巴比妥及苯骈二氮杂卓类镇静催眠药物的分析.pptx

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1、 巴巴比比妥妥类类和和苯苯骈骈二二氮氮杂杂卓卓类类药药物物是是一一类类临临床床常常用用的的催催眠眠镇镇静静药药。由由于于这这类类药药物物应应用用广广泛泛，容容易易因因不不合合理理使使用用而而引引起起中中毒毒，因因此此，需要对本类药物的原料、制剂进行分析需要对本类药物的原料、制剂进行分析。第1页/共75页 第一节第一节 巴比妥类药物分析巴比妥类药物分析一、巴比妥类药物的结构与性质一、巴比妥类药物的结构与性质巴比妥类药物母核为巴比妥类药物母核为巴比妥酸巴比妥酸5,55,5二取代的巴比妥类药物 1,5,5 1,5,5三取代的巴比妥类药物 C C2 2位硫取代的硫代巴比妥类药物第2页/共75页5,5-

2、5,5-取代的巴比妥类药物取代的巴比妥类药物 5第3页/共75页第4页/共75页第5页/共75页第6页/共75页CCNCNHOOOH3CCH31,5,5-取代的巴比妥类药物 己琐巴比妥（药典未收载）己琐巴比妥（药典未收载）51第7页/共75页硫代巴比妥类药物硫代巴比妥类药物 硫喷妥钠HCCCONONCSNaC2H5CH3CH2CH2CHCH3第8页/共75页 巴比妥类药物的基本结构分为两部分：巴比妥类药物的基本结构分为两部分：一部分为：一部分为：共性共性部分，为巴比妥酸环状结构部分，为巴比妥酸环状结构另一部分：另一部分：个性个性部分，即部分，即R R1 1、R R2 2取代基，取代基，区别各种

3、巴比妥类药物区别各种巴比妥类药物 第9页/共75页巴比妥类药物的物性：巴比妥类药物的物性：性性状状：一一般般为为白白色色结结晶晶或或结结晶晶性性粉粉末末，具具有一定的熔点有一定的熔点 溶溶解解性性：游游离离巴巴比比妥妥类类药药物物微微溶溶或或极极微微溶溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂于水，易溶于乙醇及有机溶剂 相反，钠盐容易溶于水，而不溶于有机溶剂相反，钠盐容易溶于水，而不溶于有机溶剂 与碱液共沸时水解开环与碱液共沸时水解开环第10页/共75页 巴比妥类药物的性质巴比妥类药物的性质1.1.弱酸性弱酸性1 1，3 3二酰亚胺基团二酰亚胺基团第11页/共75页具有弱酸性（具有弱酸性（pKa为）为）,与

4、强碱的与强碱的成盐反应：成盐反应：CO NHCNCOOHR1R2+NaOHCO NHCNCOONaR1R2+H2O加酸酸化后，析加酸酸化后，析出游离的巴比妥出游离的巴比妥类药物，可测定类药物，可测定熔点或进行化学熔点或进行化学反应反应第12页/共75页2.2.水解反应水解反应+2Na2CO3CHCOONaR1R2+2NH3 CO NHCNCOOHR1R2+5NaOH红色石蕊变蓝1，3二酰亚胺基团第13页/共75页3 3、易与重金属离子反应、易与重金属离子反应 硫喷妥钠+绿色铜吡啶试液吡啶合适的pH溶液中第14页/共75页与钴盐的反应：醋酸钴、硝酸钴、氧化钴有机碱：异丙胺第15页/共75页4、与

5、香草醛（Vanillin）的反应 活泼BP（2005）用于鉴别戊巴比妥第16页/共75页5.5.具有紫外特征吸收具有紫外特征吸收 A A、H H2 2SOSO4 4溶液溶液(0.05mol/L)(0.05mol/L)B B、缓冲溶液、缓冲溶液 ，发生一级电，发生一级电离，最大吸收离，最大吸收240nm240nmC C、pH13 NaOHpH13 NaOH溶液，溶液，5,55,5二取代巴比妥类药物有二二取代巴比妥类药物有二级电离，最大吸收级电离，最大吸收255 nm 255 nm，1,5,5三取代三取代巴比妥类巴比妥类药物不发生二级电离，最药物不发生二级电离，最大吸收仍为大吸收仍为240nm24

