药物分析湖南大学胺类药物分析.pptx

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1、第一节第一节 芳胺类药物的分析芳胺类药物的分析芳胺类药物的基本结构类型：芳胺类药物的基本结构类型：芳伯氨基未被取代，在芳环对位有取代芳伯氨基未被取代，在芳环对位有取代的对氨基苯甲酸酯类；的对氨基苯甲酸酯类；芳伯氨基被酰化，在芳环对位有取代的芳伯氨基被酰化，在芳环对位有取代的酰胺类。酰胺类。第1页/共100页1对氨基苯甲酸酯类药物的结构与性质对氨基苯甲酸酯类药物的结构与性质1.基本结构基本结构均具有对氨基苯甲酸酯的母体均具有对氨基苯甲酸酯的母体COOR2R1NH第2页/共100页2.典型药物典型药物（苯佐卡因）（苯佐卡因）H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2 HCl（盐酸普鲁卡因）（盐酸普鲁

2、卡因）第3页/共100页（盐酸丁卡因）（盐酸丁卡因）（盐酸普鲁卡因胺）（盐酸普鲁卡因胺）H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2 HCl（盐酸氯普鲁卡因）（盐酸氯普鲁卡因）Cl第4页/共100页3.3.主要性质主要性质芳芳伯伯氨氨基基特特性性：本本类类药药物物得得结结构构中中具具有有芳芳伯伯氨氨基基（除除盐盐酸酸丁丁卡卡因因外外），显显重重氮氮化化-偶偶合合反反应应；与芳醛缩合成与芳醛缩合成SchiffSchiff碱反应；易氧化变色。碱反应；易氧化变色。水水解解特特性性：分分子子结结构构中中的的含含有有酯酯键键（或或酰酰胺胺键键），易水解。，易水解。弱弱碱碱性性：分分子子结结构构中中具具有有叔

3、叔胺胺氮氮原原子子（除除苯苯佐佐卡卡因因外外），具具弱弱碱碱性性；能能与与生生物物碱碱沉沉淀淀剂剂发发生生沉淀反应，只能在非水溶剂体系中滴定。沉淀反应，只能在非水溶剂体系中滴定。其其他他特特性性：多多为为碱碱性性油油状状液液体体或或低低熔熔点点固固体体，难难溶溶于于水水，可可溶溶于于有有机机溶溶剂剂；其其盐盐酸酸盐盐易易溶溶于于水和乙醇，难溶于有机溶剂。水和乙醇，难溶于有机溶剂。第5页/共100页第6页/共100页2酰胺类药物的结构与性质酰胺类药物的结构与性质1.基本结构基本结构均具有芳酰胺基均具有芳酰胺基第7页/共100页2.典型药物典型药物（对乙酰氨基酚，（对乙酰氨基酚，paracetam

4、ol）（醋氨苯砜）（醋氨苯砜）第8页/共100页(盐酸利多卡因盐酸利多卡因)(盐酸布比卡因盐酸布比卡因)第9页/共100页(盐酸罗哌卡因盐酸罗哌卡因)NHCONC3H7CH3CH3HClNHCNH2CH3CH3HClCOCH3(盐酸妥卡尼盐酸妥卡尼)第10页/共100页3.3.主要性质主要性质水水解解后后显显芳芳伯伯氨氨基基特特性性：本本类类药药物物的的结结构构中中具具有有芳芳酰酰胺胺基基，在在酸酸性性溶溶液液中中易易水水解解为为芳芳伯伯氨氨基基化合物。化合物。水水解解产产物物易易酯酯化化：对对乙乙酰酰氨氨基基酚酚和和醋醋氨氨苯苯砜砜，水水解解后后产产生生醋醋酸酸，在在硫硫酸酸介介质质中中与与

5、乙乙醇醇反反应应，发出醋酸乙酯的香味。发出醋酸乙酯的香味。酚酚羟羟基基特特性性：对对乙乙酰酰氨氨基基酚酚具具有有酚酚羟羟基基，与与FeClFeCl3 3发生呈色反应。发生呈色反应。第11页/共100页3.3.主要性质（续）主要性质（续）弱弱碱碱性性：利利多多卡卡因因、布布比比卡卡因因、罗罗哌哌卡卡因因含含有有叔叔胺胺氮氮原原子子，妥妥卡卡尼尼结结构构中中有有伯伯胺胺氮氮原原子子，显显碱性，可以成盐。碱性，可以成盐。与与重重金金属属离离子子发发生生沉沉淀淀反反应应：盐盐酸酸利利多多卡卡因因、盐盐酸酸布布比比卡卡因因、盐盐酸酸罗罗哌哌卡卡因因、盐盐酸酸妥妥卡卡尼尼分分子子结结构构中中的的酰酰胺胺基

6、基上上的的氮氮可可在在水水溶溶液液中中与与铜铜离离子子或或钴钴离离子子配配位位，生生成成有有色色的的配配位位化化合合物物沉沉淀淀，沉淀可溶于三氯甲烷等有机溶剂后呈色。沉淀可溶于三氯甲烷等有机溶剂后呈色。第12页/共100页1.1.重氮化重氮化-偶合反应偶合反应 具具有有芳芳伯伯氨氨基基或或潜潜在在芳芳伯伯氨氨基基的的药药物物，均均可可发发生生重重氮氮化化反反应应，生生成成的的重重氮氮盐盐可可与与碱碱性性-萘酚偶合生成有色的偶氮染料。萘酚偶合生成有色的偶氮染料。ArNH2HClNaNO2重氮盐3鉴别试验鉴别试验 第13页/共100页直接重氮化反应：直接重氮化反应：盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁

