实验二银耳多糖含量的测定精选PPT.ppt
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1、关于实验二银耳多糖含量的测定第1页,讲稿共26张,创作于星期日一、实验目的学习和掌握多糖含量测定的原理和方法。第2页,讲稿共26张,创作于星期日三、实验原理多糖在浓硫酸中水解,进一步脱水生成糖醛及其衍生物,与蒽酮(10-酮-9,19-二氢酮)反应生成蓝绿色复合物,在620nm处有最大吸收值。以标准葡萄糖溶液作标准,在620 nm波长处进行比色,可计算出总糖的含量。第3页,讲稿共26张,创作于星期日(1)糖经浓无机酸处理后,脱水生成糠醛或糠醛衍生物;第4页,讲稿共26张,创作于星期日(2)糠醛和糖醛衍生物在浓无机酸的作用下,能与蒽酮化合物反应生成有色物质。(3)反应液颜色的深浅,反映出糖浓度的高
2、低。第5页,讲稿共26张,创作于星期日四、仪器、试剂与药品试剂:0.1mg/ml的葡萄糖标准品、蒽酮试剂、蒸馏水 样品液:0.5 mg/ml试管、电炉、可见光分光度计、容量瓶 etc.第6页,讲稿共26张,创作于星期日五、实验操作1、标准曲线的制作、标准曲线的制作(1)加样:(2)将加好的样品混匀,沸水浴10 min,室温冷却,于620 nm处比色。(3)以第一管为空白,进行比色。以光密度(OD值)为纵坐标,糖的含量(g)数为横坐标,得标准曲线。第7页,讲稿共26张,创作于星期日2.样品的准备样品的准备称取适量样品,先加少量的水溶解,最后定容于50 ml,至溶液浓度约为0.5 mg/ml.3.
3、样品中多糖含量的测定样品中多糖含量的测定分别吸取0.1、0.3 和0.5 ml样品液,用蒸馏水补足1.00 ml。加入蒽酮试剂,同标准曲线制作之操作,比色测定。根据标准曲线和样品浓度计算含量。第8页,讲稿共26张,创作于星期日第9页,讲稿共26张,创作于星期日六、思考题1、根据样品液多糖含量,计算实验一中多糖的提取率。2、根据蒽酮测糖原理,设计测定化合物中淀粉量的方案。第10页,讲稿共26张,创作于星期日注意事项:加样要求准确。第11页,讲稿共26张,创作于星期日实验三实验三 猪胃粘膜中提取胃膜素、猪胃粘膜中提取胃膜素、胃酶胃酶第12页,讲稿共26张,创作于星期日一、实验目的学习从猪胃粘膜中提
4、取胃膜素、胃酶的原理和方法,了解有机溶剂分级沉淀法的应用。第13页,讲稿共26张,创作于星期日二、简介胃膜素胃膜素:功效:功效:一种以黏蛋白为主要成分的生物活性药物,有极强的黏附作用,可直接作用于消化道内壁,在胃及十二指肠溃疡面形成一层保护膜,减少胃酸对它的刺激,利于溃疡面的愈合;另一方面有润滑作用,使进入消化道的食物易于在消化道内移行,有利于减少某些物质对溃疡面的刺激。胃膜素临床上用于胃及十二指肠溃疡。性质描述:淡黄色或淡灰色粉末,或微小颗粒。着水胀为粘浆。显微溶状态,略带类蛋白胨臭。具有很强的粘附力。第14页,讲稿共26张,创作于星期日胃蛋白酶:胃蛋白酶:存在于动物胃液中,以无活性的胃蛋白
5、酶原形式,存在于胃底的主细胞中,在酸性条件下,胃蛋白酶原变化成有消化蛋白质能力的胃蛋白酶。在医学上主要用于治疗消化不良、食欲不振、慢性胃炎等,工业上可作水解蛋白用。干燥的胃蛋白酶为白色或淡黄色粉末,引湿性强,易溶于水;对热较稳定,100 10 min不破坏。水溶液中,70 以上破坏。第15页,讲稿共26张,创作于星期日三、实验原理胃粘膜一般指胃底粘膜,分泌胃液的主细胞集中在胃底粘膜,呈暗红色,直径约10-12厘米圆块,约100 g。胃膜素是从猪胃粘膜经胃蛋白酶和盐酸消化后的上层液中,60%左右的乙醇所沉淀的部分。蛋白质、酶等极性物质的水溶液加入与水混溶的有机溶剂,可沉淀析出。第16页,讲稿共2
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