6、0nm第17页/共75页特例特例：硫喷妥硫喷妥酸性溶液碱性溶液255nm，随碱性增强，消失第18页/共75页二、鉴别试验二、鉴别试验（一）丙二酰脲类反应（一）丙二酰脲类反应 主主要要用用于于苯苯巴巴比比妥妥、异异戊戊巴巴比比妥妥及及其其盐、司可巴比妥钠的鉴别。盐、司可巴比妥钠的鉴别。第19页/共75页1.1.与银盐的反应与银盐的反应CONCNCOCR1R2ONaAg+NaHCO3NaNO3+CONHCNCOCR1R2ONa+AgNO3+Na2CO3第20页/共75页NaNO3+CONCNCOCR1R2OAgAgAgNO3+CONCNCOCR1R2ONaAg第21页/共75页2.2.与铜盐的反应

7、与铜盐的反应第22页/共75页特例特例：含含硫硫巴巴比比妥妥类类药药物物显显绿绿色色，硫硫喷喷妥妥钠钠与与铜铜盐盐反反应显应显绿色绿色。与铜盐的反应可以用于鉴别、区别巴比妥类和与铜盐的反应可以用于鉴别、区别巴比妥类和硫代巴比妥类药物硫代巴比妥类药物铜吡啶试液要现用现配铜吡啶试液要现用现配硫喷妥钠+绿色铜吡啶试液吡啶第23页/共75页（二）熔点的测定二）熔点的测定原理：原理：巴比妥类药物可直接用药典方法测定熔点巴比妥类药物可直接用药典方法测定熔点 钠钠盐盐，利利用用游游离离巴巴比比妥妥类类药药物物与与其其钠钠盐盐溶溶解解性质差异，性质差异，测定析出的游离巴比妥药物的熔点。测定析出的游离巴比妥药物

8、的熔点。巴巴比比妥妥类类的的钠钠盐盐酸酸 游游离离巴巴比比妥妥类类药药物物 过滤过滤 洗涤洗涤 干燥干燥 测熔点测熔点 第24页/共75页第25页/共75页（三）利用特殊取代基或元素的鉴别反应（三）利用特殊取代基或元素的鉴别反应1.1.利用不饱和取代基的鉴别试验利用不饱和取代基的鉴别试验 司可巴比妥钠司可巴比妥钠 与碘、溴试液发生加成反应，使溴试液褪色与碘、溴试液发生加成反应，使溴试液褪色 与高锰酸钾发生氧化反应与高锰酸钾发生氧化反应 把紫色高把紫色高锰酸钾还原为棕色的二氧化锰锰酸钾还原为棕色的二氧化锰 丙烯基或溴液第26页/共75页2.2.利利用用芳芳环环取取代代基基的的鉴鉴别别试试验验苯苯

9、巴巴比比妥妥及及其其钠钠盐盐 硝化反应硝化反应第27页/共75页与亚硝酸钠与亚硝酸钠-硫酸的反应硫酸的反应 含含有有苯苯环环取取代代基基，可可与与亚亚硝硝酸酸钠钠-硫硫酸酸反反应，生成应，生成橙黄橙黄色产物，并随即转成色产物，并随即转成橙红色橙红色。特特点点：用用于于区区分分苯苯巴巴比比妥妥与与其其它它不不含含芳芳环环取代的巴比妥类药物分离取代的巴比妥类药物分离第28页/共75页与甲醛与甲醛-硫酸的反应硫酸的反应 苯苯巴巴比比妥妥与与甲甲醛醛-硫硫酸酸反反应应，生生成成玫玫瑰瑰红红色色环。反应产物结构不明。环。反应产物结构不明。方方法法为为:取取本本品品约约50mg50mg，置置试试管管中中，

