白眼（突变型，白眼（w）小翅（）小翅（m）卷刚毛（）卷刚毛（sn）现在学习的是第13页，共43页4.1.2 果蝇的麻醉与转瓶果蝇的麻醉与转瓶将长有果蝇的培养瓶在海绵垫上敲，使果蝇全部震落在将长有果蝇的培养瓶在海绵垫上敲，使果蝇

7、全部震落在培养瓶底部，然后迅速打开培养瓶的棉塞，把果蝇倒入培养瓶底部，然后迅速打开培养瓶的棉塞，把果蝇倒入去盖的麻醉瓶中，立即盖好麻醉瓶。去盖的麻醉瓶中，立即盖好麻醉瓶。根据实验要求，将麻醉的果蝇转移至另一个培养瓶或者置根据实验要求，将麻醉的果蝇转移至另一个培养瓶或者置于白瓷板上观察。于白瓷板上观察。现在学习的是第14页，共43页对果蝇进行检查时，用乙醚麻醉，使果蝇处于对果蝇进行检查时，用乙醚麻醉，使果蝇处于昏迷状态。使用时将乙醚滴昏迷状态。使用时将乙醚滴23滴到麻醉瓶的滴到麻醉瓶的棉花球上，注意不要让乙醚流入瓶内，麻棉花球上，注意不要让乙醚流入瓶内，麻醉瓶要保持干燥，否则会粘住果蝇翅膀，醉瓶

8、要保持干燥，否则会粘住果蝇翅膀，影响观察。影响观察。现在学习的是第15页，共43页杂交1伴性遗传的观察现在学习的是第16页，共43页实验设计杂交图谱正交正交反交反交2023/4/8现在学习的是第17页，共43页4.2.1 杂交用饲养瓶的准备杂交用饲养瓶的准备亲代培养：亲代培养：第一天，将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行挑选，第一天，将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行挑选，其中在野生型中挑出其中在野生型中挑出34对，突变型中挑出对，突变型中挑出78对，对，分别培养，分别培养，25培养培养8天。天。现在学习的是第18页，共43页4.2.2亲本处女蝇的挑选亲本处女蝇的挑选 第第8天，待培养瓶中出现蛹且呈黑色

9、时，将两个品天，待培养瓶中出现蛹且呈黑色时，将两个品系的亲代果蝇麻醉弃去，野生型品系继续培养，待用。系的亲代果蝇麻醉弃去，野生型品系继续培养，待用。12小时后，将孵化的突变型成蝇麻醉后分出雌蝇，小时后，将孵化的突变型成蝇麻醉后分出雌蝇，至另一培养瓶，培养处女蝇待用。再至另一培养瓶，培养处女蝇待用。再12小时后，继续挑小时后，继续挑选雌雄蝇，放入处女蝇培养瓶中，以后每隔选雌雄蝇，放入处女蝇培养瓶中，以后每隔12小时挑选小时挑选一次，直至挑出一次，直至挑出10只处女蝇。只处女蝇。现在学习的是第19页，共43页4.2.3 雄性果蝇的挑选雄性果蝇的挑选 麻醉野生型品系，挑出麻醉野生型品系，挑出10只雄

10、果蝇，放入突变处只雄果蝇，放入突变处女蝇培养瓶中，杂交女蝇培养瓶中，杂交25培养。杂交组合为：培养。杂交组合为：雌，突变型雌，突变型X 雄，野生型雄，野生型现在学习的是第20页，共43页4.2.4 F1代生长情况的观察代生长情况的观察 上述杂交果蝇培养上述杂交果蝇培养8天以后，将亲代果蝇麻醉弃天以后，将亲代果蝇麻醉弃去，观察新长出的子一代果蝇性状。去，观察新长出的子一代果蝇性状。现在学习的是第21页，共43页4.2.5 F1代性状的观察记录及统计代性状的观察记录及统计 现在学习的是第22页，共43页4.2.6 F2代生长情况的观察培养子二代果蝇：8天以后，麻醉子一代果蝇，弃去。新生长的果蝇是子

11、二代果蝇，观察性状子一代果蝇自交：子一代果蝇收集30对果蝇（不必再挑选处女蝇），转移至三个新的培养瓶中，每瓶10对，25继续培养。现在学习的是第23页，共43页 亲本挑选时，由于需要该种性状该种基因型的亲本，亲本挑选时，由于需要该种性状该种基因型的亲本，所以需要处女蝇，当亲本杂交所以需要处女蝇，当亲本杂交F1代出现后，只有红眼雌代出现后，只有红眼雌性和白眼雄性，雌雄果蝇都各只有一种性状，随机挑取性和白眼雄性，雌雄果蝇都各只有一种性状，随机挑取果蝇时，所选的性状也只是那种性状，所以是不是处女果蝇时，所选的性状也只是那种性状，所以是不是处女蝇都不会影响实验结果。蝇都不会影响实验结果。现在学习的是第