7、卡因胺盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 Ch.PCh.P（20052005）【鉴鉴别别】取取供供试试品品约约50mg50mg，加加稀稀盐盐酸酸1m11m1，必必要要时时缓缓缓缓煮煮沸沸使使溶溶解解，放放冷冷，加加0.1mo1/L0.1mo1/L亚亚硝硝酸酸钠钠溶溶液液数数滴滴，滴滴加加碱碱性性-萘萘酚酚试试液液数数滴滴，视视供供试试品品不不同同，生生成成由由橙黄到猩红色沉淀。橙黄到猩红色沉淀。例例第14页/共100页 间接间接(加热水解后加热水解后)重氮化反应：重氮化反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜对乙酰氨基酚、醋氨苯砜例例对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 ChPChP（20

8、052005）【鉴鉴别别】取取本本品品约约0.1g0.1g，加加稀稀盐盐酸酸5m15m1，置置水水浴浴中中加加热热4040分分钟钟，放放冷冷；取取0.5m10.5m1，滴滴加加亚亚硝硝酸酸钠钠试试液液5 5滴滴，摇摇匀匀，用用水水3ml3ml稀稀释释后后，加加碱碱性性-萘萘酚酚试试液液2m12m1，振振摇，即显红色。摇，即显红色。第15页/共100页盐酸丁卡因：盐酸丁卡因：不不具具芳芳伯伯氨氨基基，无无重重氮氮化化反反应应；其其分分子子结结构构中中的的芳芳香香仲仲胺胺在在酸酸性性溶溶液液可可与与NaNONaNO2 2反反应应生生成成乳乳白白色色沉沉淀淀,可与芳伯氨基的同类药物区别。可与芳伯氨基

9、的同类药物区别。（乳白色）（乳白色）盐酸丁卡因盐酸丁卡因+H H+NaNO+NaNO2 2第16页/共100页2.2.与三氯化铁反应与三氯化铁反应 对对乙乙酰酰氨氨基基酚酚具具有有酚酚羟羟基基，可可直直接接与与三三氯氯化化铁铁试试液反应显蓝紫色液反应显蓝紫色。3.3.与重金属离子反应与重金属离子反应 与铜和钴离子反应与铜和钴离子反应 +亮绿色细小钴盐亮绿色细小钴盐盐酸利多卡因盐酸利多卡因H HCoClCoCl2 2显黄色显黄色蓝紫色蓝紫色硫酸铜硫酸铜盐酸利多卡因盐酸利多卡因氯仿氯仿碳酸钠碳酸钠+第17页/共100页羟肟酸铁盐反应羟肟酸铁盐反应 棕黑色）棕黑色）暗棕色暗棕色羟肟酸铁（紫红色羟肟酸

10、铁（紫红色羟肟酸羟肟酸盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺+FeClFeCl3 3+H+H2 2O O2 2与汞离子的反应与汞离子的反应 显黄色显黄色盐酸利多卡因盐酸利多卡因HNOHNO3 3+Hg(NO+Hg(NO3 3)2 2红色或橙黄色红色或橙黄色对氨基苯甲酸酯类对氨基苯甲酸酯类HNOHNO3 3+Hg(NO+Hg(NO3 3)2 2区别于：区别于：第18页/共100页4.水解产物的反应水解产物的反应本本类类药药物物分分子子中中有有些些具具有有酯酯键键结结构构，在在碱碱性性条条件下可水解，利用水解产物的特性可进行鉴别。件下可水解，利用水解产物的特性可进行鉴别。盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChPCh

11、P（20052005）【鉴鉴别别】取取本本品品约约0.1g0.1g，加加水水2ml2ml溶溶解解后后，加加1010氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液1ml1ml，即即生生成成白白色色沉沉淀淀；加加热热，变变为为油油状状物物；继继续续加加热热，产产生生的的蒸蒸气气，能能使使湿湿润润的的红红色色石石蕊蕊试试纸纸变变为为蓝蓝色色；热热至至油油状状物物消消失失后后，放放冷冷，加加盐酸酸化，即析出白色沉淀。盐酸酸化，即析出白色沉淀。例例1第19页/共100页）对氨基苯甲酸（白色对氨基苯甲酸（白色对氨基苯甲酸钠对氨基苯甲酸钠+HCl+HCl纸变兰色）纸变兰色）（使湿润的红色石蕊试（使湿润的红色石蕊试+二乙氨基乙醇二

12、乙氨基乙醇对氨基苯甲酸钠对氨基苯甲酸钠油状物（油状物（普鲁卡因普鲁卡因）普鲁卡因普鲁卡因（白色（白色盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 +NaOH+NaOH）第20页/共100页苯佐卡因苯佐卡因 ChPChP（20052005）【鉴鉴别别】取取本本品品约约0.1g0.1g，加加氢氢氧氧化化钠钠试试液液5m15m1，煮煮沸沸，即即有有乙乙醇醇生生成成；加加碘碘试试液液，加加热热，即即生生成成黄黄色色沉淀，并发生碘仿的臭气。沉淀，并发生碘仿的臭气。）（碘仿臭气，黄色（碘仿臭气，黄色乙醇乙醇 CHICHI3 3NaOHNaOH+I+I2 2+乙醇乙醇苯佐卡因苯佐卡因+NaOH+NaOH例例2第21页/共100