10、加加甲甲醛醛试试液液l l m1m1，加加热热煮煮沸沸，冷冷却却，沿沿管管壁壁缓缓缓缓加加硫硫酸酸，使使成成两两液液层层，置置水水浴浴中中加加热热，接接界界面显玫瑰红色面显玫瑰红色。特特点点：用用于于区区分分苯苯巴巴比比妥妥与与其其它它不不含含芳芳环环取取代代的巴比妥类药物分离的巴比妥类药物分离第29页/共75页3.3.硫元素的鉴别试验硫元素的鉴别试验 硫喷妥钠硫喷妥钠例：例：硫硫喷妥钠喷妥钠特点：特点：用于区别硫代巴比妥与其它的巴比妥类药物用于区别硫代巴比妥与其它的巴比妥类药物第30页/共75页（四）红外分光光度法四）红外分光光度法 采用标准图谱对照法采用标准图谱对照法第31页/共75页第3

11、2页/共75页三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查（一）苯巴比妥的特殊杂质检查（一）苯巴比妥的特殊杂质检查第33页/共75页1.1.酸度酸度 目目的的：中中间间体体的的乙乙基基化化反反应应不不完完全全时时，会会与与尿尿素素缩缩合合产产生生苯苯基基丙丙二二酰酰脲脲，酸性较苯巴比妥强，能使甲基橙指示剂显红色，酸性较苯巴比妥强，能使甲基橙指示剂显红色，检检查查方方法法：在在一一定定量量苯苯巴巴比比妥妥供供试试品品水水溶溶液液中中，加加甲甲基基橙橙指指示示剂剂，不不显显红红色色即酸性物质合格。即酸性物质合格。第34页/共75页2.2.乙醇溶液的澄清度乙醇溶液的澄清度目的：控制杂质目的：控制杂质苯巴比妥酸苯

12、巴比妥酸 原理：利用药物与杂质溶解性质的差异进行检查原理：利用药物与杂质溶解性质的差异进行检查（杂质（杂质苯巴比妥酸苯巴比妥酸在乙醇溶液中溶解度小）在乙醇溶液中溶解度小）方法方法:取本品，加乙醇取本品，加乙醇5m15m1，加热回流，加热回流3min3min，溶液应澄清，则为合格。，溶液应澄清，则为合格。第35页/共75页3.3.中性或碱性物质中性或碱性物质目目的的：检检查查中中间间体体的的副副产产物物2-2-苯苯基基丁丁二二酰酰胺、胺、2-2-苯基丁二酰脲或分解产物。苯基丁二酰脲或分解产物。原原理理；利利用用杂杂质质和和主主成成分分在在氢氢氧氧化化钠钠试试液液中中的的溶溶解解性性质质差差异异，

13、用用提提取取重重量量法法测测定定杂杂质质含含量量在氢氧化钠试液：杂质不溶，而主成分可溶在氢氧化钠试液：杂质不溶，而主成分可溶在乙醚中：杂质可溶在乙醚中：杂质可溶 用醚提取杂质后称重，测定其限量。用醚提取杂质后称重，测定其限量。第36页/共75页 方方法法:取取本本品品1.0 1.0 g g，置置分分液液漏漏斗斗中中，加加氢氢氧氧 化化 钠钠 试试 液液 lOmllOml溶溶 解解 后后，加加 水水 5ml5ml与与 乙乙 醚醚25ml25ml，振振摇摇lminlmin，分分取取醚醚层层，用用水水振振摇摇洗洗涤涤3 3次次，每每次次5m15m1，取取醚醚液液经经干干燥燥滤滤纸纸滤滤过过，滤滤液液

