风湿性疾病实验诊断PPT课件.ppt
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1、关于风湿性疾病的实验诊断第一张,PPT共五十四页,创作于2022年6月rheumatic diseases第二张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 前言:前言:风湿性疾病风湿性疾病(rheumatic diseases,RA)是指一大类病是指一大类病因各不相同因各不相同,累及关节及其周围组织的疾病。累及关节及其周围组织的疾病。与自身免疫关系密切,自身免疫导致器官损伤与自身免疫关系密切,自身免疫导致器官损伤或功能障碍或功能障碍。其疾病又称为自身免疫性疾病。其疾病又称为自身免疫性疾病。第三张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 自身免疫性疾病患者血循环中针对自身组织器官、细胞及自身免疫性
2、疾病患者血循环中针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的抗体成为自身抗体。细胞内成分的抗体成为自身抗体。多种自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗体谱。患多种自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗体谱。患者血清中存在自身抗体是自身免疫病的特点之一。有些者血清中存在自身抗体是自身免疫病的特点之一。有些自身抗体有高度特异性,一般形成一个抗体谱,根据临自身抗体有高度特异性,一般形成一个抗体谱,根据临床表现进行初筛或确诊。床表现进行初筛或确诊。第一节第一节 概述概述第四张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 自身免疫病具以下特点:自身免疫病具以下特点:1.起病与遗传和环境因素有关。2.病变累及多个系统,是一组
3、异质性疾病。3.基本病理改变是血管和结缔组织的慢性炎症。4.大多数呈慢性进行性反复发作的病程,以肌关节病变为主,对糖皮质激素的治疗有一定反应。第五张,PPT共五十四页,创作于2022年6月第二节 风湿性疾病常用的筛查试验 风湿性疾病患者当机体的免疫自稳受到破坏后,自身抗体和(或)自身致敏淋巴细胞攻击自身靶抗原和组织,产生免疫病理损伤和功能障碍引起自身免疫性疾病,该类免疫损伤主要表现为慢性炎性。检测炎性标志物可有效评估疾病活动性,监控疗效和判断预后。第六张,PPT共五十四页,创作于2022年6月一一 常规检测试验常规检测试验 抗抗O O粘蛋白试验粘蛋白试验 链球菌溶血素链球菌溶血素O为粘蛋白,链
4、球菌溶血素为粘蛋白,链球菌溶血素O与肾小球基与肾小球基底膜、心内膜有交叉抗原性。检测抗底膜、心内膜有交叉抗原性。检测抗O抗体可对风湿热及抗体可对风湿热及肾小球肾炎有诊断价值。肾小球肾炎有诊断价值。第七张,PPT共五十四页,创作于2022年6月二二 常用筛查实验常用筛查实验第八张,PPT共五十四页,创作于2022年6月免疫系统将自身的细胞核成分作为抗原产生的抗体免疫系统将自身的细胞核成分作为抗原产生的抗体ANAANA性质主要是性质主要是IgGIgG,也有,也有IgMIgM、IgAIgA、IgDIgD无器官和属特异性,故用动物细胞核作为靶抗原无器官和属特异性,故用动物细胞核作为靶抗原现发现现发现2
5、020余种,存在血清、胸水、关节液和尿液中余种,存在血清、胸水、关节液和尿液中(一)(一)抗核抗体(抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)第九张,PPT共五十四页,创作于2022年6月抗核抗体抗核抗体 分类分类理化特性抗原分布部位抗DNA抗体抗组蛋白抗体抗非组蛋白抗体抗核仁抗体临床检测中通常分类方式:临床检测中通常分类方式:根据抗原的化学名称命名,如抗dsDNA抗体、抗RNA、抗DNP抗体;以第一位检出该抗原的患者命名,如抗Sm、抗Ro、抗La;以相关疾病命名,如抗SSA、抗SSB抗体。抗核抗体谱抗核抗体谱第十张,PPT共五十四页,创作于2022年6月常见的常见的ANAA
6、NA荧光图形及临床意义荧光图形及临床意义均质型 斑点型 核膜型(周边型)核仁型 检测方法:常用间接免疫荧光法检测方法:常用间接免疫荧光法靶细胞:靶细胞:HEp-2细胞细胞(人喉癌)人喉癌)第十一张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 高滴度见于高滴度见于SLE患者,患者,低滴度可见于低滴度可见于RA、慢性肝脏、慢性肝脏疾病、传染性单核细胞增多疾病、传染性单核细胞增多症或药物诱发的狼疮患者。症或药物诱发的狼疮患者。1.均质型均质型 着色均匀,与均质性相关的自身抗体主要有抗不溶性着色均匀,与均质性相关的自身抗体主要有抗不溶性DNP抗体、抗组蛋白抗体,也可抗抗体、抗组蛋白抗体,也可抗dsDNA。