13、页5.制备衍生物测熔点制备衍生物测熔点三硝基苯酚衍生物三硝基苯酚衍生物盐酸布比卡因可用同法鉴别盐酸布比卡因可用同法鉴别盐酸利多卡因盐酸利多卡因 ChPChP（20052005）【鉴鉴别别】取取本本品品0.2g0.2g，加加水水20ml20ml溶溶解解。取取溶溶液液10ml10ml，加加三三硝硝基基苯苯酚酚试试液液10ml10ml，即即生生成成沉沉淀淀；滤滤过过，沉沉淀淀用用水水洗洗涤涤后后，干干燥燥，依依法法测测定定，熔熔点点为为228228232232，熔融时同时分解。，熔融时同时分解。例例第22页/共100页硫氰酸盐衍生物硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因盐酸丁卡因 ChPChP（20052005

14、）【鉴鉴别别】取取本本品品约约0.1g0.1g，加加5%5%醋醋酸酸钠钠溶溶液液10ml10ml溶溶解解后后，加加25%25%硫硫氰氰酸酸铵铵溶溶液液1ml1ml，即即析析出出白白色色结结晶晶；滤滤过过，结结晶晶用用水水洗洗涤涤，在在8080干干燥燥，依依法法测测定定，熔熔点点约为约为131131。例例第23页/共100页6.紫外分光光度法紫外分光光度法本本类类药药物物结结构构中中含含有有苯苯环环，具具有有紫紫外外吸吸收光谱特征，可用于鉴别。收光谱特征，可用于鉴别。盐酸布比卡因盐酸布比卡因 ChPChP（20052005）【鉴鉴别别】取取本本品品，精精密密称称定定，按按干干燥燥品品计计算算，加

15、加0.01mol/L0.01mol/L盐盐酸酸溶溶液液制制成成每每1ml1ml中中含含0.40mg0.40mg的的溶溶液液，照照分分光光光光度度法法测测定定，在在263nm263nm与与271nm271nm的的波波长长处处有有最最大大吸吸收收；其其吸吸收收度度分分别别为为0.530.530.580.58与与0.430.430.480.48。例例1第24页/共100页4特殊杂质检查特殊杂质检查1.1.对乙酰氨基酚的特殊杂质检查对乙酰氨基酚的特殊杂质检查 合成工艺合成工艺对硝基氯苯对硝基氯苯对硝基酚对硝基酚水解水解对氨基酚对氨基酚还原还原对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚乙酰化乙酰化杂质：杂质：铁粉（还原剂

16、）、对氨基酚（中间体）及其铁粉（还原剂）、对氨基酚（中间体）及其 有色氧有色氧化产物、对氯苯乙酰胺（副产物）等化产物、对氯苯乙酰胺（副产物）等第25页/共100页乙醇溶液的澄清度与颜色检查乙醇溶液的澄清度与颜色检查残残留留还还原原剂剂铁铁粉粉致致使使乙乙醇醇溶溶液液产产生生浑浑浊浊，中中间间体体对对氨氨基基酚酚的的有有色色氧氧化化产产物物在在乙乙醇醇中中显显橙橙红红色色或棕色。或棕色。有关物质有关物质包包括括中中间间体体、副副产产物物及及分分解解产产物物，如如：对对氨氨基基酚、对氯苯乙酰胺、偶氮苯等。酚、对氯苯乙酰胺、偶氮苯等。中中国国药药典典（20052005）采采用用薄薄层层色色谱谱法法，

17、以以对对氯苯乙酰胺为对照品，进行限量检查。氯苯乙酰胺为对照品，进行限量检查。第26页/共100页有关物质检查（对照法有关物质检查（对照法 ）【鉴别鉴别】供供试试品品溶溶液液：取取本本品品1.0g1.0g，置置具具塞塞离离心心管管中中，加加乙乙醚醚5ml5ml，密塞振摇，密塞振摇30min30min，离心后取上清液；，离心后取上清液；对对照照品品溶溶液液：取取每每1ml1ml含含对对氯氯苯苯乙乙酰酰胺胺1.0mg1.0mg的的乙乙醇醇溶液适量，用乙醚稀释成每溶液适量，用乙醚稀释成每1ml1ml含含5050 g g的溶液；的溶液；薄层板：薄层板：硅胶硅胶GF254GF254；点样量：点样量：供试品

18、溶液供试品溶液200 200 l l，对照液，对照液40 40 l l；展开剂：展开剂：三氯甲烷三氯甲烷-丙酮丙酮-甲苯（甲苯（13:5:213:5:2）；）；判断：判断：供试品的杂质斑点不得比对照品主斑点更深。供试品的杂质斑点不得比对照品主斑点更深。例例第27页/共100页对氨基酚对氨基酚使使本本品品产产生生色色泽泽并并对对人人体体有有毒毒性性，应应严严格格控控制制其限量。其限量。兰色配位化合物兰色配位化合物+亚硝基铁氰化钠亚硝基铁氰化钠对氨基酚对氨基酚-OHOH对氨基酚检查（对照法对氨基酚检查（对照法 ）【鉴鉴别别】取取本本品品1.0g1.0g，加加甲甲醇醇溶溶液液（1212）20ml20

