血球计数板使用及相关计算38612.ppt

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1、血球计数板血球计数板使用及相关使用及相关(xinggun)计算计算成成中学(zhngxu)张旭辉第一页，共十九页。第二页，共十九页。第三页，共十九页。血球计数板的使用方法步骤血球计数板的使用方法步骤1镜检。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。在加样前，先对计数板的计数室进行(jnxng)镜检。假镜检。假设有污物，那么需清洗，吹干后才能进行设有污物，那么需清洗，吹干后才能进行(jnxng)计数；计数；2加样。将清洁枯燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，加样。将清洁枯燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自用吸管吸取稀释后的酵母菌悬

2、液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡，多余培养液可行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡，多余培养液可用滤纸吸去；用滤纸吸去；3计数。稍待片刻约计数。稍待片刻约5min，待酵母菌细胞全部沉降到计数，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。4清洁。血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，清洁。血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干

3、，或用洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇、无水乙醇、丙的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其枯燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌酮等有机溶剂脱水使其枯燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。假设不干净，那么必须重复清洗直到干净为止。体或其他沉淀物。假设不干净，那么必须重复清洗直到干净为止。第四页，共十九页。计数培养液中酵母菌种群数量的要点：计数培养液中酵母菌种群数量的要点：1每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。天。2从试管中吸出培养液进行计数之

4、前，要将试管轻轻从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，求得的培养液中的震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，求得的培养液中的酵母菌数量误差小。酵母菌数量误差小。3如果一个小方格内酵母菌过多，难以如果一个小方格内酵母菌过多，难以(nny)数清，数清，应当对培养液进行稀释。具体方法是：摇匀试管，取应当对培养液进行稀释。具体方法是：摇匀试管，取1mL酵母菌培养液，参加成倍的无菌水稀释，稀释酵母菌培养液，参加成倍的无菌水稀释，稀释n倍倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以稀释倍数。以后，再用血球计数板计数，所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有每小方格内含有45个酵母细

5、胞为宜。个酵母细胞为宜。第五页，共十九页。4活酵母活酵母(jiom)有出芽生殖现象，假设芽体到达母细胞大小的一有出芽生殖现象，假设芽体到达母细胞大小的一半时，即可作为两个菌体计数，假设芽体小于母细胞一半时为半时，即可作为两个菌体计数，假设芽体小于母细胞一半时为1个酵个酵母母(jiom)细胞。细胞。5对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，一般可采取一般可采取“数上线不数下线，数左线不数右线的原那么处理，另数上线不数下线，数左线不数右线的原那么处理，另两边不计数。两边不计数。6计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来

6、计算，对每个计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算，对每个样品可计数三次，再取其平均值。样品可计数三次，再取其平均值。第六页，共十九页。例例1、有关、有关“探究培养液中酵母菌数量动态变化的实验，正确探究培养液中酵母菌数量动态变化的实验，正确的表达是的表达是A改变培养液的改变培养液的pH值不影响值不影响K值环境容纳量大小值环境容纳量大小B用样方法调查玻璃容器中酵母菌数量的变化用样方法调查玻璃容器中酵母菌数量的变化C取适量培养液滴于普通取适量培养液滴于普通(ptng)载玻片后对酵母菌准确计数载玻片后对酵母菌准确计数D营养条件并非影响酵母菌种群数量变化的唯一因素营养条件并非影响酵母菌种群数

7、量变化的唯一因素参考答案：参考答案：D第七页，共十九页。例例2、为探究培养液中酵母菌种群、为探究培养液中酵母菌种群(zhnqn)数量的动态变化，某数量的动态变化，某同学进行了如下操作。其中操作正确的有同学进行了如下操作。其中操作正确的有(填以下操作的序号填以下操作的序号)。将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖溶液的锥形瓶中，在适宜将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖溶液的锥形瓶中，在适宜条件下培养条件下培养静置一段时间后，用吸管从锥形瓶中吸取培养液静置一段时间后，用吸管从锥形瓶中吸取培养液在血球计数板中央滴一滴培养液，盖上盖玻片在血球计数板中央滴一滴培养液，盖上盖玻片用滤纸吸除血球计数板边缘多余培

8、养液用滤纸吸除血球计数板边缘多余培养液将计数板放在载物台中央，待酵母菌沉降到计数室底部，在显微将计数板放在载物台中央，待酵母菌沉降到计数室底部，在显微镜下观察、计数镜下观察、计数参考答案：参考答案：第八页，共十九页。例例3、2022江苏高考江苏高考314在探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化整个实验过程在探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中取培养原液计数的做法是错误的，正中，直接从静置的培养瓶中取培养原液计数的做法是错误的，正确的方法是确的方法是和和。5实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错误的

9、，正确的方法是错误的，正确的方法是。参考答案参考答案4摇匀培养液后再取样摇匀培养液后再取样(qyng)样液稀释后再样液稀释后再计数计数5浸泡和冲洗浸泡和冲洗第九页，共十九页。推导：推导：1mm1mm方格的计数方格的计数1mm1mm表示计数室的边长，即一个(y)大方格的边长。由于计数室厚度为0.1mm，所以计数室的总体积为0.1mm3。11625型的计数公式(gngsh)：酵母细胞个数酵母细胞个数1mL=100个小方格细胞总数个小方格细胞总数/10040010000稀稀释倍数释倍数22516型的计数(jsh)公式：酵母细胞个数酵母细胞个数1mL80个小方格细胞总数个小方格细胞总数/8040010

