艾滋病实验室检查.pptx

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1、1实 验 室 检 查第1页/共19页2免疫学检测流式细胞仪测定流式细胞仪测定流式细胞仪测定流式细胞仪测定第2页/共19页3血清学检测（）HIV抗体的初筛试验抗体的初筛试验ELISA（酶联免（酶联免疫试验）疫试验）第3页/共19页4血清学检测血清学检测（）（）HIV抗体的确证试验抗体的确证试验Western blot（免疫印迹（免疫印迹试验）试验）第4页/共19页5血清学检测（）HIV抗原检测抗原检测ELISA夹心法夹心法测定测定p24p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特异性稍差（可有假阳性特异性稍差（可有假阳性）第5页/共19页6分子生物学检测（1）

2、HIV RNA检测检测RT-PCR（逆转录（逆转录-聚合酶链反应）聚合酶链反应）PCRPCR：高温变性：高温变性(94)(94)低温退火低温退火(55)(55)适温延伸适温延伸(72)(72)；经；经25302530个循环，成倍数扩增个循环，成倍数扩增荧光定量荧光定量PCRPCR：比常规：比常规PCRPCR多一个寡聚多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）和一个荧光淬灭分子）应用：应用：PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA；RT-PCRRT-PCR查血浆中的病毒查血浆中的病毒RNARNA第6页/共19页7分子生物学检测（

3、2 2）淋巴细胞淋巴细胞HIV RNA检测检测Northern印迹杂交印迹杂交(Northern blot)原理：原理：RNARNA片段经电泳分片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂纤维素滤膜，再用探针杂交交第7页/共19页8分子生物学检测（3）HIV变异株检测变异株检测Sanger测序法测序法 原理：核酸扩增时，核苷酸在原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一某一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生特定的碱基处终止，产生A A、T T、C C、G G四组不同长度的一系列四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的核苷酸，通过在尿素变

4、性的PAGEPAGE胶上电泳，获得胶上电泳，获得DNADNA序列序列第8页/共19页9病毒检测血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV操作复杂，主要用于科研第9页/共19页10诊 断第10页/共19页11诊断原则流行病学史：有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活史；输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史；HIV抗体阳性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。临床表现：高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现，颈、腋及枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。无症状期、艾滋病期临床表现。实验室检查：HIV抗体阳性，并经确证试验确认。CD4+T淋巴细胞数明显减少。HIV RNA和P24抗原

5、的检测有助于早期诊断新生儿的HIV感染。第11页/共19页12诊断标准急性期 流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性 仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性无症状期 流行病学史、HIV抗体阳性 仅实验室检查HIV抗体阳性 第12页/共19页13诊断标准艾滋病期 流行病学史，HIV抗体阳性，临床表现有下列一项或以上：1.1.1.1.短期（短期（短期（短期（6 6 6 6个月内）体重下降个月内）体重下降个月内）体重下降个月内）体重下降10101010以上；以上；以上；以上；2.2.2.2.咳嗽或腹咳嗽或腹咳嗽或腹咳嗽或腹泻超过泻超过泻超过泻超过4 4 4 4周；周；周；周；3.3.3.3.持

6、续或间歇发热超过持续或间歇发热超过持续或间歇发热超过持续或间歇发热超过4 4 4 4周；周；周；周；4.4.4.4.全身淋全身淋全身淋全身淋巴结肿大；巴结肿大；巴结肿大；巴结肿大；5.5.5.5.反复带状疱疹或慢性播散性反复带状疱疹或慢性播散性反复带状疱疹或慢性播散性反复带状疱疹或慢性播散性HSVHSVHSVHSV感染；感染；感染；感染；6.6.6.6.口咽念珠菌病；口咽念珠菌病；口咽念珠菌病；口咽念珠菌病；7.7.7.7.全身搔痒性皮炎；全身搔痒性皮炎；全身搔痒性皮炎；全身搔痒性皮炎；8.8.8.8.反复发生反复发生反复发生反复发生的败血症；的败血症；的败血症；的败血症；9.9.9.9.深部

7、真菌感染，马尔尼非青霉菌；深部真菌感染，马尔尼非青霉菌；深部真菌感染，马尔尼非青霉菌；深部真菌感染，马尔尼非青霉菌；10.10.10.10.肺孢子虫肺炎；肺孢子虫肺炎；肺孢子虫肺炎；肺孢子虫肺炎；11.11.11.11.活动性巨细胞病毒感染；活动性巨细胞病毒感染；活动性巨细胞病毒感染；活动性巨细胞病毒感染；12.12.12.12.弓弓弓弓形虫脑病。形虫脑病。形虫脑病。形虫脑病。13.13.13.13.反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性结核病；14.14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、青年痴呆症；15.15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。第13页/共19页14诊断标准 HIV抗体阳性抗体阳性

8、CD4+T淋巴细胞数淋巴细胞数200/mm200/mm3 3 无上述表现或症状无上述表现或症状第14页/共19页15鉴别诊断原发性CD4+淋巴细胞减少症 无HIV感染流行病学资料，HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。继发性CD4+淋巴细胞减少 肿瘤和自生免疫性疾病（autoimmune disease）化疗或免疫抑制治疗后。第15页/共19页16预 后第16页/共19页17影响预后的因素感染的HIV型别及亚型：HIV-1较HIV-2临床进展快并发的机会性感染：同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高；合并丙型肝炎者预后差抗逆转录病毒治疗：治疗改变了艾滋病进程 第17页/共19页18HIVHIV感染未治疗者的结局感染未治疗者的结局典型(70%80%)：510年进展为艾滋病快速进展型(10%15%)：23年长期无进展型(500/mm3，病毒载量103拷贝/ml长期存活型(极少)：进展到艾滋病期后能稳定较长一段时间 第18页/共19页感谢您的观看！第19页/共19页