19、ml溶溶解解后后，加加碱碱性性亚亚硝硝基基铁铁氰氰化化钠钠试试液液1m11m1，摇摇匀匀，放放置置30min30min；如如显显色色，与与对对乙乙酰酰氨氨基基酚酚对对照照品品1.0g1.0g加加对对氨氨基基酚酚5050 g g用用同同一一方方法法制制成成的的对对照照液液比比较较，不不得更深（得更深（0.0050.005）。）。例例第28页/共100页2.2.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查的检查 杂质来源杂质来源盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸酯键酯键水解水解苯胺苯胺二乙胺基乙醇二乙胺基乙醇+脱羧脱羧有色物质苯醌有色物质苯醌氧化氧化使注射液

20、变黄，疗效下降，毒性增加使注射液变黄，疗效下降，毒性增加第29页/共100页对氨基苯甲酸的检查（对照法）对氨基苯甲酸的检查（对照法）【鉴别鉴别】供试品溶液：供试品溶液：精密量取本品，加乙醇稀释使成为每精密量取本品，加乙醇稀释使成为每 1ml1ml中含盐酸普鲁卡因中含盐酸普鲁卡因2.5mg2.5mg的溶液；的溶液；对照品溶液：对照品溶液：取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成 每每1ml1ml中含中含3030 g g的溶液；的溶液；薄薄层层板板：含含羧羧甲甲基基纤纤维维素素钠钠粘粘合合剂剂的的硅硅胶胶 H H薄薄 层层 板；板；展开剂：展开剂：苯苯-冰醋酸冰醋酸-丙酮丙

21、酮-甲醇（甲醇（14:1:1:414:1:1:4）;例例第30页/共100页对氨基苯甲酸的检查（续）对氨基苯甲酸的检查（续）点样量：点样量：上述两种溶液各上述两种溶液各10 10 l l；显色剂：显色剂：对二甲氨基苯甲醛溶液对二甲氨基苯甲醛溶液 （2 2对对二二甲甲氨氨基基苯苯甲甲醛醛乙乙醇醇溶溶液液 1 10 00 0m m l l，加冰醋酸加冰醋酸5ml5ml制成）；制成）；判断：判断：供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑 点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得 更深。更深。例例第31页/共100页3.3.盐酸氯

22、普鲁卡因注射液中有关物质和盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查光解产物的检查 杂质来源杂质来源盐酸氯普鲁卡因盐酸氯普鲁卡因水解水解4-氨基氨基-2-氯苯甲酸氯苯甲酸光照光照盐酸羟基普鲁卡因盐酸羟基普鲁卡因第32页/共100页高效液相色谱高效液相色谱-质谱联用法质谱联用法色谱条件色谱条件色谱柱：色谱柱：Zobax SB-CZobax SB-C1818柱；柱；柱温：柱温：2525流动相：流动相：0.5%0.5%乙酸水溶液乙酸水溶液-0.5%-0.5%乙酸乙腈（乙酸乙腈（87:1387:13）；）；流速：流速：1ml/min1ml/min；检测波长：检测波长：254nm254nm质谱条件质

23、谱条件裂解电压：裂解电压：70V70V；喷雾电压：；喷雾电压：4000V;4000V;干燥温度：干燥温度：350 350 干燥气（干燥气（N2N2）流速和压力：）流速和压力：9.5L/min9.5L/min，40psi40psi；检测方法：检测方法：正离子模式；正离子模式；质量扫描范围：质量扫描范围：8080 160160例例第33页/共100页4.4.盐酸罗哌卡因的对映体纯度检查盐酸罗哌卡因的对映体纯度检查 具有一手性碳原子，存在二个对映异构体；具有一手性碳原子，存在二个对映异构体；R-R-盐盐酸酸罗罗哌哌卡卡因因的的心心脏脏毒毒性性较较大大，需需严严格格控控制制其含量；其含量；用用毛毛细细

24、管管电电泳泳法法进进行行盐盐酸酸罗罗哌哌卡卡因因对对映映体体的的纯纯度度检检查查，R-R-盐盐酸酸罗罗哌哌卡卡因因的的限限量量不不得得超超过过0.5%0.5%。NHCONC3H7CH3CH3HCl手性碳原子手性碳原子第34页/共100页电泳手性添加剂：环糊精电泳手性添加剂：环糊精第35页/共100页5含量测定含量测定1.1.亚硝酸钠滴定法亚硝酸钠滴定法 原理：原理：本本类类药药物物分分子子结结构构中中具具芳芳伯伯氨氨基基或或水水解解后后具具芳芳伯氨基，可用伯氨基，可用NaNONaNO2 2滴定法测定含量。滴定法测定含量。Ar-NHCOR+H2OAr-NH2+RCOOHH+Ar-NH2+H2OA