14、置置1O51O5恒恒重重的的蒸蒸发发皿皿中中，蒸蒸干干，在在105105干燥干燥1 1小时，遗留残渣不得超过小时，遗留残渣不得超过3 3。第37页/共75页（二）司可巴比妥钠的特殊杂质检查（二）司可巴比妥钠的特殊杂质检查 第38页/共75页 1.1.溶液的澄清度溶液的澄清度 司司可可巴巴比比妥妥钠钠在在水水中中极极易易溶溶解解，水水溶溶液液应应澄澄清清，否否则则表表明明含含有有水水不不溶性杂质。溶性杂质。特点：特点：新沸过的冷水溶解样品，目的是为了除去水中二氧化碳。新沸过的冷水溶解样品，目的是为了除去水中二氧化碳。和司可巴比妥钠作用，司可巴比妥钠作用，析出司可巴比妥析出司可巴比妥第39页/共7

15、5页2.2.中性或碱性物质中性或碱性物质 原原理理：利利用用杂杂质质和和主主成成分分在在氢氢氧氧化化钠钠试试液液中中的的溶溶解解性性质质差差异异（杂杂质质不不溶溶，而而主主成成分分可可溶溶于于氢氢氧氧化化钠钠试试液液），用用乙乙醚醚提提取取杂杂质质后称重，测定其限量。后称重，测定其限量。要要求求：1g 1g 供供试试品品中中乙乙醚醚提提取取物物干干燥燥后后遗遗留残渣不超过留残渣不超过3 3。第40页/共75页四、含量的测定方法四、含量的测定方法 （一）银量法（一）银量法原原理理：此此类类药药物物在在适适当当的的碱碱性性溶溶液液中中，可可与与重金属离子反应，定量地形成盐。重金属离子反应，定量地形

16、成盐。终终点点指指示示：电电位位法法指指示示（AgAg电电极极为为指指示示电电极极，饱和甘汞电极为参比电极）自身指示饱和甘汞电极为参比电极）自身指示 反应摩尔比反应摩尔比：1111溶剂系统溶剂系统：甲醇：甲醇+3%+3%无水碳酸钠（无水碳酸钠（8585年版改进）年版改进）第41页/共75页适用范围适用范围：20052005年版药典采用银量法测定年版药典采用银量法测定苯巴苯巴比妥及其钠盐、异戊巴比妥及其钠盐以及它们的比妥及其钠盐、异戊巴比妥及其钠盐以及它们的制剂制剂。特点特点：操作简便，专属性强，此类药物的降解：操作简便，专属性强，此类药物的降解产物和其他可能存在的杂质不和硝酸银反应产物和其他可

17、能存在的杂质不和硝酸银反应缺点缺点：受温度影响较大，滴定终点不易观察：受温度影响较大，滴定终点不易观察第42页/共75页方法的改进方法的改进：中中国国药药典典(1963,1977(1963,1977年年版版)采采用用在在碳碳酸酸钠钠溶溶液液中中硝硝酸酸银银直直接接滴滴定定法法，以以所所生生成成的的沉沉淀淀3030秒内不消失为终点。秒内不消失为终点。中中国国药药典典（19851985，19951995，20002000年年版版）改改进进了了这这种种直直接接滴滴定定目目视视判判断断的的方方法法，沿沿用用甲甲醇醇及及3%3%无无水水碳碳酸酸钠钠作作为为溶溶剂剂，并并采采用用银银-玻玻璃璃电极系统电位

18、法指示终点电极系统电位法指示终点第43页/共75页注意事项注意事项：测定时无水碳酸钠溶液要测定时无水碳酸钠溶液要临用新配临用新配。银银电电极极在在临临用用前前要要用用硝硝酸酸浸浸泡泡1212分分钟钟，再再用水淋洗干净后使用。用水淋洗干净后使用。AgNO3AgNO3滴定液应新鲜配制滴定液应新鲜配制终点指示：电位法指示（终点指示：电位法指示（AgAg电极为指示电极，电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极自身指示）饱和甘汞电极为参比电极自身指示）第44页/共75页（二）溴量法（二）溴量法 原原理理：对对5 5位位取取代代基基中中含含有有双双键键的的巴巴比比妥妥类类药药物物，利利用用结结构构中中所所含

