全自动生化分析仪基本知识与应用.pptx

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1、会计学1全自动生化分析仪基本知识与应用全自动生化分析仪基本知识与应用2一、自动生化分析仪的分类一、自动生化分析仪的分类 n n根据反应装置：连续流动式、离心式和分立式连续流动式、离心式和分立式n n根据反应介质：液相化学、干式化学n n根据反应通道：单通道、多通道n n根据自动化程度：全自动、半自动 n n根据仪器的复杂程度：小型、中型和大型n n根据分析系统试剂开放程度：封闭系统、开放系统第1页/共90页31.连续流动式生化分析仪连续流动式生化分析仪n n比例泵n n空气分段n n透析器n n管道式，携带污染第2页/共90页4第3页/共90页52.离心式全自动生化分析仪离心式全自动生化分析仪

2、n n几乎几乎“同步分析”n n随机任选式（早期的早期的早期的早期的必须按项目顺序）n n比色杯人工清洗？（一次性一次性）第4页/共90页63.分立式生化分析仪分立式生化分析仪n n目前使用生化分析仪主要此种类型。n n比色杯 袋式仪器可以自动制作比色杯 比色杯可以兼作反应杯 比色杯不能作流动比色池（半自动半自动）第5页/共90页74.干式生化分析仪 n n干片分：扩散层、试剂层、指示剂和支持扩散层、试剂层、指示剂和支持层。层。n n利用“反射光度法”和“差式电位法”检测。n n以液体样品中的“水”为溶剂。n n理论基础：KubelkaMunk理论。第6页/共90页85.半自动生化分析仪半自动

3、生化分析仪n n光源（石英卤素灯）n n常用“干涉滤光片”分光n n微量流动比色池。n n终点法项目通常在“仪器”外孵育，时间和温度的准确性常影响测定结果。第7页/共90页9n n例例1n n临床上所指的封闭式全自动生化分析仪主要是n nA 质控物封闭n nB 试剂封闭n nC 环境封闭n nD 仪器封闭n nE 技术人员封闭第8页/共90页10n n例例2n n全自动生化分析仪可分为小型、中型、大型，其依据是：n nA 单通道和多通道数量n nB 仪器可测定项目的多少n nC 测定程序可否改变n nD 仪器的复杂程度、功能和单位时间测试数量仪器的复杂程度、功能和单位时间测试数量n nE 是否

4、可以同步分析第9页/共90页11n n例例3n n全自动与半自动生化分析仪共同之处为n nA 取样n nB 加试剂混合n nC 检测波长n nD 孵育反应n nE 清洗系统第10页/共90页12n n例例例例4 4n n干化学式自动生化分析仪所用的光学系统为干化学式自动生化分析仪所用的光学系统为n nA A 分光光度计分光光度计n nB B 原子吸光仪原子吸光仪n nC C 反射比色计反射比色计n nD D 固定闪烁计数器固定闪烁计数器n nE E 免疫比浊计免疫比浊计第11页/共90页13n n例例5n n关于分立式全自动生化分析仪的比色杯的阐述，错误的错误的错误的错误的是：n nA 比色杯

5、可以是反应杯n nB 比色杯可以自动制作n nC 比色杯可以是流动比色池n nD 比色杯可以是石英玻璃n nE 比色杯可以是硬质塑料第12页/共90页14二、自动生化分析仪的二、自动生化分析仪的安装与准备安装与准备n n1.工作环境 空间、电源（UPS)、避免直射阳光、环境温度和湿度、电磁辐射、化学品。n n2.水 蒸馏水、去离子水、反渗透水。n n3.纯水等级：一般二级 二级纯水微生物含量：最大每毫升菌落数103。第13页/共90页15n n例例6n n临床生化实验室一般采用NCCLS所规定的二级纯水，其微生物菌落（CFU/ml)应低于n nA 1n nB 10n nC 100n nD 10

6、00n nE 100000第14页/共90页16n n例例7n n临床生化实验室用水一般采用：n nA 一级水n nB 二级水n nC 三级水n nD 次级水n nE 自来水第15页/共90页17三、全自动生化分析仪三、全自动生化分析仪三、全自动生化分析仪三、全自动生化分析仪 基本结构及工作原理基本结构及工作原理基本结构及工作原理基本结构及工作原理n n1.样品系统 n n专用样品杯和直接用采血试管n n凝块和气泡检出功能n n自动冲洗功能n n样品预稀释、后稀释、加倍、标准原液系列稀释等不同的稀释方式。第16页/共90页18n n2.试剂系统n n冷藏功能n n液面感应及气泡检出n n双试剂