10、000稀释倍数稀释倍数假设：计数室内酵母菌为假设：计数室内酵母菌为a个，稀释倍数为个，稀释倍数为b，那么，那么10mL培养液中酵培养液中酵母菌总数为：母菌总数为：a105b第十页，共十九页。例例4、通常用血球计数、通常用血球计数(jsh)板对培养液中酵母菌进行计数板对培养液中酵母菌进行计数(jsh)，假，假设计数设计数(jsh)室为室为1mm1mm0.1mm方格，由方格，由400个小方格组成，如个小方格组成，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数果一个小方格内酵母菌过多，难以计数(jsh)，应先，应先后再计数。后再计数。假设屡次重复计数后，算得每个小方格中平均有假设屡次重复计数后，算得每个小方格

11、中平均有5个酵母菌，那么个酵母菌，那么10mL该培养液中酵母菌总数有该培养液中酵母菌总数有个。个。参考答案：稀释；参考答案：稀释；2108540010000102108。第十一页，共十九页。例例5、检测员将检测员将1mL水样稀释水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用渗入计数室，并用(bnyn)滤纸吸去多余液体。每个计数室由滤纸吸去多余液体。每个计数室由2516400个小格组成，容纳液体的总体积为个小格组成，容纳液体的总

12、体积为01mm3。现观察到图中该计数室所示现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格个中格80个小格内共有蓝个小格内共有蓝藻藻n个，那么上述水样中约有蓝藻个，那么上述水样中约有蓝藻个个mL。参考答案：参考答案：5n105第十二页，共十九页。例例6、在用血球计数板在用血球计数板2mm2mm方格对某一稀释方格对某一稀释50倍样品倍样品进行进行(jnxng)计数时，发现在一个计数室内盖玻片下的培养液计数时，发现在一个计数室内盖玻片下的培养液厚度为厚度为0.1mm酵母菌平均数为酵母菌平均数为16个，据此估算个，据此估算10mL培养液中培养液中有酵母菌有酵母菌个。个。参考答案：参考答案：2107

13、第十三页，共十九页。总结：总结：2mm2mm方格的计数方格的计数(jsh)2mm2mm表示计数室的边长，即一个大方格的边长。由于计数室厚度为0.1mm，所以计数区的总体积为0.4mm3。计数室通常也有两种规格：一种是1625型，另一种是2516型。假设：计数室内酵母菌为假设：计数室内酵母菌为a个，稀释倍数个，稀释倍数(bish)为为b，那么，那么10mL培养培养液中酵母菌总数为：液中酵母菌总数为：a/4105b11625型的计数公式为：酵母酵母(jiom)细胞个数细胞个数1mL=100个小方格细胞总数个小方格细胞总数/10010010000稀释倍数稀释倍数22516型的计数公式为：酵母细胞个数

14、酵母细胞个数1mL80个小方格细胞总数个小方格细胞总数/8010010000稀释倍数稀释倍数第十四页，共十九页。例例7、跳虫、甲螨和线虫是土壤中的主要动物类群，对动植物的分解起重要作、跳虫、甲螨和线虫是土壤中的主要动物类群，对动植物的分解起重要作用。用。请答复：请答复：1由于由于(yuy)跳虫和甲螨活动能力跳虫和甲螨活动能力，身体，身体，不适合用手直接捕捉，不适合用手直接捕捉，常常采用吸虫器等进行采集。采用吸虫器等进行采集。(2)现要采集大量的跳虫用于实验室培养，最好选择以下图中的吸虫器现要采集大量的跳虫用于实验室培养，最好选择以下图中的吸虫器，理，理由是由是。假设要采集大量的甲螨作为标本保存

15、，最好选择吸虫器。假设要采集大量的甲螨作为标本保存，最好选择吸虫器，理由，理由是是。3现在一培养罐内同时培养跳虫、甲螨和线虫三个种群，假设他们均仅以现在一培养罐内同时培养跳虫、甲螨和线虫三个种群，假设他们均仅以罐内已有的酵母菌为食，那么跳虫与甲螨之间的关系是罐内已有的酵母菌为食，那么跳虫与甲螨之间的关系是，线虫与酵母菌之，线虫与酵母菌之间的关系是间的关系是。假设跳虫种群所含能量增长。假设跳虫种群所含能量增长nKJ，那么跳虫消耗的酵母菌所，那么跳虫消耗的酵母菌所储存的能量至少为储存的能量至少为KJ。第十五页，共十九页。参考答案：参考答案：1较强较强微小微小2B该吸虫器中的湿棉花模拟了土壤该吸虫器

16、中的湿棉花模拟了土壤(trng)湿润环境，湿润环境，利于跳虫存活利于跳虫存活D该吸虫器中的酒精可将收集的甲螨及时固定，防止腐烂该吸虫器中的酒精可将收集的甲螨及时固定，防止腐烂3竞争竞争捕食捕食5n第十六页，共十九页。第十八页，共十九页。内容(nirng)总结血球计数板。假设有污物，那么需清洗，吹干后才能进行计数。血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行(zxng)晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其枯燥。1每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。1由于跳虫和甲螨活动能力，身体，不适合用手直接捕捉，常采用吸虫器等进行采集第十九页，共十九页。