19、含的的双双键键能能和和溴溴定定量量地地发发生生加加成成反反应应的的特特点点，采采用用溴溴量量法法测定测定 方法方法 司可巴比妥钠原料及其胶囊的测定司可巴比妥钠原料及其胶囊的测定 第45页/共75页I22Na2S2O32NaINa2S4O6+Br2（定量过量）CONHCNCOCHCH2CH2CH3(CH2)2CHCH3ONaCONHCNCOCHCH2CH2CH3(CH2)2CHCH3ONaBrBrBr22KI2KBrI2第46页/共75页 注意事项：注意事项：配制硫代硫酸钠滴定液时，要用新沸冷水配制配制硫代硫酸钠滴定液时，要用新沸冷水配制硫代硫酸钠滴定液要放置硫代硫酸钠滴定液要放置1 1个月后，

20、过滤标定后用。否则，要现用现标定个月后，过滤标定后用。否则，要现用现标定用基准重铬酸钾标定硫代硫酸钠滴定液用基准重铬酸钾标定硫代硫酸钠滴定液溴滴定液（溴滴定液（0.1 mol/L0.1 mol/L）的配制：）的配制：取溴酸钾取溴酸钾3.0 g3.0 g与溴化钾与溴化钾15 g15 g，加水适量使溶解成，加水适量使溶解成1000 ml1000 ml，摇匀，摇匀KBrO35KBr6HCl3Br26KCl3H2O 第47页/共75页操作中要防止溴和碘的逸失操作中要防止溴和碘的逸失空白试验可减少溴和碘逸失带来的误差空白试验可减少溴和碘逸失带来的误差含量测定方法为：容量法中的回滴定法含量测定方法为：容量

21、法中的回滴定法第48页/共75页（三）紫外分光光度法（三）紫外分光光度法 原理：原理：第49页/共75页1 1、直接测定的紫外分光光度法、直接测定的紫外分光光度法 将将供供试试品品溶溶解解后后，根根据据溶溶液液的的pHpH，在在相相应应的的最最大大吸吸收收波波长长处处，直接测定对照品和供试品的吸收值，计算含量。直接测定对照品和供试品的吸收值，计算含量。第50页/共75页 吸收系数法吸收系数法第51页/共75页对照法对照法 第52页/共75页例：注射用例：注射用硫喷妥钠硫喷妥钠的含量测定（的含量测定（20052005年版药典收录）年版药典收录）具具体体方方法法如如下下:取取装装量量差差异异项项下

22、下的的内内容容物物，混混合合均均匀匀，精精密密称称取取适适量量(约约相相当当于于硫硫喷喷妥妥钠钠0.25 0.25 g g)，置置5OOml5OOml量量瓶瓶中中，加加水水稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀，量量取取此此溶溶液液用用0.4%0.4%氢氢氧氧化化钠钠液液定定量量稀稀释释制制成成每每lmllml中中约约含含5g5g的的溶溶液液;另另取取硫硫喷喷妥妥对对照照品品，精精密密称称定定，加加0.4%0.4%氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液溶溶解解并并定定量量稀稀释释制制成成中中约约含含5g5g的的溶溶液液。用用lcmlcm吸吸收收池池，于于304 304 nmnm波波长长处处分分别别测测定定吸吸收收度

23、度，以以0.4%0.4%氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液作作空空白白，根根据据每每支支的的平平均均装装量量计计算算，即得。即得。第53页/共75页每每lmglmg的硫喷妥相当于的的硫喷妥相当于的C CllllH H1717N N2 2NaSNaS测定结果用下式计算测定结果用下式计算:式中式中:A:Au,u,A AS S分别为供试品和对照品的吸收值分别为供试品和对照品的吸收值 C CS S为硫喷妥对照品的浓度为硫喷妥对照品的浓度,mg/ml,mg/ml D D为稀释体积（为稀释体积（mlml），），500100=5000500100=5000 1.091 1.091为硫喷妥钠和硫喷妥的分子量比值为硫喷妥