7、与多试剂n n试剂瓶的防蒸发与死体积n n试剂条码第17页/共90页19n n3.条形码系统n n三组成部分：扫描系统、信号整形、译扫描系统、信号整形、译码器码器n n黑条白空相间的条码符号黑条白空相间的条码符号n n光电转换元件光电转换元件n n常用条码类型：常用条码类型：Code39,Code128Code39,Code128等等第18页/共90页20n n4.反应系统n n4.1 反应盘n n4.2 混合装置 多用特氟隆不沾涂层的搅多用特氟隆不沾涂层的搅拌棒拌棒n n4.3 温控装置 n n理想的温度波动应小于0.1n n3种方式：空气浴、水浴、恒温液间接加热n n强生干化学仪用空气浴恒

8、温第19页/共90页21n n5.5.清洗系统清洗系统 一般先用碱性液冲洗、再一般先用碱性液冲洗、再用酸性液冲洗、最后用去离子水冲洗。用酸性液冲洗、最后用去离子水冲洗。n n6.6.管路系统管路系统 管路系统的老化或长期使管路系统的老化或长期使用后反应废物的沉积阻塞常造成反应用后反应废物的沉积阻塞常造成反应结果的重复性差结果的重复性差。第20页/共90页22n n7.比色系统n n7.1 光源 卤素灯波长300800nmn n 氙灯 波长285750nmn n使用寿命1000h左右，光源能量对340nm影响最大。n n7.2 比色杯 常用石英、硬质玻璃、优质塑常用石英、硬质玻璃、优质塑料料n

9、n 光径光径0.50.7cm0.50.7cm。第21页/共90页23n n7.3 单色器 朗伯比尔定律n n 滤光片、棱镜、光栅分光n n 多采用光栅分光n n 多采用后分光测量技术n n光源 比色杯 单色光器 检测器n n7.4 检测器 发光二极管n n8 程序控制系统第22页/共90页24n n9.携带污染n n常规清洗不能完全消除携带污染n n9.1 常见原因 共用系统n n 保养不当（污垢、老化）n n 清洗液使用不当n n 排列顺序不合理n n9.2 计算 小于0.3%为正常n n9.3 常见组合第23页/共90页25n n例例8n n自动生化分析仪比色分析常用的检测器是n nA 固

10、定闪烁计数器n nB 硒电池n nC 镍氢电池n nD 二极管n nE 光电倍增管第24页/共90页26n n例例9n n自动生化分析仪的光源能量降低对单色光影响最大的波长是n nA 340nmn nB 405nmn nC 450nmn nD 500nmn nE 630nm第25页/共90页27n n例10n n自动生化分析仪清洗加样针主要为了n nA 提高分析精密度n nB 提高分析准确度n nC 防止交叉污染n nD 提高反应速度n nE 提高分析的灵敏度第26页/共90页28n n例例11n n大多数全自动生化分析仪比色杯的光径是n nA 0.50.7cmn nB 0.81.0cmn n

11、C 1.11.9cmn nD 2.03.9cmn nE 4.0cm第27页/共90页29n n例例12第28页/共90页30n n例例13第29页/共90页31n n例14n n全自动生化分析仪比色杯的材料常采用n nA 光学玻璃或一般塑料n nB 普通玻璃或硬质塑料n nC 隔热玻璃或普通塑料n nD 石英玻璃或优质塑料n nE 优质塑料或普通玻璃第30页/共90页32n n例例15n n目前全自动生化分析仪最常用的光栅分光方式为n nA 前分光n nB 中分光n nC 后分光n nD 前中后分光n nE 前后分光第31页/共90页33n n例例16n n干式生化分析仪保持恒温的方式是n n

12、A 空气式恒温器加热n nB 水浴式循环直接加热n nC 恒温液循环间接加热n nD 金属直接加热n nE 反应液直接加热第32页/共90页34n n例例17n n全自动生化分析仪的试剂与样品的混合装置类型为n nA 搅拌棒n nB 加温n nC 机械振荡n nD 加样针n nE 加混合液第33页/共90页35n n例例例例1818 某实验室全自动生化分析仪近两天发现部分结果明显不稳定，仪器自某实验室全自动生化分析仪近两天发现部分结果明显不稳定，仪器自检正常，测定过程没有错误报警，如果是交叉污染因素，首先应考虑为检正常，测定过程没有错误报警，如果是交叉污染因素，首先应考虑为n nA A 清洗剂

