CL-BIII八通道残留农药测定仪使用说明4678.pptx
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1、CL-BIIICL-BIII八通道残留农药八通道残留农药八通道残留农药八通道残留农药测定仪使用说明测定仪使用说明测定仪使用说明测定仪使用说明上海博纳新技术研究所上海博纳新技术研究所上海博纳新技术研究所上海博纳新技术研究所20062006年年年年4 4月月月月农残常识农残常识农残常识农残常识1 1有机磷和氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂的特点。两类农药的作用机理均为抑制动物体内乙酰胆碱酯酶的活性,破坏神经传导,引起一系列的神经中毒症状,直至死亡。二者的主要区别在于:有机磷类杀虫、杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是不可逆的,而氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是可逆的。农残常识农残常识农残常识农残常识
2、2 2酶抑制率法和酶系酶源:国家标准GB/T 5009.199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测推荐的酶抑制率法能方便、快速、准确、成本低廉检测出农产品中的农药残留,也同时肯定了乙酰胆碱酯酶作为快速检测推荐试剂的活性量和具体要求。近年来,我们通过对动物源和植物源的多种丁酰胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶进行检测实验和比较研究,发现乙酰胆碱酯酶对农药的检测敏感度和综合指标优于丁酰胆碱酯酶;确定了有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酸有较专一性的抑制作用;分析出在抑制率70%以下,大多数农药浓度和乙酰胆碱酯酶抑制率呈较好的线性关系,并能实现对单种农药的定量分析;解决了酶的活性和稳定性控制
3、等技术 农残常识农残常识农残常识农残常识3 3 什么是间接比色法:由于只有当底物与产物之间,在光学性质或其它理化性质有显著差异时,才可能直接用分光光度计法测定,因此对酶活性浓度的监测大多是采用间接监测法。如对胆碱酯酶的测定:底物(硫代乙酰胆碱)及酶水解产物(硫代胆碱和乙酸)并不具有颜色,不能用分光光度计法测定。所以必须设法在原来反应体系中添加一些试剂,这些试剂必须不与酶作用也不影响酶活性,同时又能与酶反应物迅速作用,产生可以被直接测定的物质。这就产生了Ellman的胆碱酯酶测定法即间接连续监测法。目前国内大多厂家生产的快速农药测定仪都采用了 Ellman的胆碱酯酶测定法即间接比色法。该方法通过
4、监测底物(硫代乙酰胆碱),酶水解产物硫代胆碱与添加的二硫代硝基苯甲酸(DTNB)作用立刻生成黄色化合物的反应速度来测定酶活性变化。农残常识农残常识农残常识农残常识4 4 什么是连续监测法:50年代,Warburg首先用分光光度计测定酶的活性。该方法不需停止酶反应就可测定反应物的变化,容易观察到反应的整个过程和干扰情况(通过绘制反应曲线)。因此逐步取代了固定时间法成为目前测酶活性的主要方法。该方法是利用连续对反应过程进行高灵敏度检测,并通过绘制整个酶反应曲线避开延滞期和非线性反应期,只在线性反应期测定最大反应初速度。由于仪器的高精密度,连续监测法能在很短时间,甚至在1分钟反应时间内就能准确测定出
5、活性的抑制率。技技技技 术术术术 指指指指 标标标标CL-BIII八通道残留农药测定仪的技术指标:八通道残留农药测定仪的技术指标:测量波长:410nm通道数:8检测用样品器皿:10mm比色皿光电流漂移:0.5%(3min)暗电流漂移:0.5%(3min)抑制率显示范围:0-100%抑制率测量范围:10-100%农药检测:(用甲胺磷农药标样测试)抑制率示值误差:10%抑制率重复性误差:5%第一部分第一部分 试剂配制试剂配制第二部分第二部分 联机使用联机使用第三部分第三部分 单机使用单机使用第四部分第四部分 相关技巧与常识相关技巧与常识目目目目 录录录录第一部分第一部分第一部分第一部分试剂配制试剂