25、r-N2+Cl-+NaCl+2H2ONaNO2第36页/共100页测定条件：测定条件：a.a.加入适量加入适量KBrKBr加快反应速度加快反应速度l重氮化速度：氢溴酸重氮化速度：氢溴酸 盐酸盐酸 硝酸、硫酸硝酸、硫酸l氢溴酸昂贵，以溴化钾氢溴酸昂贵，以溴化钾+盐酸代替盐酸代替NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2OAr-NH2NO+Cl-Ar-NH-NO慢慢快快Ar-N=N-OHAr-N2+Cl-快快NONO+的浓度大，反应速度快的浓度大，反应速度快第37页/共100页KBr+HClHBr+KClHNO2+HBrNOBr+H2OK1HNO2+HClNOCl+H2OK

26、2K1300K2加入加入KBrKBr，可增大被测溶液中，可增大被测溶液中NONO+的的浓度，所以能加快重氮化反应速度浓度，所以能加快重氮化反应速度第38页/共100页b.b.加入过量盐酸加速反应加入过量盐酸加速反应l重氮化反应速度加快；重氮化反应速度加快；l重氮盐在酸性溶液中稳定；重氮盐在酸性溶液中稳定；l防止生成偶氮氨基化合物影响测定结果防止生成偶氮氨基化合物影响测定结果.Ar-N2+Cl-+H2N-ArAr-N=N-NH-Ar+HCl 盐酸的量盐酸的量l芳胺类药物芳胺类药物:盐酸盐酸=1:2.5=1:2.56 6；l酸度过大，妨碍芳伯氨基的游酸度过大，妨碍芳伯氨基的游离，还可使亚硝酸盐将分

27、解。离，还可使亚硝酸盐将分解。第39页/共100页c.c.反应温度反应温度l重氮化反应速度与温度成正比；重氮化反应速度与温度成正比；l重氮盐随温度升高而加速分解；重氮盐随温度升高而加速分解；l温温度度升升高高1010，重重氮氮化化反反应应速速度度加加快快2.52.5倍，重氮盐分解速度亦加速倍，重氮盐分解速度亦加速2 2倍倍Ar-N2+Cl-+H2OAr-OH+N2 +HCl一一般般在在室室温温（10103030）下下进进行行，1515以以下结果较准确。下结果较准确。第40页/共100页d.d.滴定速度（滴定速度（先快后慢）先快后慢）l重重氮氮化化反反应应速速度度较较慢慢，滴滴定定速速度度不不宜

28、宜太太快；快；l为为避避免免HNOHNO2 2的的挥挥发发和和分分解解，滴滴定定管管尖尖端端插插入入液液面面下下2/32/3处处，将将NaNONaNO2 2滴滴定定液液一一次次大大部分放下，使其尽快反应；部分放下，使其尽快反应；l在在近近终终点点时时，未未反反应应的的药药物物的的浓浓度度极极稀稀，须须在在加加入入最最后后一一滴滴后后，搅搅拌拌1 15min5min，再再确定是否达到终点。确定是否达到终点。第41页/共100页指示终点的方法指示终点的方法永停滴定法永停滴定法调调节节R R1 1使使电电极极上上电电压压约为约为50mV50mV；终终点点前前，溶溶液液中中无无亚亚硝硝酸酸，线线路路无

29、无电电流流，电流记指针指零；电流记指针指零；终终点点时时，溶溶液液中中有有微微量量亚亚硝硝酸酸存存在在，电电极极起起氧氧化化还还原原反反应应，线线路路中中有有电电流流通通过过，电电流流记记指指针针突突然然偏偏转转，不再回复，即为终点。不再回复，即为终点。电电流流记记R铂丝铂丝（永停滴定装置）（永停滴定装置）6070R1:2k1.5V1.5V干电池干电池第42页/共100页适用范围：适用范围：l具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定;l具具潜潜在在芳芳伯伯氨氨基基的的药药物物，如如具具酰酰胺胺基基药药物物（对对乙乙酰酰氨氨基基酚酚等等）经经水水解解，可可用用本本

30、法法测测定定;l芳香族硝基化合物经还原，也可用本法测定。芳香族硝基化合物经还原，也可用本法测定。第43页/共100页盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChPChP（20052005）取取本本品品约约0.6g0.6g，精精密密称称定定，照照永永停停滴滴定定法法，在在15152525，用用亚亚硝硝酸酸钠钠滴滴定定液液（0.1mol/L0.1mol/L）滴滴定定。每每1ml1ml亚亚硝硝酸酸钠钠滴滴定定液液（0.1mol/L0.1mol/L）相相当当于于27.28mg27.28mg的的C C1313H H2020N N2 2O O2 2HClHCl例例第44页/共100页2.2.非水溶液滴定法非水溶液滴定法

31、 原理：原理：本本类类药药物物的的盐盐酸酸丁丁卡卡因因、盐盐酸酸利利多多卡卡因因、盐盐酸酸妥妥卡卡尼尼和和盐盐酸酸布布比比卡卡因因的的分分子子结结构构含含有有弱弱碱碱性性氮原子，可用非水溶液滴定法测定含量。氮原子，可用非水溶液滴定法测定含量。方法方法:溶剂：溶剂：冰醋酸；冰醋酸；滴定液：滴定液：高氯酸（高氯酸（0.1mol/L0.1mol/L）指指示示剂剂：结结晶晶紫紫（盐盐酸酸丁丁卡卡因因、盐盐酸酸利利多多卡卡因因、盐酸妥卡尼），萘酚苯甲醇（盐酸布比卡因）盐酸妥卡尼），萘酚苯甲醇（盐酸布比卡因）第45页/共100页注意事项注意事项:本本类类药药物物均均为为盐盐酸酸盐盐，在在滴滴定定前前应应加