13、的类型是否正确清洗剂的类型是否正确n nB B 清洗用水是否符合要求清洗用水是否符合要求n nC C 管路冲洗是否彻底管路冲洗是否彻底n nD D 反应杯是否需更新反应杯是否需更新n nE E 用校准品对仪器进行重新校正。用校准品对仪器进行重新校正。第34页/共90页36n n例例19 340nm波长属于n nA 可见光 n nB 紫外光n nC 红外光n nD 近红外光n nE 远红外光第35页/共90页37n n例例20第36页/共90页38n n例例21第37页/共90页39四、全自动生化分析仪常用分析技术四、全自动生化分析仪常用分析技术四、全自动生化分析仪常用分析技术四、全自动生化分析

14、仪常用分析技术n n1.1.光谱分析技术光谱分析技术n n单波长、双波长甚至多波长单波长、双波长甚至多波长n n主波长，特有波长；副波长，为消除干扰而设主波长，特有波长；副波长，为消除干扰而设n n单波长易受溶血、黄疸、脂浊的干扰；双波长可消除上述干扰，单波长易受溶血、黄疸、脂浊的干扰；双波长可消除上述干扰，减少杂散光、噪音干扰减少杂散光、噪音干扰n n常用双波长常用双波长 比浊比浊 340/700nm340/700nm；Hb 340/380 Hb 340/380；NADH 340/380NADH 340/380、340/405340/405；ALP 405/476 ALP 405/476；T

15、rinder 520/600Trinder 520/600。第38页/共90页40n n1.1 波长选择的三个条件n n待测物质的光吸收最大n n吸收峰宽而钝n n常见干扰物在该波长下光吸收最小n n1.2 吸收光谱分析n n Lambert-Beer定律第39页/共90页41n n1.3 散射光谱分析n n散射光谱分析法 光线通过溶液混悬颗粒后的光吸收或光散射程度的定律方法。n n透射比浊法n n散射比浊法 目前，全自动生化分析仪主要采用透射比浊法。第40页/共90页42n n2.电化学分析技术n n是利用物质的电化学性质，测定化学电池的电位、电流或电量的变化的分析方法。n n基本公式：能斯

16、特（Nernst)方程。n n测量电极与参比电极n nK+电极 颉氨霉素；Na+玻璃电极；Cl-银氯化银电极；CO2 气敏电极第41页/共90页43n n例例22第42页/共90页44n n例例23第43页/共90页45n n例例24第44页/共90页46n n例例25第45页/共90页47n n例例26第46页/共90页48n n例例27第47页/共90页49n n例例28n n钠电极属于n nA 晶体电极n nB 气敏电极n nC 玻璃电极n nD 酶电极n nE 膜电极第48页/共90页50n n例例29n n很多分析仪都采用双波长或多波长的光路技术，是为了减少n nA 试剂的干扰n n

17、B 样品中黄疸、溶血、脂血的干扰n nC 仪器光源的波动n nD 批间差异n nE 批内差异第49页/共90页51n n例例30第50页/共90页52n n例例31第51页/共90页53n n例例32第52页/共90页54五、全自动生化分析仪常用测定项目五、全自动生化分析仪常用测定项目五、全自动生化分析仪常用测定项目五、全自动生化分析仪常用测定项目的反应原理的反应原理的反应原理的反应原理n n终点分析法n n连续监测法n n干化学分析法n n电化学分析法第53页/共90页55n n1.常用分析方法n n 连续监测法的定义n n 终点法定义n n 零级反应期n n 一级反应期第54页/共90页5

18、6n n2.NAD(P)H系统指示的反应n n还原型NAD(P)H在340nm有吸收峰；氧化型NAD(P)则没有。第55页/共90页57n n2.1 利用利用NAD(P)HNADNAD(P)HNAD，吸光度下降的：，吸光度下降的：n n ALTn n ASTn n LD-Pn n UNn n K+酶法n n TCO2酶法第56页/共90页58n n2.2 利用利用NADNAD(P)HNADNAD(P)H，吸光度升高的：，吸光度升高的：n nCKCKn nCK-MBCK-MBn nTBATBAn nLD-LLD-Ln nGlu-HKGlu-HKn nTBATBA第57页/共90页59n n3.T