24、钠和硫喷妥的分子量比值第54页/共75页注射用硫喷妥钠的含量为注射用硫喷妥钠的含量为第55页/共75页2 2、提取分离后的紫外分光光度法、提取分离后的紫外分光光度法 当供试品中存在干扰物质时，可用提取当供试品中存在干扰物质时，可用提取分离方法排除干扰后，再用紫外分光光度法分离方法排除干扰后，再用紫外分光光度法测定测定 提取原理：提取原理：巴比妥类药物具有弱酸性，巴比妥类药物具有弱酸性，在三氯甲烷等有机溶剂中易溶，而钠盐在水在三氯甲烷等有机溶剂中易溶，而钠盐在水中易溶。将供试品酸化后得三氯甲烷提取液。中易溶。将供试品酸化后得三氯甲烷提取液。再用碱液从三氯甲烷提取液提取巴比妥再用碱液从三氯甲烷提取

25、液提取巴比妥类药物。调节碱提取液的类药物。调节碱提取液的pHpH值，选取相应的值，选取相应的测定波长。测定波长。第56页/共75页（四）高效液相色谱法（四）高效液相色谱法 用于制剂和体液中巴比妥类药物含量测定用于制剂和体液中巴比妥类药物含量测定 例：在体内药物分析中的应用例：在体内药物分析中的应用,苯巴比妥、苯巴比妥、苯妥英及卡马西平的血药浓度测定苯妥英及卡马西平的血药浓度测定（五）电泳法（五）电泳法 例：尿样中巴比妥和苯巴比妥的测定例：尿样中巴比妥和苯巴比妥的测定（六）气相色谱质谱法（六）气相色谱质谱法 第57页/共75页 第二节第二节 苯骈二氮卓类药物苯骈二氮卓类药物一、典型药物的结构特征

26、和主要化学性质一、典型药物的结构特征和主要化学性质（一）结构特征（一）结构特征 含氮杂原子、六元和七元环双环并合而成，含氮杂原子、六元和七元环双环并合而成，其中其中1,4-1,4-苯并二氮杂卓类药物是目前临床应用苯并二氮杂卓类药物是目前临床应用最广泛的抗焦虑、抗惊厥药。最广泛的抗焦虑、抗惊厥药。如：地西泮、硝基地西泮、氯氮卓、三唑如：地西泮、硝基地西泮、氯氮卓、三唑仑、氯硝西泮和奥沙西泮等，其中，除了氯氮仑、氯硝西泮和奥沙西泮等，其中，除了氯氮卓外，均为地西泮的衍生物。卓外，均为地西泮的衍生物。第58页/共75页 地西泮地西泮 阿普唑仑阿普唑仑 奥沙西泮奥沙西泮 氯氮卓氯氮卓 第59页/共75

27、页(二二)主要理化性质主要理化性质1 1、具有弱碱性、具有弱碱性 和某些有机碱沉淀剂反应产生沉淀和某些有机碱沉淀剂反应产生沉淀 用非水溶液滴定法测定含量用非水溶液滴定法测定含量2 2、具有紫外吸收：、具有紫外吸收：药药品品溶溶解解于于硫硫酸酸后后在在365nm365nm紫紫外外光光下下可可显显不同颜色的荧光。不同颜色的荧光。第60页/共75页3 3、C C7 7位上有氯原子取代位上有氯原子取代4 4、强酸性中可以水解、强酸性中可以水解 在在强强酸酸性性溶溶液液中中可可以以水水解解，形形成成相相应应的的二二苯苯甲甲酮酮衍衍生生物物，水水解解产产物物呈呈现现的某些特性也可以供鉴别或含量的某些特性也