6、配制试剂配制试剂配制 1 1、试剂的配制、试剂的配制、试剂的配制、试剂的配制提取液提取液:把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中,并加入 510ml蒸馏水溶解。酶试剂酶试剂:用移液枪取3.1ml提取液,加入酶试剂瓶中。显色剂显色剂:用移液枪取20ml提取液,加入显色剂瓶,溶 解后倒入棕色瓶中。底底 物物:用移液枪取3.1ml蒸馏水,加入底物瓶中。2 2、试剂的保存及注意事项、试剂的保存及注意事项、试剂的保存及注意事项、试剂的保存及注意事项返回目录1、本试剂适用的国家标准为:、本试剂适用的国家标准为:GB/T5009.199-2003。2、未配制的试剂,要保存在、未配制的试剂,要保存在0以下的冷冻箱里。
7、以下的冷冻箱里。(保质期可达(保质期可达1年)年)3、配制好的酶和底物试剂,要保存在、配制好的酶和底物试剂,要保存在4的冷藏箱内。的冷藏箱内。(保质期为一周)(保质期为一周)4、配制好的提取液常温下可以长期保存。、配制好的提取液常温下可以长期保存。5、配制好的显色剂需避光保存;常温或冷藏,可以、配制好的显色剂需避光保存;常温或冷藏,可以 保存保存1年。年。第二部分第二部分第二部分第二部分联机使用联机使用联机使用联机使用第一步第一步第一步第一步 仪器连接仪器连接仪器连接仪器连接1 1、连接电源、连接电源将仪器的电源接头和数据信号线接好。如图:2 2、连接电脑、连接电脑把数据信号线(串口线)接入电
8、脑主机背后的COM口(串口)上,然后把数据信号线与仪器联接起来,这样就完成了仪器与电脑的硬件连接。第二步第二步第二步第二步 软件安装软件安装软件安装软件安装安装安装安装安装“农产品质量安全检测软件农产品质量安全检测软件农产品质量安全检测软件农产品质量安全检测软件”把“农产品质量安全检测软件”光盘放入电脑光驱中,等自动读取或在光盘目录下找到并双击“setup”后,按提示点击“下一步”安装。安装完成以后,桌面上会出现“食品质量安全检测平台”的图标。安装完成桌面上出现的图标第三步第三步第三步第三步 仪器设置仪器设置仪器设置仪器设置仪器设置仪器设置仪器设置仪器设置打开仪器电源,按仪器“确认”键2次,然
9、后按1次“设置”键,再按“确定”键,选择“受控”后再按1次“确定”键。出现“现正处于受控工作模式”即可。打开检测软件,检测软件的用户名默认为“管理员”,密码是“111111”。检测软件登陆设置为受控状态调调调调0/1000/100注:以上是一个检测窗口注:以上是一个检测窗口的步骤,其他七个窗口都的步骤,其他七个窗口都是如此。是如此。等待10-15秒按“确定”放入黑块等待10-15秒按“确定”拿出黑块按“”键按“”键按“”键按“”键第四步第四步第四步第四步 空白对照空白对照空白对照空白对照空白对照空白对照空白对照空白对照 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中酶试剂加入试管中用小移液
10、枪取用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中显色剂加入试管中用小移液枪取用小移液枪取0.1ml底物加入试管中底物加入试管中迅速摇匀并倒入比色皿迅速摇匀并倒入比色皿放入比色池放入比色池按按“开始对照分析开始对照分析”键键等待对照结束等待对照结束用大移液枪抽取用大移液枪抽取2.5ml提取液放入试管中提取液放入试管中装入对照装入对照装入对照装入对照 按“装入对照分析”键选择所需对照选择需要装入对照的通道号(在通道号码前)按“读取”键完成装入工作注:对照结束后,对照曲线会自动注:对照结束后,对照曲线会自动保存保存.(标准对照库中已有(标准对照库中已有3030种蔬种蔬菜的对照,在做这菜的对照,在做这303
11、0种蔬菜时,请种蔬菜时,请参照这些对照。)参照这些对照。)装入标准对照库装入标准对照库装入标准对照库装入标准对照库 按“装入对照分析”键选择所需的空白对照和相应的样品修正值选择需要装入对照的通道号(在通道号码前)按“读取”键完成装入工作第五步第五步第五步第五步 样品检测样品检测样品检测样品检测用天平称取1克果蔬剪成2cm见方放入烧杯中,用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中静置15分钟(或震荡1分钟)用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中静置15分钟用小移液枪取0.1ml底物加入试管中迅速摇匀并倒入比色皿放
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