7、第十二张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 2 2.斑点型斑点型 细胞核内出现颗粒状荧光,多见于抗核糖体核蛋白颗粒抗细胞核内出现颗粒状荧光,多见于抗核糖体核蛋白颗粒抗体,如抗体,如抗Sm、抗、抗Ru、RNP及及抗抗SSB/La等抗体。等抗体。见于见于MCTD、SLE、硬皮病及、硬皮病及SS等。等。第十三张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 3 3.核膜型核膜型 又称周边型。在细胞核的周边形成荧光环,相又称周边型。在细胞核的周边形成荧光环,相关抗体有抗关抗体有抗dsDNA。主要见于主要见于SLE,特别是活动期特别是活动期SLE。第十四张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 4 4
8、.核仁型核仁型 荧光着色主要在核仁区,相关抗体是核仁特异的低分子量荧光着色主要在核仁区,相关抗体是核仁特异的低分子量RNA,抗,抗RNA聚合酶聚合酶-1,抗,抗U1RNP、抗、抗PM-Scl抗体。抗体。主要见于硬皮病,也可见于雷诺现象,偶见于主要见于硬皮病,也可见于雷诺现象,偶见于SLE。第十五张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 荧光图型分类对了解自身免疫性疾病的鉴别诊断荧光图型分类对了解自身免疫性疾病的鉴别诊断具有指示作用,但要明确是哪一亚类的自身抗体必须具有指示作用,但要明确是哪一亚类的自身抗体必须做进一步的抗核抗体谱系的检测。做进一步的抗核抗体谱系的检测。由于细胞成分的复杂性,不
9、同成分的抗原性不由于细胞成分的复杂性,不同成分的抗原性不同,产生多种类型的同,产生多种类型的ANA,在众多类型中,某种,在众多类型中,某种ANA只在某一疾病中出现,成为诊断指标,在不同只在某一疾病中出现,成为诊断指标,在不同的自身免疫性疾病中出现不同的的自身免疫性疾病中出现不同的ANA的组合,可形成的组合,可形成各种疾病或疾病亚群的特征性抗体谱。各种疾病或疾病亚群的特征性抗体谱。第十六张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 ANA检测在临床诊断与鉴别诊断中是一个很重要检测在临床诊断与鉴别诊断中是一个很重要的筛选试验。的筛选试验。ANA阳性者进一步检测各亚类阳性者进一步检测各亚类ANA抗抗体
10、对明确诊断、临床分期、病情观察、预后及治疗评体对明确诊断、临床分期、病情观察、预后及治疗评价具有重要意义。价具有重要意义。未经治疗的未经治疗的SLE或或MCTD患者患者95%ANA阳性,故阳性,故检测检测ANA对对SLE有较大临床意义。有较大临床意义。第十七张,PPT共五十四页,创作于2022年6月(二)类风湿因子(rheumatoid factor,RF)抗变性抗变性抗变性抗变性IgGIgGIgGIgG的抗体的抗体的抗体的抗体u可以是可以是IgMIgM、IgGIgG、IgAIgA、IgEIgEu u60%60%70%70%类风湿关节炎阳性类风湿关节炎阳性类风湿关节炎阳性类风湿关节炎阳性u正常
11、人的阳性率可达正常人的阳性率可达3%5%第十八张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 IgM型型RF效价效价80u/ml并伴有严重的关节功能障碍时,并伴有严重的关节功能障碍时,提示预后不良。提示预后不良。IgG型型RF与滑膜炎、血管炎和关节的症状密切与滑膜炎、血管炎和关节的症状密切相关相关。IgA型型RF与关节炎症状的严重程度以及骨质破坏有与关节炎症状的严重程度以及骨质破坏有显著的相关性显著的相关性。RF阳性不能确诊阳性不能确诊,阴性不能排除阴性不能排除RA,在其,在其他的自身免疫性疾病中他的自身免疫性疾病中RF可见升高可见升高。第十九张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 (三)(三
12、)免疫球蛋白测定免疫球蛋白测定Ig分为五型,临床常用免疫比浊法各种自身免疫性疾病都伴有自身Ig升高在先天性免疫缺陷病Ig下降。第二十张,PPT共五十四页,创作于2022年6月(四)(四)补体补体C3/C4C3/C4测定测定 采用透射比浊法和散射比浊法自动化测定采用透射比浊法和散射比浊法自动化测定 临床意义:临床意义:1 1.免疫相关性疾病:如免疫相关性疾病:如SLESLE、R RA A、ASAS等因消耗而下降等因消耗而下降。2 2.继发性补体含量显著降低的疾病:如冷球蛋白血症继发性补体含量显著降低的疾病:如冷球蛋白血症。3 3.高补体血症高补体血症:感染恢复期和某些恶性肿瘤,如心肌梗死、甲感染