12、24页，共43页4.2.7 F2代性状的观察记录及统计代性状的观察记录及统计 记录记录F2代性状代性状现在学习的是第25页，共43页 杂交2伴性遗传的进一步观察江辰峰 现在学习的是第26页，共43页前置实验：挑选出纯合红眼雌果蝇1亲代培养：将野生型的雌雄果蝇麻醉后进行挑选，一只雌果蝇和一只雄果蝇配成一对，挑选出多对，25培养8天。2 挑选纯合雌果蝇：观察每一组果蝇后代的性状，若子一代全为红眼果蝇，则选出其中的雌果蝇可作为纯合红眼雌果蝇使用。PS:该前置实验必须在已知眼色为伴性遗传时方可进行，这与下面证实实验有所冲突切比较复杂。现在学习的是第27页，共43页4.3.1 杂交用饲养瓶的准备杂交用饲

13、养瓶的准备亲代培养：亲代培养：第一天，将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行挑选，其中第一天，将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行挑选，其中在突变型中挑出在突变型中挑出34对，野生型中挑出对，野生型中挑出78对，分别对，分别培养，培养，25培养培养8天。天。现在学习的是第28页，共43页4.3.2亲本处女蝇的挑选亲本处女蝇的挑选 第第8天，待培养瓶中出现蛹且呈黑色时，将两个天，待培养瓶中出现蛹且呈黑色时，将两个品系的亲代果蝇麻醉弃去，突变型品系继续培养，待品系的亲代果蝇麻醉弃去，突变型品系继续培养，待用。用。12小时后，将孵化的野生型成蝇麻醉后分出雌蝇，小时后，将孵化的野生型成蝇麻醉后分出雌蝇，至另一培养瓶

14、，培养处女蝇待用。再至另一培养瓶，培养处女蝇待用。再12小时后，继续小时后，继续挑选雌雄蝇，放入处女蝇培养瓶中，以后每隔挑选雌雄蝇，放入处女蝇培养瓶中，以后每隔12小时小时挑选一次，直至挑出挑选一次，直至挑出10只处女蝇。只处女蝇。现在学习的是第29页，共43页4.3.3 雄性果蝇的挑选雄性果蝇的挑选 麻醉突变型品系，挑出麻醉突变型品系，挑出10只雄果蝇，放入野生处只雄果蝇，放入野生处女蝇培养瓶中，杂交女蝇培养瓶中，杂交25培养。杂交组合为：培养。杂交组合为：雌，野生型雌，野生型X 雄，突变型雄，突变型现在学习的是第30页，共43页4.3.4 F1代生长情况的观察代生长情况的观察 上述杂交果蝇

15、培养上述杂交果蝇培养8天以后，将亲代果蝇麻醉弃天以后，将亲代果蝇麻醉弃去，观察新长出的子一代果蝇性状。去，观察新长出的子一代果蝇性状。现在学习的是第31页，共43页4.3.5 F1代性状的观察记录及统计代性状的观察记录及统计 现在学习的是第32页，共43页4.3.6 F2代生长情况的观察培养子二代果蝇：8天以后，麻醉子一代果蝇，弃去。新生长的果蝇是子二代果蝇，观察性状子一代果蝇自交：子一代果蝇收集30对果蝇（不必再挑选处女蝇），转移至三个新的培养瓶中，每瓶10对，25继续培养。现在学习的是第33页，共43页4.3.7 F2代性状的观察记录及统计代性状的观察记录及统计 记录记录F2代性状代性状现

16、在学习的是第34页，共43页 杂交3连锁与交换的观察 黄华仪 现在学习的是第35页，共43页三点测交的原理现在学习的是第36页，共43页杂交亲本的挑选与转瓶 连锁与交换的观察实验 亲本挑选 由果蝇的性状观察实验结果可知，野生型的果蝇性状，在眼色、翅型和刚毛类型都是显性性状，同时，突变型果蝇的性状，在眼色、翅型和刚毛类型都是隐性性状。于是，选用野生型作为父本，突变型作为母本即可。挑选野生型果蝇与突变型处女蝇，分别放到不同的培养瓶中培养。转瓶 分别麻醉培养瓶中的父本果蝇和母本果蝇，再分别选取8只，放到杂交瓶中。（杂交瓶可以先倒置，等到果蝇苏醒以后，再把培养瓶直立。）把杂交瓶放到2025的培养箱中。

17、现在学习的是第37页，共43页亲本的选择现在学习的是第38页，共43页亲本的选择现在学习的是第39页，共43页实验设计 移除亲本果蝇观察F2代性状挑取F1代杂交 大约在七天后，倒掉亲本果蝇。（此时，亲本杂交完成，培养基上已经得到了受精卵，需要把亲本赶掉防止影响后续实验。）大约在十二天时，F1代果蝇出现。麻醉，挑选区分雄雌果蝇，把F1雄雌果蝇分瓶重新培养，即依据雄雌，把果蝇放在不同培养瓶中。区分好后，立即分别挑选8只F1代雄雌果蝇，放入新的杂交瓶中培养。过七天后，移去F1代。再过五天后，观察F2代。记录性状表现类型及数目。现在学习的是第40页，共43页F2代性状的观察记录及统计 80%70%50%YOUR TITLE HERE YOUR TITLE HERE YOUR TITLE HERE 现在学习的是第41页，共43页组员分工：闫昕果蝇培养及杂交技术理论部分王辰伊伴性遗传实验正交部分江辰锋伴性遗传实验反交部分黄华仪遗传与连锁实验现在学习的是第42页，共43页THANKS现在学习的是第43页，共43页