32、加入入醋醋酸酸汞溶液消除盐酸的干扰。汞溶液消除盐酸的干扰。+Hg(AC)2+HgCl2N H COCH2N(C2H5)2CH3CH3HAc22（盐酸利多卡因）（盐酸利多卡因）第46页/共100页+HClO4N H COCH2N(C2H5)2CH3CH3HAc+HAcN H COCH2N(C2H5)2CH3CH3HClO4第47页/共100页注意事项（续）注意事项（续）:滴滴定定盐盐酸酸丁丁卡卡因因时时，需需加加入入适适量量醋醋酸酸酐酐，解解离离生生成成的的醋醋酸酸酐酐合合乙乙酰酰氧氧离离子子可可增增强强丁丁卡卡因因的碱性，使滴定突跃敏锐。的碱性，使滴定突跃敏锐。终终点点颜颜色色：盐盐酸酸丁丁卡

33、卡因因（蓝蓝色色）、盐盐酸酸利利多多卡卡因因（绿绿色色）、盐盐酸酸妥妥卡卡尼尼（蓝蓝绿绿色色），盐盐酸布比卡因（绿色）。酸布比卡因（绿色）。2(CH3CO)2O(CH3CO)3O+CH3COO-第48页/共100页3.紫外分光光度法紫外分光光度法对对乙乙酰酰氨氨基基酚酚在在0.40.4氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液中中，于于257nm257nm波波长长处处有有最最大大吸吸收收，其其紫紫外外吸吸收收光光谱谱特特征征，可可用用于其原料及其制剂的含量测定。于其原料及其制剂的含量测定。对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 ChPChP（20052005）取取本本品品约约40mg40mg，精精密密称称定定，置置25ml2

34、5ml量量瓶瓶中中，加加0.40.4氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液50ml50ml溶溶解解后后，加加水水至至刻刻度度，摇摇匀匀，精精密密量量取取5m15m1，置置100ml100ml量量瓶瓶中中，加加0.40.4氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液10m110m1，加加水水至至刻刻度度，摇摇匀匀，在在257nm257nm的的波波长长处处测测定定吸吸收收度度，按按C C8 8H H9 9NONO2 2的的吸吸收收系系数数 为为715715计计算算，即得。即得。例例第49页/共100页原料药（吸收系数法）原料药（吸收系数法）A：吸光度；：吸光度；l：比色皿厚度：比色皿厚度V：体积；：体积；n：稀释倍数；：稀释倍数；

35、ms：称取量：称取量第50页/共100页4.高效液相色谱法高效液相色谱法具具有有较较强强的的分分离离能能力力，又又有有较较高高的的灵灵敏敏度度，适适用用于本类药物及其制剂的含量测定。于本类药物及其制剂的含量测定。对乙酰氨基酚泡腾片对乙酰氨基酚泡腾片 ChPChP（20052005）色谱条件色谱条件填充剂：填充剂：十八烷基硅烷键和硅胶十八烷基硅烷键和硅胶流动相：流动相：磷酸缓冲液磷酸缓冲液(pH4.5)-(pH4.5)-甲醇甲醇(80:20)(80:20)外标：外标：对乙酰氨基酚对照液（对乙酰氨基酚对照液（0.1mg/ml0.1mg/ml）,用用 流动相配制。流动相配制。检测波长：检测波长：25

36、4nm254nm；进样量：进样量：1010l l例例第51页/共100页1.1.盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（）盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（）A.A.重氮化重氮化-偶合反应偶合反应B.B.羟肟酸铁盐反应羟肟酸铁盐反应C.C.氧化反应氧化反应D.D.磺化反应磺化反应E.E.碘化反应碘化反应 自测题自测题第52页/共100页2.2.采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（）采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（）A.A.苯巴比妥苯巴比妥B.B.盐酸丁卡因盐酸丁卡因C C苯佐卡因苯佐卡因D.D.醋氨苯砜醋氨苯砜E.E.盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 第53页/共100页3.3.下下列列药药物物中中不不能能

37、用用亚亚硝硝酸酸钠钠滴滴定定法法测测定定含含量者（）量者（）A.A.乙酰水杨酸乙酰水杨酸B.B.对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠C.C.对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚D.D.普鲁卡因普鲁卡因E.E.苯佐卡因苯佐卡因 第54页/共100页4.4.亚硝酸钠滴定法中，加亚硝酸钠滴定法中，加KBrKBr的作用是（）的作用是（）A.A.添加添加BrBr-B.B.生成生成NONO+BrBr-C C生成生成HBrHBrD.D.生成生成BrBr2 2 E.E.抑制反应进行抑制反应进行 第55页/共100页5.5.中中国国药药典典（20052005年年）所所收收载载的的芳芳胺胺类类药药物物亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为

