项肿瘤标志物化学发光检测课件.ppt
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1、项肿瘤标志物化学发光检测第1页,此课件共35页哦各种类型肿瘤发生率各种类型肿瘤发生率 (不考虑性别不考虑性别)100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0271318751252124597073843475467肺肺乳腺乳腺结结直直肠肠胃胃前列腺前列腺卵巢卵巢胰腺胰腺膀胱膀胱宫颈宫颈发生率发生率5年生存率年生存率数据来自数据来自the American Cancer Society第2页,此课件共35页哦肿瘤诊断方法肿瘤诊断方法1 1、临床、临床病史、体症病史、体症2 2、辅助、辅助物理检查:物理检查:X X光、光、CTCT、核磁共振、核磁共振、B B超、超、红外扫描红外
2、扫描 病理病理 术前:穿刺、刮片、拉网术前:穿刺、刮片、拉网 术后:组织切片术后:组织切片 免疫学检查:免疫学检查:肿瘤标志物肿瘤标志物和代谢物测定和代谢物测定 分子生物学检查:分子生物学检查:核酸分析核酸分析 第3页,此课件共35页哦在肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞合成、释放、或在肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞合成、释放、或者是宿主对肿瘤反应产生的一类生化物质。者是宿主对肿瘤反应产生的一类生化物质。在血液、体液及组织中肿瘤标志物的定量或定性检测可以在血液、体液及组织中肿瘤标志物的定量或定性检测可以作为肿瘤筛查、鉴别诊断、治疗后病情监测及预后判断的标作为肿瘤筛查、鉴别诊断、治疗后病情监测及
3、预后判断的标志与依据。志与依据。这些物质必须在正常人中不存在或者是在癌症患者中出现的这些物质必须在正常人中不存在或者是在癌症患者中出现的水平显著高于正常人。水平显著高于正常人。肿瘤标志物肿瘤标志物 【tumor markers TM】第4页,此课件共35页哦肿瘤标志物的分类(化学特性)肿瘤标志物的分类(化学特性)癌胚抗原类标志物癌胚抗原类标志物 糖类抗原标记物糖类抗原标记物酶类标志物酶类标志物激素类标志物激素类标志物癌基因癌基因其他其他第5页,此课件共35页哦理想的肿瘤标志物的标准理想的肿瘤标志物的标准 特异性特异性100%100%灵敏度灵敏度100%100%器官特异性器官特异性 与肿瘤大小或
4、分期有关与肿瘤大小或分期有关 能进行疗效观察能进行疗效观察 与预后有关与预后有关 可靠的预测价值可靠的预测价值 然而目前所应用的肿瘤标志物均未达到上述要求,但如然而目前所应用的肿瘤标志物均未达到上述要求,但如正确合理使用,仍有很大临床价值,关键是要正确评价肿瘤正确合理使用,仍有很大临床价值,关键是要正确评价肿瘤标志物检测的临床意义。标志物检测的临床意义。第6页,此课件共35页哦目前临床应用肿瘤标志物现状目前临床应用肿瘤标志物现状理想形式理想形式特异性特异性100%真阴性真阴性100%假阳性假阳性 0%健康人健康人临界值临界值敏感性敏感性100%真阳性真阳性100%假阴性假阴性 0%肿瘤患者肿瘤
5、患者实际状况实际状况假阴性假阴性假阳性假阳性临界值临界值敏感性敏感性100%特异性特异性-60%健康人健康人肿瘤患者肿瘤患者特异性特异性100%敏感性敏感性-50%敏感性上升敏感性上升特异性上升特异性上升肿瘤标志物参数在健康人和肿瘤患者两组人群间的区别肿瘤标志物参数在健康人和肿瘤患者两组人群间的区别实际状态:假阴性和假阳性在选择临界值中的作用:实际状态:假阴性和假阳性在选择临界值中的作用:特异性越高,敏感性越低,反特异性越高,敏感性越低,反之亦然之亦然第7页,此课件共35页哦肿瘤标志物的临床应用肿瘤标志物的临床应用 正常人群中的筛查正常人群中的筛查 有症状者的辅助诊断有症状者的辅助诊断 癌症的