28、可以供鉴别或含量测定。测定。第61页/共75页二、鉴别试验 （一）化学鉴别1、沉淀反应 具有碱性具有碱性氯硝西泮稀盐酸溶液氯硝西泮稀盐酸溶液 盐酸氟西泮水溶液盐酸氟西泮水溶液盐酸氟西泮水溶液盐酸氟西泮水溶液 碘化铋钾试液碘化铋钾试液橙红色沉淀放置后颜色变深不变第62页/共75页2 2、硫酸、硫酸-荧光反应荧光反应 苯苯并并二二氮氮杂杂卓卓类类药药物物溶溶于于硫硫酸酸后后，在在紫紫外外光光(365nm)(365nm)下，呈现不同颜色的荧光，可供鉴别。下，呈现不同颜色的荧光，可供鉴别。药物药物药物药物硫酸硫酸硫酸硫酸稀硫酸稀硫酸稀硫酸稀硫酸地西泮地西泮地西泮地西泮黄绿色黄绿色黄绿色黄绿色黄色黄色黄

29、色黄色氯氮卓氯氮卓氯氮卓氯氮卓黄色黄色黄色黄色紫色紫色紫色紫色艾司唑仑艾司唑仑艾司唑仑艾司唑仑亮绿色亮绿色亮绿色亮绿色天蓝色天蓝色天蓝色天蓝色硝西泮硝西泮硝西泮硝西泮淡蓝色淡蓝色淡蓝色淡蓝色蓝绿色蓝绿色蓝绿色蓝绿色第63页/共75页（二）特征基团反应（二）特征基团反应1 1、氯化物的鉴别反应、氯化物的鉴别反应 本本类类药药物物大大多多为为有有机机氯氯化化合合物物，氧氧瓶瓶燃燃烧烧法法破破坏坏，生生成成HClHCl，以以5%5%氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液吸吸收收，硝酸酸化，显氯化物反应。硝酸酸化，显氯化物反应。第64页/共75页2、水解后的重氮化-偶合反应地西泮，地西泮，C C1 1位氮原子上位氮

30、原子上是甲基取代，是甲基取代，水解产物没水解产物没有芳伯氨基有芳伯氨基第65页/共75页（三）紫外分光光度法（三）紫外分光光度法中国药典中国药典(2010(2010年版年版)规定：规定：氯氯氮氮卓卓加加盐盐酸酸溶溶液液(91000)(91000)制制成成 7g 7g/m1/m1，在在245 245 nmnm和和308308 nmnm的的波波长长处处应应有有最最大大吸收。吸收。地地西西泮泮加加0.5%0.5%硫硫酸酸的的甲甲醇醇溶溶液液，稀稀释释制制成成5g 5g/ml/ml，在在242242、284284和和366 366 nmnm的的波波长长处处应应有最大吸收。有最大吸收。242 242 n

31、mnm，吸收度约为，吸收度约为 284284 nm nm，吸收度约为，吸收度约为（四）薄层色谱法（四）薄层色谱法第66页/共75页三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 1 1、地西泮有关物质的检查、地西泮有关物质的检查 TLCTLC、高低浓度对比法、高低浓度对比法 原料药和片剂原料药和片剂第67页/共75页2 2、氯氮卓中有关杂质检查、氯氮卓中有关杂质检查 SP SP、BP BP 用薄层色谱法来检查控制有关杂质用薄层色谱法来检查控制有关杂质 中国药典中国药典20102010版以版以“HPLC”HPLC”及及“溶液澄清度溶液澄清度”检查控制有关杂质检查控制有关杂质 第68页/共75页四、含量测定