19、rinder反应n nGlu-GODn n肌苷肌氨酸氧化酶法n n尿酸n nGPO-PAPn nT-Ch,HDL/LDL-Ch第58页/共90页60n n4.苯衍生物指示反应n nALPn nGGTn nNAG第59页/共90页61n n5.免疫透射比浊法n n型胶原n nTnIn nHs-CRP，LP(a)n n尿微量白蛋白，前白蛋白n n胱抑素Cn n载脂蛋白第60页/共90页62n n6.离子选择电极法n nK+n nNa+n nCl-n nTCO2第61页/共90页63n n7.常见受溶血影响较大的项目n nK+n nLDHn nCKn nASTn nALTn nMg第62页/共90页

20、64n n8.终点法反应的项目n nGlu-GOD，肌苷肌氨酸氧化酶法，尿酸，TG-GPO-PAP，T-Ch，n n9.速率法反应的项目n nALT，AST，ALP，GGT，TBA，CK,LD，n nGlu-HK，UN，NAG，第63页/共90页65n n9.其他n n9.1 反应底物 ALT L L丙氨酸丙氨酸-酮戊二酸酮戊二酸n n ALP 磷酸苯二钠n n9.2 用全血标本：糖化血红蛋白第64页/共90页66n n例例33第65页/共90页67n n例例34第66页/共90页68n n例例35第67页/共90页69n n例例36第68页/共90页70n n例例37第69页/共90页71n

21、 n例例38第70页/共90页72n n例例39第71页/共90页73n n例例40第72页/共90页74n n例例41第73页/共90页75n n例例42第74页/共90页76n n例例43第75页/共90页77n n例例44第76页/共90页78n n例例45第77页/共90页79n n例例46第78页/共90页80n n例例47n n关于ALT测定中，叙述正确的是n nA L-丙氨酸与-酮戊二酸为反应底物n nB NADH在氧化还原反应中起作用n nC 第一步反应中的第一步反应中的L-L-丙氨酸将进入下一步反应丙氨酸将进入下一步反应n nD 在偶联反应中，生化仪将在455nm处检测吸光度

22、下降速率n nE LD主要作用于第一步反应第79页/共90页81n n例例48n n若遇到溶血标本时，受影响较小的项目是n nA LDL-Cn nB LDHn nC CKn nD ASTn nE ALT第80页/共90页82n n例例49n n在下列反应中，需要谷氨酸脱氢酶的是：n nA 酶速率法测定尿素n nB 葡萄糖氧化酶法测定n nC 肌苷酶法测定n nD 尿酸酶法测定n nE 胆固醇酶法测定第81页/共90页83n n例例50n n血清前白蛋白测定，临床上常用的方法是n nA 溴甲酚绿法n nB 凯氏定氮法n nC 双缩脲法n nD 免疫比浊法n nE 磺柳酸法第82页/共90页84n

23、 n例例51n n酶法测定甘油三酯常用的方法是n nA 终点法n nB 速率法n nC 免疫比浊法n nD 化学修饰法n nE 固定时间法第83页/共90页85n n例例52n n自动生化分析仪中连续监测法的读数方式n nA 在一定的时间范围内连续读各吸光度值n nB 反应尚未开始和反应终点时各读取吸光度值n nC 终点附近读两个检测点取均值n nD 在终点附近读取两点，计算两点吸光度的差值n nE 每经过比色窗口即读取一个吸光度第84页/共90页86n n例例53n n全自动生化分析仪上测定血清（浆）载脂蛋白的方法为：n nA 免疫扩散法n nB 免疫火箭电泳法n nC 免疫透射比浊法n nD 酶法n nE 免疫散射比浊法第85页/共90页87n n例例54n n酶活性浓度测定不考虑下列哪些因素影响n nA pH和离子强度n nB 底物浓度n nC 激活剂n nD 反应温度n nE 抑制剂抑制反应的类型第86页/共90页88第87页/共90页谢谢 谢！谢！放映结束 感谢各位的批评指导！让我们共同进步第88页/共90页谢谢 谢！谢！放映结束 感谢各位的批评指导！让我们共同进步第89页/共90页