6、临床阶段的分期癌症的临床阶段的分期 疾病进程的预后指标疾病进程的预后指标 评估治疗方案评估治疗方案 判断癌症是否复发判断癌症是否复发 治疗应答的监测治疗应答的监测第8页,此课件共35页哦肿瘤标志物的注意事项肿瘤标志物的注意事项定位定位 TMTM基本上不能对肿瘤定位。极少数基本上不能对肿瘤定位。极少数TMTM如如PSAPSA,甲状腺球白等具器官特异性,但不是肿,甲状腺球白等具器官特异性,但不是肿瘤特异性。瘤特异性。确诊确诊 通常不能进行确诊。通常不能进行确诊。分期分期 大多数大多数TMTM与疾病分期有关,且浓度与肿瘤大小通常存在关联,但并不能根据个体与疾病分期有关,且浓度与肿瘤大小通常存在关联,
7、但并不能根据个体测得值来判断肿瘤大小,也不能以测得值来判断肿瘤大小,也不能以TM TM 浓度精确指示各期肿瘤,因为各期肿瘤的浓度精确指示各期肿瘤,因为各期肿瘤的TMTM浓度范围极广,且互相重叠。浓度范围极广,且互相重叠。预后预后 术前术前TMTM浓度增加,术后降低,表示这些浓度增加,术后降低,表示这些TMTM对此肿瘤有预后价值。对此肿瘤有预后价值。在病程监测中,在病程监测中,TMTM的浓度增加或降低与疾病的预后密切相关的浓度增加或降低与疾病的预后密切相关。第9页,此课件共35页哦TM评价治疗有效性方案评价治疗有效性方案(Beastall,1991)无效:无效:TM浓度与治疗前相比下降浓度与治疗
8、前相比下降50%有效:有效:TM浓度与治疗前相比下降浓度与治疗前相比下降90%显效:显效:TM浓度下降至临界值以下浓度下降至临界值以下第10页,此课件共35页哦检测肿瘤标志物的试验方法检测肿瘤标志物的试验方法放射免疫法放射免疫法(RIA)免疫放射法免疫放射法(IRMA)ELISA法法斑点法斑点法金标法金标法荧光免疫法荧光免疫法流式荧光免疫法流式荧光免疫法时间分辨免疫荧光法时间分辨免疫荧光法化学发光法化学发光法(CLIA)磁微粒化学发光法磁微粒化学发光法电化学发光法电化学发光法(ECLIA)蛋白芯片技术蛋白芯片技术第11页,此课件共35页哦化学发光免疫分析化学发光免疫分析化化学学发发光光免免疫疫
9、分分析析包包含含两两个个部部分分,即即免免疫疫反反应应系系统统和和化化学学发发光光分分析析系系统统。化化学学发发光光分分析析系系统统是是利利用用化化学学发发光光物物质质经经催催化化剂剂的的催催化化和和氧氧化化剂剂的的氧氧化化,形形成成一一个个激激发发态态的的中中间间体体,当当这这种种激激发发态态中中间间体体回回到到稳稳定定的的基基态态时时,同同时时发发射射出出光光子子(hM),利利用用发发光光信信号号测测量量仪仪器器测测量量光光量量子子产产额额。免免疫疫反反应应系系统统是是将将发发光光物物质质(在在反反应应剂剂激激发发下下生生成成激激发发态态中中间间体体)直直接接标标记记在在抗抗原原(化化学学
10、发发光光免免疫疫分分析析)或或抗抗体体(免免疫疫化化学学发发光光分分析析)上上,或或酶作用于发光底物酶作用于发光底物 进样系统进样系统反应池反应池PMT放大器放大器记录仪记录仪负高压负高压 检测系统检测系统化学发光分析法仪器方框图化学发光分析法仪器方框图PMT:光电倍增管第12页,此课件共35页哦肿瘤类型肿瘤类型已选标志物已选标志物补充标志物补充标志物肺癌肺癌肝癌肝癌乳腺癌乳腺癌胃癌胃癌前列腺癌前列腺癌结肠直肠癌结肠直肠癌胰腺癌胰腺癌卵巢癌卵巢癌睾丸肿瘤睾丸肿瘤CEAAFP、CEACA15-3、CEACEA、CA199PSACEA、CA199CA199、CEA、CA50HE4、CA125、CE