38、（）亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（）A.A.电位法电位法 B.B.永停法永停法C.C.外指示剂法外指示剂法 D.D.内指示剂法内指示剂法E.E.自身指示剂法自身指示剂法 第56页/共100页6.6.盐盐酸酸普普鲁鲁卡卡因因采采用用亚亚硝硝酸酸钠钠滴滴定定法法测测定定含含量时的反应条件是（量时的反应条件是（）6.6.A.A.强酸强酸7.7.B.B.加入适量溴化钾加入适量溴化钾8.8.C.C.室温（室温（10103030）下滴定）下滴定9.9.D.D.滴定管尖端深入液面，加入大部分滴定液滴定管尖端深入液面，加入大部分滴定液10.10.E.E.永停法指示终点永停法指示终点 第57页/共100页第

39、二节第二节 苯乙胺类药物的分析苯乙胺类药物的分析 1 1苯乙胺类药物的基本与性质苯乙胺类药物的基本与性质1.1.基本结构基本结构本类药物为拟肾上腺素类药物，具有苯乙胺本类药物为拟肾上腺素类药物，具有苯乙胺的基本结构。的基本结构。*R1CH CH NH R2OH R3（含苯环结构）（含苯环结构）第58页/共100页2.典型药物典型药物第59页/共100页第60页/共100页盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇第61页/共100页3.主要性质主要性质具具有有脂脂烃烃胺胺基基侧侧链链，其其中中氮氮为为仲仲胺胺氮氮，显显弱弱碱性；碱性；游游离离碱碱难难溶溶于于水水，易易溶溶于于有有机机溶溶

40、剂剂，其其盐盐可可溶于水；溶于水；本本类类药药物物某某些些分分子子具具有有酚酚羟羟基基结结构构，易易氧氧化化变色，可与重金属离子配位呈色；变色，可与重金属离子配位呈色；多数药物具手性碳原子，具旋光性多数药物具手性碳原子，具旋光性第62页/共100页2 2鉴别试验鉴别试验1.1.与与FeClFeCl3 3反应反应本本类类药药物物分分子子结结构构中中具具有有酚酚羟羟基基，可可与与FeFe3+3+离离子子配配位位显显色色，加加入入碱碱性性溶溶液液，显显紫紫色色或或紫紫红红色。色。2.2.与甲醛与甲醛-硫酸反应硫酸反应某某些些本本类类药药物物与与甲甲醛醛在在硫硫酸酸中中形形成成具具有有醌醌式式结构的有

41、色化合物。结构的有色化合物。如如：肾肾上上腺腺素素、盐盐酸酸异异丙丙肾肾上上腺腺素素、重重酒酒石石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素第63页/共100页3.3.氧化反应氧化反应本本类类药药物物分分子子结结构构中中多多数数具具有有酚酚羟羟基基，易易被被碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化而呈色。碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化而呈色。肾上腺素肾上腺素H2O2H+肾上腺素红（血红色）肾上腺素红（血红色）盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素I2H+异丙肾上腺素红色异丙肾上腺素红色过量的过量的I I2 2褪色褪色溶液显淡红色溶液显淡红色硫代硫酸钠硫代硫酸钠重酒石酸去甲肾上腺素在酸性条件下

42、不被重酒石酸去甲肾上腺素在酸性条件下不被I I2 2氧氧化，可与肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素区别化，可与肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素区别第64页/共100页4.与亚硝基铁氰化钠反应与亚硝基铁氰化钠反应脂肪族伯胺的专属反应脂肪族伯胺的专属反应注：丙酮中必须不含甲醛注：丙酮中必须不含甲醛第65页/共100页5.双缩脲反应双缩脲反应本本类类药药物物中中芳芳环环侧侧链链具具有有氨氨基基醇醇结结构构，可可显显双双缩缩脲脲反反应应。如如：盐盐酸酸麻麻黄黄碱碱、盐盐酸酸伪伪麻麻黄黄碱、盐酸去氧肾上腺素碱、盐酸去氧肾上腺素（盐酸麻黄碱）（盐酸麻黄碱）CH-CH-CH3HON+CH3HH2Cl-+CuSO4+4Na

43、OH第66页/共100页CH-CH-N-CH3HOH3CHCH-CH-N-CH3HOH3CHCu(OH)2+Na2SO4+2NaCl+2H2O第67页/共100页3 3特殊杂质检查特殊杂质检查1.1.酮体检查酮体检查杂质来源杂质来源：原料残存（肾上腺素、盐酸异丙：原料残存（肾上腺素、盐酸异丙 肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺 素、盐酸去氧肾上腺素等均由其素、盐酸去氧肾上腺素等均由其 酮体氢化还原制的）；酮体氢化还原制的）；检查方法：检查方法：分光光度法（比较法）分光光度法（比较法）检检查查原原理理：酮酮体体在在310nm310nm波波长长处处有有最最大大吸吸收收药药 物

44、本身在此波长几乎没有吸收物本身在此波长几乎没有吸收 规规定定一一定定浓浓度度溶溶液液在在310nm310nm波波长长的的 吸收度限制酮体的量。吸收度限制酮体的量。第68页/共100页紫外分光光度法检查酮体的条件和要求紫外分光光度法检查酮体的条件和要求第69页/共100页2.2.有关物质检查有关物质检查中中国国药药典典（20052005）要要求求对对盐盐酸酸去去肾肾上上腺腺素素、盐盐酸酸苯苯乙乙双双胍胍、硫硫酸酸沙沙丁丁胺胺醇醇和和盐盐酸酸氨氨溴索进行有关物质检查。溴索进行有关物质检查。盐盐酸酸氨氨溴溴索索：HPLCHPLC法法（高高低低浓浓度度对对比比法法，配配 制两种浓度对照溶液）制两种浓度

