自身免疫性疾病及其检验7.pptx
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1、第1页/共116页第十七章自身免疫性疾病及检验第一节第一节概述概述第二节第二节自身免疫性疾病的发病机制自身免疫性疾病的发病机制第三节第三节常见自身免疫性疾病常见自身免疫性疾病第四节第四节自身免疫性疾病的检验自身免疫性疾病的检验第2页/共116页第一节 概述(一)(一)相关概念相关概念(二)(二)自身免疫病的特征自身免疫病的特征(三)(三)自身免疫病的分类自身免疫病的分类第3页/共116页(一一).).相关概念相关概念自身耐受自身耐受(self-tolerance)self-tolerance):正常情况下,免疫系统对宿主自身的组织和细胞不产生免疫应答的现象。自身免疫自身免疫(autoimmun
2、ity)autoimmunity):当某种原因使自身耐受破坏时,免疫系统对自身组织成分发生免疫应答的现象。产生低水平的自身抗体自身抗体或自身反应性自身反应性T T淋巴细胞淋巴细胞。第4页/共116页胚胎期单一祖先细胞分化后形成可识别各种抗原胚胎期单一祖先细胞分化后形成可识别各种抗原的淋巴细胞克隆。的淋巴细胞克隆。胚胎期与抗原接触的淋巴细胞自身可被破坏或抑胚胎期与抗原接触的淋巴细胞自身可被破坏或抑制,成为禁忌克隆。制,成为禁忌克隆。第5页/共116页自身免疫病自身免疫病 :(autoimmune diseasesautoimmune diseases,AIDAID)是指机体对自身成分发生免疫反应
3、而导致的疾病。是由自身抗体或(和)自身反应性T淋巴细胞介导的自身免疫应答。l自身抗体:是指抗自身组织,器官、细胞及细胞成分的抗体。在自身免疫性疾病患者的血中可检测出。第6页/共116页1.可有诱因,也可无诱因,但多数病因不清;2.患者以女性居多,并随年龄增加发病率增加;3.有遗传趋向;4.血清中有自身抗体或自身反应性淋巴细胞。自身抗体在不同的自身免疫病中有交叉和重叠现象。(二二).).共同特征:共同特征:第7页/共116页6.病程较长,多反复发作和慢性迁延。7.在体外可复制出相关动物病理模型。8.免疫抑制剂如激素类药物治疗,可取得较好的疗效。(二二).).共同特征:共同特征:5.疾病的重叠现象
4、,即一个病人可同时患一种以上的自身免疫病。第8页/共116页(三三).).分类分类病名自身抗原器官特异性桥本甲状腺炎桥本甲状腺炎甲状腺蛋白、甲状腺蛋白、甲状腺微粒体甲状腺微粒体甲状腺功能亢进甲状腺功能亢进TSHTSH受体受体重症肌无力重症肌无力乙酰胆碱受体乙酰胆碱受体自身免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性贫血 红细胞红细胞非器官特异性系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮细胞核细胞核类风湿性关节炎类风湿性关节炎变性变性IgGIgG第9页/共116页一、自身抗原的出现二、免疫调节异常三、Fas/FasL表达异常四、遗传因素第二节第二节 自身免疫性疾病的发病机制自身免疫性疾病的发病机制第10页/共116页一、
5、自身抗原出现 一系列因生物、物理、化学因素引起的自身组织结构与成分发生改变,并能引起机体免疫系统针对这些成分产生免疫应答的抗原物质。(1).隐蔽抗原释放甲状腺球蛋白抗原 桥本甲状腺炎精子抗原 男性不育眼晶体蛋白 过敏性眼炎第11页/共116页一、自身抗原出现(2).自身抗原性质改变 药物刺激药改变血细胞抗原性自身免疫性贫血自身免疫性贫血/血小板减少性紫癜血小板减少性紫癜变性IgG 抗变性IgG抗体(类风湿因子)变性IgG-RF复合物沉积于关节滑膜类风湿性关节炎类风湿性关节炎第12页/共116页一、自身抗原出现(3).共同抗原引发的交叉反应A型溶血性链球菌与人肾小球基底膜有共同抗原决定簇肾小球肾
6、炎肾小球肾炎柯萨奇病毒感染产生免疫应答可攻击胰岛的细胞糖尿病糖尿病第13页/共116页二、免疫应答和免疫调节异常 (1).多克隆刺激剂的旁路活化 EB病毒和超抗原激活HhB细胞抗体(2).T细胞旁路活化 (3).辅助分子表达异常自身反应性T细胞(4).Th1细胞和Th2细胞功能失衡1型糖尿病SLE第14页/共116页5 5)、)、Fas/FasLFas/FasL表达异常表达异常Fas普遍表达于多种细胞包括淋巴细胞表面。FasL通常出现于活化的T细胞(如CTL)和NK细胞膜上,也可以游离形式存在。动动物物实实验验证证明明:如如果果FasFas基基因因和和FasLFasL基基因因发发生生突突变变,