13、恢复期和某些恶性肿瘤,如心肌梗死、甲状腺炎、大叶性肺炎及状腺炎、大叶性肺炎及糖尿病等糖尿病等。对自身免疫病测定,补体作为参考第二十一张,PPT共五十四页,创作于2022年6月三三 试验方法的选择及结果确认试验方法的选择及结果确认 间接免疫荧光作为经典的筛选方法,多数情况下间接免疫荧光作为经典的筛选方法,多数情况下自身抗体升高,个别也可降低。如严重甲状腺炎,腺自身抗体升高,个别也可降低。如严重甲状腺炎,腺体本身可起免疫吸附作用。有些自身免疫病是由针对体本身可起免疫吸附作用。有些自身免疫病是由针对自身抗原的致敏自身抗原的致敏T细胞所致,这种患者体液查不到自身抗细胞所致,这种患者体液查不到自身抗体体
14、。自身免疫病大都由自身免疫病大都由、型超敏反应引起,在型超敏反应引起,在、型中补体消耗过多,型中补体消耗过多,型补体不变。型补体不变。第二十二张,PPT共五十四页,创作于2022年6月第三节第三节 风湿性疾病常用的诊断试验风湿性疾病常用的诊断试验 自身抗体检测是诊断自身免疫性疾病的一自身抗体检测是诊断自身免疫性疾病的一项重要手段,有时有交叉重叠现象。借助其他项重要手段,有时有交叉重叠现象。借助其他试验和临床症状综合分析。试验和临床症状综合分析。第二十三张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 一、自身抗体检测 自身抗体与自身免疫性疾病的相关性第二十四张,PPT共五十四页,创作于2022年6月
15、(一)抗(一)抗dsDNA抗体抗体 最敏感方法是用马疫锥虫或绿蝇膜虫作最敏感方法是用马疫锥虫或绿蝇膜虫作为抗原基质进行间接免疫荧光检测。因此生为抗原基质进行间接免疫荧光检测。因此生物含纯的物含纯的dsDNAdsDNA。在诊断在诊断SLESLE有重要作用,且与疾病的活有重要作用,且与疾病的活动性有关,故可监控疾病。动性有关,故可监控疾病。第二十五张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 (二)抗(二)抗ENA抗体谱的检测抗体谱的检测 可提取核抗原(可提取核抗原(ENA),用盐水或磷酸盐缓冲液从细),用盐水或磷酸盐缓冲液从细胞核中提取。属非组蛋白的核蛋白,为酸性蛋白抗原。胞核中提取。属非组蛋白的
16、核蛋白,为酸性蛋白抗原。由许多小分子由许多小分子RNA与各自对应的特定蛋白质组成核糖核与各自对应的特定蛋白质组成核糖核蛋白颗粒,该组成使其各自的抗原性得以增强。分子中蛋白颗粒,该组成使其各自的抗原性得以增强。分子中不含不含DNA,主要包括,主要包括Sm、RNP、SSA、SSB、Jo-1、Scl-70抗原。不同的自身免疫性疾病可产生不同的抗原。不同的自身免疫性疾病可产生不同的ENA抗体。抗体。检测方法有免疫印迹技术和斑点酶技术。检测方法有免疫印迹技术和斑点酶技术。第二十六张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 (1 1)抗抗Sm(Smith)抗体抗体 抗抗Sm抗体仅发现于抗体仅发现于SLE患
17、者中,是患者中,是SLE的血清标的血清标志抗体,已列入志抗体,已列入SLE的诊断标准。约的诊断标准。约30%40%的的SLE患者抗患者抗Sm抗体阳性,此抗体阴性不能排除抗体阳性,此抗体阴性不能排除SLE的的诊断。诊断。第二十七张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 (2)抗核抗核RNP(nRNP)抗体)抗体 抗核抗核RNP(nRNP)抗体是诊断)抗体是诊断MCTD的重要血清学的重要血清学依据依据,因其抗原为含有因其抗原为含有U1RNA的核蛋白复合物,故而称的核蛋白复合物,故而称为为U1RNP.其在其在MCTD患者的阳性检出率可高达患者的阳性检出率可高达95%。抗。抗nRNP抗体无疾病特异性
18、,在抗体无疾病特异性,在SLE、SS及及PM等自身免疫等自身免疫病中也可检出。病中也可检出。由于由于Sm和和RNP是同一分子复合物(是同一分子复合物(RNA-蛋白质颗蛋白质颗粒)中的不同抗原位点,两种抗原具有相关性,故抗粒)中的不同抗原位点,两种抗原具有相关性,故抗Sm抗体阳性常伴有抗抗体阳性常伴有抗RNP抗体阳性,单一的抗抗体阳性,单一的抗Sm抗体或抗体或抗抗RNP抗体阳性较少见。抗体阳性较少见。第二十八张,PPT共五十四页,创作于2022年6月 (3)(3)抗抗SSARo抗体和抗抗体和抗SSBLa抗体抗体 二者是二者是SS患者最常见的自身抗体。前者检出率患者最常见的自身抗体。前者检出率高,
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