11、AAFPNSE、CFRA21-1、SCCAHCGCA724fPSACA242CA242HCG、CA724HCG肿瘤标志物的选择第13页,此课件共35页哦生化特性:生化特性:糖蛋白,糖蛋白,4560%糖,电泳糖,电泳迁移率,迁移率,抗原决定基抗原决定基分子量:分子量:180,000发生部位:发生部位:胚胎及胎儿肠黏膜胚胎及胎儿肠黏膜参考值范围:参考值范围:5ng/ml临床应用:临床应用:监测结直肠癌、胃癌、乳腺癌和支气管癌病程及疗效监测结直肠癌、胃癌、乳腺癌和支气管癌病程及疗效 影响因素:影响因素:5%吸烟者检测值可至吸烟者检测值可至2.55ng/ml,1%至至1020ng/ml;肝炎疾病可使;
12、肝炎疾病可使CEA 水平短暂升高水平短暂升高(一)癌胚抗原(一)癌胚抗原 (CEA)第14页,此课件共35页哦605040302010 0肿瘤患者肿瘤患者%7.0 7.0 4.2 7.0 7.4临界值临界值(ng g/ml)5033282722在实体肿瘤患者中在实体肿瘤患者中,CEA特异性为特异性为95%时的敏感性时的敏感性参考值范围:参考值范围:5ng g/ml在实体肿瘤患者中在实体肿瘤患者中CEA表达状况表达状况第15页,此课件共35页哦生化特性:生化特性:糖蛋白,糖蛋白,4%糖,电泳糖,电泳-1-迁移率迁移率分子量:分子量:70,000发生部位:发生部位:卵黄囊、胚胎肝卵黄囊、胚胎肝参考
13、值范围:参考值范围:10ng/ml临床应用:临床应用:发现原发性肝细胞癌,监测治疗效果;用于诊断生殖细胞肿瘤发现原发性肝细胞癌,监测治疗效果;用于诊断生殖细胞肿瘤 影响因素:影响因素:肝炎疾病可使肝炎疾病可使AFP水平短暂升高;水平短暂升高;AFP可通过胎盘,妊娠可通过胎盘,妊娠3236周可达高周可达高峰。峰。(二)甲胎蛋白(二)甲胎蛋白(AFP)第16页,此课件共35页哦(三)糖类抗原(三)糖类抗原242(CA242)生化特性:生化特性:是一种唾液酸化的新型粘蛋白类糖类肿瘤抗原是一种唾液酸化的新型粘蛋白类糖类肿瘤抗原临床应用:临床应用:CA242可作为胰腺癌和结肠癌校好的肿瘤标志物,其灵敏可
14、作为胰腺癌和结肠癌校好的肿瘤标志物,其灵敏度与度与CA19-9相仿(相仿(70%92%),但特异性、诊断效率则优于),但特异性、诊断效率则优于CA19-9。参考值:参考值:25U/ml第17页,此课件共35页哦生化特性生化特性:糖蛋白,由两个单克隆抗体:糖蛋白,由两个单克隆抗体:1.115D8抗乳脂膜及抗乳脂膜及2.DF3抗乳腺癌抗乳腺癌 细胞系所证实细胞系所证实分子量:分子量:115D8:400,000;DF3290,000发生部位:发生部位:乳腺癌细胞和某些上皮细胞乳腺癌细胞和某些上皮细胞参考值范围:参考值范围:28U/ml临床应用:临床应用:监测乳腺癌疗效监测乳腺癌疗效影响因素:影响因素
15、:与与CEA联合检测联合检测(四)癌抗原(四)癌抗原15-3(CA15-3)?第18页,此课件共35页哦生化特性:生化特性:糖脂糖脂,Lewis血型决定基半抗原血型决定基半抗原分子量:分子量:抗原抗原:36,000;粘蛋白粘蛋白:106D发生部位:发生部位:各种肿瘤各种肿瘤,在胎儿胃肠道上皮细胞在胎儿胃肠道上皮细胞,许多许多 粘膜细胞粘膜细胞参考值范围:参考值范围:37U/ml临床应用:临床应用:监测胰腺癌疗效监测胰腺癌疗效影响因素:影响因素:结直肠结直肠TM的第二选择的第二选择(五)糖类抗原(五)糖类抗原19-9(CA19-9)第19页,此课件共35页哦生化特性:生化特性:糖蛋白糖蛋白,以卵
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