7、引引起起自身免疫病。自身免疫病。第15页/共116页三、生理因素三、生理因素年龄因素:年龄 发病率性别因素:某些疾病女性更易患病。第16页/共116页四、遗传因素四、遗传因素1、自身免疫性疾病中发现疾病特异的基因。类风湿性关节炎编码促皮质激素基因1型糖尿病染色体6q27的IDDM82、研究发现多种自身免疫性疾病的发生率与HLA的某些基因型的检出率呈正相关。第17页/共116页HLAHLA与自身免疫病的关系与自身免疫病的关系病名抗原相对危险值SLEDR35.8类风湿关节炎DR44.2桥本甲状腺炎DR53.2恶性贫血DR55.4第18页/共116页第三节常见自身免疫病第三节常见自身免疫病AID是由
8、自身抗体自身抗体和/或自身反应性自身反应性T T细胞细胞攻击破坏自身细胞和组织所致。一、型超敏反应:自身抗体+细胞性抗原二、型超敏反应:自身抗原-抗体复合物介导三、型超敏反应:自身反应性T细胞介导第19页/共116页(一)(一)II II型超敏反应细胞损伤机制型超敏反应细胞损伤机制第20页/共116页1产生抗血细胞表面抗原抗体:产生抗血细胞表面抗原抗体:自身免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性贫血 自身免疫性血小板减少性紫癜自身免疫性血小板减少性紫癜2产生抗细胞表面受体抗体:产生抗细胞表面受体抗体:Graves病病(甲状腺亢进病)(甲状腺亢进病)重症肌无力重症肌无力(MG)3产生抗细胞外抗原的自身
9、抗体产生抗细胞外抗原的自身抗体 肺出血肾炎综合征(肺出血肾炎综合征(Goodpastures nephritis)抗基底膜抗基底膜型胶原型胶原相关疾病相关疾病第21页/共116页Graves disease抗受体抗体第22页/共116页重症肌无力(MG)抗乙酰胆碱受体抗体第23页/共116页(二)型超敏反应发生的机制第24页/共116页系统性红斑狼疮(SLE)类风湿性关节炎(RA)相关疾病第25页/共116页Systemic lupus erythematosusSLEImmunofluorescent detection ofantinuclear antibody in the serum
10、 of an SLE patient第26页/共116页Rheumatoid arthritisRACharacterized by the presence of rheumatoid factor(antibodies against IgG)第27页/共116页(三)(三)型超敏反应型超敏反应发生机制发生机制第28页/共116页相关疾病相关疾病胰岛素依赖性糖尿病多发性硬化症第29页/共116页第四节自身免疫病的检测自身抗体的检测免疫球蛋白检测补体检测淋巴细胞检测细胞因子检测第30页/共116页一、自身抗体抗自身组织,器官、细胞及细胞成分的抗体。高效价自身抗体是自身免疫性疾病的特点之一,也
11、是临床确诊自身免疫性疾病的重要标志。每种自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗体谱。第31页/共116页常见自身抗体及检测与RA相关自身抗体:类风湿因子(RF)、抗角蛋白抗体(AKA)抗环瓜氨酸肽抗体(抗)抗核抗体(ANA)抗DNA抗体抗ENA抗体与小血管炎相关的自身抗体:抗中性粒细胞胞质抗体、抗磷脂抗体第32页/共116页一).类风湿因子(RF)是一种抗人或动物 IgG 分子 Fc 片段抗原决定簇的抗体,是以变性 IgG 为靶抗原的自身抗体。类型:以IgM型为主。它与天然IgG结合能力较差,易与变性IgG或免疫复合物中的IgG 结合。第33页/共116页检测方法胶乳颗粒凝集试验:速率散射比浊法:
12、ELISA:定性或半定量、灵敏度和特异性不高、只能检测IgM型快速可定量、准确度和敏感性高于前者、只能检测IgM型特异性、敏感性、重复性均好可检测不同类型第34页/共116页临床意义RF者中阳性检出率达到79.6%,其滴度与症状相关,但不能作诊断RA的唯一标准;但在其它自身免疫性疾病(SLE、硬皮病等)及部分老年人RF阳性;但RF阴性不能排除RA的诊断。第35页/共116页IgM型:血清中RF效价80IU/ml并伴有严重关节功能障碍,提示预后不良。IgG型:滑膜液中检出IgG型RF比血清中IgM型RF更有意义;IgA型:血清或滑膜液中检出是RF活动的指标之一。第36页/共116页几种疾病时RF
13、的检出率疾病阳性率(%)类风湿性关节炎79系统性红斑狼疮30干燥综合征95硬皮病80皮肌炎80混合性结缔组织病25第37页/共116页又称抗丝集蛋白抗体(AFA)或抗角质层抗体(ASCA)。主要见于RA患者,其阳性率低为36-59%,特异性高可达95-99%。在非类风湿性关节炎的自免病AKA阳性检出率极低。二).抗角蛋白抗体(AKA)第38页/共116页检测方法间接免疫荧光法以大鼠食管中段粘膜组织切片作为反应基质。第39页/共116页临床意义AKA先于疾病的临床表现,可用于RA的早期诊断。AKA是判断RA愈后的一个标志性抗体,高效价AKA的RA患者,常提示疾病较为严重。敏感性较低,阴性不能排除
14、的诊断。可与联合检测,提高对的诊断但二者很少平行出现第40页/共116页1998年Schellekens和Girbal Neuhause等证实瓜氨酸是RA患者血清中特异的抗中间丝相关蛋白(filaggrin)抗体识别的主要组成性抗原决定簇成分。合成环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide,CCP),以此为抗原基质用ELISA法检测RA患者血清中的抗环瓜氨酸肽抗体。三).抗环瓜氨酸肽抗体(抗)第41页/共116页是类风湿性关节炎(RA)的一种高度敏感和特异的新指标。自2002年3月欧洲诊断试剂公司(EURO-DIAGNOSTICA)推出世界上第一个抗CCP诊断试剂盒以
15、来,越来越多的专家认为抗CCP抗体将成为RA早期诊断的金标准。三).抗环瓜氨酸肽抗体(抗)第42页/共116页检测方法法技术指标技术指标价格价格人抗环胍氨酸肽抗体(人抗环胍氨酸肽抗体(CCP)试剂盒;)试剂盒;Human anti-cyclic citrullinated peptide,CCP Elisa Kit;规格:;规格:96T3680.00第43页/共116页临床意义该抗体比RF具有更高的特异性(抗CCP抗体:97%,RF:62%),而敏感性相当(抗CCP抗体:80%,RF:79%)。抗CCP在疾病早期可出现阳性,并有很高的阳性预期值(91%)。抗CCP抗体在RA早期患者中的阳性率为
16、79%,因而RA的早期诊断并及时开始恰当的治疗对控制病情非常重要。第44页/共116页四).抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称;主要是 IgG、也有 IgM、IgA 和 IgD;它无器官特异性和种属特异性,故该类抗体可与所有动物的细胞核发生反应。第45页/共116页在大部分自身免疫病呈阳性,但正常老年人有低效价的ANA。细胞核成分复杂,因此产生许多ANA,不同的自身免疫病可形成不同的特征性抗体谱。ANA分类:抗DNA抗体抗组蛋白抗体抗非组蛋白抗体抗核仁抗体第46页/共116页间接免疫荧光法(indirect
17、 immunofluorescence,IIF)作为总 ANA 筛选的经典试验;可以小鼠肝细胞印片作为抗原底物片,目前最常用Hep-2 细胞(核质丰富)作为抗原。不同的荧光核型,提示不同的自身免疫性疾病。第47页/共116页培养 Hep-2 细胞作为底物固定于载玻片上;加受检血清:血清中 ANA 与核抗原结合,形成抗原-抗体复合物;加 FITC 标记的抗人 IgG:形成标记抗体-抗原-抗体复合物;荧光显微镜下观察结果:在底物片上 ANA 荧光着染强度和免疫荧光图形。操作过程:第48页/共116页均质型包括:抗抗体抗组蛋白抗体抗dsDNA抗体高效价:SLE低效价:RA第49页/共116页斑点型高
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