45、对照溶液）盐盐酸酸苯苯乙乙双双胍胍：纸纸色色谱谱法法（纸纸色色谱谱法法分分离离 后后洗洗脱脱，控控制制232nm232nm处处吸吸 收度，控制有关双胍的量）收度，控制有关双胍的量）其其他他药药物物：薄薄层层色色谱谱法法（高高低低浓浓度度对对比比法法，配制两种浓度对照溶液）配制两种浓度对照溶液）第70页/共100页4 4含量测定含量测定1.1.非水溶液滴定法非水溶液滴定法原理：原理：脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性适用范围：适用范围：本类药物原料药本类药物原料药测试条件：测试条件：溶剂：溶剂：冰醋酸冰醋酸滴定液滴定液：高氯酸：高氯酸指示终点：指示终点：结晶紫、萘酚苯甲醇、电位法结晶紫

46、、萘酚苯甲醇、电位法第71页/共100页注意事项：注意事项：l加入醋酸汞试液消除盐酸的干扰。加入醋酸汞试液消除盐酸的干扰。l若若测测定定药药物物碱碱性性较较弱弱，可可加加入入醋醋酸酸酐酐，以以提提高高其其碱碱性性，同同时时防防止止氨氨基基乙乙酰酰化化，使终点突跃明显。使终点突跃明显。2.2.溴量法溴量法 原理：原理：在酸性溶液中，药物（如盐酸去氧肾上在酸性溶液中，药物（如盐酸去氧肾上 腺素、重酒石酸间羟胺）分子中酚羟基腺素、重酒石酸间羟胺）分子中酚羟基 的邻、对位活泼氢能与过量的溴定量地的邻、对位活泼氢能与过量的溴定量地 发生溴代反应。发生溴代反应。第72页/共100页+3Br2HOCHOHC

47、H2NHCH3 HCl+3HBrHOCHOHCH2NHCH3 HClBrBrBr(盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素)Br2+2KI2KBr+I2I2+2Na2S2O32NaI+Na2S4O6第73页/共100页3.3.提取酸碱滴定法提取酸碱滴定法 原理：原理：游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂；盐游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂；盐 类可溶解于水，不溶于有机溶剂。类可溶解于水，不溶于有机溶剂。方法：方法：以硫酸苯丙胺为例以硫酸苯丙胺为例第74页/共100页4.4.紫外法分光光度紫外法分光光度法法与比色法与比色法 原理：原理：l本本类类药药物物分分子子中中具具有有苯苯乙乙胺胺结结构构，可可采采用紫外分

48、光光度法测定含量；用紫外分光光度法测定含量；l利利用用本本类类药药物物分分子子结结构构中中的的芳芳伯伯氨氨基基的的重重氮氮化化-偶偶合合反反应应，或或酚酚羟羟基基与与亚亚铁铁离离子子配位显色，可采用比色法测定含量。配位显色，可采用比色法测定含量。第75页/共100页5.5.HPLCHPLC法法盐酸肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素盐酸肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射液、硫酸沙丁胺醇片、盐酸氨溴素口服液注射液、硫酸沙丁胺醇片、盐酸氨溴素口服液硫酸沙丁胺醇片硫酸沙丁胺醇片色谱条件色谱条件填充剂：填充剂：十八烷基硅烷键和硅胶十八烷基硅烷键和硅胶流动相：流动相：磷酸二氢钠溶液磷酸二氢钠溶液(

49、pH3.10)-(pH3.10)-甲醇甲醇(85:15)(85:15)外标：外标：硫酸沙丁胺醇对照液（硫酸沙丁胺醇对照液（9696g/mlg/ml）,用用 流动相配制。流动相配制。检测波长：检测波长：276nm276nm；进样量：进样量：2020l l例例第76页/共100页1.1.能能和和重重酒酒石石酸酸去去甲甲肾肾上上腺腺素素发发生生颜颜色色反反应应的试液为（）的试液为（）A.A.浓硫酸浓硫酸B.B.甲醛试液甲醛试液C.C.氨试液氨试液D.D.甲醛甲醛-硫酸试液硫酸试液E.E.茚三酮试液茚三酮试液 自测题自测题第77页/共100页2.2.盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（）盐酸异丙肾上腺素的检

50、查项目是（）A.A.有关物质有关物质B.B.二苯酮二苯酮C.C.盐酸盐酸D.D.醛醛E.E.酮体酮体 第78页/共100页第三节第三节 苯丙胺类药物的分析苯丙胺类药物的分析 1 1苯丙胺类药物的基本与性质苯丙胺类药物的基本与性质1.1.基本结构基本结构本类药物均具有苯丙胺的基本结构。本类药物均具有苯丙胺的基本结构。NR2R1H第79页/共100页2.典型药物典型药物（马来酸依那普利）（马来酸依那普利）（盐酸贝那普利）（盐酸贝那普利）第80页/共100页(雷米普利雷米普利)(西拉普利西拉普利)(赖诺普利赖诺普利)(盐酸喹那普利盐酸喹那普利)第81页/共100页3.主要性质主要性质l酸碱性：酸碱性