32、四、含量测定（一）非水溶液滴定法（一）非水溶液滴定法1、非水碱量法、非水碱量法 本类药物多为弱碱性，在水溶液中滴定没本类药物多为弱碱性，在水溶液中滴定没有明显的突跃，终点不易观察，误差大。有明显的突跃，终点不易观察，误差大。在非水酸性溶剂中，药物的相对碱强度明在非水酸性溶剂中，药物的相对碱强度明显增强，使滴定能顺利完成。显增强，使滴定能顺利完成。采用冰醋酸或冰醋酸和醋酐的混合液做溶采用冰醋酸或冰醋酸和醋酐的混合液做溶剂，高氯酸为滴定液剂，高氯酸为滴定液第69页/共75页2 2、非水酸量法、非水酸量法 仅奥沙西泮、劳拉西泮采用仅奥沙西泮、劳拉西泮采用 在碱性介质中去质子化，具有一定酸性在碱性介质

33、中去质子化，具有一定酸性 方法：方法：二甲基甲酰胺为溶剂，氢氧化四丁二甲基甲酰胺为溶剂，氢氧化四丁基铵为滴定液，电位法指示终点基铵为滴定液，电位法指示终点第70页/共75页（二）紫外分光光度法（二）紫外分光光度法 药药物物的的制制剂剂或或片片剂剂的的测测定定用用分分光光光光度度法法。可可以以用用百百分分吸吸收收系系数数法法或或对对照照品法品法。例：奥沙西泮原料及片剂例：奥沙西泮原料及片剂 地西泮片、氯氮卓片地西泮片、氯氮卓片 等等第71页/共75页直接分光光度法直接分光光度法直接分光光度法直接分光光度法 对照品溶液同时测定或对照品溶液同时测定或对照品溶液同时测定或对照品溶液同时测定或 百分吸收

34、系数（百分吸收系数（百分吸收系数（百分吸收系数（）例：例：例：例：奥沙西泮含量测定奥沙西泮含量测定奥沙西泮含量测定奥沙西泮含量测定 取本品约取本品约取本品约取本品约15mg15mg15mg15mg，精密，精密，精密，精密称定，置称定，置称定，置称定，置200ml 200ml 200ml 200ml 量瓶中，加乙醇量瓶中，加乙醇量瓶中，加乙醇量瓶中，加乙醇150ml150ml150ml150ml，于温水，于温水，于温水，于温水浴中加热，并时时振摇，使奥沙西泮溶解，放冷，浴中加热，并时时振摇，使奥沙西泮溶解，放冷，浴中加热，并时时振摇，使奥沙西泮溶解，放冷，浴中加热，并时时振摇，使奥沙西泮溶解，放

35、冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml 5ml 5ml 5ml，置，置，置，置100ml100ml100ml100ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，照分量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，照分量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，照分量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录光光度法（附录光光度法（附录光光度法（附录 A A A A），在），在），在），在229nm 229nm 229nm 229nm 的波长处测定的波长处测定的波长处测定的波长处测定吸收度；另精密称取奥沙西泮对照品约吸收度；另精

36、密称取奥沙西泮对照品约吸收度；另精密称取奥沙西泮对照品约吸收度；另精密称取奥沙西泮对照品约15mg15mg15mg15mg，同，同，同，同法操作并测定；计算，即得。法操作并测定；计算，即得。法操作并测定；计算，即得。法操作并测定；计算，即得。第72页/共75页萃取后分光光度法萃取后分光光度法 碱化，有机溶剂萃取游离型碱，使其与制碱化，有机溶剂萃取游离型碱，使其与制剂辅料分离，再用分光光度法测定剂辅料分离，再用分光光度法测定 萃取双波长分光光度法萃取双波长分光光度法 碱化，有机溶剂萃取，在碱化，有机溶剂萃取，在254nm254nm、277nm277nm波波长处测定吸收，用吸收度之差计算含量，以长处测定吸收，用吸收度之差计算含量，以消除抗氧剂的干扰。消除抗氧剂的干扰。第73页/共75页（三）高效液相色谱法（三）高效液相色谱法 对对于于高高效效液液相相色色谱谱，由由于于它它的的特特点点，在在含含量量测测定定中中应应用用越越来来越越多多，其其中中80%80%以以上上是是采采用用反相色谱法反相色谱法。第74页/共75页感谢您的观看！第75页/共75页